HIV, HUMAN IMMUNODEFICENCY VIRUS, CBG: Trần Đỗ Hùng

HIV HUMAN IMMUNODEFICENCY VIRUS CBG: Trần Đỗ Hùng MỤC TIÊU: Sau học sinh viên có khả 1- Trình bày đặc điểm virus học HIV 2- Giải thích sinh lý bệnh học b nhiễm HIV/AIDS 3- Liệt kê tb tham gia vào đáp ứng miễn dịch 4- Trình bày thay đổi tb nhiễm HIV/AIDS 5- Hiểu nguyên lý xét nghịêm HIV/AIDS Một số khái niệm/định nghĩa AIDS viết tắt cđa tiÕng Anh (Acquired Immuno Deficiency Syndrome) cã nghÜa lµ hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải ngời nhiễm HIV gây nên HIV viết tắt cđa cơm tõ tiÕng Anh (Human Immunodeficiency Virus) cã nghi· virus gây suy giảm miễn dịch ngời AIDS lần đợc mô tả vào 1981 Los Angeles trờng hợp nam đồng tính HIV lần đợc nhóm nhà khoa học Viện Pasteur Paris phân lập 1983 1984 Gallo nhà khoa học Mỹ phân lập đợc loại virus gây AIDS gọi virus hớng vào tế bào lympho ngời Một số khái niệm/định nghĩa (2) Thực chất hai loại virus đợc phân lËp 1983 vµ 1984 lµ mét, sau nµy cã danh pháp quốc tế HIV-1 1986 nhà khoa học Pháp lại phân lập đợc loại virus khác Tây Phi gây suy giảm miễn dịch ngời gọi HIV-2 HIV-1 phân bố khắp giíi HIV-2 phÇn lín tËp trung kh tró Tây Phi ấn ộ HIV-2 ủ bệnh dài hơn, nguy lây thấp diễn biến nhẹ so với HIV-1 Lịch sử phát triển đại dịch HIV/AIDS giới Thời kỳ yên lặng khoảng từ 1970 phát • “Thêi kú ph¸t hiƯn” AIDS: 1981-1985 • “Thêi kú động viên toàn giới chống AIDS: từ 1985 đến Tình hình nhiƠm HIV trªn thÕ giíi hiƯn Tính đến ngày 31/12/2005, toàn giới có 40,3 triệu ngời nhiễm HIV Riêng 2005 ®· cã 4,9 triƯu ngêi nhiƠm míi vµ 3,1 triƯu ngời chết vỡ AIDS Tại nhiều nớc phát triển, trờng hợp nhiễm niên Kho¶ng 1/3 tỉng sè ngêi hiƯn nhiƠm HIV/AIDS ë độ tuổi 15 đến 24, phần lớn số hä kh«ng biÕt mang HIV Ngn UNAIDS Tình hình nhiƠm HIV trªn thÕ giíi hiƯn (2) Trung Tây Âu 720 000 Bắc Mỹ [570 000 – 890 000] 1.2 Triệ Triệu Đông Âu Trung Á 1.6 triệ triệu [990 000 – 2.3 triệu triệu]] [650 000 – 1.8 triệu triệu]] Đông Á 870 000 [440 000 – 1.4 triệu triệu]] Bắc Mỹ Trung Đông Caribbean 540 000 300 000 [200 000 – 510 000] [230 000 – 1.5 triệu triệu]] Đông Nam Á 7.4 triệ triệu [4.5 – 11 triệu triệu]] Sub-Saharan Châu Phi Mỹ La Tinh 1.8 triệ triệu 25.4 triệ triệu [23.4 – 28.4 triệu triệu]] [1.4 – 2.4 triệu triệu]] Châu Đại Dương 74 000 [45 000 – 120 000] Tổng số: 40.3 (35.9 – 44.3) triệu CẤU TRÚC HIV TÍNH CHẤT CHUNG CỦA VIRUS (viruse hoc) • HIV thuộc họ Retroviridae,hình cầu, kích thước khỏang 80-100nm • Genom chuỗi ARN xoắn ốc có enzym chép ngược(RT:reverse transcriptase) • Thuộc nhóm nhỏ Lentivirus(hiv-1 HIV-2) có khả gây bệnh ADIS cho người CẤU TRÚC GỒM LỚP • Lớp vỏ ngồi:gắn màng nầy gai nhú(gp = 160KD),gồm phần + Màng gp có MW=120kd KN dễ biến đổi + Và gp xun màng có MW=41kd • Lớp vỏ gồm lớp protein + Lớp ngồi hình cầu cấu tạo protein có MW=17kd + Lớp hình trụ cấu tạo protein có MW=24kd KỸ THUẬT WESTERN BLOT T¸ch KN HIV theo trọng lợng phân tử điện di gel polyacrylamid màng introcellulose KN (HIV) + KT + a.KT enzym KN-KT-a.KT enzym Làm chuyển Gắn Huyết màu chất màng thử nitrocellulo se Phản ứng (+) có hai băng màu: + Một cho phần vỏ + Một cho phần nhân K THUẬT ELISA SANDWICH KN Đo hoạt tính phóng xạ E E KT KN cần tìm Cơ chất Có màu: Đo màu THƯỜNG QUY XÉT NGHIỆM HIV VN     Xác định SỰ có mặt kháng thể kháng HIV với phương cách Phương cách I Phương cách II Phương cách II PHƯƠNG CÁCH I Áp dơng: c«ng tác an toàn truyền máu Mẫu huyết dơng tính với ph ơng cách I: dơng tính với c¸c thư nghiƯm: ELISA, SERODIA, hay thư nghiƯm nhanh Loại bỏ mẫu máu dơng tính hay nghi ngờ  PHƯƠNG CÁCH II   Áp dơng: gi¸m s¸t trọng điểm Mẫu huyết dơng tính với phơng cách II: dơng tính lần xét nghiệm loại sinh phẩm với nguyên lý chuẩn bị kháng nguyên khác PHNG CCH III áp dụng: chẩn đoán trờng hợp nhiễm HIV Mẫu huyết dơng tính với phơng cách III: dơng tính lần xét nghiệm loại sinh phẩm với nguyên lý chuẩn bị kháng nguyên khác VÍ DỤ VỀ PHƯƠNG CÁCH III (+) Determine HIV(+) (+) (+) Serodia ELISA (-) HIV(-) XÁC ĐỊNH SỰ CÓ MẶT KN PCR Kháng nguyên p24 Nuôi cấy HIV Ý NGHĨA CỦA KẾT QUẢ XN    Mn tính: không nhiễm HIV nhiễm HIV giai đoạn cửa sổ Kết không xác định: xét nghiệm lại sau - 12 tuần Kết xét nghiệm HIV dơng tính trẻ em Trẻ 18 tháng: đứa trẻ nhiễm HIV Trẻ dới 18 tháng: có hai khả n ng ứa trẻ nhiễm HIV Có thể trẻ cha nhiễm HIV, nhng phản ứng dơng tÝnh víi kh¸ng thĨ cđa ngêi mĐ trun sang  Kết xét nghiệm HIV dơng tính LI CH CỦA XN       KÕt qu¶ âm tính: yên tâm nhng lu ý giai đoạn cửa sổ Kết dơng tính: khuyến khích ngời nhiễm bạn tỡnh giảm/ ngừng hành vi nguy Phụ n có thai xét nghiệm dơng tính: giúp định phá thai hay để đẻ Có số liệu đờng lây, hành vi nguy cao thông tin khác định hớng cho dịch vụ HIV/ AIDS tơng lai Bạn tỡnh/ ngời chung bơm kim tiêm với ngời nhiễm: biết thông tin để xét nghiệm Cảnh tỉnh thầy thuốc, nha sĩ dịch vụ y tế thực dự phòng lây nhiễm qua đờng máu HIV 1/2 KIT THỬ DẠNG QUE Nguyên lý Trên sở sử dụng màng thấm nhằm phát kháng thể HIV huyết thanh, huyết tương máu toàn phần để xác định bệnh nhân có nhiễm HIV hay khơng CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH  Một giọt huyết huyết tương, giọt dung dịch đệm (Buffer)  giọt máu toàn phần lấy từ tĩnh mạch, giọt dung dịch đệm (Buffer)  25µl máu tồn phần lấy từ đầu ngón tay ống mao dẫn, giọt dung dịch đệm (Buffer)  giọt máu toàn phần nhỏ thẳng từ đầu ngón tay, giọt dung dịch đệm (Buffer)  Đọc kết sau 15’ xuất vạch chữ C chữ T kết luận dương tính, xuất vạch C kết âm tính HBsAg KIT THỬ DẠNG QUE Nguyên lý Trên sở sử dụng màng thấm mao dẫn nhằm phát kháng thể HBV huyết thanh, huyết tương máu toàn phần để xác định bệnh nhân có nhiễm HBV hay khơng CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH  Huyết huyết tương vừa đủ  Nhúng que thử nghiệm vào ống huyết tương huyết ngâm 10-15 giây  Sau đặt KIT thử nằm ngang mặt phẳng, không hút nước bắt đầu tính thời gian  Đọc kết sau 15’ xuất vạch chữ C chữ T kết luận dương tính, xuất vạch C kết âm tính ...  Endonuclease(p31 HIV- 1 p34 HIV- 2) có vai trò tích hợp DNA virus vào ký chủ CẤU TRÚC HIV PHÂN LOẠI • Phân loại theo týp huyết  HIV- 1 phân làm nhiều nhóm phụ (HIV- 1 týp A-H HIV- 1 týp O), phân... quốc tế HIV- 1 1986 nhà khoa học Pháp lại phân lập đợc loại virus khác Tây Phi gây suy giảm miễn dịch ngời gọi HIV- 2 HIV- 1 phân bố khắp giới HIV- 2 phần lớn tập trung kh trú Tây Phi ấn ộ HIV- 2... điểm virus học HIV 2- Giải thích sinh lý bệnh học b nhiễm HIV/ AIDS 3- Liệt kê tb tham gia vào đáp ứng miễn dịch 4- Trình bày thay đổi tb nhiễm HIV/ AIDS 5- Hiểu nguyên lý xét nghờm HIV/ AIDS Một