Tìm hiểu quy trình công nghệ sản xuất nấm metarhizium SPP trừ sâu hại cây trồng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC KỸ THUẬT CƠNG NGHỆ TP HCM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP TÌM HIỂU QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT NẤM METARHIZIUM SPP TRỪ SÂU HẠI CÂY TRỒNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực MSSV: 0811110061 : Phan Công Nhật Lớp: 08CSH1 TP Hồ Chí Minh, 2011 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan khóa luận tốt nghiệp cơng trình nghiên cứu thực cá nhân, thực sở nghiên cứu lý thuyết Các số liệu, kết thí nghiệm báo cáo khóa luận tốt nghiệp trung thực Nội dung báo cáo có tham khảo sử dụng tài liệu, thông tin đăng tải tác phẩm, tạp chí trang web theo danh mục tài liệu tham khảo Sinh viên thực Phan Công Nhật LỜI CẢM ƠN Lời xin gửi lời thân thương đến cha mẹ, người sinh thành, dưỡng dục nuôi dạy nên người Cha mẹ nguồn động lực to lớn giúp vững bước phấn đấu học tập sống Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cám ơn tồn thể q Thầy Thầy Cơ Trường Đại Học Kỹ Thuật Công Nghệ TP HCM quan tâm, nhiệt tình giảng dạy truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt ba năm học Đặc biệt em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Thị Hai, người đáng kính nhiệt tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức để em hoàn thành tốt đề tài Cuối em xin gửi lời cảm ơn đến toàn thể tập thể 08CSH chia vui buồn, nhiệt tình giúp đỡ em thời gian qua Em xin chân thành cảm ơn! Tp Hồ Chí Minh, tháng 07 năm 2011 SVTH: Phan Công Nhật MỤC LỤC Nội dung Trang LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC i DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC SƠ ĐỒ vii LỜI MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU BIỆN PHÁP SINH HỌC PHÒNG TRỪ SÂU HẠI CÂY TRỒNG 1.1 Vị trí phương pháp hóa học hệ thống bảo vệ trồng 1.1.1 Biện pháp hóa học BVTV năm đầu kỷ XX 1.1.2 Hạn chế thuốc hóa học BVTV vào thập kỷ 80 - 90 kỷ XX 1.2 Đấu tranh sinh học tự nhiên sở, tảng CNSH BVTV 1.2.1 Sơ lược lịch sử đấu tranh sinh học (ĐTSH) 1.2.2 Khái niệm đấu tranh sinh học 1.2.3 Cơ sở khoa học đấu tranh sinh học BVTV 1.2.4 Các nhóm sinh vật có ích ĐTSH 1.3 Vị trí biện pháp sinh học BVTV .8 1.4 Các hướng đấu tranh sinh học 1.4.1 Tính tốn để nâng cao hoạt tính sinh vật có ích i 1.4.2 Nghiên cứu tạo chế phẩm sinh học phòng trừ sinh vật gây hại .10 1.5 Tính ưu việt chế phẩm sinh học .11 CHƯƠNG 2: ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦA NẤM METARHIZIUM SPP 13 2.1 Phân loại 13 2.2 Đặc điểm hình thái .13 2.3 Độc tố diệt côn trùng nấm Metarhizium .14 2.4 Cơ chế tác động nấm lên côn trùng đường truyền bệnh .15 2.4.1 Cơ chế tác động 16 2.4.2 Con đường truyền bệnh 16 2.5 Cấu tạo thành phần hóa học tế bào vi nấm 17 2.6 Khả đồng hóa nguồn cacbon, nitơ nấm M anisoliae .20 2.7 Nhu cầu chất kích thích sinh trưởng .21 2.8 Phổ ký chủ nấm lục cương Metarhizium spp 22 CHƯƠNG 3: TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VÀ SỬ DỤNG NẤM METARHIZIUM SPP 27 3.1 Tình hình nghiên cứu sử dụng Metarhizium giới .27 3.2 Tình hình nghiên cứu sử dụng Metarhizium Việt Nam 28 3.3 Hiệu lực phòng trừ sâu hại chế phẩm Metarhizium anisopliae .29 CHƯƠNG 4: QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM NẤM METARHIZIUM SPP TRỪ SÂU HẠI 33 4.1 Một số yếu tố ảnh hưởng đến phát triển nấm 33 4.1.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy 33 4.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ độ ẩm đến trình phát triển nấm M anisopliae 33 4.1.3 Ảnh hưởng ánh sáng .34 4.1.4 Ảnh hưởng độ thống khí .34 ii 4.1.5 Ảnh hưởng hàm lượng nước 34 4.1.6 Ảnh hưởng pH 34 4.2 Công nghệ sản xuất nấm Metarhizium spp 35 4.2.1 Sử dụng chủng giống để sản xuất 35 4.2.2 Chọn môi trường 35 4.3 Phương pháp sản xuất 37 4.3.1 Lên men chìm .37 4.3.2 Lên men bề mặt không vô trùng 40 4.3.3 Lên men xốp .42 4.3.4 Tạo chế phẩm qui mô nhỏ- thủ công 46 4.4 Cải tiến quy trình bảo quản giống gốc 46 4.4.1 Phục hồi giống gốc 46 4.4.2 Các phương pháp bảo quản số giống nấm côn trùng Việt Nam 47 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 5.1 Kết luận .49 5.2 Kiến Nghị 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BVTV : Bảo vệ thực vật B.bassiana : Beauveria bassiana Bt : Bacciluss Thuringiensis bt : bào tử cc : Cubic centimeter cs : Cộng cm : Centimet ĐTSH : Đầu tranh sinh học g : Gram IU : International Unit Mat : Metarhizium anisopliae M.anisopliae : Metarhizium anisopliae M flavoviride : Metarhizium flavoviride Môi trường PDA : Potato Dextro Agar Môi trường PGA : Potato Glucose Agar mg : Milligram ml : Milliitter NPV : Nucleo Polyhedrosis Virus NSP : Ngày sau phun iv DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Hiệu lực chế phẩm nấm Metarhizium anisopliae bọ xít hại nhãn vải (Tessaratoma papillosa) phịng thí nghiệm 30 v DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Metarhizium anisopliae .13 Hình 2.2 Cơ chế tác dụng chế phẩm 17 Hình 2.3 Khuẩn lạc Metarhizium anisopliae .19 Hình 2.4 Bào tử nấm 19 Hình 2.5 Sâu xanh hại bơng .25 Hình 2.6 Bọ khoai tây 25 Hình 2.7 Châu chấu bị nấm cơng 26 Hình 2.8 Bọ rầy bị nhiễm nấm Metarhizium 26 Hình 3.1 Chế phẩm Metarhizium anisopliae trừ bọ cánh cứng 31 Hình 3.2 Chế phẩm Metarhizium 80LS 31 Hình 3.3 Chế phẩm Metarhizium 90 DP 32 Hình 3.4 Chế phẩm BIMA 32 vi DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 3.1 Sơ đồ lên men chìm sản xuất số sở nước 39 Sơ đồ 3.2 Sơ đồ lên men bề mặt không vô trùng 41 Sơ đồ 3.3 Sơ đồ trình lên men xốp .43 Sơ đồ 3.4 Quy trình sản xuất nấm Mat theo phương pháp lên men bề mặt 45 vii Khóa Luận Tốt Nghiệp - pH = SVTH: Phan Công Nhật 6,5  Phương pháp lên men xốp:  Môi trường sản xuất: - Bột cám gạo 50% - Bột ngô 30% - Bột đậu tương ( đậu xanh) 10% - Trấu ( bã mía, vỏ lạc) 10% Năm 2003- 2004, Phạm Thị Thùy cs nghiên cứu môi trường sản xuất nấm M anisopliae có thành phần 50% cám gạo, 20% bột ngô, 20% bột đậu, 10% trấu với tỷ lệ nước/ môi trường sản xuất 50%, cấy chủng nấm M anisopliae phân lập bọ sữa Phú Quốc, chất lượng chế phẩm nấm đạt cao 3,0 x 1010 BT/g Đây kết tốt có triển vọng rút ngắn số lượng chế phẩm nấm để phòng trừ sâu hại trồng, nhằm giảm giá thành cho nông dân 4.3 Phương pháp sản xuất [2, 4, 6, 7, 8] 4.3.1 Lên men chìm Với phương pháp giúp dễ dàng thu nhận sinh khối bào tử, tinh thể độc sản phẩm khác chất kháng sinh, độc tố dạng hịa tan mơi trường dinh dưỡng Metarhizium anisopliae để diệt sâu bệnh Ngoài phương pháp có ưu điểm mơi trường dinh dưỡng đáp ứng hồn tồn với nhu cầu sinh lí Metarhizium anisopliae Do hiệu suất thu sản phẩm cao, tự động hóa cơng nghệ giúp giảm nhân cơng diện tích làm việc khơng q lớn  Các bước tạo chế phẩm từ Metarhizium anisopliae đường lên men chìm : Bước 1: Chuẩn bị ống giống nuôi 5-7 ngày Bước2 : Nhân giống bình 250ml có 100ml mơi trường, lắc 200v/ phút, nhiệt độ 28 - 300C nuôi 24 37 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật Bước3: Nhân giống bình 1000ml mơi trường Lắc 200v/phút, nhiệt độ 28-30oC, nuôi 24 Bước4: Lên men hệ thống tự động, khuấy 550v/phút, nhiệt độ 29 30oC nuôi 72 Bước 5: Li tâm lạnh 3000v/phút 40 phút Sau thu sinh khối bổ sung chất phụ gia Bước : Sấy khô 30-35oC Bước : Nghiền nhỏ, vô bao kín, bảo quản 5-10oC 38 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Công Nhật  Sơ đồ làm rõ cho bước Giống Nhân giống Lên men Ly tâm Sấy Chế phẩm Sơ đồ 3.1 Sơ đồ lên men chìm sản xuất số sở nước Trong phương pháp lên men chìm ngồi việc sử dụng nồi lên men thơng thường, người ta cịn áp dụng nuôi cấy đệm plastic quy mô công nghiệp áp dụng nuôi cấy chủng để thu chế phẩm diệt sâu hại Khi áp dụng lên men chìm gặp hạn chế trang thiết bị phức tạp, kinh phí đầu tư cao, kĩ thuật công nghệ tiên tiến Khi nuôi cấy Metarhizium anisopliae thu bào tử chồi, bào tử có sức sống kém, thời gian sống ngắn, cấu trúc 39 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật 4.3.2 Lên men bề mặt không vô trùng Trong điều kiện thiếu trang thiết bị hoàn chỉnh để lên men chìm, người ta sử dụng phương pháp lên men bề mặt không vô trùng để thu nhận chế phẩm diệt trùng từ nấm, vi khuẩn Khâu khó khăn quy trình hạn chế nhiễm tạp vi khuẩn lạ Do môi trường không hấp khử trùng Để khắc phục ta đun môi trường 100⁰C 30 phút, nguội cho thêm kháng sinh streptomycine 0.01%  Các bước lên men bề mặt Bước : Nấm nuôi ống thạch nghiêng hay đĩa pertri 7-10 ngày nhiệt độ 28 - 30 oC Bước : Lấy bào tử Bước : Cho vào chậu thủy tinh lớn có lớp mơi trường dịch – 1,5 cm (chậu phải sấy 100oC 30 phút, môi trường dịch nấu sôi 100oC 30 phút) Bước : Nuôi 12 ngày nhiệt độ 25 - 30oC Bước : Vớt thảm nấm có bào tử, đồng thời tròn mặt bào tử Bước : Thấm cho nước bổ sung chất phụ gia Bước : Nghiền nhỏ máy nghiền Bước : Sấy khô 30 - 35oC Bước : Vơ bao, bảo quản -10oC 40 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Công Nhật  Sơ đồ làm rõ cho bước: Nấm Lấy bào tử Vào chậu Nuôi Vớt thảm Nghiền Sấy Chế phẩm Sơ đồ 3.2 Sơ đồ lên men bề mặt không vô trùng 41 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật Ngồi để đảm bảo phát triển áp đảo chủng vi sinh vật nuôi cấy, cần tuân thủ nguyên tắc sau : - Môi trường sau đun 100oC 30’, để nguội cấy bào tử vào, số bào tử khuếch tán thành màng mỏng khắp bề mặt môi trường Trong thời gian định chúng ngăn cản không cho không khí khuếch tán vào mơi trường Do làm hạn chế tạp nhiễm vi sinh vật lạ Lượng bào tử cấy vào đủ để áp đảo vi sinh vật lạ 1- tỉ bào tử/cm3 - pH môi trường khoảng 5.0 - 5.5 thích hợp cho phát triển nấm, vi khuẩn 4.3.3 Lên men xốp  Quy trình sản xuất nấm M.anisopliae Ninh Thị Huyền Nga Trường Nông Lâm Tp HCM (2005) Phương pháp sử dụng thành công để sản xuất nấm Metarhizium số nấm diệt trùng khác Trong quy trình lên men xốp này, tác giả sử dụng loại chất khác bột đậu nành, bã đậu phụ, lúa, gạo với dịch dinh dưỡng nuôi cấy nấm Metarrhizium  Quy trình mơ tả sau: Bước 1: Chuẩn bị ống giống Bước 2: Cho vào môi trường xốp bình 250 ml, ni - ngày nhiệt độ 28 -32⁰C Bước 3: Môi trường xốp chậu thủy tinh (khử trùng 100⁰C 40 phút) bổ sung 10% giống, nuôi 10 ngày 28 - 32⁰C, độ ẩm tương đối 95% Bước 4: Làm khô nhiệt độ phịng có quạt, độ ẩm 10% sấy 40oC Bước 5: Nghiền nhỏ, vô bao, bảo quản - 10oC tối 42 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Công Nhật  Sơ đồ làm rõ cho bước: Ống giống -7 ngày Môi trường dịch thể, lắc 200 vịng/phút, ni tº= 28 30ºC Mơi trường xốp bình 250ml, ni -5 ngày tº = 28 - 32ºC Môi trường xốp chậu thủy tinh ( khử trùng 100ºC 30 – 40 phút) + 10% giống Nuôi 10 ngày tºC= 28- 32ºC Làm khơ nhiệt độ phịng Có quạt Độ ẩm 10% sấy 40ºC Nghiền nhỏ Đóng bao nhãn Kiểm tra chất lượng Bảo quản - 10ºC Sơ đồ 3.3 Quy trình lên men xốp 43 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật Cơng thức tính số lượng bào tử 1g bột nấm 4000x 1000x a x 10-n D= b D: số bào tử g bột nấm a: số bào tử đếm n: nồng độ pha lỗng b: số nhỏ buồng đếm hồng cầu  Quy trình lên men xốp Viện Bảo vệ thực vật (Nguyễn Văn Tuất, 2004; Phạm Thị Thùy, 2010) Chọn chuẩn nấm: - Sản xuất nấm Metarhizium flavoviride phải chọn chủng Metarhizium flavoviride phân lập cào cào, châu chấu - Sản xuất nấm Metarhizium anisopliae chọn chuẩn Metarhizium anisopliae phân lập rầy nâu bọ hại dừa - Chọn môi trường nhân giống cấp nhân giống cấp 2: - Chuẩn bị môi trường cấp cấp - Môi trường cấp khử trùng 0,8 at 30 phút - Môi trường cấp môi trường sản xuất lên men xốp phải khử trùng at 30 phút Cấy giống cấp vào môi trường nhân giống môi trường sản xuất theo quy trình sau: 44 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Công Nhật Ống giống Môi trường nhân giống cấp Môi trường nhân giống cấp Rải nia để hình thành bảo tử trần (2 ngày) Thu sinh khối, sấy 40- 45ºC 6-8 Hỗn hợp phụ gia để tạo chế phẩm nấm Kiểm tra chất lượng bào tử nấm Thử hoạt lực sâu Đóng gói, bảo quản sử dụng Hình 3.4 Quy trình sản xuất nấm Mat theo phương pháp lên men bề mặt (xốp) ( Quy trình cấp Bằng Độc quyền sáng chế số 3451 ngày 7/4/2003) 45 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật 4.3.4 Tạo chế phẩm qui mô nhỏ - thủ công [2] Bước 1: Chuẩn bị môi trường gạo nuôi cấy nấm: ngâm gạo với nước - 30 phút (tùy theo gạo mềm cơm hay cứng cơm, rẻ sử dụng gạo IR 50404), vớt gạo cho vào bọc nylon trung bình 500 g/bọc, buộc kín miệng dây thun Bước : Hấp khử trùng: cho nước ngập đến vỉ ngăn nước nồi nhôm cho bọc gạo nylon vào nồi, hấp trùng khoảng - 30 phút (kể từ nước sôi), đun than đá củi Vớt bọc gạo để nguội Bước : Chủng nấm nguồn vào môi trường gạo: chia dĩa nấm Metarhizium anisopliae gốc thành phần (1/6 để sử dụng bọc gạo nylon), dùng dao rạch nấm gốc thành miếng nhỏ, cấy vào bọc gạo nylon, dùng co ống nước làm miệng, đậy nắp gòn bịt đầu môi trường Đem ủ chế phẩm để nơi cao thoáng mát điều kiện nhiệt độ từ 28 - 30 độ, lắc bọc chế phẩm lần/ngày, sau 10 - 14 ngày quan sát thấy nấm xanh bao phủ hết hạt gạo (hạt gạo nhỏ dần), sử dụng hòa chế phẩm nước qua vải lược, bọc cho bình 16 lít (2 bình/1.000 m2), cho chế phẩm vào bình pha thêm 5cc chất bám dính, phun chậm vào gốc lúa phun xịt lúc trời mát (dẫn theo Huỳnh Thanh Bình 2003) 4.4 Cải tiến quy trình bảo quản giống gốc 4.4.1 Phục hồi giống gốc Nâng cao hoạt tính diệt trùng chủng nấm có từ trước cách cấy truyền qua côn trùng phân lập hóa lại để nâng cao hoạt tính diệt côn trùng chủng nấm Metarhizium Kết thí nghiệm cho thấy nấm xanh ni cấy cấy truyền qua - lần mơi trường nhân tạo khả sinh trưởng phát triển sinh bào tử độ độc chúng trùng giảm cách có ý nghĩa so với nấm phân lập Nhưng sau lây nhiễm nấm trở lại ký chủ 46 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật phân lập tạo trở lại đặc tính sinh học chúng phục hồi trở lại Vì vậy, tác giả cho sau 4- hệ, cần phải phục hồi giống gốc cách cấy lại côn trùng ký chủ 4.4.2 Các phương pháp bảo quản số giống nấm côn trùng Việt Nam Đến nay, Viện Bảo vệ thực vật bảo quản giống nấm theo số phương pháp sau: a) Bảo quản truyền thống Ở nhiệt độ phòng từ 1- tuần tùy theo điều kiện nuôi cấy khác nhau, sau giữ lạnh nhiệt độ 5- 6ºC, sau 2- tháng cấy truyền lại Phương pháp này đơn giản tốn công, mặt khác giống bảo quản không lâu Tuy nhiên phương pháp áp dụng phổ biến thuận lợi việc sử dụng giống để sản xuất kịp thời có dịch b) Bảo quản để tủ lạnh sâu Dưới âm độ với nguồn nấm có độc tố cao sử dụng, ví dụ nguồn nước ngồi, nguồn thu cũ, để lâu không sử dụng, để sản xuất, c) Bảo quản dầu khoáng Bằng cách đổ đầy bề mặt giống lớp dầu khoáng 1- cm, phương pháp giữ – năm d) Bảo quản theo phương pháp hút bào tử nấm máy hút chân khơng Sau cất giữ tủ lạnh, phương pháp giữ vài năm e) Bảo quản dịch Slicagel Phương pháp giữ – 10 năm f) Bảo quản NitroGel lỏng Phương pháp giữ lâu 10 – 15 năm g) Bảo quản phương pháp đông khô vi sinh vật Phương pháp giữ – năm 47 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật Việc bảo quản giống nấm mục đích để lưu giữ gen vi sinh vật quý, mặt khác dùng để so sánh đối chiếu với mẫu chuẩn quốc tế Trong công nghệ sản xuất chế phẩm nấm, không nên sử dụng chủng bảo quản lâu Việc sản xuất nấm sử dụng chủng nguồn địa phương phân lập đối tượng sâu hại cần phòng trừ, đạt hiệu cao 48 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Cơng Nhật CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Qua khóa luận này, sinh viên hiểu biết thêm ý nghĩa vai trò biện pháp đấu tranh sinh học phòng trừ sâu bệnh hại trồng Trong số tác nhân sinh học sử dụng phịng trừ sâu hại trồng nấm xanh Metarhizium anisopliae có tiềm lớn Các nghiên cứu tác giả cho thấy, nấm xanh có hiệu phịng trừ cao nhiều lồi sâu hại, đặc biệt nhóm trùng chích hút Có thể ứng dụng kỹ thuật Công nghệ sinh học để sản xuất nấm xanh Metarhizium anisopliae, tạo chế phẩm để phổ biến cho sản xuất, phòng trừ sâu hại trồng Nguyên liệu sử dụng cho công nghệ sản xuất chủ yếu dựa nguồn sẵn có nước, giá thành rẻ nên phát triển trì sản xuất, cạnh tranh với sản phẩm khác 5.2 Kiến nghị Để tăng cường hiệu diệt sâu chế phẩm, cần nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng yếu tố ngoại cảnh đến việc bảo quản trì hiệu lực chế phẩm đồng ruộng Sản xuất thuốc trừ sâu có nguồn gốc từ sinh học vấn đề phức tạp cần đầu từ thời gian, lực lượng cán khoa học chuyên gia có lực, thiết bị đồng kinh phí ban đầu cho hồn thiện cơng nghệ sản xuất thử nghiệm, chí cịn phải hỗ trợ giá, quảng cáo sản phẩm, cần nhà nước quan tâm giúp đỡ 49 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Công Nhật TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt [1] Hoàng Minh Châu, 1998 Cẩm nang sử dụng phân bón, NXB Thơng tin khoa học kỹ thuật hố chất [2] Huỳnh Thanh Bình, 2003 Mơ hình sản xuất nấm xanh Metarhizium anisopliae để phòng trừ rầy nâu hại lúa nơng hộ gia đình tỉnh Sóc Trăng Trích Báo cáo hội nghị Khoa học cơng nghệ toàn quốc BVTV lần thứ tháng năm 2003 [3] Nguyễn Thị Chắt,1999 Côn trùng Đại học Nơng Lâm - Tp Hồ Chí Minh [4] Nguyễn Văn Tuất, 2004 Báo cáo tổng kết khoa học kỹ thuật Đề tài: Nghiên cứu sản xuất sử dụng thuốc sâu sinh học đa chức cho số loại trồng kỹ thuật công nghệ sinh học Bộ Khoa học công nghệ - Viện bảo vệ thực vật [5] Nguyễn Lân Dũng, 1981 Sử Dụng Vi Sinh Vật Để Phòng Trừ Sâu Hại Cây Trồng, NXB Khoa Học Kỹ Thuật [6] Ninh Thị Huyền Nga, 2005 Khảo sát hoạt tính nấm Metarhizium anisopliae sùng trắng, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh [7] Phạm Thị Thùy cộng 2003 Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm Beauveria Metarhizium để phòng trừ số sâu hại trồng Tuyển tập cơng trình nghiên cứu Bảo vệ thực vật NXB Nông Nghiệp [8] Phạm Thị Thùy, 2010 Giáo trình Cơng nghệ sinh học Bảo vệ thực vật Nhà xuất giáo dục Việt Nam [9] Trần Văn Mão, 2004 Sử dụng vi sinh vật có ích, tập II - Ứng dụng nấm cộng sinh sinh vật phòng trừ sâu hại Nhà xuất nơng nghiệp Hà Hội 50 Khóa Luận Tốt Nghiệp SVTH: Phan Công Nhật [10] Trần Như Ngọc, 2006 Luận văn tốt nghiệp Sử dụng kỹ thuật RFLP xác định đa dạng di truyền nấm Metarhizium anisopliae nấm Beauveri bassiana ký sinh côn trùng gây hại Đại học Nơng Lâm- Tp Hồ Chí Minh Nguồn internet [11] http://www.sinhhocvietnam.com/vn/modules.php?name=News&file=article &sid=1166 51 ... Nhật đề tài: ? ?Tìm hiều quy trình cơng nghệ sản xuất nấm Metarhizium spp trừ sâu hại trồng? ?? Mục đích nội dung Mục đích - Tìm hiểu quy trình sản xuất nấm xanh Metarhizium spp trừ sâu hại trồng Nội... học phòng trừ sâu hại trồng - Đặc điểm chung nấm Metarhizium spp - Tình hình nghiên cứu sử dụng nấm Metarhizium spp - Quy trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm nấm Metarhizium spp trừ sâu - Hiệu... lượng sản xuất chưa có nhiều để phục vụ sản xuất Cải tiến hồn thiện quy trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm sinh học để giảm giá thành, hiệu cao sản xuất với số lượng lớn để phục vụ sản xuất Gần