Đang tải... (xem toàn văn)
[r]
(1)KẾT HỢP
KHÁNG NGUYÊN-KHÁNG THỂ
(2)MỤC TIÊU
1 Trình bày được đặc tính lực liên kết của phản ứng kết hợp kháng nguyên (KN)-kháng thể (KT)
2 Nêu được nguyên lý loại phản ứng tủa, cho ví dụ
3 Trình bày được nguyên lý loại phản
ứng ngưng kết
(3)1 ĐẠI CƯƠNG
1.1 Ba đặc tính của phản ứng kết hợp KN-KT • Đặc hiệu: KT chỉ kết hợp đặc hiệu với KN
Ứng dụng nhiều chẩn đoán bệnh nghiên cứu
• Thuận nghịch: Kết hợp phân ly, cấu trúc
KN KT không thay đổi Sự phân ly phụ
thuộc vào một số yếu tố như pH, nồng độ
muối, nhiệt độ
(4)9/23/15 PhD NguyBôn môn: MD-SLBễn Văn Đô,
1.2 Các lực liên kết giữa KN-KT
Là lực hóa lý thơng thường, gặp liên kết enzyme-cơ chất, hocmon với receptor…
Các lực Nguồn gốc
Cầu nối hydro Lực hút tĩnh điện
Lực Van der Waal
Lực hút kỵ nước
Tương tác nhóm mang điện trái dấu
Hydro liên kết với nguyên tử mang điện âm (N,O)
Chuyển động đám mây điện tử xung quanh các phân tử làm cho phân tử có cực
(5)9/23/15 PhD NguyBôn môn: MD-SLBễn Văn Đơ,
• Epitop vị trí kháng ngun kết hợp trực tiếp với kháng thể Có
nhiều loại epitop khác (xem hình)
Paratop vị trí kháng thể
kết hợp với kháng nguyên
KN nhỏ: epitop; Vị trí KHKN:
KN trung bình: epitop;KHKN:
KN lớn: 10 epitop; KHKN:
KN vừa: epitop; Vị trí KHKN:
(6)1.4 Ái tính háo tính
1.4.1 Ái tính (affinity) KTvới KN biểu thị
bằng tổng hợp tất lực liên kết paratop với epitop
KT + KN KN-KT
[KN.KT]
[KN]x[KT] K
K: số kết hợp
Sự kết hợp phân ly KN
đơn hóa trị
Sự kết hợp phân ly KN
(7)1.4.2 “Háo tính”(avidity) KT là biểu thị tất lực liên kết KT KN đa hóa trị
• Háo tính phụ thuộc vào số
epitop KN số hóa trị KT (IgG, IgM ), pH, lực,
nhiệt độ số kết hợp
• Ái tính có ý nghĩa lý thuyết,
cịn háo tính có ý nghĩa thực tế
đơn hóa trị
(8)9/23/15 PhD NguyBộ mơn: MD-SLBễn Văn Đơ,
• Phản ứng tủa
• Phản ứng ngưng kết
• Phản ứng miễn dịch đánh dấu
(9)2.1 Phản ứng tủa
Nguyên lý chung
Các KN KT dạng hòa tan kết hợp với KT hoặc KN đặc hiệu tương
ứng tạo thành phức hợp miễn dịch (tủa) có thể nhìn thấy
Các loại phản ứng tủa:
• Mơi trường lỏng
• Mơi trường gel
Thừa KT Tương
đương Thừa KN
Lượng KN thêm vào
(10)2.1.1 Phản ứng tủa môi trường lỏng để
phát KN KT (Định tính)
- Cho KT vào ống nghiệm
- Nhỏ từ từ KN lên lớp KT
- Vòng tủa xuất lớp KN KT (ống 5) - Các ống chứng: 1,2,3,4:
1
Vòng tủa
3 4 5
2