Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống in vitro cây cói bông trắng và cói nhật

luận văn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ------------      ---------- NGỌC THỊ THANH HUYỀN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY CÓI BÔNG TRẮNG VÀ CÓI NHẬT LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: TRỒNG TRỌT Mã số : 60.62.01 Người hướng dẫn khoa học: TS. NINH THỊ PHÍP HÀ NỘI - 2010 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan, kết quả và số liệu nghiên cứu trình bày trong luận văn này là trung thực và chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam ñoan, mọi sự giúp ñỡ trong việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả Ngọc Thị Thanh Huyền Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. ii LỜI CÁM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Ninh Thị Phíp, TS. Nguyễn Thị Phương Thảo, những người ñã tận tình giúp ñỡ, hướng dẫn tôi trong suốt thời gian thực hiện ñề tài, cũng như trong suốt quá trình hoàn chỉnh luận văn tốt nghiệp. Tôi xin chân thành cám ơn các thầy cô giáo Khoa Sau ðại Học, Khoa Nông học, Khoa Công nghệ sinh học, ñặc biệt là các thầy cô trong bộ môn Cây công nghiệp, bộ môn Công nghệ sinh học thực vật (Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội) ñã có nhiều ý kiến ñống góp quý báu giúp tôi hoàn thành luận văn này Tôi xin giử lời cám ơn chân thành tới KS. Nguyễn Thị Thủy và KS. Phạm Thị Thanh Hằng cùng các bạn sinh viên K51 khoa công nghệ sinh học (Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội) ñã giúp ñỡ tôi rất nhiều trong quá trình làm ñề tài. Tôi cũng xin chân thành cám ơn tới các bạn bè, gia ñình và người thân ñã nhiệt tình giúp ñỡ, ñộng viên tôi trong suốt thời gian thực hiện ñề tài và hoàn chỉnh luận văn tốt nghiệp. Hà nội, ngày tháng năm 2010 Ngọc Thị Thanh Huyền Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cám ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình viii 1. MỞ ðẦU 1 1.1 Tính cấp thiết của ñề tài 1 1.2. Mục ñích, yêu cầu 2 1.3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của ñề tài 3 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1 Giới thiệu chung về cây cói 4 2.2. Tiềm năng năng suất cói 18 2.3. Nhân giống cói bằng phương pháp in vitro 21 2.4. Các kết quả nghiên cứu về cói trên thế giới và ở Việt Nam 26 3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 3.1. ðối tượng, vật liệu, ñịa ñiểm, thời gian nghiên cứu 34 3.2. Nội dung nghiên cứu 34 3.3 Phương pháp nghiên cứu 38 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 4.1. Nghiên cứu chế ñộ khử trùng mẫu thích hợp 41 4.1.1. Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng thời gian khử trùng của thủy ngân clorua (HgCl 2 ) 0,1% ñến hiệu quả khử trùng mẫu 41 4.1.2. Thí nghiệm 2. Ảnh hưởng thời gian khử trùng kép của HgCl 2 0,1% trong 10 phút và dung dịch Ca(OCl) 2 5% ñến hiệu quả khử trùng mẫu. 43 4.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất ñiều tiết sinh trưởng ñến khả năng tạo chồi từ ñoạn thân mang mầm ngủ 45 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. iv 4.2.1. Thí nghiệm 3. Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi từ ñoạn thân mang mầm ngủ cói bông trắng 46 4.2.2. Thí nghiệm 4. Ảnh hưởng của nồng ñộ kinetin ñến khả năng phát sinh chồi từ ñoạn thân mang mầm ngủ cói bông trắng 48 4.2.3. Thí nghiệm 5. Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi từ ñoạn thân mang mầm ngủ giống cói Nhật 52 4.2.4. Thí nghiệm 6. Ảnh hưởng của nồng ñộ Kinetin ñến khả năng phát sinh chồi từ ñoạn thân mang mầm ngủ giống cói Nhật 55 4.3. Giai ñoạn nhân nhanh chồi cói. 59 4.3.1. Thí nghiệm 7. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói. 60 4.3.2. Thí nghiệm 8. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói 66 4.3.3. Thí nghiệm 9: Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói 72 4.3.4. Thí nghiệm 10: Ảnh hưởng của tổ hợp Kinetin và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói 78 4.4. Giai ñoạn tạo rễ cho chồi in vitro 83 4.4.1. Thí nghiệm 11. Ảnh hưởng của nồng ñộ α-NAA ñến khả năng ra rễ cói 84 4.4.2. Thí nghiệm 12. Ảnh hưởng của nồng ñộ than hoạt tính ñến khả năng ra rễ cói 89 5. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 96 5.1. Kết luận 96 5.2. ðề nghị 97 TÀI LIỆU THAM KHẢO 98 PHỤ LỤC 102 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên viết tắt Viết ñầy ñủ CT Công thức BA Benzyl Adenin Ki Kinetin α-NAA Axit α –naphtyl axetic IBA 3-indolebutiric axid ð/C ðối chứng NXB Nhà xuất bản Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 2.1 Diện tích trồng cói của các tỉnh ở Việt Nam 5 2.2 Diện tích, năng suất, sản lượng cói Việt Nam trong những năm gần ñây. 18 4.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng của HgCl 2 0,1% ñến hiệu quả khử trùng mẫu 42 4.2 Ảnh hưởng thời gian khử trùng kép của HgCl 2 0,1% trong 10 phút và dung dịch Ca(OCl) 2 5% ñến hiệu quả khử trùng mẫu. 44 4.3 Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói bông trắng 46 4.4 Ảnh hưởng của nồng ñộ Ki ñến khả năng phát sinh chồi cói bông trắng 49 4.5 Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói Nhật 53 4.6 Ảnh hưởng của nồng ñộ Ki ñến khả năng phát sinh chồi cói Nhật 56\ 47 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 60 4.8 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 63 4.9 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 66 4.10 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 68 4.11 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 72 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. vii 4.12 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 75 4.13 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 78 4.14 Ảnh hưởng của tổ hợp Kinetin và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 80 4.15 Ảnh hưởng của nồng ñộ α-NAA ñến khả năng ra rễ cói bông trắng 84 4.16 Ảnh hưởng của nồng ñộ α-NAA ñến khả năng ra rễ cói Nhật 87 4.17 Ảnh hưởng của nồng ñộ than hoạt tính ñến khả năng ra rễ cói bông trắng 89 4.18 Ảnh hưởng của nồng ñộ than hoạt tính ñến khả năng ra rễ cói Nhật 92 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. viii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 2.1 ðặc ñiểm rễ, thân, lá và hoa cói 7 2.2 Cấu tạo hoa Cói 11 4.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng của HgCl 2 0,1% ñến hiệu quả khử trùng mẫu 42 4.2 Ảnh hưởng thời gian khử trùng kép HgCl 2 0,1% và dung dịch Ca(OCl) 2 5% ñến hiệu quả khử trùng mẫu 44 4.3 Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói bông trắng 47 4.4 Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói bông trắng 48 4.5 Ảnh hưởng của nồng ñộ Ki ñến khả năng phát sinh chồi cói bông trắng 50 4.6 Ảnh hưởng của nồng ñộ Ki ñến khả năng phát sinh chồi cói bông trắng 51 4.7 Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói Nhật 54 4.8 Khả năng phát sinh chồi của cói Nhật trên môi trường BA 54 4.9 Ảnh hưởng của nồng ñộ Ki ñến khả năng phát sinh chồi cói Nhật 56 4.10 Khả năng phát sinh chồi của cói Nhật trên môi trường Kinetin 58 4.11 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 62 4.12 Nhân nhanh chồi cói bông trắng trêm môi trường BA và α-NAA 62 4.13 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 63 4.14 Nhân nhanh chồi cói Nhật trên môi trường BA và α-NAA 65 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Trung tâm thông tin thư viện ………. ix 4.15 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 66 4.16 Nhân nhanh chồi cói bông trắng trên môi trường BA + IBA 68 4.17 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 69 4.18 Nhân nhanh chồi cói Nhật trên môi trường BA + IBA 69 4.19 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và α-NAA dến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 72 4.20 Nhân nhanh chồi cói bông trắng trên môi trường Ki + α-NAA 74 4.21 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và α-NAA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 75 4.22 Nhân nhanh chồi cói Nhật trên môi trường Ki + α-NAA 77 4.23 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói bông trắng 79 4.24 Nhân nhanh chồi cói bông trắng trên môi trường Ki + IBA 79 4.25 Ảnh hưởng của tổ hợp Ki và IBA ñến khả năng nhân nhanh chồi cói Nhật 81 4.26 Nhân nhanh chồi cói Nhật trên môi trường Ki + IBA 82 4.27 Ảnh hưởng của nồng ñộ α-NAA ñến khả năng ra rễ cói bông trắng 86 4.28 Khả năng ra rễ của cói bông trắng trên môi trường α-NAA 86 4.29 Ảnh hưởng của nồng ñộ α-NAA ñến khả năng ra rễ cói Nhật 88 4.30 Khả năng ra rễ của cói Nhật trên môi trường α-NAA 88 4.31 Ảnh hưởng của nồng ñộ than hoạt tính tới sự ra rễ cói bông trắng 91 4.32 Khả năng ra rễ của cói bông trắng trên môi trường than hoạt tính 91 4.33 Ảnh hưởng của nồng ñộ than hoạt tính ñến khả năng ra rễ của cói Nhật 92 4.34 Khả năng ra rễ của cói Nhật trên môi trường than hoạt tính 93 . vitro cây cói bông trắng và cói Nhật . 1.2 Mục ñích, yêu cầu 1.2.1 Mục ñích Nghiên cứu quy trình nhân in vitro cây cói làm cơ cở cho việc nhân nhanh các giống. nhiên nhân giống in vitro cây cói ở Việt Nam vẫn chưa ñược áp dụng. Chính vì vậy, chúng tôi tiến hành ñề tài: Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống in vitro