Xây dựng quy trình sản xuất và tiêu chuẩn hóa bộ kit thử định lượng creatinin trong huyết thanh bằng phương pháp jaffe

Đại Học Quốc Gia Tp Hồ Chí Minh TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA [ \ Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã số ngành: 60 42 80 LUẬN VĂN THẠC SĨ Niên khóa 2007 - 2009 TP HỒ CHÍ MINH, tháng 12 năm 2009 Luận văn cao học CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC - TP.HCM BỆNH VIỆN QUẬN - TP.HCM Cán hướng dẫn khoa học: PGS – TS TRẦN THANH NHÃN Cán chấm nhận xét 1: Cán chấm nhận xét 2: Luận văn thạc sĩ bảo vệ tại: HỘI ĐỒNG CHẤM BẢO VỆ LUẬN VĂN THẠC SĨ TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA, ngày 12 tháng 12 năm 2009 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHIÃ VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc oOo TP HCM, ngày 12 tháng 12 năm 2009 NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: NGUYỄN THỊ PHƯƠNG THẢO Ngày, tháng, năm sinh : 02 / 06 / 1977 Chuyên ngành : Cơng nghệ Sinh học Giới tính : Nữ Nơi sinh : Vĩnh Long MSHV : 03107123 I - TÊN ĐỀ TÀI: XÂY DỰNG QUY TRÌNH SẢN XUẤT VÀ TIÊU CHUẨN HOÁ BỘ KIT THỬ ĐỊNH LƯỢNG CREATININ TRONG HUYẾT THANH BẰNG PHƯƠNG PHÁP JAFFÉ II - NHIỆM VỤ LUẬN VĂN: − Xây dựng quy trình sản xuất kit thử định lượng creatinin huyết phương pháp Jaffé − Khảo sát độ đúng, độ xác, độ tuyến tính kit với huyết kiểm tra − Kiểm tra độ ổn định kit phương pháp dài hạn phương pháp già hóa cấp tốc để dự đoán hạn sử dụng kit − Sử dụng kit thử xét nghiệm có so sánh thống kê với kit ngoại nhập sử dụng III - NGÀY GIAO NHIỆM VỤ : tháng 02 năm 2009 IV - NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ : tháng 12 năm 2009 V - HỌ VÀ TÊN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN : PGS-TS TRẦN THANH NHÃN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN QUẢN LÝ CHUYÊN NGÀNH Nội dung đề cương luận văn thạc sĩ Hội đồng chuyên ngành thông qua TRƯỞNG PHÒNG ĐÀO TẠO SĐH TRƯỞNG KHOA QL NGÀNH (Họ tên chữ ký) HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học LỜI CẢM ƠN Lời cho phép gửi lời cám ơn chân thành đến Thầy hướng dẫn tôi, PGS - TS Trần Thanh Nhãn, Thầy nhiệt tâm hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi để thực luận văn Trân trọng gửi lời cảm ơn đến quý Thầy Cô môn Công nghệ Sinh học hướng dẫn truyền đạt cho kiến thức mới, hỗ trợ cho nhiều công tác sống Đặc biệt, gửi lời cảm ơn đến TS Nguyễn Th Hương, cám ơn Cơ có lời động viên, chia hướng dẫn em suốt trình học tập trường Chân thành biết ơn Cơ! Để hồn thành luận văn tốt nghiệp nhờ vào động viên, khuyến khích từ gia đình đồng nghiệp tơi, người ln ln bên cạnh tơi, giúp tơi hồn thành tốt công tác, yên tâm thực luận văn Xin cho tơi bày tỏ nơi lịng biết ơn chân thành! HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học TĨM TẮT Mục tiêu: Xây dựng quy trình sản xuất tiêu chuẩn hóa kit thử định lượng creatinin huyết Phương pháp: • Ứng dụng phần mềm vi tính (Design-Expert, FormRules, INForm, Microsoft Office Excel) để tối ưu hố cơng thức kit • Sự ổn định kit xác định phương pháp tự nhiên phương pháp lão hóa cấp tốc Kết quả: • Đề tài khảo sát thông số tối ưu kit Các thông số tối ưu sau: nồng độ acid picric = 21,06 mmol/L; nồng độ NaOH = 333,55 mmol/L; nồng độ creatinin chuẩn = 5,4 mg/dL; thời gian t1 = 10 giây; thời gian t2 = 104 giây • Thời hạn sử dụng kit dự đoán 42 tháng kể từ pha chế điều kiện bảo quản mát từ - 0C • Bộ kit sử dụng để định lượng nồng độ creatinin huyết 327 bệnh nhân 21 huyết nội kiểm tra phịng sinh hố, bệnh viện Quận 4, thành phố Hồ Chí Minh có so sánh thống kê kết với kit ngoại nhập (ISE - Ý) sử dụng Kết cho thấy, kit có chất lượng tương đương với kit ngoại nhập HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học Abstract Objective: Process development and standardization of the kit for the quantification of the creatinin in serum Methods: • Computer softwares (Design - Expert, FormRules, INForm, Microsoft Office Excel) were applied in the optimum mixing formular of the kit • Real time method and accelerated study were used to determine the stability of the kit Results: • This study has investigated to optimize parameters of the kit Resulting conditions are as followed: concentration of picric acid = 21.06 mmol/L, concentration of NaOH = 333.55 mmol/L, concentration of standard creatimin = 5.4 mg/dL, time t1 = 10 seconds, time t2 = 104 seconds • The expiry date of the kit was predicted 42 months from the manufacture date at - 80C • The kit was used for the quantitative determination of the creatinin in the serum of 327 patients and 21 samples control (Internal Quality Control) at Biochemistry department of District hospital, at Ho Chi Minh city And then we compare with imported kit (ISE - Italy) are using currently at hospital The results showed the quality of this kit is the same with the kit imported (I.S.E - Italy) HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học CHƯƠNG I MỞ ĐẦU CHƯƠNG II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan creatinin 2.1.1 Đại cương creatinin 2.1.2 Thăm dò chức lọc cầu thận 2.1.2.1 Đo mức lọc cầu thận qua tính độ thải creatinin nội sinh 2.1.2.2 Ước lượng GFR 2.2 Bệnh lý liên quan 10 2.2.1 Bình thường 10 2.2.2 Thay đổi sinh lý 10 2.2.2.1 Thay đổi theo tuổi 10 2.2.2.2 Thay đổi theo giới tính 10 2.2.2.3 Thay đổi nguyên nhân khác 11 2.2.3 Thay đổi bệnh lý 11 2.2.3.1 Các bệnh lý liên quan đến tăng lượng creatinin máu 11 2.2.3.2 Các bệnh lý liên quan đến giảm lượng creatinin máu 11 2.3 Các phương pháp định lượng creatinin huyết 11 2.3.1 Phương pháp động học dựa phản ứng Jaffé 11 2.3.1.1 Lịch sử phát triển 11 2.3.1.2 Nguyên tắc 12 2.3.1.3 Điều kiện áp dụng 13 2.3.1.4 Thuốc thử 13 2.3.1.5 Ưu nhược điểm 13 2.3.2 Các phương pháp định lượng khác 14 2.3.2.1 Phương pháp chuẩn độ điện điện cực màng chọn lọc 14 2.3.2.2 Phương pháp sắc ký lỏng cao áp 14 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học 2.3.2.3 Phương pháp dùng enzym creatinase 16 2.3.2.4 Phương pháp dùng enzym creatinin desaminase 16 2.3.2.5 Phương pháp đo điểm cuối 17 2.3.3 Các quy trình tham khảo 19 2.4 Thiết kế tối ưu hóa cơng thức 21 2.4.1 Thiết kế mô hình thực nghiệm 21 2.4.1.1 Mơ hình cơng thức (formulation designs) 22 2.4.1.2 Mơ hình quy trình (process designs) 22 2.4.1.3 Mơ hình kết hợp (combined designs) 23 2.4.2 Nghiên cứu liên quan nhân 23 2.4.3 Tối ưu hóa cơng thức 23 2.4.4 Ứng dụng phần mềm vi tính xây dựng cơng thức tối ưu 24 2.4.4.1 Các phần mềm thông minh 24 2.4.4.2 Cấu tạo phần mềm thông minh 27 2.4.4.3 Ứng dụng phần mềm thông minh xây dựng công thức 29 2.5 Thẩm định quy trình định lượng creatinin huyết 30 2.5.1 Miền giá trị - khoảng tuyến tính 30 2.5.1.1 Khảo sát khoảng tuân theo định luật Lambert - Beer 30 2.5.1.2 Sự lệch khỏi định luật Beer 30 2.5.1.3 Miền giá trị (khoảng tuyến tính) 31 2.5.2 Xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính 31 2.5.2.1 Công thức tính hệ số hồi quy 32 2.5.2.2 Phương sai tái 32 2.5.2.3 Kiểm định có nghĩa hệ số hồi quy theo tiêu chuẩn Student 32 2.5.2.4 Kiểm định tương thích mơ hình với thực nghiệm theo tiêu chuẩn Fisher 33 2.5.3 Giới hạn phát giới hạn định lượng 33 2.5.4 Độ đặc hiệu (Specificity) 34 2.5.5 Độ xác (precision) 34 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học 2.5.5.1 Độ lặp lại (repeatibility) 34 2.5.5.2 Độ xác trung gian (intermediate precision) 35 2.5.5.3 Độ chép lại (reproducibility) 35 2.5.6 Độ (accuracy) 35 2.6 Độ ổn định 36 2.6.1 Độ ổn định thuốc sinh phẩm 36 2.6.2 Hạn dùng thuốc sinh phẩm 36 2.6.3 Nghiên cứu độ ổn định thuốc sinh phẩm 36 2.6.3.1 Phương pháp thử độ ổn định thực hay phương pháp theo dõi tự nhiên (real time method) 36 2.6.3.2 Phương pháp thử độ ổn định cấp tốc hay phương pháp già hóa cấp tốc (accelerated study) 37 CHƯƠNG III NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 40 3.1 Nguyên liệu, hóa chất trang thiết bị 41 3.1.1 Hóa chất dung mơi 41 3.1.2 Chất chuẩn chất thử 42 3.1.3 Thiết bị nghiên cứu 43 3.1.4 Phần mềm chuyên dụng 44 3.2 Phương pháp nghiên cứu 45 3.2.1 Sơ đồ nội dung nghiên cứu 45 3.2.2 Xây dựng công thức tối ưu quy trình điều chế kit theo phương pháp thực nghiệm 45 3.2.2.1 Quy trình định lượng creatinin huyết 45 3.2.2.2 Thăm dò mối liên quan nhân 49 3.2.2.3 Tối ưu hóa quy trình 50 3.2.3 Thẩm định quy trình định lượng creatinin 52 3.2.3.1 Thẩm định quy trình tối ưu 52 3.2.3.2 So sánh quy trình tối ưu quy trình tham khảo 55 3.2.4 Thử nghiêm độ ổn định kit 56 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học 3.2.4.1 Theo dõi độ ổn định kit theo phương pháp dài hạn 56 3.2.4.2 Theo dõi độ ổn định kit theo phương pháp già hoá cấp tốc 57 3.2.4.3 Xác định tuổi thọ thuốc thử 60 3.2.5 Ứng dụng kit nghiên cứu mẫu thử thật so sánh kết với kit ngoại nhập 60 3.2.6 Tính tốn hiệu kinh tế kit 61 CHƯƠNG IV KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 62 4.1 Xây dựng cơng thức quy trình bào chế kit 63 4.1.1 Thăm dò nhân 63 4.1.1.1 Mơ hình thí nghiệm 63 4.1.1.2 Kết thực nghiệm 65 4.1.1.3 Liên quan nhân 66 4.1.2 Tối ưu hóa cơng thức 74 4.1.2.1 Mơ hình thí nghiệm 74 4.1.2.2 Kết thực nghiệm 78 4.1.2.3 Kết luyện mạng 80 4.1.2.4 Kết tối ưu hóa 82 4.2 Thẩm định quy trình định lượng creatinin 86 4.2.1 Thẩm định quy trình tối ưu 86 4.2.1.1 Khoảng tuyến tính 86 4.2.1.2 Xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính 89 4.2.1.3 Giới hạn phát giới hạn định lượng 91 4.2.1.4 Độ đặc hiệu 92 4.2.1.5 Độ xác 92 4.1.2.6 Độ 95 4.2.2 So sánh quy trình tối ưu quy trình tham khảo 95 4.2.2.1 Đánh giá quy trình tham khảo 95 4.2.2.2 So sánh thành phần thuốc thử điều kiện tiến hành 99 4.2.2.3 So sánh số thống kê 100 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Luận văn cao học RESIDUAL OUTPUT Observation Residuals Predicted Y 0.7170206 -0.00064526 0.7093858 0.00110999 0.7017511 -0.00013982 0.6941163 -0.00046928 0.6864816 0.00014437 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Standard Residuals -0.934021 1.606717 -0.202392 -0.679284 0.2089799 Luận văn cao học Lô Cr-T110802 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0.9998866 R Square 0.9997732 Adjusted R Square 0.9996976 Standard Error 0.0001541 Observations ANOVA Significance MS F F 0.0003138 13222.447 1.450E-06 2.373E-08 df SS 0.0003138 7.12E-08 0.0003139 Intercept X Variable Coefficients 0.7039195 -0.001867 Standard Error 0.0001193 1.624E-05 Intercept X Variable Lower Upper Lower 95% Upper 95% 95.0% 95.0% 0.7035397 0.7042992 0.7035397 0.704299 -0.001919 -0.0018156 -0.001919 -0.001815 Regression Residual Total t Stat P-value 5898.8822 1.074E-11 -114.9889 1.45E-06 RESIDUAL OUTPUT Observation Predicted Y Residuals 0.703919 0.0001677 0.698317 -0.0001829 0.692712 -6.865E-05 0.687113 1.527E-05 0.681512 6.859E-05 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Standard Residuals 1.256648 -1.370634 -0.514590 0.114489 0.514086 Luận văn cao học Lô Cr-T110803 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0.998366 R Square 0.996736 Adjusted R Square 0.995647 Standard 0.000798 Error Observations ANOVA MS 0.000582 6.36E-07 F 915.9861 Coefficients Standard Error t Stat Intercept 0.717021 0.000617911 1160.395 X Variable -0.002545 8.4087E-05 -30.2652 P-value 1.411E09 7.924E05 Intercept X Variable Lower 95% 0.71505 -0.00281 Upper 95% 0.71899 -0.00228 Lower 95.0% 0.71505 -0.00281 Upper 95.0% 0.71899 -0.00228 Residuals -0.000645 0.001110 -0.000139 -0.000469 0.000144 Standard Residuals -0.93402 1.60671 -0.20239 -0.67928 0.20897 Regression Residual Total df SS 0.000582893 1.90907E-06 0.000584802 RESIDUAL OUTPUT Observation Predicted Y 0.7170206 0.7093858 0.7017511 0.6941163 0.6864816 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Significance F 7.923E-05 Luận văn cao học Phụ lục Kết định lượng nồng độ creatinin mẫu huyết kit Cr-T1108 I.S.E THỬ NGHIỆM TRÊN HUYẾT THANH NỘI KIỂM TRA (IQC) Thông tin mẫu nội kiểm Ngày Tên mẫu Công ty SX Lot số Kết (mg/dL) Thực nghiệm Tham khảo Cr-T1108 ISE Mean Range 09/09/09 1.920 2.000 1.9 1.52 - 2.28 10/09/09 1.940 1.990 1.9 1.52 - 2.28 11/09/09 1.900 1.890 1.9 1.52 - 2.28 12/09/09 2.020 2.220 1.9 1.52 - 2.28 14/09/09 1.990 2.170 1.9 1.52 - 2.28 2.100 2.200 1.9 1.52 - 2.28 2.080 2.120 1.9 1.52 - 2.28 1.980 2.090 1.9 1.52 - 2.28 2.120 1.990 1.9 1.52 - 2.28 2.090 2.230 1.9 1.52 - 2.28 Bio - 2.010 2.180 1.9 1.52 - 2.28 Rad 5.770 5.800 5.8 4.64 - 6.96 5.790 5.720 5.8 4.64 - 6.96 5.850 5.660 5.8 4.64 - 6.96 5.870 5.770 5.8 4.64 - 6.96 5.920 5.620 5.8 4.64 - 6.96 5.870 5.690 5.8 4.64 - 6.96 29/09/09 5.940 5.670 5.8 4.64 - 6.96 30/09/09 5.970 5.590 5.8 4.64 - 6.96 01/10/09 6.020 5.970 5.8 4.64 - 6.96 02/10/09 5.950 5.890 5.8 4.64 - 6.96 14171 16/09/09 17/09/09 18/09/09 19/09/09 21/09/09 22/09/09 23/09/09 24/09/09 25/09/09 26/09/09 Lyphocheck Assaye Control Chemis try 15/09/09 28/09/09 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 14172 Luận văn cao học THỬ NGHIỆM TRÊN HUYẾT THANH BỆNH NHÂN STT Mã số bệnh nhân 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 Cr1108NC190604 Cr1108NC190605 Cr1108NC190612 Cr1108NC190613 Cr1108NC190629 Cr1108NC190632 Cr1108NC190633 Cr1108NC190634 Cr1108NC190635 Cr1108NC190636 Cr1108NC190637 Cr1108NC190639 Cr1108NC190640 Cr1108NC190641 Cr1108NC190642 Cr1108NC190643 Cr1108NC190647 Cr1108NC190658 Cr1108NT190601 Cr1108NT190602 Cr1108NT190607 Cr1108NT190609 Cr1108NT190610 Cr1108NT190611 Cr1108NC220601 Cr1108NC220622 Cr1108NC220623 Cr1108NC220624 Cr1108NC220640 Cr1108NC220641 Cr1108NC220642 Cr1108NC220643 Cr1108NC220644 Cr1108NC220646 Cr1108NC220647 Cr1108NC220648 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo Kết định lượng creatinin (mg/dL) Cr-T1108 I.S.E 1.2 1.2 1.4 1.2 1.1 0.9 1.1 1.1 1.2 1.3 1.2 1.2 1.5 1.1 1.3 1.4 1.2 1.1 0.8 1.0 0.9 1.0 0.6 1.0 1.1 1.0 1.1 1.0 1.0 1.3 1.3 1.0 1.0 2.1 0.9 1.1 1.1 1.1 1.5 1.1 1.2 0.9 1.1 1.0 1.2 1.2 1.2 1.2 1.6 1.1 1.2 1.4 1.3 1.0 0.7 1.0 0.9 1.0 0.5 1.1 1.0 1.0 1.1 1.0 1.1 1.4 1.3 0.9 1.0 2.2 0.8 1.1 Luận văn cao học 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 Cr1108NC220649 Cr1108NC220650 Cr1108NC220651 Cr1108NC220663 Cr1108NC220664 Cr1108NC220668 Cr1108NC220669 Cr1108NC220675 Cr1108NC220676 Cr1108NC220677 Cr1108NC220680 Cr1108NC220681 Cr1108NC220684 Cr1108NC220685 Cr1108NT220603 Cr1108NT220604 Cr1108NT220605 Cr1108NT220606 Cr1108NT220608 Cr1108NT220609 Cr1108NT220610 Cr1108NT220611 Cr1108NT220612 Cr1108NT220613 Cr1108NT220618 Cr1108NT220622 Cr1108NT220624 Cr1108NT220626 Cr1108NT220627 Cr1108NT220628 Cr1108NT220629 Cr1108NT220630 Cr1108NT220631 Cr1108NT220632 Cr1108NT220633 Cr1108NT220634 Cr1108NT220635 Cr1108NT220640 Cr1108NT220641 Cr1108NT220642 Cr1108NT220643 Cr1108NT220644 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 1.2 1.1 1.0 1.0 1.3 1.2 1.1 1.0 1.1 1.0 1.2 0.7 0.8 1.0 0.7 1.0 1.2 1.0 0.9 1.3 1.1 0.7 0.8 0.9 1.2 1.2 1.2 1.1 1.2 1.1 1.2 1.3 1.3 1.0 1.1 1.1 1.3 0.8 0.9 1.0 0.9 1.1 1.2 1.2 0.9 1.0 1.4 1.1 1.0 1.0 1.1 1.0 1.3 0.6 0.7 0.9 0.6 1.0 1.2 1.0 0.9 1.4 1.1 0.7 0.8 0.8 1.3 1.2 1.2 1.0 1.2 1.0 1.1 1.4 1.2 1.1 1.1 1.0 1.4 0.7 0.8 1.0 0.9 1.1 Luận văn cao học 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 Cr1108NT220645 Cr1108NC230637 Cr1108NC230640 Cr1108NC230641 Cr1108NC230642 Cr1108NC230643 Cr1108NC230644 Cr1108NC230645 Cr1108NC230646 Cr1108NC230647 Cr1108NC230648 Cr1108NC230649 Cr1108NC230650 Cr1108NC230653 Cr1108NC230654 Cr1108NC230656 Cr1108NC230657 Cr1108NC230658 Cr1108NC230660 Cr1108NC230662 Cr1108NC230665 Cr1108NT230601 Cr1108NT230602 Cr1108NT230604 Cr1108NT230605 Cr1108NT230606 Cr1108NT230607 Cr1108NT230608 Cr1108NT230611 Cr1108NT230612 Cr1108NT230619 Cr1108NT230620 Cr1108NT230621 Cr1108NT230622 Cr1108NC240604 Cr1108NC240627 Cr1108NC240628 Cr1108NC240629 Cr1108NC240630 Cr1108NC240631 Cr1108NC240633 Cr1108NC240634 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 0.9 1.2 1.0 1.0 1.0 1.0 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.4 1.0 0.9 0.9 1.1 1.0 1.1 1.0 1.3 1.1 1.0 0.9 1.1 1.0 1.0 0.7 1.2 1.0 1.2 0.8 1.1 1.0 1.0 0.9 1.0 1.2 1.4 2.9 0.9 1.1 1.1 0.8 1.2 1.0 1.0 0.9 0.9 1.2 1.2 1.3 1.2 1.2 1.5 1.0 0.8 0.9 1.0 1.0 1.1 1.0 1.3 1.0 1.1 0.9 1.0 1.0 1.0 0.7 1.3 1.0 1.2 0.7 1.1 1.0 1.0 0.9 0.9 1.0 1.6 3.1 0.9 1.0 0.9 Luận văn cao học 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 Cr1108NC240643 Cr1108NC240644 Cr1108NC240647 Cr1108NC240648 Cr1108NC240649 Cr1108NC240650 Cr1108NC240651 Cr1108NC240652 Cr1108NC240654 Cr1108NC240655 Cr1108NT240601 Cr1108NT240604 Cr1108NT240605 Cr1108NT240606 Cr1108NT240607 Cr1108NT240608 Cr1108NT240610 Cr1108NT240616 Cr1108NT240617 Cr1108NT240618 Cr1108NT240619 Cr1108NT240620 Cr1108NT240622 Cr1108NC250601 Cr1108NC250602 Cr1108NC250608 Cr1108NC250611 Cr1108NC250619 Cr1108NC250621 Cr1108NC250622 Cr1108NC250623 Cr1108NC250624 Cr1108NC250625 Cr1108NC250633 Cr1108NC250636 Cr1108NC250637 Cr1108NC250638 Cr1108NC250639 Cr1108NC250640 Cr1108NC250641 Cr1108NC250642 Cr1108NC250643 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 0.9 1.2 1.0 1.1 0.8 1.2 1.0 1.5 1.2 1.1 1.0 0.9 1.0 0.6 0.9 1.0 0.9 1.0 1.0 0.8 1.0 1.0 1.0 0.9 0.8 0.9 0.9 1.2 1.5 1.1 0.9 1.2 1.5 1.0 1.1 1.3 1.0 1.2 1.5 1.3 1.2 1.1 0.8 1.3 1.0 1.0 0.9 1.1 0.9 1.7 1.2 1.0 0.9 0.9 1.1 0.7 0.8 0.9 0.9 1.1 1.0 0.8 1.1 1.0 1.0 0.9 0.9 0.8 1.0 1.3 1.7 1.0 0.7 1.2 1.6 0.9 1.1 1.4 0.9 1.1 1.7 1.4 1.1 1.1 Luận văn cao học 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 Cr1108NC250644 Cr1108NC250647 Cr1108NC250649 Cr1108NT250602 Cr1108NT250604 Cr1108NT250605 Cr1108NT250606 Cr1108NT250607 Cr1108NT250608 Cr1108NT250614 Cr1108NT250618 Cr1108NT250619 Cr1108NT250620 Cr1108NT250621 Cr1108NC260606 Cr1108NC260622 Cr1108NC260623 Cr1108NC260624 Cr1108NC260625 Cr1108NC260626 Cr1108NC260627 Cr1108NC260628 Cr1108NC260629 Cr1108NC260630 Cr1108NC260631 Cr1108NC260647 Cr1108NC260649 Cr1108NC260650 Cr1108NC260651 Cr1108NC260652 Cr1108NT260603 Cr1108NT260604 Cr1108NT260605 Cr1108NT260606 Cr1108NT260607 Cr1108NT260608 Cr1108NT260609 Cr1108NC270639 Cr1108NC270645 Cr1108NC270646 Cr1108NC270648 Cr1108NC270652 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 1.3 1.1 1.1 0.9 0.9 1.0 0.8 1.1 1.1 0.9 1.2 1.2 1.1 1.1 1.4 1.0 1.0 1.4 1.0 0.9 0.9 1.5 1.2 1.3 1.1 0.9 0.8 0.8 0.8 0.9 0.7 1.0 0.9 1.0 0.8 0.8 1.2 0.9 1.0 1.0 1.2 0.9 1.2 1.0 1.1 0.8 0.7 1.0 0.8 1.1 1.1 0.8 1.1 1.2 1.1 1.2 1.5 1.1 1.0 1.3 1.1 1.0 0.9 1.6 1.2 1.4 1.0 0.8 0.8 0.8 0.7 0.9 0.6 1.0 0.9 1.0 0.8 0.8 1.3 0.8 1.1 1.0 1.1 0.8 Luận văn cao học 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 Cr1108NC270653 Cr1108NC270654 Cr1108NC270655 Cr1108NC270656 Cr1108NC270657 Cr1108NC270658 Cr1108NC270659 Cr1108NC270660 Cr1108NC270665 Cr1108NC270666 Cr1108NC270667 Cr1108NC270668 Cr1108NC270675 Cr1108NC270676 Cr1108NC270678 Cr1108NC270682 Cr1108NC270683 Cr1108NC270685 Cr1108NC270686 Cr1108NC270687 Cr1108NC270688 Cr1108NC270689 Cr1108NC270690 Cr1108NC270692 Cr1108NT270607 Cr1108NT270608 Cr1108NT270609 Cr1108NT270610 Cr1108NT270611 Cr1108NT270612 Cr1108NT270613 Cr1108NT270614 Cr1108NT270615 Cr1108NT270616 Cr1108NT270617 Cr1108NT270618 Cr1108NT270619 Cr1108NT270620 Cr1108NT270621 Cr1108NT270622 Cr1108NT270623 Cr1108NT270624 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 1.2 1.0 0.8 0.7 1.0 1.0 1.1 0.9 1.2 0.8 0.8 1.1 1.1 1.1 0.9 0.7 1.0 1.1 1.1 1.1 0.7 0.9 0.8 0.9 1.2 0.8 1.2 1.1 1.0 1.1 1.2 0.8 1.0 1.1 0.9 1.1 0.8 1.0 1.1 0.8 0.9 0.8 1.2 1.0 0.7 0.7 0.9 1.0 1.0 0.9 1.2 0.8 0.8 1.0 1.1 1.1 0.8 0.5 1.0 1.1 1.1 1.2 0.7 0.8 0.8 0.9 1.3 0.8 1.2 1.1 1.0 1.2 1.1 0.7 1.0 1.1 0.9 1.1 0.7 1.1 1.1 0.7 0.9 0.7 Luận văn cao học 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 Cr1108NT270625 Cr1108NT270626 Cr1108NT270627 Cr1108NT270629 Cr1108NT270632 Cr1108NT270633 Cr1108NC300605 Cr1108NC300617 Cr1108NC300618 Cr1108NC300619 Cr1108NC300625 Cr1108NC300627 Cr1108NC300628 Cr1108NC300629 Cr1108NC300631 Cr1108NC300632 Cr1108NC300635 Cr1108NC300640 Cr1108NC300641 Cr1108NC300642 Cr1108NC300643 Cr1108NT300602 Cr1108NT300604 Cr1108NT300609 Cr1108NT300610 Cr1108NT300611 Cr1108NT300612 Cr1108NT300613 Cr1108NT300614 Cr1108NT300615 Cr1108NT300618 Cr1108NC010717 Cr1108NC010731 Cr1108NC010732 Cr1108NC010733 Cr1108NC010734 Cr1108NC010737 Cr1108NC010740 Cr1108NC010745 Cr1108NC010746 Cr1108NC010747 Cr1108NC010748 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 0.8 0.9 0.8 1.0 1.0 0.8 1.0 1.1 1.2 2.2 0.9 1.0 0.9 0.7 1.2 1.3 0.9 1.0 1.6 1.3 1.1 0.9 1.1 0.9 1.1 1.0 0.9 1.1 0.9 1.0 0.9 1.1 1.2 1.5 0.9 1.0 0.9 1.1 0.9 3.5 1.1 1.2 0.8 0.8 0.8 0.9 1.0 0.8 1.0 1.1 1.2 2.5 0.9 1.0 0.9 0.6 1.2 1.4 0.8 1.0 1.7 1.2 1.1 0.8 1.1 0.9 1.1 1.0 0.8 1.1 0.9 0.9 1.0 1.1 1.2 1.5 0.9 1.0 0.9 1.0 0.8 3.8 1.0 1.1 Luận văn cao học 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323 324 325 326 327 Cr1108NC010749 Cr1108NC010754 Cr1108NC010758 Cr1108NC010759 Cr1108NC010760 Cr1108NC010761 Cr1108NC010762 Cr1108NT010703 Cr1108NT010704 Cr1108NT010705 Cr1108NT010706 Cr1108NT010707 Cr1108NT010709 Cr1108NT010710 Cr1108NT010711 Cr1108NT010712 Cr1108NT010713 Cr1108NT010714 Cr1108NT010715 Cr1108NT010717 Cr1108NC020704 Cr1108NC020705 Cr1108NC020706 Cr1108NC020707 Cr1108NC020710 Cr1108NC020711 Cr1108NC020712 Cr1108NC020722 Cr1108NC020727 Cr1108NT020705 Cr1108NT020706 Cr1108NT020709 Cr1108NT020710 Cr1108NT020711 Cr1108NT020712 Cr1108NT020714 Cr1108NT020715 Cr1108NT020716 Cr1108NT020717 HVTH: Nguyễn Thị Phương Thảo 1.0 1.1 1.0 0.8 1.2 1.1 1.5 1.1 1.3 2.0 1.0 1.0 0.6 0.9 1.1 1.3 1.1 1.2 1.1 0.9 1.6 1.1 1.4 1.2 1.2 1.3 1.2 1.1 1.2 0.8 0.9 0.9 1.2 1.1 1.2 1.1 1.1 1.5 1.0 1.1 1.0 0.7 1.2 1.1 1.6 1.1 1.2 2.3 1.0 0.9 0.5 0.8 1.0 1.3 1.1 1.2 1.1 0.9 1.7 1.1 1.5 1.2 1.1 1.2 1.0 1.2 1.1 1.3 0.7 0.9 0.9 1.1 1.1 1.2 1.2 1.0 1.7 Luận văn cao học Phụ lục Trắc nghiệm F so sánh phương sai & trắc nghiệm t phương sai so sánh giá trị trung bình để so sánh chất lượng kit I.S.E kit theo dõi Mẫu huyết nội kiểm F-Test Two-Sample for Variances Variable Variable Mean 3.861904762 3.831428571 Variance 3.95132619 3.482902857 Observations 21 21 df 20 20 F 1.134492219 P(F