PHÂN TÍCH kết QUẢ điện DI HEMOGLOBIN (THỰC HÀNH HUYẾT học)

PHÂN TÍCH KẾT QUẢ ĐIỆN DI HEMOGLOBIN (Phân tích thành phần Hb) MỤC TIÊU Nêu nguyên lý kỹ thuật điện di Nêu định làm điện di hemoglobin Nêu bước đọc kết điện di Phân tích kết điện di hemoglobin ĐIỆN DI • Định nghĩa – Điện di di chuyển phân tử tích điện mơi trường điện • Các yếu tố ảnh hưởng – Tốc độ di chuyển phân tử phụ thuộc vào: • • • • • • điện tích, kích thước hình dạng phân tử, pH dung dich đệm, đặc điểm môi trường hỗ trợ, khung thời gian cho phương pháp tiến hành nhiệt độ hệ thống hoạt động • Ứng dụng: điện di hemoglobin, điện di protein huyết NGUYÊN LÝ • Phương pháp điện di – phương pháp lý hóa – dùng dòng điện chiều làm di chuyển phân tử mang điện • Mục đích phương pháp – dựa tích điện phân tử, tốc độ di chuyển khác để tách thành phần mong muốn  định tính định lượng Thiết bị thuốc thử • Nguồn điện • Bể chứa (mơi trường đệm, mơi trường hỗ trợ) • Thiết bị phát định lượng Electrophoresis tank Cathode Paper support medium Trong hệ thống điện di, phân tử tích điện di chuyển qua mơi trường hỗ trợ nhờ lực phát từ môi trường điện Ngun lý phân tách • Theo điện tích • Theo kích thước (1) Theo điện tích • Khi phân tử tích điện đặt mơi trường điện, chúng di chuyển hai phía cực dương cực âm theo điện tích chúng (2) Theo kích thước phân tử (1) Normal (2) New born (3) Hb C trait [A-C] (4) Hb SC disease [S-C] (5) Sickle cell disease [S-S], (6) Sickle cell trait [A – S] (7) New born (8) Normal • Điện di hemoglobin thực trên: – Giấy lọc – Màng cellulose acetate – Gel tinh bột – Gel citrate agar – Gel agarose 10 Kết điện di HbH 6.5 HbBart 0.3 HbA 92.5 HbF 0.0 HbE 0.0 HbA2 0.7 HbS 0.0 47 Kết điện di HbH 0.0 HbBart 0.0 HbA 74.3 HbF 0.6 HbE 21.6 HbA2 3.5 HbS 0.0 48 Case  CLS: Bệnh nhân nữ 47 year người Mỹ gốc Phi  Hgb: 5.9  Hct: 17.8  MCV: 97.1  RDW: 20.9  Iron: 83  Ferritin: 394.3 49 Case HbF: 1.0%; HbA: 38.7%; HbA2: 4.4%; HbS: 56.1% 50 LƯU Ý • Việc phân tích kết điện di lâm sàng phải kết hợp với – – – – – Bệnh cảnh lâm sàng bệnh nhân Tổng phân tích tế bào máu ngoại vi (cơng thức máu) Phết máu ngoại biên Bilan chuyển hóa sắt Tiền sử gia đình 51 ... lý kỹ thuật điện di Nêu định làm điện di hemoglobin Nêu bước đọc kết điện di Phân tích kết điện di hemoglobin ĐIỆN DI • Định nghĩa – Điện di di chuyển phân tử tích điện mơi trường điện • Các yếu... dụng: điện di hemoglobin, điện di protein huyết NGUYÊN LÝ • Phương pháp điện di – phương pháp lý hóa – dùng dịng điện chiều làm di chuyển phân tử mang điện • Mục đích phương pháp – dựa tích điện phân. .. support medium Trong hệ thống điện di, phân tử tích điện di chuyển qua môi trường hỗ trợ nhờ lực phát từ môi trường điện Nguyên lý phân tách • Theo điện tích • Theo kích thước (1) Theo điện tích •