NGHIÊN cứu đột BIẾN GEN PIK3CA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ dạ dày

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI DƯƠNG THỊ MINH THOA NGHIÊN CỨU ĐỘT BIẾN GEN PIK3CA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ DẠ DÀY LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC HÀ NỘI – 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI DƯƠNG THỊ MINH THOA NGHIÊN CỨU ĐỘT BIẾN GEN PIK3CA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ DẠ DÀY Chuyên ngành: Hóa sinh Mã số: 60720106 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Tạ Thành Văn HÀ NỘI – 2018 LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học Bộ mơn Hóa sinh trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến GS.TS Tạ Thành Văn, người thầy tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện cho học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới PGS.TS Đặng Thị Ngọc Dung ln nhiệt tình hướng dẫn, động viên, giúp đỡ cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn lời nhận xét quý báu, góp ý xác đáng Ths Nguyễn Thị Ngọc Lan, thầy cô Bộ mơn Hóa sinh thành viên nhóm nghiên cứu ung thư dày - Trường Đại học Y Hà Nội Tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn tơi tới Trung tâm kiểm chuẩn chất lượng y học trường Đại học Y Hà Nội, Ban giám đốc, phòng Kế hoạch tổng hợp, khoa Giải phẫu bệnh khác phòng khoa bệnh viện tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô hội đồng thông qua đề cương, thầy cô hội đồng chấm luận văn cho ý kiến quí báu Nghiên cứu tài trợ Quỹ Phát triển khoa học công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106-YS.02-2015.37 Tôi xin chia sẻ nỗi đau đớn, mát mà bệnh nhân người thân họ không may phải trải qua Và cuối cùng, trân trọng khắc ghi tim tình cảm mà gia đình, bạn bè, đồng nghiệp, người thân u ln bên cạnh động viên, để tơi có thành bước đầu ngày hôm Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2018 Dương Thị Minh Thoa LỜI CAM ĐOAN Tơi Dương Thị Minh Thoa, Cao học khóa 25, Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Hóa sinh, xin cam đoan Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn thầy GS.TS Tạ Thành Văn Cơng trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp nhận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Tác giả luận văn Dương Thị Minh Thoa DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AJCC American Joint Committee on Cancer (Ủy ban Hợp Hoa Kỳ Ung thư) BN Bệnh nhân CEA Carcino- Embryonic- Antigen (Kháng nguyên bào thai) CT Computerized Tomography (Chụp cắt lớp vi tính) EGFR Epidermal Growth Factor Receptor (Thụ thể yếu tố tăng trưởng thượng bì) GWAS Genome-Wide Association Studies (Nghiên cứu tương quan toàn nhiễm sắc thể) H pylori Helicobacter pylori HE Hematoxylin - Eosin HER Human Epidermal Growth Factor Receptor (Thụ thể yếu tố tăng trưởng thượng bì người) HER2 Human Epidermal Growth Factor Receptor (Thụ thể yếu tố tăng trưởng thượng bì người loại 2) HMMD OR PET_ CT Hóa mơ miễn dịch Odds Ratio (tỷ số chênh) Positron emission tomography–computed tomography (Chụp cắt lớp vi tính phát xạ) PI Phosphatidylinositol PKB Protein kinase B Rpm Revolutions Per Minute (số vòng phút) SNP Single nucleotide polymorphism (Các dạng đa hình nucleotide đơn) TCYTTG Tổ chức Y tế Thế giới TNM Tumor–Node–Metastasis (Khối u – Hạch – Di căn) UICC Union for International Cancer Control (Liên minh Kiểm soát Ung thư Quốc tế) UTBM Ung thư biểu mô UTBMDD Ung thư biểu mô dày UTBMT Ung thư biểu mô tuyến UTDD Ung thư dày VEGF Vascular Endothelial Growth Factor WHO World Health Organization (Tổ chức y tế giới) MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm chung .3 1.1.1 Dịch tễ học 1.1.2 Nguyên nhân yếu tố nguy cuả ung thư dày 1.1.3 Triệu chứng .7 1.1.4 Giải phẫu bệnh ung thư dày .12 1.1.5 Chẩn đoán giai đoạn 16 1.1.6 Điều trị UTDD 19 1.2 Gen PIK3CA .20 1.2.1 Vị trí, chức 20 1.2.2 Gen PIK3CA ung thư dày 24 1.2.3 Các nghiên cứu nước 26 1.3 Các kỹ thuật sinh học phân tử phát đột biến gen PIK3CA gây UTDD 27 1.3.1 Phản ứng PCR .27 1.3.2 Giải trình tự gen 29 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .31 2.1 Đối tượng nghiên cứu 31 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 31 2.1.2 Thiết kế nghiên cứu .31 2.1.3 Phương pháp chọn mẫu 31 2.1.4 Cỡ mẫu nghiên cứu .31 2.2 Thời gian nghiên cứu 31 2.3 Chỉ tiêu nghiên cứu .31 2.4 Kết phân tích gen 32 2.5 Dụng cụ, trang thiết bị, hóa chất nghiên cứu 32 2.5.1 Dụng cụ 32 2.5.2 Hóa chất 32 2.6 Phương pháp nghiên cứu .33 2.6.1 Mơ hình nghiên cứu 33 2.6.2 Nội dung nghiên cứu .34 2.6.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 34 2.6.4 Quy trình kỹ thuật nghiên cứu 34 2.6.5 Phương pháp xử lý số liệu: 40 2.7 Đạo đức nghiên cứu 40 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 41 3.1 Đặc điểm chung đối tượng 41 3.1.1 Đặc điểm tuổi 41 3.1.2 Đặc điểm giới 41 3.1.3 Đặc điểm tuổi theo mô bệnh học 42 3.1.4 Đặc điểm giới theo mô bệnh học 42 3.2 Kết tìm đột biến exon (codon 542, 545) exon 20 (codon 1047) gen PIK3CA 43 3.2.1 Tách DNA từ mô đúc paraffin .43 3.2.2 Phản ứng PCR .46 3.2.3 Phân tích kết đột biến .47 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 51 4.1 Đặc điểm chung nhóm nghiên cứu .51 4.1.1 Đặc điểm tuổi: 51 4.1.2 Đặc điểm giới 52 4.1.3 Đặc điểm giới theo mô bệnh học .53 4.1.4 Đặc điểm tuổi theo mô bệnh học 53 4.2 Xác định đột biến exon (codon 542, codon 545) exon 20 gen PIK3CA .54 4.3 Liên quan đột biến exon (codon 542, codon 545) exon 20 gen PIK3CA với mô bệnh học 63 4.4 Nghiên cứu phát đột biến gen PIK3CA giới 65 KẾT LUẬN 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Đặc điểm tuổi bệnh nhân 41 Bảng 3.2: Đặc điểm giới bệnh nhân 41 Bảng 3.3: Đặc điểm tuổi bệnh nhân theo mô bệnh học 42 Bảng 3.4: Đặc điểm giới bệnh nhân theo mô bệnh học 42 Bảng 3.5 Kết đo nồng độ độ tinh mẫu DNA tách từ mô ung thư dày bệnh nhân 44 Bảng 3.6 Kết đột biến gen liên quan mô bệnh học 50 Bảng 3.7 Kết đột biến gen liên quan đến số khác 50 Bảng 4.1 Các đột biến gen PIK3CA nghiên cứu .57 Bảng 4.2 Các đột biến gen PIK3CA nghiên cứu khác 58 Bảng 4.3 Kết đột biến gen PIK3CA liên quan mô bệnh học nghiên cứu khác 63 Bảng 4.4 Kết đột biến gen PIK3CA liên quan mô bệnh học nghiên cứu khác 64 Bảng 4.5 Đột biến PIK3CA ung thư khác 65 Bảng 4.6 Tỉ lệ đột biến exon 20 66 Bảng 4.7: Tỉ lệ đột biến PIK3CA bệnh nhân ung thư dày nghiên cứu 67 71 231 8.7% 1, 20 Pyrosequencing [110] 101 7.7% 20 Direct sequensing [111] 75 2.67% 20 Sanger method Nghiên cứu chúng tơi Mục đích nghiên cứu để mô tả đột biến PIK3CA loạt bệnh ung thư dày xác định mối liên quan với mơ bệnh học Tỷ lệ đột biến tổng thể 2.67%, thấp so với báo cáo tài liệu có sẵn 4-16%, dù tỷ lệ quan sát thấy báo cáo khác không đồng Lý cho không đồng tương tác cụ thể đột biến với môi trường nguồn gốc di truyền, yếu tố lên quan khác bị loại trừ Theo hiểu biết chúng tôi, đột biến liên quan đến codon 1034 độ biến nucleotid A codon 542 chưa báo cáo trước đây, không mô tả sở liệu COSMIC, có số lượng lớn nghiên cứu khu vực khác Đây nghiên cứu Việt Nam đột biến gen PIK3CA bệnh nhân UTDD nghiên cứu bước đầu cho nghiên cứu đánh giá mối liên quan đột biến gen PIK3CA yếu tố chẩn đoán sớm, tiên lượng, kháng thuốc điều trị… Nghiên cứu chúng tơi cịn nhiều thiếu sót khó khăn cỡ mẫu nhỏ, sử dụng mơ paraffin gây khó khăn cho trình tách DNA ảnh hưởng tới phản ứng sau, nghiên cứu đánh giá đột biến vùng trọng điểm, khơng đánh giá tồn gen Do chúng tơi kiến nghị cần tăng cỡ mẫu, đánh giá đột biến toàn exon gen sử dụng mô tươi cho nghiên cứu 72 KẾT LUẬN Qua nghiên cứu xác định đột biến gen PIK3CA exon 9, 20 liên quan mô bệnh học bệnh nhân ung thư dày rút số kết luận sau: Xác định 2/75 (2.67%) bệnh nhân nhóm UTDD có đột biến Trong có đột biến dị hợp tử thay G thành T vị trí c.3102 exon 20 gen PIK3CA gây biến đổi acid amin glutamic thành arpastic vị trí acid amin số 1034 Một đột biến nucleotid codon 542 exon gây đột biến dịch khung Đây đột biến chưa công bố Cả đột biến gặp bệnh nhân trẻ tuổi (36 37 tuổi) ung thư dày thể lan tỏa TÀI LIỆU THAM KHẢO Parkin D.M (2004) International variation Oncogene, 23(38), 6329– 6340 Fact Sheets by Cancer , accessed: 18/06/2017 Deng N., Goh L.K., Wang H et al (2012) A comprehensive survey of genomic alterations in gastric cancer reveals systematic patterns of molecular exclusivity and co-occurrence among distinct therapeutic targets Gut, 61(5), 673–684 Handschick K., Beuerlein K., Jurida L et al (2014) Cyclin-dependent kinase is a chromatin-bound cofactor for NF-κB-dependent gene expression Mol Cell, 53(2), 193–208 Cantley L.C (2002) The phosphoinositide 3-kinase pathway Science, 296(5573), 1655–1657 Katso R., Okkenhaug K., Ahmadi K et al (2001) Cellular function of phosphoinositide 3-kinases: implications for development, homeostasis, and cancer Annu Rev Cell Dev Biol, 17, 615–675 Samuels Y., Wang Z., Bardelli A et al (2004) High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers Science, 304(5670), 554 Willems L., Tamburini J., Chapuis N et al (2012) PI3K and mTOR signaling pathways in cancer: new data on targeted therapies Curr Oncol Rep, 14(2), 129–138 Sun M., Wang G., Paciga J.E et al (2001) AKT1/PKBalpha kinase is frequently elevated in human cancers and its constitutive activation is required for oncogenic transformation in NIH3T3 cells Am J Pathol, 159(2), 431–437 10 Itoh N., Semba S., Ito M et al (2002) Phosphorylation of Akt/PKB is required for suppression of cancer cell apoptosis and tumor progression in human colorectal carcinoma Cancer, 94(12), 3127–3134 11 Matsuoka T and Yashiro M (2014) The Role of PI3K/Akt/mTOR Signaling in Gastric Carcinoma Cancers, 6(3), 1441–1463 12 Impact of PTEN/AKT/PI3K signal pathway on the chemotherapy for gastric cancer: Journal of Clinical Oncology: Vol 24, No 18_suppl , accessed: 11/08/2017 13 Yu H.-G., Ai Y.-W., Yu L.-L et al (2008) Phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway plays an important role in chemoresistance of gastric cancer cells against etoposide and doxorubicin induced cell death Int J Cancer, 122(2), 433–443 14 Ferlay J., Shin H.-R., Bray F et al (2010) Estimates of worldwide burden of cancer in 2008: GLOBOCAN 2008 Int J Cancer, 127(12), 2893–2917 15 Marvi D.M and Krantz S.B (2011), stomach, Philadelphia : Saunders/Elsevier, c2010 16 Kamangar F., Dawsey S.M., Blaser M.J et al (2006) Opposing risks of gastric cardia and noncardia gastric adenocarcinomas associated with Helicobacter pylori seropositivity J Natl Cancer Inst, 98(20), 1445–1452 17 Boyle P., Levin B., International Agency for Research on Cancer cộng sự., btv (2008), World cancer report 2008, International Agency for Research on Cancer ; Distributed by WHO Press, Lyon : Geneva 18 Nagini S (2012) Carcinoma of the stomach: A review of epidemiology, pathogenesis, molecular genetics and chemoprevention World J Gastrointest Oncol, 4(7), 156–169 19 Anderl F and Gerhard M (2014) Helicobacter pylori vaccination: Is there a path to protection? World J Gastroenterol WJG, 20(34), 11939– 11949 20 Naserpour Farivar T., Johari P., Najafipour R et al (2014) The relationship between gastric cancer and Helicobacter pylori in formaldehyde fixed paraffin embedded gastric tissues of gastric cancer patients-scorpion real-time PCR assay findings Pathol Oncol Res POR, 20(1), 113–117 21 Liu J., Sun L.-P., Gong Y.-H et al (2010) Risk factors of precancerous gastric lesions in a population at high risk of gastric cancer Chin J Cancer Res, 22(4), 267–273 22 Saghier A.A., Kabanja J.H., Afreen S et al (2013) Gastric Cancer: Environmental Risk Factors, Treatment and Prevention J Carcinog Mutagen 23 Gunderson L.L and Donohue J.H (2013), “Cancer of the Stomach and Gastroesophageal Junction”, Bookmarks, Chapter 75, pp 1240 - 1270., 24 Noguchi Y., Yoshikawa T., Tsuburaya A et al (2000) Is gastric carcinoma different between Japan and the United States? Cancer, 89(11), 2237–2246 25 overwiew gastric cancer in the world.pdf , accessed: 18/06/2017 26 Trịnh Thị Hoa (2009) Đánh giá hiệu hoá trị bổ trợ ECX bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến dày sau phẫu thuật bệnh viên K (2006 - 2009), luận văn thạc sĩ y học, trường Đại học Y Hà Nội 27 Trịnh Hồng Sơn Hoàng Việt Dũng Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đánh giá kết điều trị phẫu thuật ung thư dày bệnh viện Hữu Nghị (Giai đoạn 1/2008 – 6/2011)" tạp chí y học Việt Nam - số 2/1013, 66–77 28 Nguyễn Lam Hòa (2008) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, giải phẫu bệnh, kết điều trị phẫu thuật ung thư dày hóa trị bổ trợ bệnh viện Việt Tiệp - Hải phòng Luận văn tiến sĩ y học, Học viện Quân Y 29 Trần Quang hưng N.L.H (2007) Kết bước đầu điều trị hóa chất bổ trợ bệnh ung thư dày phẫu thuật Hải Phịng Tạp chí Ngoại khoa số 1/2007, tr 49 – 55 30 Hoàng Trọng Thảng (2006), ung thư dày, nhà xuất Y học 31 Sleisenger M.H., Feldman M., Friedman L.S et al., btv (2010), Sleisenger and pathophysiology, Fordtran’s diagnosis, gastrointestinal and management, liver disease: Saunders/Elsevier, Philadelphia , PA 32 Nishino Y., Inoue M., Tsuji I et al (2006) Tobacco smoking and gastric cancer risk: an evaluation based on a systematic review of epidemiologic evidence among the Japanese population Jpn J Clin Oncol, 36(12), 800– 807 33 González C.A., Pera G., Agudo A et al (2003) Smoking and the risk of gastric cancer in the European Prospective Investigation Into Cancer and Nutrition (EPIC) Int J Cancer, 107(4), 629–634 34 Ohata H., Kitauchi S., Yoshimura N et al (2004) Progression of chronic atrophic gastritis associated with Helicobacter pylori infection increases risk of gastric cancer Int J Cancer, 109(1), 138–143 35 Phạm Quang Cử (1999) Mối liên quan nhiễm Helicobacter Pylori với viêm teo, dị sản ruột, loạn sản dày với ung thư dày, Luận án Tiến sĩ Y học, Học viện Quân y, Hà Nội 36 Trần Văn Huy, Vũ Thị Tuyết Lê, Đào Thị Vân Khánh, Phan Trung Nam, Đặng Công Thuận, Ngô Văn Trung, Trần Thị Phương Thảo, Huỳnh Thị Như Ý, Đoàn Thị Sâm (2006) Nghiên cứu đặc điểm nội soi, mô bệnh học tỷ lệ nhiễm Helicobacter pylori bệnh nhân ung thư dày Bệnh viện Trường Đại học Y khoa Huế Đề tài nghiên cứu khoa học cấp bộ, Đại học Huế, Trường Đại học Y khoa 37 Yatsuya H., Toyoshima H., Tamakoshi A et al (2004) Individual and joint impact of family history and Helicobacter pylori infection on the risk of stomach cancer: a nested case-control study Br J Cancer, 91(5), 929–934 38 Leung W.K.and Ng E.K.W J.J.Y.S (2009) Tumors of the Stomach Textbook of Gastroenterology , accessed: 14/06/2017 39 Hansson L.E., Nyrén O., Hsing A.W et al (1996) The risk of stomach cancer in patients with gastric or duodenal ulcer disease N Engl J Med, 335(4), 242–249 40 Tersmette A.C., Offerhaus G.J., Tersmette K.W et al (1990) Metaanalysis of the risk of gastric stump cancer: detection of high risk patient subsets for stomach cancer after remote partial gastrectomy for benign conditions Cancer Res, 50(20), 6486–6489 41 Mai Hồng Bàng (2006) Đặc điểm lâm sàng, hình ảnh nội soi mơ bệnh học ung thư dày Y học Thực hành, (535): tr 87-89., 87–89 42 Freedman N.D., Chow W.-H., Gao Y.-T et al (2007) Menstrual and reproductive factors and gastric cancer risk in a large prospective study of women Gut, 56(12), 1671–1677 43 Lê Văn Thiệu (2011) Hình ảnh nội soi mô bệnh học bệnh ung thư dày bệnh viện Việt Tiệp Hải Phòng từ 7/2010 - 6/2011 Tạp chí Y học Việt Nam – Số đặc biệt, tr 25 – 28 44 Đặng Trần Tiến (2012) Nghiên cứu đặc điểm giải phẫu bệnh ung thư biểu mô dày mối liên quan với tổn thương niêm mạc nhoài vùng ung thư Luận án tiến sĩ y học, Đại học Y Hà Nội 45 Japanese Gastric Cancer Association (2017) Japanese gastric cancer treatment guidelines 2014 (ver 4) Gastric Cancer Off J Int Gastric Cancer Assoc Jpn Gastric Cancer Assoc, 20(1), 1–19 46 Tokunaga M., Sano T., Ohyama S et al (2013) Clinicopathological characteristics and survival difference between gastric stump carcinoma and primary upper third gastric cancer J Gastrointest Surg Off J Soc Surg Aliment Tract, 17(2), 313–318 47 Quách trọng Đức, Lê Minh Huy, Nguyễn Thúy Oanh cộng (2012) Xác định bệnh nhân nguy cao bị ung thư dày nội soi: cần sinh thiết hệ thống nên sinh thiết vị trí Tạp Chí Khoa Học Tiêu Hóa Việt Nam, 1875–1882 48 Han K.B., Jang Y.J., Kim J.H et al (2011) Clinical Significance of the Pattern of Lymph Node Metastasis Depending on the Location of Gastric Cancer J Gastric Cancer, 11(2), 86–93 49 Takahashi Y., Mai M., and Kusama S (1995) Factors influencing growth rate of recurrent stomach cancers as determined by analysis of serum carcinoembryonic antigen Cancer, 75(6 Suppl), 1497–1502 50 Horie Y., Miura K., Matsui K et al (1996) Marked elevation of plasma carcinoembryonic antigen and stomach carcinoma Cancer, 77(10), 1991–1997 51 Shimada H., Noie T., Ohashi M et al (2014) Clinical significance of serum tumor markers for gastric cancer: a systematic review of literature by the Task Force of the Japanese Gastric Cancer Association Gastric Cancer Off J Int Gastric Cancer Assoc Jpn Gastric Cancer Assoc, 17(1), 26–33 52 Warneke V.S., Behrens H.-M., Böger C et al (2013) Her2/neu testing in gastric cancer: evaluating the risk of sampling errors Ann Oncol, 24(3), 725–733 53 Nguyễn Văn Thành, Lâm Thanh Cầm (2011) Đặc điểm biểu HER2 carcinom tuyến dày Y Học Thành Phố Hồ Chí Minh Phụ Bản 152, 43–46 54 Tamura G., Osakabe M., Yanagawa N., et al (2012) Comparison of HER2 immunohistochemical results using a monoclonal antibody (SV261γ) and a polyclonal antibody (for Dako HercepTest) in advanced gastric cancer Pathol Int 628 Pp 513-517, 513–517 55 An Atlas of Surgical Antonamy 2005.pdf , accessed: 15/06/2017 56 Aiko T Sasako M (1998) The new Japanese Classification of Gastric Carcinoma: Points to be revised Gastric Cancer Off J Int Gastric Cancer Assoc Jpn Gastric Cancer Assoc, 1(1), 25–30 57 Lazăr D., Tăban S., Sporea I et al (2009) Gastric cancer: correlation between clinicopathological factors and survival of patients II Romanian J Morphol Embryol Rev Roum Morphol Embryol, 50(2), 185–194 58 Van Ness M., Gregg J., Wang J et al (2012) Genetics and molecular pathology of gastric malignancy: Development of targeted therapies in the era of personalized medicine J Gastrointest Oncol, 3(3), 243–251 59 Kwon S.J (2011) Evaluation of the 7th UICC TNM Staging System of Gastric Cancer J Gastric Cancer, 11(2), 78–85 60 Đỗ Trọng Quyết, Đỗ Đức Vân, Trịnh Hồng Sơn, (2009), “Kết điều trị phẫu thuật ung thư dày Bệnh viện đa khoa tỉnh Thái Bình từ tháng 1/2006 đến 7/2008”, Y học thực hành, 669(8): tr 32-37 61 Ohtsu A (2008) Chemotherapy for metastatic gastric cancer: past, present, and future J Gastroenterol, 43(4), 256–264 62 Benson A.B (2008) Advanced Gastric Cancer: An Update and Future Directions Gastrointest Cancer Res GCR, 2(4 Suppl 2), S47–S53 63 Fornaro L., Lucchesi M., Caparello C et al (2011) Anti-HER agents in gastric cancer: from bench to bedside Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 8(7), 369–383 64 Li C., Oh S.J., Kim S et al (2009) Macroscopic Borrmann type as a simple prognostic indicator in patients with advanced gastric cancer Oncology, 77(3–4), 197–204 65 Washington K (2010) 7th edition of the AJCC cancer staging manual: stomach Ann Surg Oncol, 17(12), 3077–3079 66 Galizia G., Lieto E., Orditura M et al (2007) Epidermal growth factor receptor (EGFR) expression is associated with a worse prognosis in gastric cancer patients undergoing curative surgery World J Surg, 31(7), 1458–1468 67 Kataoka Y., Okabe H., Yoshizawa A et al (2013) HER2 expression and its clinicopathological features in resectable gastric cancer Gastric Cancer Off J Int Gastric Cancer Assoc Jpn Gastric Cancer Assoc, 16(1), 84–93 68 Alberts B., Johnson A., Lewis J et al (2002) Signaling through EnzymeLinked Cell-Surface Receptors 69 Reference G.H PIK3CA gene Genetics Home Reference, , accessed: 31/07/2017 70 Engelman J.A., Luo J., and Cantley L.C (2006) The evolution of phosphatidylinositol 3-kinases as regulators of growth and metabolism Nat Rev Genet, 7(8), 606–619 71 Manning B.D and Cantley L.C (2007) AKT/PKB signaling: navigating downstream Cell, 129(7), 1261–1274 72 Samuels Y., Diaz L.A., Schmidt-Kittler O et al (2005) Mutant PIK3CA promotes cell growth and invasion of human cancer cells Cancer Cell, 7(6), 561–573 73 Shigaki H., Baba Y., Watanabe M et al (2013) PIK3CA mutation is associated with a favorable prognosis among patients with curatively resected esophageal squamous cell carcinoma Clin Cancer Res Off J Am Assoc Cancer Res, 19(9), 2451–2459 74 Tan I.B., Ng I., Tai W.M et al (2012) Understanding the genetic basis of gastric cancer: recent advances Expert Rev Gastroenterol Hepatol, 6(3), 335–341 75 Oki E., Baba H., Tokunaga E et al (2005) Akt phosphorylation associates with LOH of PTEN and leads to chemoresistance for gastric cancer Int J Cancer, 117(3), 376–380 76 Li V.S.W., Wong C.W., Chan T.L et al (2005) Mutations of PIK3CA in gastric adenocarcinoma BMC Cancer, 5, 29 77 Welker M.E and Kulik G (2013) Recent syntheses of PI3K/Akt/mTOR signaling pathway inhibitors Bioorg Med Chem, 21(14), 4063–4091 78 Harada K., Baba Y., Shigaki H et al (2016) Prognostic and clinical impact of PIK3CA mutation in gastric cancer: pyrosequencing technology and literature review BMC Cancer, 16 79 Shi J., Yao D., Liu W et al (2012) Highly frequent PIK3CA amplification is associated with poor prognosis in gastric cancer BMC Cancer, 12, 50 80 Ito C., Nishizuka S.S., Ishida K et al (2017) Analysis of PIK3CA mutations and PI3K pathway proteins in advanced gastric cancer J Surg Res, 212, 195–204 81 Đỗ Văn Tráng Nghiên cứu kỹ thuật nạo vét hạch phẫu thuật nội soi điều trị ung thư dày vùng hang môn vị Luận án tiến sĩ y học Đại học Y Hà Nội 82 Barbi S., Cataldo I., De Manzoni G et al (2010) The analysis of PIK3CA mutations in gastric carcinoma and metanalysis of literature suggest that exon-selectivity is a signature of cancer type J Exp Clin Cancer Res CR, 29(1), 32 83 Đặng Văn Thởi (2017) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, thương tổn đánh giá kết lâu dài phẫu thuật triệt ung thư phần dày Luận án tiến sĩ y học, trường Đại học y Dược Huế 84 Vũ Quang Toản (2017) Đánh giá kết điều trị ung thư dày giai đoạn IIB-III (T4, N0-3, M0) hóa chất bổ trợ EOX sau phẫu thuật bệnh viện K Luận văn tiến sĩ, Trường Đại học y Hà Nội 85 Sự N.Đ.T (2012) Cancer registry in Thua Thien Hue period 2001-2009, Ghi nhận ung thư Thừa Thiên Huế giai đoạn 2001-2009 Tạp Chí Dược Học, 2(2), 75 86 Mabula J.B., Mchembe M.D., Koy M et al anzania: a retrospective review of 232 cases World J Surg Oncol, 10, 257 87 Petrelli F., Berenato R., Turati L et al (2017) Prognostic value of diffuse versus intestinal histotype in patients with gastric cancer: a systematic review and meta-analysis J Gastrointest Oncol, 8(1), 148–163 88 van der Woude C.J., Kleibeuker J.H., Tiebosch A.T.G.M et al (2003) Diffuse and intestinal type gastric carcinomas differ in their expression of apoptosis related proteins J Clin Pathol, 56(9), 699–702 89 Ushiku T., Arnason T., Ban S et al (2013) Very well-differentiated gastric carcinoma of intestinal type: analysis of diagnostic criteria Mod Pathol Off J U S Can Acad Pathol Inc, 26(12), 1620–1631 90 Sengüven B., Baris E., Oygur T et al (2014) Comparison of Methods for the Extraction of DNA from Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Archival Tissues Int J Med Sci, 11(5), 494–499 91 Chacon-Cortes D and Griffiths L.R (2014) Methods for extracting genomic DNA from whole blood samples: current perspectives Journal of Biorepository Science for Applied Medicine, , accessed: 03/08/2018 92 Bamford S., Dawson E., Forbes S et al (2004) The COSMIC (Catalogue of Somatic Mutations in Cancer) database and website Br J Cancer, 91(2), 355–358 93 Bader A.G., Kang S., and Vogt P.K (2006) Cancer-specific mutations in PIK3CA are oncogenic in vivo Proc Natl Acad Sci U S A, 103(5), 1475–1479 94 Kang S., Bader A.G., and Vogt P.K (2005) Phosphatidylinositol 3-kinase mutations identified in human cancer are oncogenic Proc Natl Acad Sci U S A, 102(3), 802–807 95 Lu W., Wei H., Li M et al (2015) Identification of KRAS and PIK3CA but not BRAF mutations in patients with gastric cancer Mol Med Rep, 12(1), 1219–1224 96 Velho S., Oliveira C., Ferreira A et al (2005) The prevalence of PIK3CA mutations in gastric and colon cancer Eur J Cancer Oxf Engl 1990, 41(11), 1649–1654 97 Kim J.-W., Lee H.S., Nam K.H et al (2017) PIK3CA mutations are associated with increased tumor aggressiveness and Akt activation in gastric cancer Oncotarget, 8(53), 90948–90958 98 Zhao L and Vogt P.K (2008) Helical domain and kinase domain mutations in p110alpha of phosphatidylinositol 3-kinase induce gain of function by different mechanisms Proc Natl Acad Sci U S A, 105(7), 2652–2657 99 Miled N., Yan Y., Hon W.-C et al (2007) Mechanism of two classes of cancer mutations in the phosphoinositide 3-kinase catalytic subunit Science, 317(5835), 239–242 100.Mandelker D., Gabelli S.B., Schmidt-Kittler O et al (2009) A frequent kinase domain mutation that changes the interaction between PI3Kα and the membrane Proc Natl Acad Sci U S A, 106(40), 16996–17001 101.Gabelli S.B., Huang C.-H., Mandelker D et al (2010) Structural effects of oncogenic PI3Kα mutations Curr Top Microbiol Immunol, 347, 43–53 102.Scheid M.P and Woodgett J.R (2001) PKB/AKT: functional insights from genetic models Nat Rev Mol Cell Biol, 2(10), 760–768 103.Vivanco I and Sawyers C.L (2002) The phosphatidylinositol 3-Kinase AKT pathway in human cancer Nat Rev Cancer, 2(7), 489–501 104.Downward J (2004) PI 3-kinase, Akt and cell survival Semin Cell Dev Biol, 15(2), 177–182 105.Fresno Vara J.A., Casado E., de Castro J et al (2004) PI3K/Akt signalling pathway and cancer Cancer Treat Rev, 30(2), 193–204 106.Bacus S.S., Altomare D.A., Lyass L et al (2002) AKT2 is frequently upregulated in HER-2/neu-positive breast cancers and may contribute to tumor aggressiveness by enhancing cell survival Oncogene, 21(22), 3532–3540 107.Aoki M., Blazek E., and Vogt P.K (2001) A role of the kinase mTOR in cellular transformation induced by the oncoproteins P3k and Akt Proc Natl Acad Sci U S A, 98(1), 136–141 108.Lee J.W., Soung Y.H., Kim S.Y et al (2005) PIK3CA gene is frequently mutated in breast carcinomas and hepatocellular carcinomas Oncogene, 24(8), 1477–1480 109.Chong M.-L., Loh M., Thakkar B et al (2014) Phosphatidylinositol-3- kinase pathway aberrations in gastric and colorectal cancer: Meta-analysis, co-occurrence and ethnic variation Int J Cancer, 134(5), 1232–1238 110.Sukawa Y., Yamamoto H., Nosho K et al (2012) Alterations in the human epidermal growth factor receptor 2-phosphatidylinositol 3-kinasev-Akt pathway in gastric cancer World J Gastroenterol, 18(45), 6577– 6586 111 Lee H., Hwang I.-S., Choi I.-J et al (2015) Are PIK3CA Mutation and Amplification Associated with Clinicopathological Characteristics of Gastric Cancer? Asian Pac J Cancer Prev APJCP, 16(11), 4493–4496 ... nghiên cứu đề tài: ? ?Nghiên cứu đột biến gen PIK3CA bệnh nhân ung thư dày? ?? với mục tiêu: Xác định đột biến exon 20 gen PIK3CA bệnh nhân ung thư dày Tìm hiểu mối liên quan đột biến gen PIK3CA với... bào 25 1.2.2 Gen PIK3CA ung thư dày Các đột biến gen PIK3CA tìm thấy nhiều loại ung thư, bao gồm ung thư buồng trứng, vú, phổi, não dày Các đột biến gen PIK3CA liên quan đến ung thư somatic,... Kết đột biến gen PIK3CA liên quan mô bệnh học nghiên cứu khác 63 Bảng 4.4 Kết đột biến gen PIK3CA liên quan mô bệnh học nghiên cứu khác 64 Bảng 4.5 Đột biến PIK3CA ung thư khác