HIV (HUMAN IMMUNODEFICENCY VIRUS) (VI SINH)

HIV HUMAN IMMUNODEFICENCY VIRUS MỤC TIÊU: Sau học sinh viên có khả 1- Trình bày đặc điểm virus học HIV 2- Giải thích sinh lý bệnh học b nhiễm HIV/AIDS 3- Liệt kê tb tham gia vào đáp ứng miễn dịch 4- Trình bày thay đổi tb nhiễm HIV/AIDS 5- Hiểu nguyờn lý ca xột nghờm HIV/AIDS Một số khái niệm/định nghĩa ã AIDS viết tắt tiếng Anh (Acquired Immuno Deficiency Syndrome) có nghĩa hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải ngời nhiễm HIV gây nên ã HIV viết tắt cụm từ tiếng Anh (Human Immunodeficiency Virus) có nghià virus gây suy giảm miễn dịch ngời ã AIDS lần đợc mô tả vào 1981 Los Angeles trờng hợp nam đồng tính ã HIV lần đợc nhóm nhà khoa học Viện Pasteur Paris phân lập 1983 ã 1984 Gallo nhà khoa học Mỹ phân lập đợc loại virus gây AIDS vµ gäi lµ “virus híng vµo tÕ bµo lympho ngời Một số khái niệm/định nghĩa (2) ã Thực chất hai loại virus đợc phân lập 1983 1984 một, sau có danh pháp quốc tế HIV-1 ã 1986 nhà khoa học Pháp lại phân lập đợc loại virus khác Tây Phi gây suy giảm miễn dịch ngời gọi HIV-2 ã HIV-1 phân bố khắp giới HIV-2 phần lớn tập trung kh trú Tây Phi ấn ộ ã HIV-2 ủ bệnh dài hơn, nguy lây thấp diễn biến nhẹ so với HIV-1 Lịch sử phát triển đại dịch HIV/AIDS giới ã Thời kỳ yên lặng khoảng từ 1970 phát ã Thời kỳ phát AIDS: 1981-1985 ã Thời kỳ động viên toàn giíi chèng AIDS: tõ 1985 ®Õn Tình hình nhiƠm HIV giới ã Tính đến ngày 31/12/2005, toàn giới có 40,3 triệu ngời nhiễm HIV ã Riêng 2005 đà có 4,9 triệu ngêi nhiƠm míi vµ 3,1 triƯu ngêi chÕt AIDS ã Tại nhiều nớc phát triển, trờng hợp nhiễm niên ã Khoảng 1/3 tổng sè ngêi hiƯn nhiƠm HIV/AIDS ë ®é ti 15 ®Õn 24, ã phần lớn số họ mỡnh mang HIV Ngn UNAIDS Tình hình nhiƠm HIV trªn thÕ giíi hiƯn (2) Trung Tây Âu 720 000 Bắc Mỹ [570 000 – 890 000] 1.2 Triệ Triệu Đông Âu Trung Á 1.6 triệ triệu [990 000 – 2.3 triệu triệu]] [650 000 – 1.8 triệu triệu]] Đông Á 870 000 [440 000 – 1.4 triệu triệu]] Bắc Mỹ Trung Đông Caribbean 540 000 300 000 [200 000 – 510 000] [230 000 – 1.5 triệu triệu]] Đông Nam Á 7.4 triệ triệu [4.5 – 11 triệu triệu]] Sub-Saharan Châu Phi Mỹ La Tinh 1.8 triệ triệu 25.4 triệ triệu [23.4 – 28.4 triệu triệu]] [1.4 – 2.4 triệu triệu]] Châu Đại Dương 74 000 [45 000 – 120 000] Tổng số: 40.3 (35.9 – 44.3) triệu CẤU TRÚC HIV TÍNH CHẤT CHUNG CỦA VIRUS (viruse hoc) • HIV thuộc họ Retroviridae,hình cầu, kích thước khỏang 80-100nm • Genom chuỗi ARN xoắn ốc có enzym chép ngược(RT:reverse transcriptase) • Thuộc nhóm nhỏ Lentivirus(hiv-1 HIV-2) có khả gây bệnh ADIS cho người CẤU TRÚC GỒM LỚP • Lớp vỏ ngoài:gắn màng nầy gai nhú(gp = 160KD),gồm phần + Màng ngồi gp có MW=120kd KN dễ biến đổi + Và gp xuyên màng có MW=41kd • Lớp vỏ gồm lớp protein + Lớp ngồi hình cầu cấu tạo protein có MW=17kd + Lớp hình trụ cấu tạo protein có MW=24kd KỸ THUẬT WESTERN BLOT T¸ch KN HIV theo träng lợng phân tử điện di gel polyacrylamid mµng introcellulose KN (HIV) + KT + a.KT enzym  KN-KT-a.KT enzym Làm chuyển Gắn Huyết màu chất màng thử nitrocellulo se Phản ứng (+) có hai băng màu: + Một cho phần vỏ + Một cho phần nhân K THUT ELISA SANDWICH KN Đo hoạt tính phóng xạ E E KT KN cần tìm Cơ chất Có màu: Đo màu THƯỜNG QUY XÉT NGHIỆM HIV VN     Xác định SỰ có mặt kháng thể kháng HIV với phương cách Phương cách I Phương cách II Phương cách II PHNG CCH I p dụng: công tác an toàn truyền máu Mẫu huyết dơng tính với ph ơng cách I: dơng tính với thử nghiệm: ELISA, SERODIA, hay thư nghiƯm nhanh  Lo¹i bá mÉu máu dơng tính hay nghi ngờ PHNG CCH II p dụng: giám sát trọng điểm Mẫu huyết dơng tính với phơng cách II: dơng tính lần xét nghiệm loại sinh phẩm với nguyên lý chuẩn bị kháng nguyên khác PHNG CCH III áp dụng: chẩn đoán trờng hợp nhiễm HIV Mẫu huyết dơng tính với phơng cách III: dơng tính lần xét nghiệm loại sinh phẩm với nguyên lý chuẩn bị kháng nguyên khác V D V PHNG CÁCH III (+) Determine HIV(+) (+) (+) Serodia ELISA (-) HIV(-) XÁC ĐỊNH SỰ CÓ MẶT KN    PCR Kháng nguyên p24 Nuôi cấy HIV í NGHA CA KẾT QUẢ XN    Mạn tÝnh: kh«ng nhiƠm HIV nhiễm HIV giai đoạn cửa sổ Kết không xác định: xét nghiệm lại sau - 12 tuần Kết xét nghiệm HIV dơng tính trẻ em Trẻ 18 tháng: đứa trẻ nhiễm HIV Trẻ dới 18 tháng: có hai khả nng ứa trẻ đà nhiễm HIV Có thể trẻ cha nhiễm HIV, nhng phản ứng dơng tính với kháng thể ngêi mĐ trun sang   KÕt qu¶ xÐt nghiƯm HIV d¬ng tÝnh LỢI ÍCH CỦA XN    Kết âm tính: yên tâm nhng lu ý giai đoạn cửa sổ Kết dơng tính: khuyến khích ngời nhiễm bạn tỡnh giảm/ ngừng hành vi nguy Phụ n có thai xét nghiệm dơng tính: giúp định phá thai hay để đẻ Có số liệu đờng lây, hành vi nguy cao thông tin khác định hớng cho dịch vụ HIV/ AIDS tơng lai Bạn tỡnh/ ngời chung bơm kim tiêm với ngời nhiễm: biết thông tin để xét nghiệm Cảnh tỉnh thầy thuốc, nha sĩ dịch vụ y tế thực dự phòng lây nhiễm qua đờng máu HIV 1/2 KIT TH DNG QUE Nguyên lý Trên sở sử dụng màng thấm nhằm phát kháng thể HIV huyết thanh, huyết tương máu toàn phần để xác định bệnh nhân có nhiễm HIV hay khơng CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH  Một giọt huyết huyết tương, giọt dung dịch đệm (Buffer)  giọt máu toàn phần lấy từ tĩnh mạch, giọt dung dịch đệm (Buffer)  25µl máu tồn phần lấy từ đầu ngón tay ống mao dẫn, giọt dung dịch đệm (Buffer)  giọt máu tồn phần nhỏ thẳng từ đầu ngón tay, giọt dung dịch đệm (Buffer)  Đọc kết sau 15’ xuất vạch chữ C chữ T kết luận dương tính, xuất vạch C kết âm tính HBsAg KIT THỬ DẠNG QUE Nguyên lý Trên sở sử dụng màng thấm mao dẫn nhằm phát kháng thể HBV huyết thanh, huyết tương máu toàn phần để xác định bệnh nhân có nhiễm HBV hay khơng CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH  Huyết huyết tương vừa đủ  Nhúng que thử nghiệm vào ống huyết tương huyết ngâm 10-15 giây  Sau đặt KIT thử nằm ngang mặt phẳng, khơng hút nước bắt đầu tính thời gian  Đọc kết sau 15’ xuất vạch chữ C chữ T kết luận dương tính, xuất vạch C kết âm tính ...  Endonuclease(p31 HIV- 1 p34 HIV- 2) có vai trị tích hợp DNA virus vào ký chủ CẤU TRÚC HIV PHÂN LOẠI • Phân loại theo týp huyết  HIV- 1 phân làm nhiều nhóm phụ (HIV- 1 týp A-H HIV- 1 týp O), phân... quốc tế HIV- 1 ã 1986 nhà khoa học Pháp lại phân lập đợc loại virus khác Tây Phi gây suy giảm miễn dịch ngời gọi HIV- 2 ã HIV- 1 phân bố khắp giới HIV- 2 phần lớn tập trung kh trú Tây Phi ấn ộ ã HIV- 2... lên HIV + Gen rev(regulator of virion protein):điều hòa nhân lên HIV + Gen vif(viral infectivity factor):mã hóa cho protein khác + Gen vrp(viral protein R):mã hóa cho protein khác + Gen vpu(viral