Nghiên cứu nồng độ một số hormon tuyến giáp trong máu người phơi nhiễm chất da cam dioxin

B ộ Y TẾ Đ Ạ I HỌC Đ IỀU D Ư Ỡ N G N A M ĐỊNH BÁ O C Á O K ẾT QUẢ N G H IÊN cứu Đ È TÀI CÁP c o SỎ NGHIÊN CỨU NỒNG Đ ộ MỘT SÓ HORMON TUYẾN GIÁP TRONG MÁU NGƯỜI PH OI NHIỄM CHẤT DA CAM/DIOXIN [ « Oại học đ;ểù dưỡng _ NĂM ĐỊNH Chủ nhiệm đề tài: Phạm Văn Sơn Cấp quản lý: Trường Đại học Điều dưỡng Nam Định Thời gian thực hiện: Từ tháng 03 năm 2015 đến tháng 10 năm 2015 Tổng kinh phí thực đề tài: 10 triệu đồng Trong đó: kinh phí SNKH: 10 triệu đồng N ăm 2015 BÁO CÁO KÉT QUẢ NGHIÊN cửu ĐÊ TÀI CÁP c SỎ Tên đề tài: “Nghiên cứu nồng độ số hormon tuyến giáp người phơi nhiễm chất da cam/dioxin ” Chủ nhiệm đề tài: Ths Phạm Văn Sơn, BM Hóa Sinh Cơ quan chủ trì đề tài: Trường Đại học Điều dưỡng Nam Định Cơ quan quản lý đề tài: Trường Đại học Điều dưỡng Nam Định Phó chủ nhiệm đề tài: Ths Trần Thị Hương, BM Hóa Sinh Danh sách nghiên cửu viên: - CN Đàm Dương Mỹ Ngọc, BM Hóa Sinh - Mai Lệ Quyên, BM Hóa Sinh Thư ký đề tài: CN Đàm Dương Mỹ Ngọc Thời gian thực đề tài từ tháng 03 năm 2015 đến tháng 10 năm 2015 MỤC LỤC Trang \ Trang phụ bìa Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đồ Danh mục hình PHẦN A Kết bật đề tài 1.1 Đóng góp đề tài 1.2 Kết cụ thể 1.3 Hiệu xã hội 2 Đánh giá thực đề tài đổi chiếu với đề cương nghiên cứu phê duyệt 2.1.Tiến độ 2.2 Thực mục tiêu nghiên cứu đề 2.3 Các sản phẩm tạo so với dự kiến đề cuơng 2.4 Đánh giá việc sử dụng kinh phí 2.5 Các ý kiến đề xuất: Chủ yểu tập trung vào đề xuất quản lý PHÀNB ĐẶT VẨN ĐÈ .- .4 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình nghiên cứu thể giới ảnh hường dioxin với tuyến giáp 2.2 Tình hình nghiên cứu nước ảnh hường dioxin với tuyến giáp ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 3.1 Thiết kể nghiên cứu 3.2 Đối tượng nghiên cứu 3.3 Phương pháp chọn m ẫu 10 3.4 Phương pháp thu thập số liệu v 10 3.5 Phương pháp phân tích, xử lý số liệu 10 3.5.1 Trang thiết bị, vật liệu nghiên cứu 10 3.5.2 Địa điểm, thời gian nghiên cửu .11 3.5.3 Xác định số nhân trắc khám lâm sàng 11 3.5.4 Phương pháp xác định tiêu nghiên cứu 12 3.5.5 Phương pháp xử lý số liệu 16 3.6 Y Đ ức 16 3.7 Mơ hình nghiên cứu 17 KẾT QUẢ NGHIÊN c ứ u 18 4.1 Đặc điểm mẫu nghiên cứu .18 4.1.1 Đặc điểm tuổi đời đối tượng nghiên cứu 18 4.1.2 Nghề nghiệp đối tượng nghiên cứu 18 4.1.3 Các đặc điểm nhân ừắc học đối tượng nghiên cứu 19 4.1.4 Huyết áp động mạch .20 4.2 Một số số hóa sinh huyết học .21 4.2.1 Các số hóa sinh huyết tương 21 4.2.2 Các số huyết học 21 4.3 Nồng độ dioxin máu đối tượng nghiên cứu 22 4.3.1 Nồng độ dioxin toàn phần (phương pháp DR CALUX) 22 4.3.2 Nồng độ đồng đẳng dioxin (phương pháp GCMS) 23 4.4 Nồng độ mói tương quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với dioxin máu đối tượng nghiên cứu 25 4.4.1 Nồng độ TSH hormon tuyến giáp đối tượng nghiên cứu 25 4.4.2 Nồng độ TSH hoimon tuyến giáp theo phân nhóm nồng độ dioxin 26 4.4.3 Tương quan nồng độ TSH, hormon tuyển giáp với dioxin 26 4.4.4 Tương quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ đồng đẳng dioxin 51 đối tượng nghiên cứu 27 BÀN LUẬN 33 5.1 Một số đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 33 5.2 Một sổ đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đối tượng nghiên cửu 34 5.3 Nồng độ dioxin máu đối tượng nghiên cứu 37 5.3.1 Nồng độ dioxin toàn (phương pháp DR CALUX) 37 5.3.2 Định lượng nồng độ dioxin (phương pháp GCMS) 38 5.4 Nồng độ mối tương quan nồng độ TSH, hormon tuyển giáp vói nồng độ dioxin đối tượng nghiên cứu : 40 5.4.1 Nồng độ TSH hormon tuyến giáp 40 5.4.2 Tương quan nồng độ TSH hormon tuyển giáp với nồng độ dioxin đối tượng nghiên cứu 44 KẾT LUẬN 45 Nồng độ dioxin hormon tuyến giáp máu người phơi nhiễm chất da cam/dioxin 45 Tương quan nồng độ TSH hormon tuyến giáp với nồng độ dioxin 45 KIẾN NGHỊ 46 TÀI L Ệ U THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIÉT TẮT AhR Aryl Hydrocarbon Receptor Arnt Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator BEQ Biology Equivalents (Đưomg lượng sinh học) B-TSH Blood Thyroid-stimulating Hormon (hormon hướng giáp) BMI Body mass index (chi số khối) CCB Cựu chiến binh CDC Chất diệt cỏ DRE Dioxin Responsive Element DR CALUX Dioxin Response Chemically Activated Luciferase gene Expression FT3 Free Triiodothyroxine FT4 Free Thyroxine GC-MS Gas Chromatography Mass Spectometry (Sắc kí khí kết hợp khối phổ) HAIT Huyết áp tâm thu HATTr Huyết áp tâm trưorng PCB Polychlorinated Biphenyls PCDD Policlodibenzo-p-dioxin PCDF Policlodibenzofuran POP Persistent Organic Pollutants (Chất hữu bền vững) TEF Toxic equivalency factor (hệ số độc) TEQ Toxic Equivalents (Dượng lượng độc) T3 Triiodothyronine T4 Tetraiodothyronine TBG Thyroxine Binding Globuline TBA Thyroxine Binding Albumine TBPA Thyroxine Binding Prealbumine TCDD 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin WHO World Health Organization (Tổ chức y tế giới) DANH MỤC BẢNG Bảng Tên bảng Trang Bảng 4.1: Số lượng, giới nhóm tuổi đối tượng nghiên cứu .18 Bảng 4.2: Phân bố nghề nghiệp đối tượng 18 Bảng 4.3: Chiều cao, cân nặng theo nhóm tuổi đối tượng nghiên u 19 Bảng 4.4: Chỉ số khối theo nhóm tuổi đối tượng nghiên cứu 20 Bảng 4.5: Huyết áp động mạch theo nhóm tuổi đổi tượng nghiên cứu .20 Bảng 4.6: Chỉ số glucose sắt huyết tương theo nhóm tuổi 21 Bảng 4.7: Các số huyết học đổi tượng ngiên cứu 21 Bảng 4.8: Nồng độ dioxin tồn phần theo giới, nhóm tuổi 22 Bảng 4.9: Nồng độ đồng đẳng PCDD máu 51 đối tượng nghiên cứu 23 Bảng 4.10: Nồng độ đồng đẳng PCDF máu 51 đối tượng nghiên cứu 24 Bảng 4.11: Nồng độ TSH, hormon tuyến giáp đối tượng nghiên cứu 25 Bảng 4.12: Nồng độ hormon tuyến giáp theo phân nhóm nồng độ dioxin .26 Bảng 4.13: Tương quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ dioxin 26 Bảng 4.14 Tương quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ đồng đẳng PCDD 27 Bảng 4.15 Tương quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ đồng đẳng PCDF 31 DANH MỤC HÌNH Hình Tên hình Trang > Hình 3.1: Hình ảnh máy miễn dịch tự động Immulite 2000XPÌ 10 Hình 3.2: Hình ảnh máy đo tín hiệu quang học Cenừo LB 960, Berthold 10 Hình 3.3: Nguyên lý kỹ thuật DR CALUX 12 Hình 3.4: Hình ảnh tế bào H4n sau cho tiếp xúc với mẫu dỉoxin 13 Hình 3.5: Nguyên lý phương pháp miễn dịch hóa phát quang 15 Hình 4.1: Tương quan nồng độ T3 toàn phần với nồng độ dioxin toàn phần (pg BEQ/g mỡ) nữ 27 Hỉnh 4.2 A: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,4,7,8-HexaCDD nữ 28 Hình 4.2 B: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,6,7,8-HexaCDD n ữ 28 Hình 4.2 C: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,7,8,9-HexaCDD nữ 29 Hình 4.2 D: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,4,6,7,8-HexaCDD nữ 29 Hình 4.2 E: Tương quan nồng độ TSH với độ độc tổng số nữ 30 Hình 4.3: Tương quan nồng độ nồng độ FT3 với 1,23,7,8,9-HexaCDD n ữ 30 Hỉnh 4.4 A: Tương quan nồng độ TSH vói nồng độ 2,3,4,7,8 PentaCDF n ữ 31 Hình 4.4 B: Tương quan nồng độ 1,2 ,4,7,8 PentaCDF vói nồng độ FT3 nữ 32 \ PHÀN A Kết bật đề tài 1.1 Đóng góp mói đề tài \ TCDD chất độc hậu gây sức khỏe người nghiêm trọng Sự phơi nhiễm dỉoxin chứng minh nguyên nhân nhiều bệnh lý nguy hiểm như: ung thư tiểu đường gây rối loạn hệ thống miễn dịch hệ sinh sản, hệ thần kinh có nguy cao sinh dị tật Hiện nay, nồng độ dioxin vùng bị phơi nhiễm Việt Nam đă giảm nhiều mưa, sói mịn phân hủy hóa học sau 40 năm, nồng độ chúng đất trầm tích cao vùng khơng bị phơi nhiễm, Những vùng nhiễm nặng không quân Mỹ trước đây, nơi mà chất diệt cỏ vận chuyển, lưu trữ Sau đợt phun dải, phương tiện lại đưa sân bay để tẩy rửa Đặc biệt, cố kỹ thuật làm lượng lớn CDC bể chứa sân bay Biên Hòa Sân bay Đà Nang chiến dịch Ranch Hand (RH) chiến dịch Pacer Ivy (PI) rị ri mơi trường Điều gây nên tinh trạng nhiễm nặng nề chất diệt cỏ có lẫn dioxin không quân Những khu vực gọi “các điểm nóng” nhiễm dioxin, điểm quan ứọng sân bay Biên Hòa, Phù Cát Đà Nang Trong nghiên cứu này, định lượng nồng độ dioxin máu đối tượng phương pháp DR CALUX, nghiên cứu Dịch tễ học đánh giá mức độ phơi nhiễm chất da cam/đioxin cho đối tượng người sống “điểm nóng” nhiễm từ có đánh giá xác ảnh hường dioxin sức khỏe người 1.2 Kết cụ thể Bước đầu tìm mối tương quan nồng độ dioxin nồng độ hormon tuyển giáp: Nồng độ T3 nữ tương quan thuận với nồng độ dioxin toàn phần Nồng độ TSH nữ có tương quan thuận với đồng đẳng dioxin: 1,2,3,4,7,8HexaCDD, 1,2,3,6,7,8-HexaCDD, 1,2,3,7,8,9-HexaCDD, 1,2,3,4,6,7,8-HeptaCDD, 2,3,4,7,8 PentaCDF, độ độc tồng số (PCDD + PCDF) TEQ 1.3 Hiệu xã hội Nghiên cứu tác hại dioxin chương trình nghiên cứu Quốc gia, để tìm chứng khoa học tác hại sức Idhỏe người, ton lưu tự nhiên, nguồn phơi nhiễm sờ đó, xây dựng giải pháp tích cực đê bao vẹ sức khỏe nhân dân Đánh giá thực đề tài đối chỉếu với đề cương nghiên cứu đưọc phê duyệt 2.1.Tiến độ Đúng tiến độ Rút ngắn thời gian nghiên cứu Tổng số thời gian rút ngắn tháng Kéo dài thời gian nghiên cứu Tổng số tháng kéo d i tháng Lý phải kéo d i 2.2 Thực mục tiêu nghỉên cứu đề - Thực đầy đủ mục tiêu đề - Thực mục tiêu đề khơng hồn chỉnh - Chỉ thực số mục tiêu đề - Những mục tiêu không thực (ghi rõ) 2.3 Các sản phẩm tạo so với dự kiến đề cương - Tạo đầy đủ sản phẩm dự kiến ừong đề cưomg X - Chất lượng sản phẩm đạt yêu cầu ghi đề cương X - Tạo đầy đủ sản phẩm chất lượng có sản phẩm chưa đạt - Tạo đầy đủ sản phẩm tất sản phẩm chưa đạt chất lượng - Tạo số sản phẩm đạt chất lượng - Những sản phẩm chưa thực (ghi rõ) 2.4 Đánh giá việc sử dụng kinh phí - Tổng kinh phí thực đề tài: triệu đồng - Trong Kinh phí nghiệp khoa học: - Kinh phí từ nguồn khác: triệu đồng triệu đông - Trang thiết bị đầu tư từ nguồn kinh phí đê tài Stt Tên trang thiết bị Kỹ thuật sử dụng Sản phấm tạo Tồn kinh phí quyêl toán Chưa toán xong Kinh phí tồn đọng triệu đồng Kinh phí 34 nhiều, phụ nữ đa số nội trợ nên có thời gian nhiều hơn, tỷ lệ nữ nghiên cứu nhiều * ỵề nghề nghiệp đối tượng: quan sát đối tượng theo giới tính, chúng tơi thấy phân bố nghề nghiệp tương đối khác nhau, nam đa số lao động phổ thông công nhân nữ đa số nội trợ buôn bán 28,50 % 22,90 % * Đ ặc điểm th ể lực đối tượng nghiên cứu:Theo số liệu điều tra UBTDTT năm 2001 với số sinh học người Việt Nam nay, nam giới trường thành có chiều cao đứng trung bình 165,14 cm, cân nặng 53,19 kg; nữ giới trường thành có chiều cao 153,88 cm, cân nặng 46,02 kg Trong nghiên cứu trung bĩnh chiều cao nam là; 167,00 cm, nữ là; 152,22 cm, người có chiều cao thấp 130 cm, qua vấn khám lâm sàng không phát bất thường tuyến giáp đối tượng cân nặng phụ thuộc nhiều vào điều kiện kinh tế xã hội cụ thể, ừong nghiên cứu cua chung toi, can nạn0 trunc hình đối tượng nghiên cứu giới nam là; 55,70 kg, gicn nư la; 52,75 kg Từ số liệu chiều cao, cân nặng tính chi số BM I trung bình đối tượng nghiên cứu 22,00 ± 3,35 kg/m2 Kêt phù họp với nghiên cứu Teruhiko Kido cộng (2011) [17] N hư vậy, số liệu kết nghiên cứu khơng thay đổi so với binh thường va khơng khác tác giả khác 5.2 M ặt số dặc diễm lâm sàng, cận lâm sàng dối m ạng nghiln cứu - Đ ặc điềm huyết úp động mạch: phân loại huyết áp dộng mạch theo WHO/JNC (1999) chứng thấy huyết áp tâm thu huyết áp tâm trương cùa đot tưọng nhóm tuồi giái hạn binh thường Trong đó, huyết áp tâm thu Ị Ị 1.01 * 17,58 mmHg, huyết áp tâm trương 68,99 ± 10,99 mmHg Ờ nhóm 18-29 tuồi huyết áp tâm thu 105,33 ± 11,06 mmHg, huyết áp tà n tnrong 65,67 ± 8,58 m m H g, Nhóm 30 - 40 tuồi huyết áp tâm thu 106,67 ± 12,91 nunHg, huyét áp tâm trưcmg 67,25 ± 10,02 mmBg, Nhóm > 40 tuồi huyét áp tỉm thu 114,13 ± 19,73mmHg, huyet ap tam trương 70,48 d= 11,65 mmHg N hu vậy, đối tưọng nghiên cứu chúng tơi có chi số huyết áp tương dương vdi dặc dlềm h u y áp dộng m ạch chung 35 * Đ pc điêm sơ sơ hut học, hóa sinh đối tượng nghiên cứu: Mục tieu chinh cua nghiên cứu nông độ số hormon tuyến giáp tuyến tụy người phơi nhiêm chât đa cam/dioxin Tuy nhiên, đối tượng bị phơi nhiễm dioxin ảnh hưởng đên tuyến nội tiết mà cịn ảnh hưởng đén nhiều quan, chun hóa khác cho nên, việc tìm hiểu thêm số số huyết học hóa sinh khác góp phân khẳng định thêm dioxin có hay khơng ảnh hường đển quan khác có liên quan hay độc lập với quan, tổ chức khác không + M ột số c h ỉ số huyết học: số lượng hồng cầu: trung bình cho đối tượng nghiên cứu 4,59 ± 0,63 T/l, ữong số lượng hồng cầu nam 4,92 ± 0,72 T/l, số lượng hồng cầu nữ 4,50 ± 0,58 T/l Bình thường số lượng hồng cầu nam 4,7 - 6,1 T/l, số lượng hồng cầu nữ 4,2 - 5,4 Tỉl [1] Như vậy, số lượng hồng cầu tính trung bỉnh cho nhóm nằm giới hạn bình thường hemoglobỉn (Hb): trung bình cho nhóm phơi nhiễm 127,1 ± 19,5g/L, huyết sắc tố nam 141,0 ± 16,5 g/L, huyết sắc tố nữ 123,2 ± 1,85 g/L Bình thường, huyết sắc tố nam 130b- 180 g/L, nữ 120 -1 g/L [1] Hemolobin tính trung bình cho nhóm nằm giới hạn bình thường ch ỉ số bạch cầu: số lượng bạch cầu 7,28 ± 2,24 G/l, nam 8,52 ± 3,25 G/l, nữ 6,93 ± 1,71 G/l Bình thường, số lượng bạch cầu 4,5 - 10,5 G/l [1] Trong nghiên cửu chúng tôi, số lượng bạch cầu đối tượng nghiên cứu ừong giới hạn bình thường số tiểu cầu: số lượng tiểu cầu trung bình chung là: 286,00 ± 88,36 G/l, nam 294,93 ± 106 02 G/l nữ 283,49 ± 82,94 G/l Bình thường, số lượng tiểu cầu 150 - 400 T/l [1] Các số liệu cho thấy số lượng tiểu cầu nằm ừong giới hạn bình thường 36 + M ột số số hóa sinh: Ve nông độ glucose máu đối tượng nghiên cứu: nồng độ glucose máu đieu hoa bởi^hệ thông rât phức tạp, có nhiều quan, tổ chức tham gia, chủ yếu la tuyên nội tiêt, gan thận [4] Trong tuyến nội tiết tuyến tụy đóng vai trị quan trọng điều hịa glucose máu Tuyến tụy tổng hợp tiết hormon insulin, hormon thể hạ glucose máu Insulin tổng hợp tế bào beta (P) tiêu đảo langerhans Đồng thời tụy tổng hợp, tiết hormon glucagon tể bào alfa (a) tiêu đảo langerhans, hormon có chức làm tàng glucose máu thông qua hệ thống tạo AMPv [2] Vì vậy, việc định lượng glucose máu khơng tìm hiêu tác dụng dioxin chuyển hóa glucid mà cịn số quan trọng để tìm hiêu ảnh hường dioxin tuyến tụy Kêt nghiên cứu cho thấy rằng, nồng độ glucose máu đối tượng phơi nhiễm chất da cam/ dioxin không phân biệt nam nữ 3,73 ±1,01 mmol/1 Trong đó, nơng độ glucose nam bị phơi nhiễm dioxin 3,56 ± 1,09 mmol/1, nữ 3,78 ± 0,99 mmol/1 Như vậy, nồng độ glucose máu đối tượng phơi nhiễm chất da cam/dioxin nằm giới hạn thấp giá trị bình thường nồng độ sắt huyết tương: thể, sắt thành phần quan trọng nhiều quan Trong đó, chức bật thành phần cấu tạo quan trọng hồng cầu, hồng cầu sắt tồn hóa trị 2, nơi gắn kết với oxi hồng cầu trình vận chuyển oxi Do đó, việc định lượng sắt có ý nghĩa quan trọng ừong việc đánh giá mức độ nhược sắc, hay ưu sắc hồng cầu đối tượng phơi nhiễm chất da cam/dioxin Trong nghiên cứu này, thấy nồng độ sắt huyết trung bình chung cho nam nữ 19,06 ± 5,46 mmol/1, nam 18,07 ± 5,00 mmol/1, nữ 19,34 ± 5,56 nưnol/1 Với sổ liệu cho thấy nồng độ sắt huyết đối tượng phơi nhiễm chất da cam /dioxin nằm giới hạn bỉnh thường 37 5.3 Nong độ dioxin máu đối tưọ-ng nghiên cứu 5.3.1 Nồng độ dioxin toàn (phương pháp DR CALUX) Trong nghiên cứu này, toàn đối tượng định lượng nồng độ dioxin phương pháp DR CALUX Đây phương pháp dùng tế bào cảm biến sinh học để phát nông độ dioxin huyết Mặc dù phương pháp không định lượng đông đẳng dioxin, song phương pháp đơn giản, tốn nên có khả ứng dụng nghiên cứu dịch tễ học với quần thể lớn Điều có ý nghĩa thiêt thực bước đột phá nghiên cứu dioxin Việt Nam Trong năm trước đây, hầu hết nghiên cứu ảnh hường dioxin lên sức khỏe người thường không định.lượng nồng độ dioxin cá thể nghiên cứu, mà so sánh tình trạng sức khỏe nhóm dân cư vùng phơi nhiễm với vùng không phơi nhiễm Việc đo nồng độ dioxin thông qua tổng độ độc BEQ cho ta sô phản ánh mức độ phơi nhiễm dioxin cá thể Phương pháp hình thành sở tác động dioxin thể sinh vật thông quan thụ cảm thể AhR Vì thế, giá trị độc tính tương đương sinh học liên quan chặt chẽ tới chế tác động dioxin thể sinh vật Phương pháp DR CALUX tiến hành theo quy trình chuẩn quốc tể, tổ chức quốc tế công nhận Xét nghiệm thực phịng thí nghiệm dioxin, Trung tâm Nghiên cứu Y Dược học Quân sự, Học viện Quân Y, Sau đánh giá lực thơng qua chương trình xét nghiệm kiểm fra chéo, Phịng thí nghiệm cấp chứng quốc tế phân tích dioxin BDS, Amsterdam, Hà Lan Vì vậy, nghiên cứu này, số BEQ máu sử dụng phản ánh mức độ phơi nhiễm dioxin cách tương đối Việc phân chia đối tượng thành nhóm phơi nhiễm cao - thấp, phân tích tương quan có ý nghĩa Két n ghiên cứu định lượng dioxin theo phương pháp DR CALUX chung cho nhóm phơi nhiễm chất da cam/dioxin khơng phân biệt nam, nữ 64,47 ± 29,66 pg BEQ/g mỡ, nồng độ dioxin nam 74,27 ± 32,79 pg BEQ/g mỡ, nữ 61,67 ± 28,20 pg BEQ/g mỡ Giá trị trung trung vị cho nhóm đổi tượng 59 pg BEQ/g mỡ Đặc điểm phân bố nồng độ dioxin đối tượng phơi 38 nhiêm chât da cam/dioxin nghiên cứu chúng tơi tn theo qui luật phân bố chuẩn có dạng hình chng úp (đường cong phân bố chuẩn - đường cong Gauss) Đây nghiên cứu Việt Nam sử dụng phương pháp DR CALUX Hiện chưa có số liệu nghiên cửu nồng độ dioxin phương pháp DR CALUX cho đối tượng sinh sống khu vực khác Việt Nam để so sánh với nhóm Đối với nồng độ dioxin máu nữ giới, so sánh với số quốc gia phát triên châu Âu, nơi phơi nhiễm dioxin chủ yểu từ công nghiệp, giá trị trung vị 41,4 pg BEQ/g mỡ 37 pg BEQ/g mỡ Tây Ban Nha [23] Đan Mạch Trong nghiên cứu giá trị trung vị cho nữ giới 54,5 pg BEQ/g mỡ Như thấy nơng độ dioxin thể nữ giới Biên Hòa cao gấp khoảng 1,5 lần so với nữ giới nước 5.3.2 Định lượng nồng độ dioxin (phương pháp GCMS) Phương pháp GCMS phương pháp sắc ký khí kết hợp khối phổ, phương pháp có độ đặc hiệu độ nhạy cao, phương pháp này, đồng đăng dioxin khối phổ nhận dạng cấu trúc độc qua việc so sánh với thư viện cấu trúc biết, mức phát phương pháp 0,01 ppt Đây túy phương pháp phân tích hóa học, định lượng xác nồng độ đồng đẳng dioxin, PCB Việc tính tốn số phản ánh độ độc chung TEQ cho tất đồng đẳng tham chiếu từ bảng hệ số độc (TEF) đồng đẳng tổ chức Y tế thể giới năm 2005 Đây pháp định lượng có độ xác cao, nhiên kỹ thuật phân tích phức tạp giá thành đắt Vói quốc gia phát triển Việt Nam nay, việc triển khai nghiên cứu dịch tễ học với sổ đối tượng lớn cần định lượng dioxin phượng pháp GCMS gặp khó khăn Một hướng giải phân đối tượng thành nhóm với sổ đặc điểm tương đồng ừộn mẫu cá thể với tạo thành mẫu chung đại diện cho nhóm để phân tích GCMS Việc giúp giảm sổ lượng mẫu cần phân tích, hạn chế cho việc tìm hiểu ảnh hưởng dioxin lên sức khỏe, chẳng hạn khơng thể tiến hành phân tích tương quan nồng độ dioxin với số đánh giá sức khỏe Trong nghiên cứu này, riển hành phân tích nồng độ dioxin trona huyết phương pháp GCMS cho 51 đổi tượng (19 nam 32 nữ) N ồng độ 17 39 đong đăng dioxin/furan định lượng phịng thí nghiệm Đại học Y khoa Kanazawa, Nhật Bản Tông độ độc TEQ số phản ánh độ độc chung cho đồng đẳng Trong nghiên cứu này, giá trị trung bỉnh tổng độ độc TEQ 26,33 pg TEQ /g mỡ nam 24,16 pg TEQ/g mỡ nữ Mức độ phoi nhiễm tưorng đương với mức độ dân cư sink sông điểm ô nhiễm khác Việt Nam sân bay Phù Cát (26 pg TEQ/g mỡ) cao so với dân cư sinh sống khu vực không bị phun dải Kim Bảng, Nam Hà (9,2 pg TEQ/g mỡ) [31] Tuy nhiên, phân tích tương quạn nồng độ đồng đẳng dioxin cho thấy phơi nhiễm dioxin cư dân sinh sống quanh sân bay Biên Hòa đặc trưng cho ns^iồn dioxin từ chất Da Cam TCDD đồng đẳng đặc trưng cho phơi nhiễm dioxin từ chất da cam Chúng nhận thây nồng độ TCDD máu nam nữ 7,21 6,12 pg/g mỡ Đây nồng độ cao ữong nhóm dân cư sinh sống Việt Nam cao so với nồng độ dân cư sinh sống “điểm nóng” ô nhiễm khác Phù Cát (2,6 pg/g mỡ) [16] khu vực phía bắc khơng bị phun dải (1,5 pg/g mỡ) [16] Theo tính tốn chúng tơi, thành phần 2,3,7,8 - TCDD đóng góp vào tổng lượng độc dioxin (TEQ tổng số) 26% Trong đó, tổng độ độc đồng đẳng PCB PCB 77; PCB 81; PCB 126; PCB 169 đóng góp vào tổng TEQ 10% (kết khơng trình bày đây) Điều cho thấy, phân tích tương quan đồng đẳng, nhiễm đồng đẳng 2,3,7,8-TCDD trội, đặc trưng cho nguồn nhiễm dioxin có nguồn gốc chất da cam + Trong đồng đẳng PCDD, loại octaCDD cao lên tới 644,19 ± 1,70 pg TEQ/g mỡ thấp loại hexa CDD 4,82 ± 1,76 pg TEQ/g mỡ Loại có độc tính mạnh TeCDD có nồng độ 7,21 pg TEQ/g mỡ, nểu so với nghiên cứu Ho Dung M anh [ 16] nồng độ đồng đẳng TeCDD nghiên cửu cao hom (7,21 so với 3,5 pg TEQ/g mỡ) Ngược lại loại đồng đẳng có độc tính thấp octa CDD nghiên cứu chúng tơi gấp 87 lần loại đồng đẳng có độc tính cao TeCDD, cịn nghiên cứu Ho Dung Manh [16] loại có độc tính thâp nhât octa CDD gấp 123 lần loại TeCDD, nên tính tổng độ độc dioxin nghiên cứu lớn Ho Dung Manh hợp lý 40 + Trong cac đông đăng PCDF đôi tượng phơi nhiễm chất da cam/dioxin đồng đẳng có độc tính mạnh đồng đẳng PCDF 2,3,4,7,8 penta CDF có nong đọ chung cho nam nữ 8,85 ± 1,67 pg TEQ/ g mỡ Trong nam 9,11 ± 1,83 pg TEQ/g mỡ, nữ 8,71 ± 1,59 pg TEQ/g mở Đồng đẳng có nồng độ thấp 1,2,3,7,8 hexa CDF với nồng độ 2,23 ± 1,98 pg TEQ/g mỡ Một nghiên cứu thực năm 2014 bời nhà khoa học Nhật Bản Việt Nam [16] xác định nồng độ dioxin nam giới người Việt nam 40 tuổi, sau năm tiêp xúc trực tiếp quân đội Mỹ phun rải Nghiên cứu thực nhóm: nhóm bị phơi nhiễm lấy “điểm nóng” nhiễm dioxin Phù Cát Miên nam Việt Nam 97 người nhóm chứng lấy Kim Bảng, Hà Nam 85 người, kêt nghiên cứu xác định nồng độ dioxin huyết người sống sân bay 41,7 pg/g mỡ, nồng độ dioxin người sông gân sân bay 29 pg/g mỡ, ừong nghiên cứu xác định nồng độ dioxin người sống vùng không bị phun rải chất diệt cỏ 13,6 pg/ g mờ, xác định người sống vùng không bị rải chất dioxin mà trước thời gian chiến tranh có di cư vào miền nam người lại miền bắc thi nông độ dioxin nhóm người khác khơng có ý nghĩa thống kê 5.4 Nong độ mối tưong quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nong độ dỉoxỉn đối tượng nghiên cứu 5.4.1 Nồng độ TSH hormon tuyến giáp Tuyến giáp tạo hormon thyroxin (T4 - tetra iodothyroxin) triiodothyroxin (T3) Các horm on từ nang giáp vào máu, máu hormon gắn mạnh vào globulin gọi thyroxin binding globulin số protein khác Vì vậy, có khoảng 0,01 % T3, T4 dạng tự (FT3, FT4), dạng tự dạng hoạt động hormon Khi dạng tự giảm thỉ dạng kết hợp với protein giải phóng horm on tự do, định lượng FT3 FT4 đánh giá chức hoạt dộng horm on tuyển giáp xác Chức sinh học T3 T4 tương tự nhau, mức hoạt động khác T3 có hoạt động mạnh hon T4 từ -5 lần, tuyến giáp tổng hợp T4 nhiều 41 T 3, nen nông độ T4 máu cao nồng độ T3 Tác dụng hormon tuyến giáp la kích thích phản ứng oxy hóa điều hịa cường độ chuyển hóa thể Thuy trước tuyên yên tông hợp hormon TSH (thyroid stimulating horm on) có tác dụng kích thích phát triển tuyến giáp tham gia vào hầu hết giai đoạn tông hợp hormon tuyến giáp Hoạt động TSH hormon tuyến giap có mơi liên quan chặt chẽ với TSH kích thích tuyển giáp tổng hợp hormon T3, T4, ngược lại, nồng độ T3, T4 cao máu ức chế thùy trước tuyến yên giảm tiết TSH Vì vậy, để đánh giá chức tuyến giáp người ta định lượng T4 và/hoặc FT4, T3 và/hoặc FT3 TSH Dioxin có cấu trúc tương tự hormon loại steroid dẫn xuất acid amin, khả nàng chuyển hóa chúng nhiều ảnh hường đến chuyển hóa hormon có cấu trúc tương tự, có hormon tuyến giáp Kết nghiên cứu cho thấy rằng, đối tượng bị phơi nhiễm chât da cam/dioxin có nồng độ TSH là: 1,72 ± 1,06 (p iu /m l), ừong nhóm nam 1,41 ± 0,79 piu/m l, nữ 1,75 ± 1,14 piu/m l Kết không khác biệt so với nhóm người khỏe mạnh 1,58 ± 1,17 (piu/m l) [6] với nghiên cứu Phạm Thị Phưcmg Lê Việt Thắng, nồng độ TSH nhóm người khỏe mạnh 1,58 ± 1,17 (piu/m l) [6] Nồng độ T3 chung nhóm 94,24 ± 35,46 ng/dL đó, nam 93,09 ± 24,72 ng/dL nữ 94,24 ± 28,58 ng/dL Nồng độ T3 người bình thường -1 ng/dL[l] Nồng độ T4 chung nhóm là: 7,11 ± 1,94 (pg/ml) đó, nam 7,17 ± 1,98 (pg/ml) nữ là: 7,16 ± 1,71 (pg/ml) Nồng độ T4 người bình thường 4,52 - 1 (pg/ml) Nồng độ FT3 chung nhóm 3,30 ± 1,37 pg/ ml Nồng độ FT3 người bình thường nghiên cửu Phạm Thị Phương Lê Việt Thắng 2,06 ± 0,6 pg/ml [6] N hư vây, nồng độ FT3 máu đối tượng phơi nhiễm chất da cam/dioxin nghiên cứu cao nồng độ FT3 máu người bình thường ừong nghiên cứu Phạm Thị Phương có ý nghĩa thống kê < 0,05 Nồng độ FT4 chung nhóm 1,10 ± 0,41 ng/dL ừong đó, nam là: 1,08 ± 0,46 ng/dL nữ 1,10 ± 0,27 ng/dL Kết quà phù hợp với nghiên cứu Phạm Thị Phương, nồng độ FT4 nhóm người bình thường 1,17 ± 0,16 ng/dL [6] 42 Khi phân nhóm đối tượng nghiên cứu theo nồng độ cao, thấp dioxin thấy: Nông độ TSH nhóm thấp 1,68 ± 1,00 (piu/ml), nhóm cao 1,75 db 1,12 (piu/ml) Nồng độ T3 theo phân nhóm npng độ dioxin, nhóm thấp 91,58 ± 28,95 ng/dL, nhóm cao 96,98 ± 28,08 ng/dL Nồng độ T4 nhóm thấp 6,97 ± 1,69 (pg/ml), nhỏm cao la 7,25 ± 2,17 (ịig/ml) Nông độ FT3 nhóm thấp 3,23 ±1,11 (pg/ml), nhóm cao 3,37 ± 1,60 (pg/ml) Nồng độ FT4 nhóm thấp 1,10 ± 0,40 (ng/ml), nhóm cao 1,09 ± 0,42 (ng/ml) Như vậy, qua số liệu cho thấy trừ hormon FT4, tất hormon TSH, T3, T4, FT3 đêu có xu hương táng đối tượng có phơi nhiễm dioxin cao Theo kêt nghiên cứu đề tài nhánh đề tài cấp nhà nước năm 2005 [5] nhăm đánh giá ảnh hưởng chất da cam /dioxin thay đổi hormon tuyên giáp hormon hướng giáp trạng huyết 318 người dân sống vùng bị phori nhiễm cho thấy rằng: nồng độ T3 huyết đối tượng bị phơi nhiễm dioxin vùng khác khác Trong vùng có nguy phơi nhiễm cao có vùng có nồng độ T3 huyết không khác biệt với vùng khơng phơi nhiễm (Hà Nội) có vùng có nồng độ T3 huyết thấp có ỷ nghĩa thống kê (p < 0,05) so với cư dân Hà Nội Nông độ FT4 huyết vùng có nguy phơi nhiễm với chất da cam/ dioxin thấp so với cư dân Hà Nội (nhóm chứng) Nồng độ TSH huyết cư dân vùng có nguy phơi nhiễm vùng có nồng độ TSH cao cư dân Hà Nội, cịn vùng khơng có khác biệt với nhóm chứng Với kết tốt lên tình cảnh khái quát là, vùng bị phơi nhiễm chât da cam /dioxin làm thay đổi nồng độ hormon tuyên giáp làm tăng nông độ hcu mon TSH tuyến yên vùng có nguy phơi nhiêm cao thi khác biệt đo cang rõ hơ n so với vùng có nguy thấp Các nghiên cứu thể giỏi liên quan dioxin chức tuyến giáp cho k ê t không quán Tháng năm 1976, tai nạn công nghiệp xảy vùng Seveso, Italy gây r a tỉnh trạng ô nhiễm TCDD cộng đồng dân cư sinh sống Các nghiên cửu â n h hường p h i nhiễm đioxin lên sức khỏe tiến hành, có nghiên u đánh giá tác động lên hệ Kết quà nghiên cứu ảnh hường dioxin lên 43 chức tuyển giáp hệ thứ hai cho thấy, nồng độ TSH máu tăng en tinh VỚI nông độ TCDD dông đẳng dioxin khác máu m ẹ [9] Điều phản ánh xu hướng tình trạng nhược giáp Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu đánh giá chức tuyến giáp người trực tiếp phơi nhiễm với TCDD Đôi với cộng đông dân cư khác có mức phơi nhiễm thấp nguồn dioxin cơng nghiệp kết nghiên cứu khơng định Cũng nghiên cứu sử dụng phương pháp DR CALUX đinh lượng dioxin máu cuông rốn trẻ sơ sinh Hà Lan, cho thấy nồng độ dioxin tưorng quan nghịch với nông độ T3 T4 tự do, khơng có mối liên quan với nồng độ TSH [13] Trong nghiên cứu Mỹ công nhân phơi nhiễm TCDD nghề nghiệp, tác giả Calvert c s cho thấy nhóm cơng nhân có nồng độ dioxin cao có sổ T4 tự huyêt cao hom cách có ý nghĩa thống kê so với nhỏm chứng (p = 0,02) Mặc dù tỷ lệ mắc bệnh đái tháo đường hai nhóm khơng có khác biệt, song nơng độ glucose huyết trung bình nhóm phơi nhiễm dioxin cao m ột cách có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng Từ tác giả đưa kết luận phơi nhiễm với dioxin, đặc biệt TCDD ảnh hưởng tới chức giáp trạng chuyển hóa glucose Trong nghiên cứu chúng tối, tổng BEQ tương quan thuận với T4 tự do, nhiên khơng có ý nghĩa thống kê (p=0,19) Chúng xác đinh đối tượng phơi nhiễm chất da cam/dioxin mà máu có nồng độ dioxin cao nồng độ hormon tuyên giáp thấp, T4 FT4 có mức độ thấp so với T3 FT3 Trong nồng độ TSH lại tăng tỷ lệ thuận với nồng độ dioxin Với két vậy, cho dioxin làm giảm horm on tuyên giáp, ché làm giảm hormon tuyển giáp cỏ thể là: Dioxin chất lạ (xenobiotỉc) thể Cho nên dioxin đ ã cảm ứng tổng hợp enzym chuyển hóa chất lạ mà chủ yểu Cytochrom P450, để chuyển hóa dioxin, hormon tuyến giáp phần có cấu tạo tương tự dioxin làm tăng chuyển hóa hormon tuyến giáp làm cho chúng giảm Khi nồng độ hormon tuyến giáp kích thích trực tiếp thùy trước tuyến yên tiết TSH (feedback +) 44 5.4.2 Tưong quan nong độ TSH hỡrmon tuyến giáp với nồng độ dioxỉn đối tưọ ng nghiên cứu Đây nghiên cứu ảnh hường dioxin lên chức tuyển nội tiết thể nhóm dân cư sinh sống quanh “điểm nóng” nhiễm dioxin Việt Nam * Tương quan nông độ TSH\ hormon tuyến giáp với dioxin tồn phần Trong nghiên cửu này, Nồng độ T3 có tương quan thuận có ý nghĩa thống kê (r = 0,21; p < 0,05) tổng BEQ với nồng độ T3 toàn phần nữ giới Trong nồng độ T3 chung cho nam nữ lại tương quan không cỏ ý nghĩa thống kê với nồng độ dioxin r = 0,1 p > 0,05 Chúng thấy nồng độ TSH không tương quan với nồng độ dioxin (r = 0,00 p > 0,05) hormon tuyến giáp khác Kết phù hợp với nghiên cứu Johan Maervoet [13] * Tương quan nồng độ TSHy nồng độ hormon tuyến giáp với đồng đăng PCDD PCDF 51 đối tượng xét nghiệm theo GCMS + Giữa đồng đẳng PCDD tương quan có ý nghĩa thống kê với TSH, T3, T4y FT3, FT4 sau: TSH có tương quan thuận với 1,2,3,4,7,8-HexaCDD có r = 0,43 p < 0,05 TSH có tương quan thuận với 1,2,3,6,7,8-HexaCDD có r = 0,41 p< 0,05 TSH tương quan thuận với 1,2,3,7,8,9-HexaCDD có r= 0,42 p < 0,05 FT3 tương quan thuận với 1,2,3,7,8,9-HexaCDD có r = 0,36 p< 0,05 TSH tương quan thuận với l,2,3,4,6,7,8,HeptaCDD cỏ r =0,51 p < 0,01 TSH tương quan thuận với tổng độ độc (PCDD + PCDF) với r = 0,44 p < 0,05 + Giữa đồng đẳng PCDF tương quan có ý nghĩa thống kê với TSH , T3, T4, FT3, FT4 sau: 2>3,4,7,8-PentaCDF có tương quan thuận với TSH r = 0.48 p < 0,01 1,2,3,4,6,7,8 - HeptaCDF FT3 có mối tương quan thuận vớ i r = 0.40 p < 0,05 45 KÉT LUẬN Sau nghiên cứu nồng độ số hormon tuyến giáp tuyến tụy 207 người phơi nhiễm chất da cam / dioxin phường Bủqạ Long phường Trung Dũng - thành phổ B iên Hòa, coi khu vực “điểm nóng” nhiễm chất da cam/ dioxin, chúng tơi có m ột sổ kết luận sau: Nồng độ dioxin hormon tuyến giáp máu người phoi nhiễm chất da cam /dioxỉn * N ồn g độ dioxin huyết tương đối tượng nghiên + N ồng độ dioxin toàn phần: 64,47 ± 29,66 (pg BEQ/g mỡ) + Tổng độ độc dioxin TEQ (cho tất đồng đẳng tham chiếu từ bảng bệ số độc (TEF) đồng đẳng tổ chức Y tế giới năm 2005 là: 24,95 ± 2,02 (pg/g mỡ) * N ồng đọ TSH hormon tuyến giáp, tuyến + T3: 94,24 ± 28,58(ng/ dL), FT3: 3,30 l,37(pg'ml) -ĩ- T4: 7,11 ± l,94(ug'm l), F T :1,10 ± 0,41(ng'mT) + TSH: 1,72 ± 1,06 (uU/ml) T o m , qaaa giã* nèng độ TSH ĩ i t o n » , m y í gSP M - ¿ V « -ir T a o n s quan 2Íữa nàng độ díoxín với honũOQ Ç2 2 đ m ện v o ỉG cgđộđioxĩntheoB E Q (r É2Ợ- nữ TSHộ n ữ c ó tưnng l-23A 7,8-H exă€Đ D (r = 0,43), £ ,S -E s 7j CDD = HsxaCDD (r =0,42), 1Ẳ3,4,6,7,8-Hepĩ2CDD (r =0,5t> ,4 ) T S Ỉ Sssqg TT-gn- d a ậ n vóí độ ổ ịc ĩẵog sỗ (PCĐD ÝPO)F)TBQ(5r=ạ4^ độ 46 KIẾN NGHỊ Cần tiếp tục nghiên cứu sâu nữa, đặc biệt nghiên cứu D ịch tễ học với cỡ mẫu lớn, đánh giá trực tiếp múc độ phơi nhiễmsdioxin cho đối tượng, để sở đánh giá tác hại lâu dài nỏ sức khỏe người MMMằẳằÊằằếm TÀI LIỆU THAM KHẢO T IẾ N G V IỆT - N guyễn Đạt A nh Nguyễn Thị Hương(2013),'Cức xét nghiệm dụng thực hành lâm sàng, Nhà xuất Y học, 863 qui áp N guyễn Thị H (2001), "Hóa sinh hormon", Trường Đại học YH Nội-N XB Y học, tr 515 Nguyễn Thị H cộng (2004), "Nghiên cứu hàm lượng số hom ion hướng sinh dục huyết người sống vùng bị nhiễm chất da cam/dioxin", TCNCYH 8, ti.2 Nguyễn Nghiêm Luật (2001), "Chuyển hóa glucid, Hỏa sinh", Trưcmg Đại học Y Hà Nộỉ-N XB Y h ọ c, 2ti 73 Phạm Thiện cộng (2005), "Nồng độ hormon T3, T4, FT4, TSH huyết ả cư dân có nguy phơi nhiễm chât da cam dioxin , TCNCYH Tr.5-11 Phạm Thị Phương Lê Việt Thắng (2013), "Khảo sát nồng độ hormon tuyến giáp FT3, FT4 TSH máu bệnh nhân hội chứng thận hư nguyên phát", C H Ỉ Y H Ọ C THỰ C HÀNH 3, ti.14-16 TIẾNG ANH Donato, F and Zani, c (2010), "[Chronic exposure to organochlorine compounds and health effects in adults: diabetes and thyroid diseases]", A nn Ig 22(3), p 185-98 Augustowska, K et al (2003), "Effects of dioxin (2,3,7 ,8-TCD D ) and PCDDs/PCDFs congeners mixture on steroidogenesis in human placenta tissue culture", Endocr Regul 37(1), p 11-9 Baccarelli, A et al (2008), "Neonatal thyroid function in Seveso 25 years after maternal exposure to dioxin", PLoS Med 5(7), p el61 10 Chen, s T et al (2015) "2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin modulates estradiolinduced aldehydic DNA lesions in human breast cancer cells through alteration o f CYP1A1 and CYP1B1 expression", Breast Cancer 22(3), p, 269-79 11 Dwemychuk, L w et al (2002), "Dioxin reservoirs in southern V ie t N a m - a legacy o f Agent Orange", Chemosphere 47(2), p 117-37 12 G oodm an, M et al (2015), "Dose-response relationship between serum 2,3,7,8tetrachlorodibenzo-p-dioxin and diabetes mellitus: a meta-analysis”, Am J Epidem iol 181(6), p 374-84 13 Johan M aervoet et al ( 2007), "Association of Thyroid Hormone Concentrations w ith Levels o f Organochlorine Compounds in Cord Blood of Neonates N ational Institute o f Environmental Health Sciences 115, p 1780-1786 , 14 K oopm an-Esseboom , C et al (1994), "Effects of dioxins and polychlorinated biphenyls on thyroid hormone status of pregnant women and Pediatr Res 36(4), p 468-73 15 Lurker, P A et al (2014), "Post-Vietnam military herbicide exposures in LU C123 Agent Orange spray aircraft", Environ Res 130, p 34-42 16 Manh, H D e t al (2014), "Serum dioxin levels m Vietnamese “ “ years after herbicide spraying", Environ Sci Technol 48(6), p ^ 4° 17 N hu, D D and Teruhiko Kido (2011), "Dioxin levels in the estradiol and androgen levels in the saliva of Vietnamese pnnuparae , Toxicological and Environmental Chemistry 14, p 824 18 Phadnis-M oghe, A S„ Crawford, R B^ “ ^ ^ “ ^ ^ n z o -p ^ o x in "Suppression o f hum an B cell activation y > > > 144m p 39-50 involves altered regulation o f Bcell lymphoma-6", Toxrcol Sc 144(1), p 19 Stellman, J M et al (2003), "The extent and patterns of usage o f Agent O ran „ and other herbicides in Vietnam ", Nature 422(693 ),p• 20 Tran Van Khoa, Pham The Tai, Hoang Van Luong, Le Bach Qua^,v(^ )’ of Dioxin Exposure on Thyroid Hormones of Dioxin Contamination in Vietnam", Journal of Aging cien • 21 W ayne Dwenychuuk, Cau, H D., (2002), "Dioxin reservoirs m s N am - A legacy o f Agent Orange , Chemospher a POP contaminated sites-contem porary a n d 22 Weber, R et al (2008), "Dtoxm- and p o p -“ n™ ^ ^ d scope o f th e future relevance and challenges: overview series", Environ Sci Pollut Res Int 15(5), p-3 23 Papadopoulou, E et al (2013), , Hiptarv intake of dioxins and ater“ Nonve