Đánh Giá Chất Lượng Tinh Dịch Và So Sánh Thời Gian Tồn Trữ Tinh Dịch Heo Bằng Hai Loại Môi Trường

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y ĐINH TẤN ANH ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TINH DỊCH VÀ SO SÁNH THỜI GIAN TỒN TRỮ TINH DỊCH HEO BẰNG HAI LOẠI MÔI TRƯỜNG PHA LỖNG (BTS, NIAH2) TẠI TRẠI CHĂN NI THỰC NGHIỆM HÒA AN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP BÁC SĨ THÚ Y Cần Thơ, 12/2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y ĐINH TẤN ANH ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TINH DỊCH VÀ SO SÁNH THỜI GIAN TỒN TRỮ TINH DỊCH HEO BẰNG HAI LOẠI MƠI TRƯỜNG PHA LỖNG (BTS, NIAH2) TẠI TRẠI CHĂN NI THỰC NGHIỆM HỊA AN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP BÁC SĨ THÚ Y Giáo Viên Hướng Dẫn PHẠM HOÀNG DŨNG Cần Thơ, 12/2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài: Đánh giá chất lượng tinh dịch so sánh thời gian tồn trữ tinh dịch heo hai loại mơi trường pha lỗng (BTS, NIAH2) trại chăn ni thực nghiệm Hịa An Sinh viên thực hiện: Đinh Tấn Anh, thực số 554, ấp Hòa Đức xã Hòa An - huyện Phụng Hiệp - tỉnh Hậu Giang từ tháng 08 năm 2010 đến tháng 10 năm 2010 Cần Thơ, ngày….tháng….năm 2010 2010 Cần Duyệt Bộ Môn Thơ, ngày….tháng….năm Duyệt Giáo Viên Hướng Dẫn Cần Thơ, ngày….tháng….năm 2010 Duyệt Khoa Nông nghiệp & SHƯD i LỜI CẢM ƠN Xin cảm ơn cha mẹ anh chị tạo điều kiện vật chất lẫn tinh thần để yên tâm học tập đến Xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến  Quý thầy cô Khoa Nông Nghiệp Và Sinh Học Ứng Dụng Trường Đại Học Cần Thơ giảng dạy suốt thời gian theo học trường  Thầy Phạm Hoàng Dũng, Người tận tình hướng dẫn tơi hồn thành báo cáo luận văn  Thầy Đỗ Võ Anh Khoa trưởng trại Hòa An, chú, anh trại tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành thực tập trại  Các bạn lớp Thú Y K32 động viên, chia kinh nghiệm học tập với năm học trường Xin chân thành cảm ơn! ii MỤC LỤC Trang duyệt Lời cảm ơn Mục lục Danh sách bảng Danh sách hình Danh sách chữ viết tắt Tóm lược Chương ĐẶT VẤN ĐỀ Chương CƠ SỞ LÍ LUẬN 2.1 Đặc điểm sinh lý sinh dục heo đực 2.2 Tinh dịch-thành phần tinh dịch 2.2.1 Tinh dịch 2.2.2 Thành phần tinh dịch 2.3 Đặc điểm tinh trùng 2.3.1 Sơ lược trình sinh tinh 2.3.2 Cấu tạo tinh trùng 2.3.3 Đặc điểm sinh vật học * Đặc điểm trao đổi chất tinh trùng * Các đặc tính khác 2.4 Đặc tính tinh 2.4.1 Tác dụng chủ yếu tinh 2.4.2 Các đặc tính sinh hóa học tinh 2.5 Những nhân tố ảnh hưởng đến khả sản xuất heo đực giống 2.5.1 Giống 2.5.2 Chế độ nuôi dưỡng 2.5.3 Tuổi đực giống 2.5.4 Cường độ sử dụng 2.5.5 Chế độ vận động 2.6 Thụ tinh nhân tạo 2.6.1 Chọn heo để huấn luyện 2.6.2 Tuổi trọng lượng heo bắt đầu huấn luyện 2.6.3 Phương pháp huấn luyện mơ hình nhảy giá * Một số phương pháp huấn luyện * Kiểu giá nhảy * Phương pháp lấy tinh * Thời gian tần xuất lấy tinh 2.7 Kỹ thuật kiểm tra chất lượng tinh dịch 2.7.1 Yêu cầu chất lượng tinh dịch 2.7.2 Kiểm tra chất lượng tinh dịch iii i ii iii v vi vii viii 2 2 3 5 7 8 8 9 10 10 10 10 11 12 12 13 13 13 14 * Thể tích tinh dịch (V) * Màu sắc * Độ vẩn * pH * Hoạt lực tinh trùng * Nồng độ tinh trùng (C ) * Sức kháng tinh trùng (R) * Tinh trùng kỳ hình * Tinh trùng sống chết 2.8 Pha loãng tinh dịch dựa theo bội số pha lỗng 2.8.1 Mơi trường pha lỗng tinh * Mục đích, ý nghĩa * Ngun tắc chế mơi trường pha lỗng tinh * Các mơi trường pha lỗng tinh dịch * Phương pháp pha loãng dựa bội số pha loãng 2.9 Bảo tồn vận chuyển tinh dịch 2.9.1 Bảo tồn tinh dịch 2.9.2 Vận chuyển tinh dịch Chương PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Phương tiện 3.1.1 Thời gian địa điểm 3.1.2 Đối tượng thí nghiệm 3.1.3 Sơ lược trại chăn nuôi thực nghiệm Hịa An 3.1.4 Dụng cụ thí nghiệm 3.2 Phương pháp tiến hành 3.2.1 Phương pháp đánh giá chất lượng tinh * Thể tích (V) * pH * Hoạt lực tinh trùng (A) * Nồng độ tinh trùng (C) * Sức kháng tinh trùng * Tinh trùng kỳ hình (K) * Tỷ lệ tinh trùng chết 3.2.2 Khảo sát thời gian tồn trữ tinh dịch đến hoạt lực 50% mơi trường pha lỗng tinh dịch BTS NIAH-2 3.3 Phương pháp thu thập xử lý số liệu Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết đánh giá chất lượng tinh dịch đàn heo giống trại 4.2 Kết khảo sát thời gian tồn trữ tinh Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỂ NGHỊ iv 14 15 15 15 16 17 18 18 18 19 19 19 19 22 23 25 25 25 26 26 26 26 26 28 29 29 29 29 29 30 31 32 32 33 34 35 35 37 40 5.1 Kết luận 5.2 Đề nghị TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ CHƯƠNG 40 40 41 42 v DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Thành phần hóa học tinh dịch Bảng 2.2 Ảnh hưởng cường độ lấy tinh đến chất lượng tinh dịch Bảng 2.3 Tuổi trọng lượng thể bắt đầu huấn luyện 10 Bảng 2.4 Chỉ tiêu chất lượng tinh dịch heo đực 14 Bảng 2.5 Thể tích tinh dịch heo lần lấy tinh 14 Bảng 2.6 Thang điểm đánh giá hoạt lực tinh trùng 16 Bảng 2.7 Nồng độ tinh trùng heo 17 Bảng 2.8 Lượng kháng sinh sử dụng mơi trường pha lỗng tinh dịch heo 22 Bảng 2.9: Nồng độ tinh trùng tiến thẳng thể tích tinh dịch liều 24 Bảng 3.1 Thang điểm đánh giá hoạt lực tinh trùng 29 Bảng 4.1 Giá trị trung bình tiêu chất lượng tinh dịch theo tiêu chuẩn TCVN1859/76 đực giống trại 35 Bảng 4.2 Kết thời gian tồn trữ tinh dịch sử dụng môi trường BTS 37 Bảng 4.3 Kết thời gian tồn trữ tinh dịch sử dụng môi trường NIAH-2 38 Bảng 4.4 Kết thời gian tồn trữ tinh trung bình đực giống môi trường pha lỗng 38 vi DANH SÁCH HÌNH Hình 1: Dãy chuồng ni đực giống 42 Hình 2: Giá nhảy dùng để lấy tinh heo 42 Hình 3: Lấy tinh heo 43 Hình 4: Đo thể tích tinh ngun 43 Hình 5: Kiểm tra hoạt lực tinh trùng vật kính X–40 44 Hình 6: Kiểm tra tỷ lệ sống chết tinh trùng vật kính X–40 44 Hình 7: Đếm tinh trùng buồng đếm Neubauer vật kính X–40 45 Hình 8: Đo pH tinh dịch 45 Hình 9: Tinh trùng có hai đầu 46 Hình 10: Tinh trùng có giọt bào tương xa đầu 46 Hình 11: Mơi trường pha lỗng tinh dịch BTS 47 Hình 12: Mơi trường pha lỗng tinh dịch NIAH–2 47 vii DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT AND: acid deoxyribonucleic ATP: adenosin triphotphat ARN: acid ribonucleic BSPL: bội số pha loãng ĐPL: độ pha loãng viii Bảng 4.3 Kết thời gian tồn trữ tinh dịch sử dụng môi trường NIAH-2 Thời gian tồn trữ tinh đực giống Lần khảo sát Y107 Y-P103 L109 Y-L101 24 28 30 26 24 36 38 28 28 24 40 26 30 26 36 26 24 38 40 36 26 24 36 24 30 36 24 36 26 30 30 24 26 30 28 24 Bảng 4.4 Kết thời gian tồn trữ tinh trung bình đực giống mơi trường pha loãng Thời gian bảo quản tinh dịch đực giống (giờ) Môi trường bảo quản tinh dịch Y107 Y–P103 Y–L101 L109 Thời gian bảo tồn trung bình mơi trường pha lỗng (giờ) BTS 27,11 32,89 30,67 35,33 31,61 NIAH–2 26,44 30,22 27,78 33,56 29,50 Chú thích: Y: Yorkshire; L: Landrace; Y–L: Yorkshire–Landrace ;Y–P: Yorkshire–Pietrain; ĐPL: độ pha loãng Qua số liệu bảng cho thấy thời gian tối đa mà tinh trùng hoạt lực 50% (t5) mơi trường pha lỗng tinh dịch BTS 31, 61 giờ, cịn mơi trường pha lỗng tinh dịch NIAH–2 t5=29,50 Cùng môi trường BTS L109 có thời gian bảo quản dài (t5=35,33 giờ), Y–P103 (t5=32,89 giờ), Y–L101(t5=30,67) ngắn Y107 (t5=27,56 giờ) 38 Cùng môi trường NIAH–2 L109 có thời gian bảo quản dài (t5=33,56 giờ), Y–P103 (t5=30,22 giờ), Y–L101(t5=27,78 giờ) ngắn Y107(t5=26,44 giờ) Kết thời gian tồn trữ tinh dịch hai loại môi trường BTS NIAH–2 đến hoạt lực tinh trùng 50% ghi nhận tương đối thấp Dựa vào kết ta thấy khả bảo quản hai môi trường tương đương Theo Nguyễn Thiện ctv (2006) nhiệt độ bảo quản tinh dịch heo thích hợp 15–18oC Theo Nguyễn Tấn Anh ctv (1997), tinh trùng heo pha loãng môi trường BTS với nước khử ion, thẩm thấu ngược khử trùng tia cực tím cho kết bảo quản đến ngày, cịn mơi trường NIAH–2 bảo quản đến ngày (theo hướng dẫn sử dụng) Trong đó, nước nấu mơi trường trại nước cất lần, nhiệt độ bảo tồn từ 10–20oC nên kết tồn trữ thấp phù hợp với yêu cầu tinh sản xuất dùng để phối cho heo nái trại bán ngày 39 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Qua trình kiểm tra, đánh giá chất lượng theo dõi thời gian tồn trữ tinh tinh dịch Trung tâm Nghiên cứu – Thực nghiệm – Đa dạng Sinh học Hòa An, tỉnh Hậu Giang có kết luận sau: + Phẩm chất tinh dịch heo đực giống trại đạt theo tiêu chuẩn nhà nước TCVN 1859/76, đảm bảo phục vụ tốt cho công tác gieo tinh nhân tạo ngồi trại Khi dựa vào BSPL Y–P103 có chất lượng tốt lần lấy tinh Y–P103 cho 14,90 liều gieo, Y–L101 (14,49 liều gieo), L109 (14,39 liều gieo) thấp Y107 tạo 5,16 liều gieo + Thời gian tồn trữ tinh dịch đến hoạt lực cịn 50% mơi trường BTS trại 31,61 môi trường NIAH–2 29,50 Trong L109 có thời gian bảo quản lâu nhất, Y–P103, Y–L101 thấp Y107 Qua kết ghi nhận chênh lệch thời gian bảo quản tinh dịch hai môi trường không đáng kể nên cho thấy hiệu bảo quản loại môi trường pha loãng tinh dịch BTS NIAH-2 5.2 ĐỀ NGHỊ + Đề nghị trại sử dụng môi trường NIAH-2 thay cho môi trường BTS để tiết kiệm chi phí + Trại cần trang bị thêm găng tay, đồng phục riêng cho người phụ trách lấy tinh heo sử dụng + Trang bị thêm hóa chất dụng cụ để bảo quản tinh tốt hơn, nhằm nâng cao thời gian bảo quản, chất lượng tinh dịch 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Tiến Dũng, Dương Đình Long Nguyễn Văn Thanh, 2002 Sinh sản gia súc, NXB Nông Nghiệp–Hà Nội Nguyễn Tấn Anh, Nguyễn Quốc Đạt, 1997 Thụ Tinh Nhân Tạo Gia Súc Gia Cầm, NXB Nơng Nghiệp–Tp.Hồ Chí Minh Nguyễn Thiện, Nguyễn Tấn Anh Đỗ Hữu Hoan, 2006 Kỹ thuật thụ tinh cho lợn Việt Nam, NXB Nơng Nghiệp Lê Hồng Sĩ, 2000 Bài giảng thụ tinh nhân tạo, Đại Học Cần Thơ Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài Nguyễn Văn Tó, 2006 Thiến thụ tinh vật ni, NXB Lao Động Hà Nội Nguyễn Thiện, Đào Đức Thà, 1999 Cẩm nang kỹ thuật thụ tinh nhân tạo gia súc, gia cầm, NXB Nơng Nghiệp–Hà Nội Vũ Đình Tơn, Trần Thị Thuận, 2005 Giáo trình chăn ni lợn, NXB Hà Nội Nguyễn Thiện, 2008 Giống lợn suất cao kỹ thuật chăn nuôi hiệu quả, NXB Nông Nghiệp Nguyễn Tấn Anh, 2003 Thụ tinh nhân tạo cho gia súc, gia cầm, NXB Lao Động–Xã Hội 41 PHỤ CHƯƠNG Hình 1: Dãy chuồng ni đực giống Hình 2: Giá nhảy dùng để lấy tinh heo 42 Hình 3: Lấy tinh heo Hình 4: Đo thể tích tinh ngun 43 Hình 5: Kiểm tra hoạt lực tinh trùng vật kính X–40 Hình 6: Kiểm tra tỷ lệ sống chết tinh trùng vật kính X–40 44 Hình 7: Đếm tinh trùng buồng đếm Neubauer vật kính X–40 Hình 8: Đo pH tinh dịch 45 Hình 9: Tinh trùng có hai đầu Hình 10: Tinh trùng có giọt bào tương xa đầu 46 Hình 11: Mơi trường pha lỗng tinh dịch BTS Hình 12: Mơi trường pha loãng tinh dịch NIAH–2 47 Kết xử lý số liệu phần mềm MiniTab GIỐNG L General Linear Model: GIO versus MTBL Factor MTPL Type fixed Levels Values BTS, NIAH-2 Analysis of Variance for GIO, using Adjusted SS for Tests Source MTPL Error Total DF 16 17 Seq SS 14.22 414.22 428.44 S = 5.08811 Adj SS 14.22 414.22 R-Sq = 3.32% Adj MS 14.22 25.89 F 0.55 P 0.469 R-Sq(adj) = 0.00% Expected Mean Squares, using Adjusted SS Source MTPL Error Expected Mean Square for Each Term (2) + Q[1] (2) Error Terms for Tests, using Adjusted SS Source MTPL Error DF 16.00 Error MS 25.89 Synthesis of Error MS (2) Variance Components, using Adjusted SS Source Error Estimated Value 25.89 Least Squares Means for GIO MTPL BTS NIAH-2 Mean 35.33 33.56 SE Mean 1.696 1.696 Tukey 95.0% Simultaneous Confidence Intervals Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Lower -6.862 Center -1.778 Upper 3.307 -+ -+ -+ -+ ( * ) -+ -+ -+ -+ -6.0 -3.0 0.0 3.0 Tukey Simultaneous Tests 48 Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Difference of Means -1.778 SE of Difference 2.399 Adjusted P-Value 0.4693 T-Value -0.7412 GIỐNG Y General Linear Model: GIO versus MTBL Factor MTPL Type fixed Levels Values BTS, NIAH-2 Analysis of Variance for GIO, using Adjusted SS for Tests Source MTPL Error Total DF 16 17 Seq SS 2.000 95.111 97.111 S = 2.43812 Adj SS 2.000 95.111 R-Sq = 2.06% Adj MS 2.000 5.944 F 0.34 P 0.570 R-Sq(adj) = 0.00% Expected Mean Squares, using Adjusted SS Source MTPL Error Expected Mean Square for Each Term (2) + Q[1] (2) Error Terms for Tests, using Adjusted SS Source MTPL Error DF 16.00 Error MS 5.944 Synthesis of Error MS (2) Variance Components, using Adjusted SS Source Error Estimated Value 5.944 Least Squares Means for GIO MTPL BTS NIAH-2 Mean 27.11 26.44 SE Mean 0.8127 0.8127 Tukey 95.0% Simultaneous Confidence Intervals Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Lower -3.103 Center -0.6667 Upper 1.770 -+ -+ -+ -+ ( * -) 49 -+ -+ -+ -+ -3.0 -1.5 0.0 1.5 Tukey Simultaneous Tests Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Difference of Means -0.6667 SE of Difference 1.149 Adjusted P-Value 0.5700 T-Value -0.5800 GIỐNG Y-P General Linear Model: GIO versus MTBL Factor MTPL Type fixed Levels Values BTS, NIAH-2 Analysis of Variance for GIO, using Adjusted SS for Tests Source MTPL Error Total DF 16 17 Seq SS 32.00 388.44 420.44 S = 4.92725 Adj SS 32.00 388.44 R-Sq = 7.61% Adj MS 32.00 24.28 F 1.32 P 0.268 R-Sq(adj) = 1.84% Expected Mean Squares, using Adjusted SS Source MTPL Error Expected Mean Square for Each Term (2) + Q[1] (2) Error Terms for Tests, using Adjusted SS Source MTPL Error DF 16.00 Error MS 24.28 Synthesis of Error MS (2) Variance Components, using Adjusted SS Source Error Estimated Value 24.28 Least Squares Means for GIO MTPL BTS NIAH-2 Mean 32.89 30.22 SE Mean 1.642 1.642 Tukey 95.0% Simultaneous Confidence Intervals Response Variable GIO 50 All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Lower -7.591 Center -2.667 Upper 2.257 -+ -+ -+ -+( -* ) -+ -+ -+ -+-6.0 -3.0 0.0 3.0 Tukey Simultaneous Tests Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Difference of Means -2.667 SE of Difference 2.323 Adjusted P-Value 0.2678 T-Value -1.148 GIỐNG Y-L General Linear Model: GIO versus MTBL Factor MTPL Type fixed Levels Values BTS, NIAH-2 Analysis of Variance for GIO, using Adjusted SS for Tests Source MTPL Error Total DF 16 17 Seq SS 37.56 331.56 369.11 S = 4.55217 Adj SS 37.56 331.56 Adj MS 37.56 20.72 R-Sq = 10.17% F 1.81 R-Sq(adj) = 4.56% Expected Mean Squares, using Adjusted SS Source MTPL Error Expected Mean Square for Each Term (2) + Q[1] (2) Error Terms for Tests, using Adjusted SS Source MTPL Error DF 16.00 Error MS 20.72 Synthesis of Error MS (2) Variance Components, using Adjusted SS Source Error Estimated Value 20.72 Least Squares Means for GIO MTPL BTS Mean 30.67 P 0.197 SE Mean 1.517 51 NIAH-2 27.78 1.517 Tukey 95.0% Simultaneous Confidence Intervals Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Lower -7.438 Center -2.889 Upper 1.660 + -+ -+ -+ -( -* ) + -+ -+ -+ 7.5 -5.0 -2.5 0.0 Tukey Simultaneous Tests Response Variable GIO All Pairwise Comparisons among Levels of MTPL MTPL = BTS subtracted from: MTPL NIAH-2 Difference of Means -2.889 SE of Difference 2.146 T-Value -1.346 Adjusted P-Value 0.1970 52 ... tài ? ?Đánh giá chất lượng tinh dịch so sánh thời gian tồn trữ tinh dịch heo hai loại mơi trường pha lỗng (BTS, NIAH2) trại chăn ni thực nghiệm Hịa An” Mục tiêu đề tài - Đánh giá so sánh chất lượng. ..TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y ĐINH TẤN ANH ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TINH DỊCH VÀ SO SÁNH THỜI GIAN TỒN TRỮ TINH DỊCH HEO BẰNG HAI LOẠI MÔI TRƯỜNG... Kết thời gian tồn trữ tinh dịch sử dụng môi trường BTS 37 Bảng 4.3 Kết thời gian tồn trữ tinh dịch sử dụng môi trường NIAH-2 38 Bảng 4.4 Kết thời gian tồn trữ tinh trung bình đực giống mơi trường