Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của cao chiết xuất từ cây guồi đỏ trên động vật thực nghiệm

B ộ Y TẾ TRƯỜNG Đ Ạ I HỌC ĐEÈU DƯỠNG NAM ĐỊNH 'ÍRUỚNG ŨẠi HỌC DIẾÙ DƯỜNG NÂMDjNH T K Ữ y iỂ N số M S BÁO CÁO KÉT QUẢ NGHIÊN c ứ u ĐÈ TÀI CẤP c o SỎ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CẢI THIỆN TRÍ NHĨ CỦA CAO CHIẾT XUẤT TỪ CÂY GUỒI ĐỎ TRÊN ĐỘNG VẬT THựC NGHIỆM Chủ nhiệm đề t i : Đinh Quốc Bảo Cấp quản lý: Trường Đ ại học Điều dưỡng N am Định M ã số đề tài (nếu có): Thời gian thực hiện: từ tháng 10 năm 1014 đến tháng 11 năm 2015 Tổng kinh phí thực đề tài triệu đồng Trong đó: kinh phí SNKH triệu đồng Năm 2015 BÁO CÁO KỂT QƯẢ NGHIÊN cứu ĐỀ TÀI CẤP c SỞ Tên đề tài: N ghiên cửu tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ động vật thực nghiệm Chủ nhiệm đề tài: Đinh Quốc Bảo Cơ quan chủ trì đề tài: Trường Đại học Điều Dưỡng Nam Định Cơ quan quản lý đề tài: Trường Đại học Điều Dưỡng Nam Định Phó chủ nhiệm đề tài (nếu có): D anh sách nghiên cứu viên: - Phùng Thị Thu Hương - Lê Thị Ngọc Thúy Thư ký đề tài: Dương Đình Dũng Thời gian thực đề tài từ tháng 10 năm 2014 đến tháng 11 năm 2015 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT TT Từ viết tắt T viết đầy đủ Ach Acetylcholin • AchE Acetylcholinesterase AD Alzheim er Disease cs Cộng GD 100 Guồi đỏ 100 mg/kg GD 150 Guồi đỏ 150 mg/kg G D 200 Guồi đỏ 200 mg/kg scop 0.5 scopolamine 0,5 mg/kg scop 1.0 scopolam ine mg/kg 10 scop 1.5 scopolamine 1,5 mg/kg 11 M eOH Cao chiết methanol từ Guồi đỏ DANH MỤC BẢNG Bảng Xên bảng Trang 1• Sự thay đổi cân nặng (gram) nhóm chuột 11 Thời gian (giây) chuột bơi đến tìm thấy bến đ ỗ 12 Quãng đường (m) chuột bơi đến tìm thấy bến đỗ 14 Thời gian (giây) chuột bơi góc phần tư 16 Sự thay đổi cân nặng (gram) nhóm chuột 17 Thời gian (giây) chuột bơi đến tìm thấy bến đ ỗ 18 Quãng đường (m) chuột bơi đến tìm thấy bến đ ỗ 20 Thời gian (giây) chuột bơi góc phần tư .22 DANH MỤC BIỂU ĐÒ Biêu đô Tên biểu đồ Trang 1: Thay đổỉ thời gian chuột bơi mê lộ nước 13 2: Thay đổi quãng đường chuột boi mê lộ nước : .15 3: Thay đổi thòi gian chuột bori ữong mê lộ nước 19 4: Thay đổi quãng đường chuột boi ừong mê lộ nước 21 PH Ả N A 1 Kết bật đề tài 1.1 Đóng góp đề t i .1 1.2 Kết cụ thể 1.3 Hiệu xã h ộ i 2 Đánh giá thực đề tài đối chiếu với đề cương nghỉên cứu phê duyệt 2.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước liên quan tới đề tài 2.2 Tình hỉnh nghiên cứu nước liên quan tói đề tài 2.2.1 Giói thiệu Guồi đỏ 2.2.2 Tính chất dưọc lý 2.2.3 Hoạt tính sinh học Guồi đỏ Đối tượng phưoug pháp nghỉên cứu — 3.1 Thiết kế nghiên cứu 3.2 Đối tượng nghiên cứu 3.2.1 Thí nghỉệm đánh giá tác dụng gây suy giảm trí nhó* scopolamine 3.2.2 Thí nghiệm đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ caoGuồi Đỏ .8 3.3 Thòi gian, địa điểm nghiên cứu _ 3.4 Phương tiện, dụng cụ nghiên cứu.— . - - 3.4.1 Phương tiện .8 3.4.2 Húa cht ãããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããããôãããããôããããããft*9 3.4 Phng phỏp nghiờn cu ’ 3.4.1 Chỉ số nghỉên cứu tập mê lộ nước - . - 3.4.2 Quy trình sử dụng thuốc .— - - 10 3.5 Phương pháp xử lý số liệ u 11 Kết nghỉên cứu 11 4.1 Đánh giá gây suy giảm trí nhớ scopolamine chuột nhắt trắng .11 4.2 Đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ chuột nhắt trắng cao chiết xuất từ Guồi đ ỏ 17 Bàn luận 23 5.1 v ề phương pháp phân tích hành v i .23 5.2 v ề kết thay đổi trọng lượng chuột q trình nghiên cứu 23 5.3 v ề mơ hình nghiên cứu —24 5.4 Kết đánh giá suy giảm trí nhớ chuột scopolamine 24 5.5 Kết đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết suất từ Guồi đỏ 26 Kết luận kiến nghị 27 6.1 Két lu ân : 27 6.1.1 Tác dụng gây suy giảm trí nhớ scopolamin 6.2.2 Tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết suất từ Guồi đ ỏ 6.2 Kiến nghị 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO V Ị PHẢN A Kết bật đề tài 1.1 Đóng góp mói đề tài Tơn thương suy giảm trí nhớ biểu thường gặp nhiều bệnh thối hóa não Bệnh Alzheimer (AD), rối loạn thối hóa cơng não dẫn đến sa sút trí tuệ, rối loạn phổ biến tuổi già, với dấu hiệu trí nhớ, suy giảm ngơn ngữ, thị giác không gian, rối loạn cảm giác, vận động, nhận thức có xu hướng tiến triển ; Có số giả thuyết nguyên nhân bệnh Alzheimer, giả thuyết suy giảm acetylcholin công nhận rộng rãi, sở nhiều nghiên cứu thuốc điều trị bệnh Alzheimer Các nghiên cửu bệnh nhân Alzheimer cho thấy bất thường hệ cholinergic có liên quan với mức độ suy giảm trí nhớ nhận thức Những phát dẫn đến phương pháp điều trị bệnh Alzheimer tăng cường hoạt động hệ cholinergic chế kháng enzym Acetylcholinesterasa - AchE) Ở nước, nghiên cứu điều trị bệnh Alzheimer dừng lại việc sàng lọc phát số dược chất có tác dụng mơ hình in vỉtro ức chế enzym AchE mà chưa có nhiều nghiên cứu đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ, nhận thức, học tập loại thuốc động vật thực nghiệm Khi nghiên cửu sàng lọc sơ 133 dược liệu Việt Nam hoạt tính ức chế enzym AchE, khoa Hóa ĐHTN thành phố Hồ Chí Minh phát cao MeOH thân Guồi đỏ, Willughbeia conchinchinensis (họ Trúc đào, Apocynaceae), có hoạt tính kháng enzym AchE mạnh với giá trị IC50 = 23.57 pgmL“1 so với chất đối chứng dương galantamine (IC50 = 1.9 pgmL’1) Do đó, chúng tơi chọn nghiên cứu tác dụng I cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ động vật thực nghiệm nhằm định hướng cho nghiên cứu sâu điều trị bệnh Alzheimer Việt Nam Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ đề tài dừng lại việc đánh giá ừên động vật, kết nghiên cứu chưa ứng dụng để điều trị bệnh Alzheimer cho người, nhiên kết nghiên cứu đề tài tiền đề sở khoa học cho nghiên cứu sâu điều ị suy giảm trí nhớ loại dược liệu 1.2 Kết cụ thể Gây mơ hình suy giảm trí nhớ chuột nhắt trắng scopolamine đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ có sử dụng scopolamine 1.3 Hiệu xã hội Là loại dược liệu có nguồn gốc từ thiên nhiên nên tác dụng phụ, có lãnh thổ Việt Nam, nhập khẩu, giá thành thấp Đánh giá thực đề tài đối chiếu vói đề cương nghiên cứu phê duyệt 2.1 ƠTiến độ - Đúng tiến độ - Rút ngắn thời gian nghiên cứu Tổng số thời gian rút ngắn tháng Kéo dài thời gian nghiên cứu Tổng số tháng kéo d i tháng Lý phải kéo d i 2.2 Thực mục tiêu nghiên cứu đề - Thực đầy đủ mục tiêu đề - Thực mục tiêu đề khơng hồn chình - Chi thực số mục tiêu đề - Những mục tiêu không thực (ghi rõ) 2.3 Các sản phẩm tạo so với dự kiến đề cương - Tạo đầy đủ sản phẩm dự kiến ữong đề cưomg - Chất lượng sản phẩm đạt yêu cầu ghi đề cương - Tạo đầy đủ sản phẩm chất lượng có sản phẩm chưa đạt - Tạo đầy đủ sản phẩm tất sản phẩm chưa đạt chất lượng - Tạo số sản phẩm đạt chất lượng - Những sản phẩm chưa thực (ghi rõ) 2.4 Đánh giá việc sử dụng kỉnh phí - Tổng kinh phí thực đề tài: triệu đồng - Trong Kinh phí nghiệp khoa học: - Kinh phí từ nguồn khác: triệu đồng ừiệu đồng - Trang thiết bị đầu tư từ nguồn kinh phí đề tài thiết bị có giả Stt ghi ừang trị 50.000.000 đồng) Tên ừang thiết bị Kỹ thuật sử dụng Sản phâm tạo Chưa toán xong Kinh phí tồn đọng triệu đồng 2.5 Các ý kiến đề xuất: Chủ yếu tập trung vào đề xuất quản lý 2.5.1 Đề xuất tài (nếu có) Kinh phí Cần ghi rõ ý kiến đề xuất cụ thể kinh phí cấp phát chậm yêu cầu toán chứng từ 2.5.2 Đề xuất quăn lý khoa học công nghệ (nếu có) Cần ghi rõ ý kiến đề xuất cụ thể như: quyét định phê duyệt chậm, chế quản lý cồng kềnh, nhiều văn giấy tờ v.v 2.5.3 Đề xuất liênquan đến đề tài (nếu có) Cần ghi rõ ý kiến đề xuất Hên quan đến việc ừỉển khai ứng dụng phát triển tiếp nghiên cứu cần giải thích rõ lý lại đề xuất \ 16 Minh họa đường bơi chuột nhóm nghiên cứu ngày ngày hình 3.3 Scop 1.5 Scop 1.0 Scop 0.5 Chứng Hình Hình ảnh đường boi chuột ngày 1; theo nhóm Két nghiên cứu thời gian chuột bơi góc phần tư trước cỏ đặt bến đỗ tập mê lộ nước thể bảng Bảng Thịi gian (giây) chuột bíri góc phần tư Ợ ± S D ) cs Nhóm n Chứng 20 (a) Scop 0.5 19 (b) Scop 1.0 19 (c) Scop 1.5 (d) 24 Góc Góc Góc Góc (1) (2) (3) (4) 37,33 30,90 26,84 25,10 ± ± ± ± 8,63 9,88 7,32 8,34 35,12 40,65 •24,12 20,11 ± ± ± ± 7,64 12,59 6,32 8,27 34,38 31,42 29,52 24,67 ± ± ± ± 8,73 8,70 7,46 6,36 26,71 38,91 31,82 22,55 ± ± ± db 7,87 10,13 7,01 7,28 Pa,d Pa,c< 0,001 Pa,b< 0,001 Pa,C) Pa,d, Pb,e< 0,01 Pb,e< 0,001 (p < 01);***(p < 0,001) so với ngày lơ thí nghiệm 21 Biểu đồ Tbay đổi qng đường chuột boi mê lộ nưóc Kết nghiên cứu cho thấy: - Phân tích phương sai hai chiều lặp lại (Two way ANOVA repeated) nhận thấy có khác biệt đáng kể quãng đường chuột bơi tìm thấy bến đỗ theo ngày (quãng đường) [F (4.378, 91.948) = 27.054, p < 0,001] theo nhóm (cách điều trị) [F (3.386, 71.110) = 12.060, p < 0,001], đồng thời có tương tác hai yếu tố lên khác biệt quãng đường chuột bơi đến tìm thấy bến đỗ - So sánhtheo ngày nhóm thấy: + Chuột thuộc nhóm GD 150 có qng đường bơi đến tìm thấy bến đỗ từ ngày đến 7và nhóm GD 200 ngày 6,7 ngắn so với ngày l(pi 4_ < 0,05, Pi < 0,01); (Pi,6- 7< 0,05) + Chuột thuộc nhóm GD 200 có quãng đường bơi đến tìm thấy bến đỗ dài so với chuột thuộc nhóm chứng ngày 5, ngắn so với nhóm chuột thuộc nhóm scop 1.5 ởngày 6; (Pa,e(3 và5)< 0,01, Pb,e(6và7)< 0,001) GD200 G D 150 G D 100 Scop 1.5 Chứng Hình Hình ảnh đường bơi chuột ngày ,7 theo nhóm 22 Kết nghiên cứu thời gian chuột bơi góc phàn tư trước có đặt bên đỗ tập mê lộ nước thể bảng Bảng Thòi gian (giây) chuột bơi góc phần tư \ c s n Chứng G óc G óc G óc G óc (1) (2) (3) 37,33 30,90 26,84 25,10 ± ± ± ± 8,63 9,88 7,32 8,34 26,71 38,91 31,82 22,55 ,± ± ± ± 7,87 10,13 7,01 ,2 34,65 32,14 26,99 26,21 ± ± ± ± 6,49 6,95 9,40 ,0 34,81 30,84 27,41 26,93 ± ± ± ± 6,66 5,78 8,18 5,54 37,01 35,03 24,51 23,34 ± ± ± ± 9,26 8,70 10,97 8,76 Nhom^v 20 (a) Scop 1.5 20 (b) GD 100 22 (c) GD 150 21 (d) GD 200 22 (e) ± S ỡ ) p (4) ' p 1,3 < ,05 p i ^ ,0 Pl,3< 0,01 P l,4< 0,01 P i,4 < ,0 P i,2< 0,05 Pi,3< 0,05 P l,4 < ,0 Pb,c1 P Mh — toJ G D 100 Scop 1.5 Chứng 1 ĩxề Hình Hình ảnh đường bơi chuột ngày theo nhóm 23 Bàn luận 5.1 phương pháp phân tích hành vi Nghiên cứu phân tích vê hành vi, nhận thức, trí nhớ cần thỉết ké tinh tế, phức tạp Trong nghiên cửu trước tác gỉả phải sử dụng phân tích thủ cơng nhờ quan sát, phân tích băng măt ghi lại tay, làm phức tạp cho nghiên cửu viên mà kêt vân khơng hồn tồn khách quan Gần đây, với phát triển khoa học kỹ thuật, nhiêu phân mêm phân tích hình ảnh động cơng ty lớn thể giới Any maze (Stoelting, Mỹ), PrimateScan, TopScan (Clever.sys, Mỹ), EthoVision XT (Noldus, Hà lan) [12] cho phép phân tích hành vi tự động cho kết xác, khách quan Trong nghiên cứu tại, hành vi chuột phân tích tự động bời sử dụng phần mềm Any maze Đây phần mềm thương mại Mỹ nhiều labo nhà nghiên cứu giới sử dụng nghiên cứu hành vi động vật [18] Phần mềm hoạt động theo nguyên lý dựa vào khác biệt hình ảnh động vật (các dụng cụ thí nghiệm) phân tích khác biệt khung hình theo thời gian file video Phần mềm xác định xác tọa độ chuột theo thời gian với tần số qt 30 hình/giây, từ xác định vị trí tương đối chuột với vùng định dạng, từ cho ta thơnơ số tần suất thời gian chuột vào, sử dụng vùng mà ta quan tâm Hơn nữa, ừong nghiên cửu dụng cụ thí nghiệm như: mê lộ nước, tập nhận thức đồ vật, mê lộ chữ Y làm theo quy chuẩn mà labo lớn giới sử dụng Do đó, kết nghiên cứu có ý nghĩa khoa học độ xác cao [18] 5.2 kết thay đổi trọng lượng chuột trình nghiên cứu Trong trình nghiên cứu, sử dụng đối tượng chuột nhắt trắng, giống đực khỏe mạnh 10 - 12 tuần tuổi (trọng lượng từ 20 - 30g) với số lượng 180 chuột, ban chăn nuôi Học viện Quân y cung cấp Chuột trước làm thực nghiệm, chăm sóc ni phịng thống mát, ăn uống đầy đủ, chu kỳ sáng tối trì 12/12 Trong suốt thời gian nghiên cứu, tất chuột ăn uống, hoạt động bình thường Kết cho thấy trọng lượng chuột không bị giảm mà tăng dần theo thời gian (bảng 3.1) Điều chứng tỏ chuột chăm sóc tốc khỏe mạnh, đảm bảo yêu cầu nghiên cứu M ặt khác chuột lô khác biệt trọng lượng thời điểm kiểm tra Kết cho thấy thuốc dùng ữong thí nghiệm chúng tơi khơng ảnh hưởng đến tăng trọng lượng binh thường chuột Như vậy, trình nghiên cửu tiến hành thuận lợi, đảm bảo quy trình 24 5.3 mơ hình nghiên cứu Hiẹn có nhiêu mơ hình gây tơn thương trí nhớ động vật thực nghiệm theo chê khác sử dụng hóa chất, gây tổn thương vùng não, biến đôi gen [15] Sử dụng scopolamine gây suy giảm trí nhớ mơ hình áp dụng rộng rãi, đặc biệt cho thử nghiệm thuôc tác động theo ché kháng enzym A chE Scopolamine chât ức chê cạnh tranh thụ cảm thể muscarin, làm giảm hoạt động hệ cholinergic Nhiêu nghiên cứu cho thấy scopolamine gây suy giảm nhận thức trí nhớ người động vật thực nghiệm [6] Hiện nay, mơ hình sử dụng scopolamine gây suy giảm trí nhớ sử dụng rộng rãi, nghiên cứu đánh giá tác dụng tăng cường trí nhớ loại thuốc theo chế kháng enzym AchE [20] So với mơ hình khác, mơ hình có ưu điểm thực dễ dàng hon (tiêm scopolamine vào phúc mạc), tỷ lệ khả sống sót chuột cao Thí nghiệm tiến hành chuột nhắt trắng, nên sử dụng số lượng nhiêu hơn, lựa chọn chuột có tính tương đồng chủng, tuổi, cân nặng dễ dàng Hơn nữa, thiết bị, dụng cụ sử dụng tập đánh giá trí nhớ chuột (mê lộ nước) dễ làm hơn, kích thước nhỏ thực đơn giản so với sử dụng loại động vật lớn (chó, thỏ, khỉ ) 5.4 Kết đánh giá suy giảm trí nhớ chuột scopolamine Bệnh nhân suy giảm ừí nhớ có biểu giảm sút khả học tập, trí nhớ, nhận thức, tổn thương ảnh hưởng lời nói trí nhớ khơng lời nói [5], [12] Ở mức độ nhẹ, người bệnh khó khăn việc ghi nhận, lưu giữ tái kiện có liên quan đến sống hàng ngày vị trí đồ vật, ghi nhớ thơng tin vừa truyền đạt, không thực nhiệm vụ phức tạp hàng ngày, hoạt động khơng có tính sáng tạo Ở mức độ trung bình, giảm trí nhớ ảnh hưởng đến khả sống tự lập, bệnh nhân không nhớ họ vừa làm tên người quen, bệnh nhân khơng thể hoạt động bình thường khơng có trợ giúp người khác mua hàng, quản lý tiền bạc Mức độ trầm ừọng, bệnh nhân mât hoàn toàn khả lưu giữ thông tin mới, bệnh nhân không nhận chí ca người thân gia đình Các biêu gây khó khăn cho bẹnh nhan hoạt động hoạt động xã hội [1], [5] Scopolamine, chất đối kháng thụ thể acetylcholine, cho làm suy giảm trinh nhận thức, học tập đặc biệt nhận thức ữí nhớ khơng gian [6], [9] N hiều tác g!â cho thây scopolamine gây suy giảm nhận thức trí nhơ như! Seth J Sherman cộng nghiên cứu tác dụng scopolamine người nhận thâyscopolamine (liều 4mg/kg) ảnh hưởngquá trình nhận thức, khả thực tập kích thích hình ảnh [16] S.p Mewaldt M.M Ghoneim nhận thấy 25 scopolamine (liều pg/kg) gây suy giảm khả học tập, gợi lại trí nhớ v ề sô Trên động vật thực nghiệm, scopolamine gây triệu chửng tương tự n h như: gay giam kha học tập, suy giảm trí nhớ nhiều tập liên quan đến học tập, nhận thức trí nhớ [6], [9], [22] Tác dụng gây m ất trí n h scopolamine đánh giá nhiều thử nghiệm hành vi như: mê l nư ớc (M orris water maze), nhạn thưc đô vật (Object recognition), mê lộ chữ Y (Y m aze), né tránh thụ động (passive avoidance) [8], [11], [17] Scopolamine dùng để nghiên cứu tác dụng cải thiện tình trạng trí nhớ sản phẩm dược liệu thiên nhiên [ 11] Nhieu san phâm tự nhiên bao gôm alkaloid, flavonoid stilbenes, báo cao có tác dụng ức chê AchE đê xuât nguồn hợp chất iro n s điều trị triệu chứng bệnh Alzheimer [11] Trong nghiên cứu này, đê đánh giá trí nhớ, khả học tập, nhận thức chuột nhăt trăng sử dụng tập mê lộ nước, tập dã cho phương tiện cỏ giá trị, độ tin cậy cao đánh giá trí nhớ [6], [22] Bài tập m ê lộ nước phương tiện sử dụng rộng rãi có nhiều quỉ trình nghiên cứu khác áp dụng tác giả khác nhiên nguyên lý chung tập là: chuột thả vào nước, sống còn, chuột vận động tìm cách bơi khỏi nơi nguy hiểm tìm bến đỗ an tồn [21], [23] Trong tập chúng tơi tiến hành qua hai giai đoạn: giai đoạn học tập hình trí nhớ (ngày - 7): thời gian quãng đường chuột bơi mê lộ nước từ thả đến tìm thấy bến đỗ tính tốn Đây thông số thể khả học tập hình thành trí nhớ động vật (acquisition memory) Giai đoạn gợi lại trí nhớ (ngày thứ 8): thời gian chuột bơi góc phần tư trước đặt bến đỗ tính tốn Đây thơng số thể khả gợi lại trí nhớ hình thành binh học tập Nghiên cửu chúng tơi thấy rằng: giai đoạn học tập hình thành trí nhớ, có khác biệt đáng kể thời gian quãng đường chuột bơi đên tìm thây bên theo ngày theo nhóm chuột Chuột tất nhóm có thời gian bơi m ê lộ nước từ thả đến tìm thấy bến đỗ giảm dần theo ngày, thời gian bơi đến tìm thây bến đỗ có khác nhóm Chuột thuộc nhóm chứng, scop 0.5, scop 1.0 có khác biệt thời gian tìm thấy bên đô từ ngày đên so VỚI ngày 1, cịn chuột thuộc nhóm scop 1.5 khác biệt từ ngày đến (với giá trị p bảng ) Khi so sánh khác thời gian tìm thấy bén đỗ nhóm m ột ngày thấy: chuột thuộc nhóm scop 0.5, scop 1.0 có khác biệt so VƠI rdìom chứng ngày chuột nhom scop 1.5 co sư khac b iẹt so VƠI 26 nhóm chưng từ ngày đên ngậy So sánh nhóm chuột đ ợ c tiêm scopolamine thấy: thời gian bơi đến tìm thấy bến đỗ chuột thuộc nhóm sc o p 1.5 lớn so với nhóm scop 0.5 nhóm scop 1.0 từ ngày đến ngày Đ iề u n y chứng tỏ chuột tiêm scopolamine có suy giảm khả học tập ghi n h vị trí bến đỗ giai đoạn gợi lại trí nhớ (ngày thứ 8): chuột nhóm chứng có th i gian bơi goc phan tư trước đặt bên đô lớn so với góc cịn lại Đ iều bày chưng to chuọt thuọc nhom chứng có khả nhớ lại học tập khư Trong chuột tiêm scopolamine liêu 0,5; l,5mg/kg có thời gian bơi góc phần tư trước đặt bến đỗ giảm dần thấp nhóm scop 1.5 Đ iều chủng tỏ scopolamine làm suy giảm hai khả học tập hình thành trí nhớ v gợi lại trí nhớ khứ động vật scopolamine liều l,5mg/kg có tác d ụ n e gây suy giảm trí nhớ mạnh ữong liều thử nghiệm thí nghiệm Các tác giả trước như: Manish Kumar Saraf cộng (2011) nghiên cứu tác dụng gây suy giảm trí nhớ scopolamine ữên chuột nhắt trắng tập mê lộ nước, với dải liều 0,lmg/kg, 0,5mg/kg lmg/kg cho thấy với liều 0,5 lmg/kg gây tăng thời gian quãng đường chuột bơi từ thả đến tìm thấy bên từ ngày đến ngày làm giảm đáng kể thời gian chuột bơi góc phàn tư (góc đặt bến đỗ trước đây) ngày [20] Liying Zhu cộng (2014), Jinghua Wang cộng (2014) nhận thấy scopolamine liều 2mg/kg gây tăng thời gian chuột bơi mê lộ nước từ thả đến tìm đến bến đỗ giảm thời gian chuột bơi góc phần tư m trước đặt bến đỗ [24], [26] 5.5 K ết đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết suất từ G uồi đỏ Bệnh Alzheimer ừong nguyên nhân phổ biến chứng trí nhớ người già đặc trưng trí nhớ chức nhận thức khác [5], [11] Các nghiên cứu trước bệnh Alzheimer chứng minh bất thường hệ cholinergic tương quan với mức độ nhớ suy giảm nhận thức [15] Acetylcholinesterase enzyme thủy phân acetylcholine dẫn truyên thân kinh, enzym e quan trọng hệ thống thần kinh cholinergic Sự gia tăng nồng độ A chE quanh m ảng -amyloid p đám rối neurofibrillary đặc diêm nôi trội bệnh A D [14] Các loại thuốc phổ biến điều trị bệnh Alzheimer lâm sàng, D onepezil, Galantamin, Rivastigmine thuốc kháng AchE [15] B ài tập mê lộ nước công cụ điển hình để đánh giá trí nhớ đặc biệt trí nhớ diơng gian Mơ hình hữu ích để phân tích tác dụng cài thiện trí n h n ộ t số loại thuốc có tác dụng đối kháng lại chứng hay quên [23] Trong thí nghiệm ủ a chúng tơi, chuột điều trị cao chiết Guồi đỏ (ờ ba liêu) cộng tiêm copolam ine làm giảm đáng kể thời gian quãng đường chuột bơi mê lộ nước 'í th ả đến tìm bến đỗ so với chuột thuộc nhóm scopolamine điêu trị nước muối Trong cao chiết G i đỏ liêu 200m g/kg lam giam n h ieu n h a t ve thông số Sự suy giảm thời gian chuột bơi góc p h ần tư (g ó c đặt bên đô trước đây) gây scopolam ine tăng đáng kê chuột đieu trị bang cao chiết Guồi đỏ (200mg/kg) Đ iều cao chiết Guồi đỏ bảo vệ chuột khỏi tác hại gây suy giảm trí nhớ scopolam ine đánh gia tro n g bai tập mê lộ nước Kết tương tự với tác giả như: Julio R ubio cộng (2007), Manỉsh Kumar Saraf cộng (2011) nhận thây dịch chiêt B lack Maca (liều 250 - 100mg/kg), B acopa m onniera (liều 120m g/kg) có tác dụng làm giảm thời gian quãng đường bơi đến tìm thấy bến đỗ chuột gây suy giảm trí nhớ scopolamine [19], [20], N gồi cịn nhiều sản phẩm có nguồn gốc thiên nhiên như: Sulforaphane [22] Loganin [13] Im peratorin [7] Lycium barbarum Polysaccharides [8] có tác dụng cải thiện trí nhớ tập m ê lộ nước nghiên cứu Kêt luận kiến nghị 6.1 Kết luận 6.1.1 Tác dụng gâỵ suy giảm tr í nh scopolam ine Scopolamine lieu 0,5mg/kg, 1mg/kg rõ liều l,5m g/kg (tiêm phúc m ạc) có tác dụng: - Giảm khà học tập, hình thành trí nhớ: làm tăng thời gian qng đường chuột bơi mê lộ nước từ thả đến tìm thấy bến đỗ từ ngày đến ngày - Gây suy giảm trí nhớ làm việc khơng gian khả gợi lại trí nhớ: làm giảm thời gian chuột bơi góc phần tư trước có đặt bến đỗ (ngày 8) 6.2.2 Tác dụng cải thiện trí nh cao chiết suất từ Guồi đỏ Cao chiết xuất từ thân Guồi đỏ liều 100mg/kg, 150mg/kg rõ liều 200mg/kg (đường uống) ữên chuột gây suy giảm trí nhớ bàng scopolamine có tác dụng: - Phục hồi khả học tập, hình thành trí nhớ: làm giảm thời gian quãng đườnơ chuột bơi từ thả vào mê lộ nước đến tìm thấy bến đỗ từ ngày đến ngày _' Cải thi?n tình tr^ g suy giảm trí nhớ làm việc khơng gian khả gợi lại trí nhơ: làm tăng thời gian chuột bơi ừong góc phần tư trước có đặt bến đỗ (ngày 8) 6.2 Kiến nghị Qua kêt nghiên cứu đề tài, xin nêu số kiến nghị sau: , ' Tiêp tục tiếnhành nghiên cứu so sánh tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết xuat tư cay Guôi đỏ với thuốc sử dụng điều trị bệnh suy giảm trí nhớ Rivastigmine, Galanthamine, Donepezil - Kiêm ừa độc tính cấp, độc tính trường diễn đường uống cao chiết xuất từ Guồi đỏ động vật thí nghiệm TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾ N G VIỆT P hạm K huê (2002), "Bệnh Alzheimer", N X Byhọc, Hà N ội, tr - 10 P hạm Thắng (2010), "Bệnh Alzheimer thể sa sút trí tu ệ khác", xu ấ t B ả n Y học,tr 174 - 190 N guyễn Bá Tĩnh (2007), "Tuệ Tĩnh toàn tập", Nhà xuất Bàn Y tr N guyễn Kim V iệt (2009), "Nghiên cứu đặc điểm sa sút trí tuệ cộng đ n g ", Tạp c h í Y học thực hành 32(6), tr 208 - 217 TIẾ N G ANH B lennow K., D e Leon M J., Zetterberg H (2006), "Alzheimer’s disease", Lancet 368, p 387-403 B lokland A (2005), "Scopolamine-induced deficits in cognitive perform ance: A rev iew o f anim al studies", F aculty o f Psychology, Brain & B ehavior M aastricht U niversity, The Netherlands, p -15 B udzynska B., Boguszewska-Czubara A., Kruk-Slomka M et al (2015), "Effects o f im peratorin on scopolamine-induced cognitive im pairm ent and oxidative stress in m ice", Psychopharmacology 232(5), p 931 - 942 C h en w , Polysaccharides C heng X., Chen J et al (2014), "Lycium Prevent M emory and Neurogenesis b arb aru m Im pairm ents in Scopolam ine-Treated Rats", P LoS One 9(2), p 1-11 C hristian GỈIles M D., Stéphane Ertlé M s (2000), "P harm acological m odels in A lzheim er’s disease research", Dialogues N eitrosci 2(3) p - 255 10 H o u Q X., W u D.W , Zhang c x et al (2014), "BushenYizhi fo rm u la am eliorates cognition deficits and attenuates oxidative stressrelated n e u ro n al apoptosis in scopolam ineinduced senescence in mice", 429-39 M ed (2 ), p 11 Ian Q., W hishaw , Kolb B (2005), "The Behavior o f the L a b o to ry R a t A Handbook w ith Tests", O xford University Press 4, p 560 12 Jeffrey L., Cummings M.D (2004), "Alzheimer’s Disease.", N Vol 351, p - 13 K won S.H , Kim H.C., Lee S.Y et al (2009), "Loganin im proves learning and m em ory im pairm ents induced by scopolamine in mice", E u ro p ea n J o u rn a l o f P harm acology 619(1 - ), p 44 - 49 14 M aria-Salud, Garcia-Ayllon (2010), "Revisiting the role of acetylcholinesterase in Alzheimer ’s disease: cross-talk with P -tau and p amyloid", F ro n t N euroenergetics 4(2), p - 15 M cG leenon B M , Dynan K B., Passmore A P (1999), "Acetylcholinesterase inhibitors in Alzheimer’s disease", B r J C lin P harm acol 48(4), p 471 - 480 16 O h S.R , A hn E.M , Jung J.W (2011), "The beneficial effects o f A chyranth us bidentata B lum e on scopolamine-induced memory impairment in m ice", O rient P harm E xp M ed 11, p 199 - 206 17 P a rk S.J., A hn Y.J., Oh S.R et al (2014), "Am yrin attenuates scopolam ine-induced cognitive impairment in mice", B io lo g ica l & P rm a ceu tica l B ulletin 37(7), p 1207-1213 18 R osem b erg D.B (2011), "Differences in Spatio-Temporal B eh av io r o f Z ebrafish in th e O pen Tank Paradigm after a Short-Period C onfinem ent into D ark an d B right Environm ents", Behav Pharma 16(1), p 19 R u b io J., D ang H., Gong M et al (2007), "Aqueous and hydro alco h o l ic extracts o f B lack M aca (Lepidium meyenii) improve scopolam ine-induced m em o ry im pairm ent in mice", F ood and Chemical Toxicology 45(10), p 1882 1890 S a r a f M K , Prabhakar S., Khanduja K.L et al (2010), "B aco p a m o n ru e A ttenuates Scopolamine-Induced Impairment of Spatial M e m o ry in M ice." E vidence-B ased Complementary and Alternative M edicine, a rtic le ID 236186, p 10 21 Sharm a V.K (2009), "Morris water maze - A versatile cognitive to o l ", J B io sci Tech 1(1), p 15 - 19 22 Siyoung L., K im J., Seo SG et al (2014), "Sulforaphane a lle v ia te s scopolam ine-induced m em ory impairment in Mice", Pharm acological R esea rc h 85, p 23 - 32 23 V orhees C.V., W illiam s M.T (2006), "Morris water maze: p rocedures for assessing spatial and related forms o f learning and memory", Nat P rotoc 1(2), p 848 - 858 24 W a n g J., K im J., Seo S.G et al (2014), "Effects o f Fructus A k eb iae on learning and m em ory impairment in a scopolamine-induced animal m o d el o f dem entia", E xperim ental a n d Therapeutic Medicine 8, p 671-675 25 Y ah aya T.A., A deola S.O., Akpojo A J (2012), "Crinum zeylanicum b u lb extract im proves scopolamine-induced memory impairment in mice ", M o le c id a r and C lin ica l P harm acology 3(1), p 21-29 26 Z h u L., Z hang L , Zhan L et al (2014), "The effects o f Zibu P iyin R e cip e com ponents on scopolam ine-induced learning and memory im pairm ent in th e mouse", Jo u rn a l o f Ethnopharm acology 151(1), p 576 - 582 27 X ia n g G Q., T ang S.S., Jiang L.Y et al (2012), "PPARgam m a a g o n is t pioglitazone im proves scopolamine-induced memory impairment in m ice , JPharm Pharmacol 64(4) p 589 - 596 ... chọn nghiên cứu tác dụng I cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ động vật thực nghiệm nhằm định hướng cho nghiên cứu sâu điều trị bệnh Alzheimer Việt Nam Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ. .. nghiên cứu đánh giá tác dụng hợp chất động vật thực nghiệm Vì vậy, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài “ cứu tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ động vật thực nghiệm? ?? với hai mục... nghiên cứu sâu điều ị suy giảm trí nhớ loại dược liệu 1.2 Kết cụ thể Gây mơ hình suy giảm trí nhớ chuột nhắt trắng scopolamine đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ cao chiết xuất từ Guồi đỏ có sử dụng