Nghiên cứu tính an toàn và hiệu quả giải độc của pháp “gđ 103” trên người phơi nhiễm chất da cam dioxin (tt)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG VIỆN Y HỌC CỔ TRUYỀN QUÂN ĐỘI DƯƠNG QUANG HIẾN NGHIÊN CỨU TÍNH AN TOÀN VÀ HIỆU QUẢ GIẢI ĐỘC CỦA PHÁP “GĐ-103” TRÊN NGƯỜI PHƠI NHIỄM CHẤT DA CAM/DIOXIN Chuyên ngành: Y học cổ truyền Mã số : 62720201 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2017 Công trình hoàn thành tại: VIỆN Y HỌC CỔ TRUYỀN QUÂN ĐỘI Người hướng dẫn khoa học: TS Đoàn Chí Cường PGS.TS Lê Văn Đông Phản biện 1: PGS.TS Phạm Vũ Khánh Phản biện 2: PGS.TS Nguyễn Liễu Phản biện 3: PGS.TS Nguyễn Trọng Thông Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Viện vào hồi: ngày tháng 10 năm 2017 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc Gia Thư viện Viện Y học cổ truyền Quân đội Thư viện Học Viện Quân y DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU CỦA TÁC GIẢ ĐÃ CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Dương Quang Hiến, Đoàn Chí Cường, Nguyễn Bá Vượng (2015), "Nghiên cứu phản ứng kích ứng da, niên mạc thuốc GĐX-103 động vật thực nghiệm", Tạp chí Y dược học cổ truyền Quân sự, Viện Y học cổ truyền Quân đội, số tập 5, 2015, tr 21-29 Trần Quốc Bảo, Đoàn Chí Cường, Dương Quang Hiến (2016), “Ảnh hưởng phương pháp giải độc đông y lên số tiêu huyết học hóa sinh máu người phơi nhiễm chất da cam/dioxin”, Tạp chí Y - Dược học Quân sự, Học viện Quân Y, vol 41, N0 5, tháng 7/2016, tr 156-161 Dương Quang Hiến, Đoàn Chí Cường, Lê Văn Đông (2016), "Nghiên cứu độc tính cấp thay đổi số tiêu huyết học động vật thực nghiệm thuốc GĐU-103", Tạp chí Y dược học cổ truyền Quân sự, Viện y học cổ truyền Quân đội, số tập 6, 2016, tr 25-31 Dương Quang Hiến, Đoàn Chí Cường, Lê Văn Đông (2017), “Nghiên cứu ảnh hưởng thuốc GĐU-103 đến số tiêu sinh hóa máu, mô bệnh học thỏ”, Tạp chí Y học thực hành - Bộ Y tế ISSN 1859-1663 số (1042) 2017, tr 47-51 GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Đặt vấn đề Chất độc da cam/dioxin mà quân đội Mỹ sử dụng chiến tranh miền Nam Việt Nam có chứa dioxin, chất có độc lực mạnh, tồn lâu dài môi trường Khi người nhiễm phải, gây tổn thương đa dạng, phức tạp ảnh hưởng qua nhiều hệ Cho đến nay, giới nước chưa có thuốc điều trị đặc hiệu, phương pháp chủ yếu giải triệu chứng nhiều biện pháp khác nhau, kết thu không mong muốn Y học cổ truyền có vị thuốc, thuốc có tác dụng giải độc tương đối tốt Vì vậy, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu tính an toàn hiệu giải độc pháp “GĐ-103” người phơi nhiễm chất da cam/dioxin”, với mục tiêu sau: 1- Xác định độc tính cấp, độc tính bán trường diễn thuốc uống “GĐU-103” phản ứng kích ứng da, niêm mạc thuốc xông “GĐX-103” động vật thực nghiệm 2- Đánh giá tác dụng giải độc không đặc hiệu thuốc “GĐU-103”, “GĐX103” người phơi nhiễm chất da cam/dioxin, thông qua số số lâm sàng, cận lâm sàng Tính cấp thiết, ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án Trong chiến tranh xâm lược Việt Nam, từ năm 1961 đến 1971 quân đội Mỹ phun rải khoảng gần 80 triệu lít chất độc hóa học xuống miền Nam Việt Nam, 61% chất da cam, chứa khoảng 366 kg dioxin Nhưng đến nay, hậu thảm khốc chất da cam/dioxin môi trường sống, sức khoẻ người mối quan tâm hàng đầu người có lương tri mà nhà khoa học giới Việt Nam Đặc điểm tổn thương thể dioxin tổn thương đa dạng Cơ chế bệnh sinh chưa hoàn toàn sáng tỏ Bởi vậy, biện pháp điều trị chủ yếu điều trị giải độc không đặc hiệu, thực chất điều trị triệu chứng cân rối loạn tiềm ẩn chất độc gây Căn vào sở lý luận thực tiễn lâm sàng cho thấy thuốc y học cổ truyền có nhiều lợi việc gây tăng tiết mồ hôi, tăng cường chức tạng phủ, nâng cao khí, giúp đào thải chất độc qua đường mồ hôi, đại tiểu tiện Vì thế, đề tài nghiên cứu pháp “GĐ103” sử dụng thuốc y học cổ truyền đường uống kết hợp xông toàn thân để giải độc cho người phơi nhiễm chất da cam/dioxin cách tiếp cận mang tính khoa học, có ý nghĩa thực tiễn tính nhân văn cao Đề tài có tính mới, tính sáng tạo, không trùng lặp với công trình nghiên cứu công bố trước Những đóng góp luận án Đề tài cung cấp chứng khoa học hiệu giải độc tính an toàn pháp “GĐ-103” người phơi nhiễn chất da cam/dioxin Kết sau đợt điều trị giải độc pháp GĐ-103, cụ thể sau: Tất triệu chứng lâm sàng người bệnh cải thiện tốt Đặc biệt, có tác dụng làm giảm có ý nghĩa nồng độ, lượng tồn trung bình 15/17 chất đồng loại độc PCDD PCDF; Thay đổi chất chống oxy hóa theo hướng có lợi cho thể (GPx tăng, SOD giảm, MDA giảm); Tăng cường khả đáp ứng miễn dịch thể (nồng độ IgA, IgM, số lượng tế bào CD3, CD4, CD8 tăng) có ý nghĩa thống kê Bài thuốc tác dụng phụ không mong muốn Cấu trúc luận án Luận án gồm 143 trang: Đặt vấn đề 02 trang, tổng quan tài liệu 36 trang, chất liệu đối tượng phương pháp nghiên cứu 30 trang, kết nghiên cứu 39 trang, bàn luận 35 trang, kết luận 02 trang, kiến nghị 01 trang Có 47 bảng, 11 biểu đồ, hình, sơ đồ, 25 ảnh 10 phụ lục 153 tài liệu tham khảo (tiếng Việt 86, tiếng Anh 51 tiếng Trung Quốc 16) NỘI DUNG LUẬN ÁN CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Một số hiểu biết dioxin Dioxin hợp chất tương tự (dioxins and related compounds - DRCs) nhóm bao gồm hàng trăm chất hữu độc hại tồn bền vững môi trường (Persistent Organic Pollutants - POP) Thuật ngữ dioxin hiểu gồm nhóm hợp chất: Polychlorinated dibenzo-p-dioxin (PCDDs), polychlorinated dibenzofuran (PCDFs, furan) polychlorinated biphenyl đồng phẳng (coplanar PCB hay dioxin- like PCBs, dl-PCBs) Theo định nghĩa Tổ chức Y tế giới (WHO 1997), dioxin gồm đồng phân PCDD, 10 đồng phân PCDF 12 PCB đồng phẳng (coplanar PCB) có đặc điểm gây độc tương tự dioxin (dioxin-like PCB) Các đồng loại tác động vào thụ thể hydrocarbon thơm (Aryl hydrocacbon receptor - AHR), chúng có khả gây ảnh hưởng đến sức khỏe người mức độ khác tùy theo hệ số độc tương ứng Cho đến có nhiều đề tài, dự án tác giả nước nghiên cứu bệnh - chứng, minh chứng hậu xấu đa dạng người bị phơi nhiễm chất da cam/dioxin họ 1.2 Quan niệm độc pháp giải độc y học cổ truyền Y học cổ truyền nghiên cứu “độc” từ lâu, khái niệm “độc” đề cập sớm “Nội kinh” Các hệ y gia sau không ngừng bổ sung, hoàn thiện làm cho lý luận “độc” ngày hoàn chỉnh phương diện như: khái niệm, phân loại, đặc điểm gây bệnh, biểu lâm sàng pháp giải độc Pháp giải độc chung y học cổ truyền không pháp điều trị (hãn, thổ, hạ, hòa, ôn, thanh, tiêu bổ Còn gọi tám đại pháp) Nhưng thực tế bệnh cảnh nhiễm độc lâm sàng phức tạp, phụ thuộc vào tính chất nhiễm độc (cấp hay mạn), loại chất gây độc, đường vào chất độc tình trạng sức khỏe người bệnh Do đó, vận dụng chữa trị, sử dụng linh hoạt tám đại pháp nhằm giải toàn diện nguyên nhân phát sinh diễn biến bệnh từ vào trong, từ nông biểu đến vào sâu, tạng phủ với nhiều mức độ cấp mạn tính khác CHƯƠNG 2: CHẤT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PPNC 2.1 Chất liệu nghiên cứu Gồm thuốc uống GĐU-103 có 16 vị, xây dựng từ thuốc cổ phương « Bổ trung ích khí thang » gia giảm thuốc xông GĐX-103 gồm vị; thuốc khoa Dược Bệnh viện Quân y 103 bào chế đảm bảo theo tiêu chuẩn dược điển Việt Nam IV, đạt tiêu chuẩn sở 2.2 Đối tượng nghiên cứu Chuột nhắt trắng, chủng Swiss; Thỏ chủng Newzealand White: nghiên cứu thực nghiệm 35 người bị phơi nhiễm chất da cam/dioxin: nghiên cứu lâm sàng 2.3 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu thực nghiệm thử nghiệm lâm sàng 2.3.1 Nghiên cứu thực nghiệm Xác định độc tính cấp LD50 thuốc GĐU-103 chuột nhắt trắng trưởng thành đường uống, theo phương pháp Litchfield-Wilcoxon; Nghiên cứu độc tính bán trường diễn thuốc GĐU-103 thỏ đường uống, theo phương pháp Wallace Hayes hướng dẫn OECD-407 (Organisation for Economic Co-operation and Developenzymt - 407); Nghiên cứu phản ứng kích ứng da, niêm mạc thuốc GĐX-103, theo hướng dẫn Tổ chức hợp tác phát triển kinh tế thử nghiệm chất gây kích ứng da (OECD- 404) 2.3.2 Nghiên cứu lâm sàng 2.3.2.1 Cỡ mẫu nghiên cứu: Chọn cỡ mẫu tối thiểu (35 người) đủ lớn, đảm bảo có ý nghĩa thống kê 2.3.2.2 Qui trình nghiên cứu lâm sàng Chọn người phơi nhiễm Điều trị: xông hơi, uống thuốc hàng ngày Lấy máu X.N lần 25 Ngày Lấy máu X.N lần Sơ đồ 2.1: Quy trình nghiên cứu lâm sàng - Tuyển chọn 35 bệnh nhân đủ tiêu chuẩn nghiên cứu, thu dung Bệnh viện Quân y 103 điều trị - Lấy máu xét nghiệm lần 1: Thời điểm lấy máu trước lần điều trị ngày thứ (lần 2: sau lần điều trị cuối ngày thứ 25) vào buổi sáng sớm lúc chưa ăn, dùng để xét nghiệm: công thức máu, hóa sinh máu; hoạt độ enzym chống oxy hóa SOD, GPx, nồng độ MDA; số tiêu miễn dịch (IgA, IgM, IgG, số lượng tế bào CD3, CD4, CD8); xác định nồng độ, lượng tồn dioxin máu cho tất bệnh nhân tham gia nghiên cứu - Điều trị (trong 25 ngày liền) chung cho tất bệnh nhân: xông toàn thân thuốc GĐX-103, ngày lần, thời gian 60’, máy CLEOPATRA -2014 (Thụy Sỹ); uống thuốc GĐU-103: lần uống túi 125ml, ngày lần vào lúc 30 15 30 Điều trị riêng: bệnh lý kết hợp (nếu có) 2.3.2.3 Các tiêu theo dõi, đánh giá kết quả: Lâm sàng: Cải thiện triệu chứng lâm sàng sau đợt điều trị Cận lâm sàng: So sánh thay đổi số xét nghiệm trước sau đợt điều trị 2.4 Phương pháp xử lý số liệu Toàn số liệu nghiên cứu xử lý chương trình phần mềm SPSS 22.0, Bộ môn Dịch tễ học, Học viện Quân y Sự khác biệt có ý nghĩa p0,05) Không thấy tổn thương mô bệnh học gan, thận thỏ 3.1.3 Phản ứng kích ứng da, niêm mạc thuốc GĐX-103 Thuốc xông GĐX-103 không gây kích ứng da thỏ tất thời điểm giờ, 24 giờ, 48 72 sau rửa loại bỏ thuốc Sự thay đổi tần số hô hấp số lần gãi mặt, mũi nhóm chuột nhắt trắng xông thuốc GĐX-103, so với nhóm đối chứng xông nước máy, ý nghĩa thống kê (p>0,05) 3.2 Kết nghiên cứu lâm sàng 3.2.1 Đặc điểm chung nhóm bệnh nhân nghiên cứu Trong số 35 người phơi nhiễm tham gia nghiên cứu, người có tuổi thấp 42, người cao tuổi 66, tuổi trung bình 53,79 ± 4,74 Nam giới gồm 31 người, nữ giới 04 người, 32 người quân nhân (28 người nghỉ hưu, 04 người ngũ), có 03 người làm nghề tự có thời gian dài sống vùng “nóng” ô nhiễm chất da cam/dioxin, thường mắc bệnh: suy nhược thể, suy nhược thần kinh, tăng huyết áp, đái tháo đường tuýp 2, bệnh da mạn tính 3.2.2 Kết nghiên cứu tác dụng pháp GĐ-103 3.2.2.1 Cải thiện triệu chứng lâm sàng Sau người phơi nhiễm điều trị hết liệu trình, tất triệu chứng lâm sàng cải thiện rõ rệt so với trước Trong hiệu tốt chiếm 37,14%, loại chiếm 51,43% trung bình 11,43% 3.2.2.2 Thay đổi tiêu cận lâm sàng - Kết thay đổi số huyết học: Sự thay đổi giá trị trung bình số lượng hồng cầu, tiểu cầu, lượng huyết sắc tố, số lượng bạch cầu, tỷ lệ bạch cầu neutro lympho người phơi nhiễm trước sau điều trị, ý nghĩa thống kê, với p>0,05 - Kết thay đổi số hóa sinh máu: Sau điều trị, nồng độ ure, triglycerit máu trung bình người phơi nhiễm so với trước điều trị, thay đổi tăng lên có ý nghĩa (p0,05 - Kết thay đổi hoạt độ enzym SOD, GPx nồng độ MDA Bảng 3.1: Sự thay đổi hoạt độ SOD, GPx nồng độ MDA (n = 35) Thời điểm Chỉ tiêu SOD (U/gHb) GPx (U/gHb) MDA (µmol/l) Trước điều trị (1) X ± SD 1444,09 ± 286,61 29,35 ± 7,47 1,83 ± 0,49 Sau điều trị (2) X ± SD 1220,64 ± 206,74 38,61 ± 15,03 1,27 ± 0,45 p(1,2) < 0,001 Nhận xét: Sau điều trị, hoạt độ enzym chống oxy hóa SOD nồng độ MDA máu trung bình người phơi nhiễm, thay đổi giảm so với trước điều trị; hoạt độ enzym GPx trung bình so với trước điều trị tăng lên, có ý nghĩa thống kê, với p10 đến ≤ 50 >50 đến ≤ 100 >100 đến ≤ 200 > 200 đến ≤ 300 >300 Tổng số Min - max Số lượng Tỷ lệ (%) Số lượng Tỷ lệ (%) 10 11 35 2,86 28,57 31,43 17,14 8,57 11,43 100 18 35 5,72 51,42 17,14 14,29 8,57 2,86 100 6,35pg/g - 858,33pg/g 4,5pg/g - 373,13pg/g (nồng độ 2,3,7,8-TCDD) Nhận xét: Trước điều trị tất 35 BN nghiên cứu bị phơi nhiễm 2,3,7,8-TCDD Trong 34/35 BN có nồng độ 2,3,7,8-TCDD 10 pg/g mỡ (người bị 6,35 pg/g mỡ, cao 858,33 pg/g mỡ) Sau đợt điều trị có 34/35 BN giảm nồng độ 2,3,7,8-TCDD máu (người thấp 4,5 pg/g mỡ, cao 373,13 pg/g mỡ) Bảng 3.6: Sự thay đổi nồng độ, tỷ lệ % 2,3,7,8-TCDD tổng đương lượng độc trước sau điều trị (n=35) Thời điểm Chất phân tích 2,3,7,8-TCDD (pg/g mỡ) Tỉ lệ % 2,3,7,8 - Trước điều trị Sau điều trị ± SD (1) 143,05 ± 195,95 ± SD (2) 76,41 ± 84,99 X p(1,2) X < 0,001 73,61 ± 17,46 70,94 ± 18,76 > 0,05 TCDD/WHO-TEQ WHO-TEQ (ND = ½ DL) 188,51 ± 228,82 99,11 ± 93,56 < 0,001 Nhận xét: Sau đợt điều trị nồng độ 2,3,7,8-TCDD tổng đương lượng độc (WHO-TEQ (ND = ½ DL) giảm so với trước có ý nghĩa (p0,05 Bảng 3.7: Sự thay đổi nồng độ (pg/g mỡ) chất đồng phân độc nhóm PCDD trước sau điều trị (n=35) Thời điểm Chất phân tích Trước điều trị (1) Sau điều trị (2) X ± SD X ± SD p(1,2) 2,3,7,8 -TCDD 143,05 ± 195,95 76,41 ± 84,99 < 0,001 1,2,3,7,8-PeCDD 25,94 ± 31,38 11,84 ± 7,10 < 0,001 1,2,3,4,7,8-HxCDD 19,45 ± 30,98 7,76 ± 3,96 < 0,01 1,2,3,6,7,8-HxCDD 55,48 ± 55,96 29,52 ± 19,59 < 0,001 1,2,3,7,8,9-HxCDD 21,22 ± 32,37 9,40 ± 5,75 < 0,01 1,2,3,4,6,7,8-HpCDD 123,47 ± 194,56 59,39 ± 60,03 < 0,001 OCDD 1336,19 ± 2547,04 550,01 ± 442,14 < 0,001 Nhận xét: Sau đợt điều trị, nồng độ trung bình chất đồng phân độc nhóm PCDD giảm so với trước điều trị có ý nghĩa thống kê, với p