VŨ QUANG HUY NGHIÊN cứu tác DỤNG cải THIỆN TRÍ NHỚ của ACID URSOLIC TRÊN mô HÌNH CHUỘT gây SUY GIẢM TRÍ NHỚ THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dƣợc sĩ

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI VŨ QUANG HUY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CẢI THIỆN TRÍ NHỚ CỦA ACID URSOLIC TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT GÂY SUY GIẢM TRÍ NHỚ THỰC NGHIỆM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2020 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI VŨ QUANG HUY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CẢI THIỆN TRÍ NHỚ CỦA ACID URSOLIC TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT GÂY SUY GIẢM TRÍ NHỚ THỰC NGHIỆM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Lê Thị Xoan TS Chử Thị Thanh Huyền Nơi thực hiện: Khoa Dƣợc lý Sinh hóa – Viện Dƣợc liệu Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội HÀ NỘI – 2020 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực khóa luận, em nhận nhiều giúp đỡ từ thầy cô anh chị Viện Dược liệu trường Đại học Dược Hà Nội Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Lê Thị Xoan, TS Hà Vân Oanh TS Chử Thị Thanh Huyền, ba người thầy tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu thực đề tài hồn thiện khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới anh chị khoa Dược lý – Sinh hóa Viện Dược liệu giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện để em hồn thành đề tài Do thời gian thực đề tài, kiến thức kỹ lần tham gia nghiên cứu khoa học có hạn, chắn khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận ý kiến đóng góp q giá từ thầy để khóa luận hoàn thiện Hà Nội, tháng năm 2020 Sinh viên Vũ Quang Huy MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Hội chứng sa sút trí tuệ suy giảm trí nhớ .2 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Dịch tễ 1.1.3 Yếu tố nguy yếu tố bảo vệ 1.1.4 Biểu lâm sàng 1.1.5 Cơ chế bệnh sinh 1.1.6 Các thuốc điều trị 1.2 Acid ursolic .11 1.2.1 Một số dƣợc liệu có chứa acid urosolic 11 1.2.2 Cơng thức cấu tạo tính chất lý hoá .11 1.2.3 Tác dụng dƣợc lý .12 1.2.4 Dƣợc động học 14 1.3 Một số mơ hình gây suy giảm trí nhớ 14 1.4 Một số thử nghiệm đánh giá hành vi 15 1.4.1 Thử nghiệm ghi nhớ vị trí đồ vật 16 1.4.2 Thử nghiệm tránh né chủ động 16 1.4.3 Thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến (modified Y-maze) 16 1.4.4 Mê lộ nƣớc Morris (Morris water maze) 16 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 1.1 Đối tƣợng nghiên cứu .18 1.1.1 Nguyên liệu: 18 1.1.2 Động vật thí nghiệm 18 1.1.3 Hóa chất, trang thiết bị 18 1.2 Nội dung nghiên cứu 19 1.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 1.3.1 Chuẩn bị thuốc đƣờng dùng 19 1.3.2 Thiết kế thí nghiệm 20 1.3.3 Đánh giá tác dụng acid ursolic động vật thực nghiệm 20 1.3.4 Phẫu thuật cắt thùy khứu giác (Olfactory bulbectomy-OBX) 21 1.3.5 Thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến 22 1.3.6 Thử nghiệm mê lộ nƣớc Morris 23 1.4 Phân tích số liệu 26 CHƢƠNG KẾT QUẢ 27 3.1 Tác dụng cải thiện trí nhớ acid ursolic mơ hình chuột suy giảm trí nhớ đánh giá qua thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến .27 3.2 Tác dụng cải thiện trí nhớ acid ursolic mơ hình chuột suy giảm trí nhớ đánh giá qua thử nghiệm mê lộ nƣớc Morris (MWM) 29 3.2.1 Bài tập có bến đỗ 29 3.2.2 Bài tập khơng có bến đỗ .33 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 34 4.1 Về mơ hình nghiên cứu .34 4.2 Về khả cải thiện trí nhớ ursolic acid 34 4.2.1 Đánh giá trí nhớ ngắn hạn qua mơ hình mê lộ chữ Y cải tiến 34 4.2.2 Đánh giá trí nhớ dài hạn qua mơ hình mê lộ nƣớc Morris 35 4.2.3 Một số chế tiềm acid ursolic tác dụng cải thiện khả học hỏi ghi nhớ 38 4.2.4 Một số dƣợc liệu chứa acid ursolic có tác dụng cải thiện trí nhớ 38 KẾT LUẬN 40 KIẾN NGHỊ VÀ ĐỀ XUẤT 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 PHỤ LỤC 48 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Viết tắt Viết đầy đủ theo Tiếng Viết đầy đủ theo Tiếng Anh Việt AChE Acetylcholinesterase AD Alzheimer’s disease APOE Apolipoprotein E APP Amyloid precursor protein Aβ Β-amyloid BDNF BuChE BVLKTW DNP 10 FDA 11 GSH Glutathione 12 MDA Malondialdehyde 13 MWM Morris water maze 14 NMDA N-methyl-D-aspartate 15 OBX Olfactory bulbectomy 16 SSTT 17 UA Brain-derived neurotrophic factor Bệnh alzheimer Protein tiền chất amyloid Yếu tố ổ th n kinh n o Butyrylcholinesterase Bệnh viện Lão khoa Trung ƣơng Donepezil.HCl U.S Food and Drug Cục quản lý Thực phẩm Administration Dƣợc phẩm Hoa Kỳ Mê lộ nƣớc Morris Chuột loại bỏ thùy khứu giác Sa sút trí tuệ Ursolic acid Sự chết tế theo chƣơng 18 Apoptosis 19 Synaptic plasticity Tính mềm d o synap 20 Modified Y-maze Mê lộ chữ Y cải tiến trình DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình Trang Hình 1.1: Acid ursolic 13 Hình 2.1: Thiết kế thí nghiệm 20 Hình 2.2 : Giải phẫu loại bỏ thùy khứu giác 21 Hình 2.3: Quy trình phẫu thuật loại bỏ thùy khứu giác 22 Hình 2.4: Sơ đồ thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến 23 Hình 2.5: Sơ đồ thử nghiệm MWM 24 Hình 3.1: Đồ thị biểu diễn thời gian chuột khám phá cánh thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến Hình 3.2: Đồ thị biểu diễn số lần chuột khám phá cánh thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến Hình 3.3: Đồ thị biểu diễn tổng số lần chuột khám phá cánh thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến 27 28 28 Hình 3.4: Thời gian tìm thấy bến đỗ chuột thử nghiệm MWM 30 Hình 3.5: Quãng đường bơi chuột thử nghiệm MWW 31 Hình 3.6: Tốc độ bơi trung bình chuột thử nghiệm MWM 31 Hình 3.7: Thời gian chuột góc phần tư chứa bến đỗ 33 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Trang Bảng 1.1 Các yếu tố nguy yếu tố bảo vệ bệnh Alzheimer Bảng 1.2: Một số thuốc điều trị bệnh Alzheimer Bảng 2.1 Hóa chất sử dụng 18 Bảng 2.2 Trang thiết bị sử dụng 19 Bảng 2.3: Vị trí thả chuột thử nghiệm MWM 25 ĐẶT VẤN ĐỀ Cùng với già hoá dân số giới, bệnh liên quan đến lão khoa ngày đƣợc quan tâm, đặc biệt bệnh lý thoái hoá bệnh mạn tính, có sa sút trí tuệ (SSTT) Bệnh Alzheimer (AD) nguyên nhân phổ biến sa sút trí tuệ nói chung, với khoảng 60% tổng số ca bệnh nhân 65 tuổi [48] Kể từ đƣợc phát từ năm 1907 đến nay, chế bệnh sinh bệnh Alzheimer chƣa đƣợc làm sáng tỏ, chƣa có phƣơng pháp điều trị triệt để Các thuốc hoá dƣợc đ đƣợc sử dụng trị liệu có tác dụng cải thiện triệu chứng bệnh, nhiên kèm theo chi phí đắt đỏ tạo gánh nặng kinh tế, đồng thời thuốc đƣợc sử dụng thƣờng có nhiều tác dụng khơng mong muốn có nguy tƣơng tác thuốc, với đối tƣợng ngƣời cao tuổi Do đó, hƣớng nghiên cứu phát triển thuốc từ dƣợc liệu có tác dụng cải thiện trí nhớ nhƣ triệu chứng kèm theo bệnh Alzheimer đƣợc nhà nghiên cứu quan tâm Mơ hình cắt bỏ thùy khứu giác (Olfactory bulbectomy, OBX) loài gặm nhấm đ đƣợc sử dụng rộng r i nhƣ mơ hình gây suy giảm trí nhớ, nhận thức rối loạn cảm xúc, có tr m cảm bệnh Alzheimer Acid ursolic triterpenoid đƣợc phân bố rộng rãi tự nhiên, có nhiều lồi thực vật có tác dụng cải thiện trí nhớ nhƣ hƣơng nhu tía, hƣơng thảo,…[23], [1] Ngồi số nghiên cứu đ acid ursolic có hoạt tính cải thiện nhận thức trí nhớ [20], [21], gợi ý chất tiềm để điều trị bệnh liên quan đến suy giảm trí nhớ nhƣ Alzheimer Do đó, chúng tơi tiến hành nghiên cứu “Tác dụng cải thiện trí nhớ acid ursolic mơ hình chuột gây suy giảm trí nhớ thực nghiệm” với mục tiêu: Đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ acid ursolic mơ hình chuột loại bỏ thùy khứu giác dựa thử nghiệm hành vi ... TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI VŨ QUANG HUY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CẢI THIỆN TRÍ NHỚ CỦA ACID URSOLIC TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT GÂY SUY GIẢM TRÍ NHỚ THỰC NGHIỆM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn:... suy giảm trí nhớ nhƣ Alzheimer Do đó, chúng tơi tiến hành nghiên cứu ? ?Tác dụng cải thiện trí nhớ acid ursolic mơ hình chuột gây suy giảm trí nhớ thực nghiệm? ?? với mục tiêu: Đánh giá tác dụng cải. .. giảm trí nhớ đánh giá qua thử nghiệm mê lộ chữ Y cải tiến .27 3.2 Tác dụng cải thiện trí nhớ acid ursolic mơ hình chuột suy giảm trí nhớ đánh giá qua thử nghiệm mê lộ nƣớc Morris (MWM)