Nguồn cung cấp giống trong nước không đảm bảo, chủ yếu nhập khẩu hạt giống với chi phí cao. Nghiên cứu này cung cấp một giải pháp sản xuất cây giống với giá thành thấp. Kết quả nghiên cứu cho thấy, hạt Măng tây được vô trùng tốt nhất bằng javel 75% trong 10 phút.
Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 33 Nhân giống Măng tây (asparagus officinalis L.) in vitro Hồng Thị Thủy, Cao Bích Hằng, Mai Thị Phương Hoa, Đỗ Tiến Vinh* Khoa Công nghệ Sinh học, Đại học Nguyễn Tất Thành * dtvinh@ntt.edu.vn Tóm tắt Măng tây (asparagus officinalis L.) loại trồng có giá trị kinh tế cao Thành phần hóa học Măng tây gồm có glucid; lipid; protid; cellulose; sarsasapogenin; asparagin; coniferin; rutosid; vitamin A, B1, B2, C thành phần khoáng mangan, sắt, photpho, kali, calcium four, brome, iod có tác dụng phịng trị bệnh đường tiêu hóa, tiểu đường, suy gan, thận, chống lão hóa, tăng cường sinh lực Nguồn cung cấp giống nước không đảm bảo, chủ yếu nhập hạt giống với chi phí cao Nghiên cứu cung cấp giải pháp sản xuất giống với giá thành thấp Kết nghiên cứu cho thấy, hạt Măng tây vô trùng tốt javel 75% 10 phút Môi trường nhân chồi LV có bổ sung BA 1mg/l cho số chồi phát sinh cao Tỉ lệ rễ đạt cao mơi trường LV có bổ sung NAA (3mg/l) Nghiên cứu sở cho nghiên cứu hoàn thiện qui trình sản xuất giống Măng tây sau Nhận 18.12.2019 Được duyệt 05.03.2020 Công bố 30.03.2020 Từ khóa Asparagus officinalis, Măng tây, ni cấy mơ, vi nhân giống ® 2020 Journal of Science and Technology - NTTU Đặt vấn đề Măng tây (asparagus officinalis L.) lồi sống lâu năm có khả thích nghi với nhiều vùng sinh thái khác trồng nhiều nơi giới Măng tây loại thực phẩm có hàm lượng dinh dưỡng cao, thị trường ưa chuộng Thành phần hoá học Măng tây gồm có glucid 1,70 - 2,50%; lipid 0,1 - 0,15%; protid 1,6 1,9%; cellulose 0,55 - 0,7%; vitamin A, B1, B2, C, khoảng 10% chất khoáng với mangan, sắt, photpho, kali, calcium four, brome, iod, tanin, sarsasapogenin; chồi non chứa asparagin, coniferin, rutosid Trong rễ có sarsasapogenin coniferin, acid chelidonic, mannit, asparagin, muối kali Măng tây thị trường sử dụng nhiều dạng ăn tươi, đóng hộp, sấy khơ Ngồi ra, Măng tây dược liệu giàu dược tính có tác dụng tốt phịng trị bệnh đường tiêu hóa, tiểu đường, suy gan, thận, chống lão hóa, tăng cường sinh lực Măng tây chứa nhiều chất dinh dưỡng cần thiết cho thể Bên cạnh đó, Măng tây cịn sử dụng làm vật liệu trang trí, phục vụ cho công nghiệp hoa kiểng Tại Việt Nam, Măng tây chủ yếu nhân giống theo phương pháp truyền thống từ Măng tây mẹ tách thành - phần để nhân con, phương pháp cho hệ số nhân thấp khó đảm bảo bệnh Nhân giống Măng tây hạt khó thực có hoa đực hoa khác thân dị hợp tử, giá thành hạt giống cao, tỉ lệ nảy mầm thấp làm tăng chi phí sản xuất Nhân giống kĩ thuật nuôi cấy mô sản xuất số lượng lớn giống thời gian ngắn, chất lượng đồng giữ đặc tính ưu việt mẹ, giá thành thấp, kiểm soát mầm bệnh Do đó, phương pháp nhân giống ni cấy mơ giải pháp khả thi cần nghiên cứu áp dụng Vật liệu phương pháp nghiên cứu Vật liệu: Hạt giống Măng tây UC157 Công ty Cổ phần Dũng Hà cung cấp Thành phần khoáng sử dụng cho nghiên cứu môi trường MS[1], B5[2], LV[3], WPM[4] Các chất bổ sung NAA (α - Naphthaleneacetic acid - Merck germany), IBA (Indol butyric acid- MB cell Korea), IAA (Indole-3acetic acid - MB cell Korea), BA (6 - benzylaminopurineMerck germany), Kinetin (MB cell Korea), đường sucrose 30g/l Môi trường khử trùng nồi hấp tiệt trùng 121°C, áp suất 1atm 20 phút Điều kiện ni cấy: thí nghiệm thực điều kiện nhiệt độ 26°C ± 2°C, cường độ ánh sáng 2000 - 3000 lux, thời gian chiếu sáng 10 giờ/ngày Địa điểm nghiên cứu: Phịng thí nghiệm ni cấy mơ khoa Công nghệ Sinh học Đại học Nguyễn Tất Thành Phương pháp: Thí nghiệm bố trí theo khối hồn toàn ngẫu nhiên với lần lặp lại, lần bình thủy tinh chứa Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 34 50ml mơi trường ni cấy, bình cấy mẫu Kết nghiên cứu xử lí thống kê phần mềm SAS 9.1 trắc nghiệm phân hạng LSD với độ tin cậy 99% Thiết kế thí nghiệm Thí nghiệm - Vô trùng mẫu hạt Măng tây: Hạt giống Măng tây khử trùng javel (25; 50 75%) với khoảng thời gian (5 10 phút), tiếp tục ngâm mẫu HgCl2 1‰ thời gian phút Mẫu sau rửa sạch, loại bỏ mẫu bị hoại cấy vào môi trường MS có bổ sungđường sucrose 30g/L, agar 8g/l Thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng loại môi trường khoáng đến sinh trưởng phát triển Măng tây in vitro: chồi Măng tây cắt thành đoạn có chiều dài 2cm, có Sau cấy vào bình mơi trường thí nghiệm B5 ; LV ; MS WPM có bổ sung đường sucrose 30g/l agar 8g/l Thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA Kinetin đến q trình ni cấy tạo chồi Măng tây: chồi Măng tây cắt thành đoạn có chiều dài 2cm, có Sau cấy vào bình mơi trường LV có bổ sung BA; Kinetin theo nồng độ thí nghiệm (0,1; 0,5; 1,0 2,0mg/l), đường sucrose 30g/l agar 8g/l Thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng IBA, NAA, IAA đến trình tạo rễ Măng tây in vitro: chồi Măng tây cắt thành đoạn có chiều dài 2cm, có Sau cấy vào bình mơi trường LV có bổ sung IBA, NAA, IAA với nồng độ thí nghiệm (1; 3mg/l), đường sucrose 30g/l agar 8g/l Các tiêu theo dõi: - Tỉ lệ mẫu vô trùng (%) = (tổng số mẫu vô trùng/tổng số mẫu ban đầu) x 100 - Tỉ lệ mẫu nảy mầm (%) = (tổng số mẫu vô trùng nảy mầm/tổng số mẫu vô trùng) x 100 - Số phát sinh tính cách đếm số sau tuần nuôi cấy trừ cho số ban đầu (lá/mẫu) - Số chồi phát sinh tính cách lấy số chồi sau tuần nuôi cấy trừ cho số chồi ban đầu (chồi/mẫu) - Chiều cao chồi tính từ phần tiếp giáp thân với rễ tới đỉnh chồi cao (cm) - Chiều cao trung bình chồi (cm) = tổng chiều cao chồi/tổng số chồi đo đếm - Chiều dài rễ tính từ phần tiếp giáp thân với rễ đến chóp rễ rễ dài - Chiều dài trung bình rễ (cm) = tổng chiều dài rễ/tổng số rễ đo đếm - Số rễ tính cách đếm số rễ sau tuần nuôi cấy mẫu hạt Măng tây, hạt bị nhiễm nấm khuẩn hoàn toàn sau đến 10 ngày Khi tăng nồng độ javel lên 50%, tỉ lệ mẫu vô trùng tăng lên tăng tỉ lệ thuận với thời gian khử trùng Cụ thể: Nghiệm thức 1.3 với thời gian khử trùng phút, kết cho thấy tỉ lệ mẫu vô trùng đạt 39,32%, mẫu nảy mầm sau tuần nuôi cấy với tỉ lệ 50,82%, chồi phát triển to khỏe; tỉ lệ mẫu vô trùng tăng lên đáng kể đạt 52,08%; tỉ lệ mẫu nảy mầm 48,35% nghiệm thức có thời gian khử trùng 10 phút, mẫu không xuất nhiễm sau 30 ngày nuôi cấy Với nồng độ javel 75%, kết thu sau 30 ngày nuôi cấy cho thấy: Nghiệm thức 1.6 nồng độ javel 75% thời gian 10 phút cho kết tỉ lệ mẫu nảy mầm có suy giảm (đạt 45,81%) so với nghiệm thức sử dụng nồng độ javel 50% (đạt 50,82%) Tuy nhiên, tỉ lệ mẫu vô trùng lại tăng lên gấp hai lần đạt 100% Như vậy, nồng độ javel 75% 10 phút thích hợp để vô trùng mẫu hạt Măng tây Chồi Măng tây phát triển bình thường sau 30 ngày nuôi cấy sử dụng làm nguyên liệu cho thí nghiệm Bảng Kết khảo sát nồng độ javel thời gian vô trùng mẫu Nồng độ Thời gian Tỉ lệ mẫu vô Tỉ lệ mẫu nảy javel (phút) trùng (%) mầm (%) (%) 1.1 25 0e 0c e 1.2 25 10 0c d 1.3 50 39,32 50,82a c 1.4 50 10 52,08 48,35ab 1.5 75 94,69b 46,53b a 1.6 75 10 100 45,81b Các kí tự theo sau giá trị trung bình cột thể khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa P ≤ 0,01 trắc nghiệm phân hạng LSD Nghiệm thức A B C Kết thảo luận 3.1 Kết thí nghiệm 1- Vơ trùng mẫu hạt Măng tây: Kết thí nghiệm thể Bảng cho thấy nghiệm thức 1.1 1.2 tương ứng với nồng độ javel (25%) khoảng thời gian 10 phút khơng có tác dụng vơ trùng Đại học Nguyễn Tất Thành Hình Vơ trùng mẫu Măng tây: Mẫu hạt sau vô trùng (A); Hạt nảy mầm sau ngày; Chồi Măng tây sau 10 ngày ni cấy (C) Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 35 3.2 Kết thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng loại môi trường khoáng đến sinh trưởng phát triển Măng tây in vitro: Thí nghiệm sử dụng loại môi trường MS, LV, B5 WPM Đây mơi trường sử dụng phổ biến thích hợp cho việc nhân giống nhiều loài trồng khác MS môi trường giàu dinh dưỡng thích hợp cho hầu hết loại thực vật in vitro mận (Prunus spp), Ôliu (Olea europaea), Bạch đàn (Eucalyptus dunnii Maid)… Nhiều lồi thực vật ni cấy mơi trường khống MS cho kết tốt việc tái sinh chồi thành hoàn chỉnh[5] Tuy nhiên, số thí nghiệm khác chứng minh, khống môi trường vượt mức cần thiết tăng trưởng thực vật nuôi cấy in vitro Môi trường LV với thành phần đạm thấp so với môi trường MS sử dụng thành công để nhân giống số loài trồng Cà Chua Thân Gỗ, Thanh Hao,… WPM sử dụng phổ biến nhân giống lồi thân gỗ Thơng (Loblolly pine, Pinus taeda) Dương lai (P caribaea x P elliotii)[5] B5 thích hợp cho việc tạo mơ biệt hóa phận Mơi trường Gamborg B5 xác định cho việc nuôi cấy dịch huyền phù tế bào dừa cạn (Catharanthus roseus)[6] Kết khảo sát mơi trường khống ni cấy Măng tây Thời gian khảo sát tuần cho thấy số chồi phát sinh khơng có sai khác q lớn mặt thống kê nghiệm thức Tuy nhiên, chiều cao chồi số nghiệm thức lại có khác biệt rõ rệt môi trường khảo sát Môi trường LV nghèo dinh dưỡng số chồi phát sinh sau cấy cao nghiệm thức 3,29 chồi, chiều cao chồi 13,41cm trung bình 9,34 so với mơi trường MS giàu dinh dưỡng không khác biệt tuần khảo sát Sau 40 ngày, nghiệm thức 2.2 MS bắt đầu ngả vàng dần bắt đầu tượng rụng Điều cho thấy môi trường giàu dinh dưỡng thúc đẩy nhanh trình phát triển làm cho nhanh già hóa Mơi trường B5 A B WPM tương ứng với nghiệm thức 2.3 2.4 không khác biệt nhiều số chồi chiều cao chồi dao động từ 7,23 - 9,42cm Sau 30 ngày nuôi cấy, chồi phát triển chậm lại có xu hướng rụng chết dần Với kết trên, ta khẳng định mơi trường B5 WPM khơng thích hợp để nhân giống Măng tây với tiêu ghi nhận thấp đáng kể so với môi trường MS LV Dựa kết xử lí thống kê thấy hai mơi trường MS LV khơng có khác biệt tất tiêu khảo sát Do đó, để chọn thành phần khống sử dụng cho thí nghiệm tiếp theo, chúng tơi dựa tiêu đặc điểm hình thái mẫu Kết cho thấy chồi Măng tây nuôi cấy mơi trường LV thân có màu xanh đậm, to khỏe, không bị rụng sau 40 ngày ni cấy Trong đó, mơi trường MS chồi bắt đầu rụng sau 40 ngày nuôi cấy, xuất hiện tượng phù gốc héo đọt Kết tương tự nghiên cứu Kozai cộng (1988), hoa cẩm chướng nuôi môi trường MS tăng trưởng chậm so với nuôi môi trường Enshi-Shoho có thành phần khống đơn giản hàm lượng muối toàn phần thấp hơn[7] Như vậy, thành phần mơi trường có ảnh hưởng lớn đến q trình sinh trưởng phát triển Măng tây Môi trường LV lựa chọn để nuôi cấy Măng tây thí nghiệm Bảng Kết khảo sát mơi trường khống ni cấy Măng tây Số chồi Nghiệm Môi trường Chiều cao ph t inh Số l l thức nuôi cấy chồi (cm) chồi 2.1 LV 3,29a 13,41a 9,34a a a 2.2 MS 3,41 12,84 8,81a ab c 2.3 B5 2,83 7,23 6,88b 2.4 WPM 2,01b 9,42b 4,28c Các kí tự theo sau giá trị trung bình cột thể khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa P ≤ 0,01 trắc nghiệm phân hạng LSD C D Hình Chồi Măng tây ni cấy môi trường: mẫu ban đầu (A);Môi trường B5 WPM (B); Môi trường MS (C) Môi trường LV (D) 3.3 Kết thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ cytokinin đến trình ni cấy tạo chồi Măng tây: Thí nghiệm tiến hành với nồng độ BA Kinetin biến thiên từ - 2mg/l xác định BA thích hợp cho q trình tạo chồi Măng tây Số chồi gia tăng chiều cao gia tăng Măng tây mơi trường có nồng độ Kinetin TDZ khác nghiên cứu trước Ngô Phương Ngọc (2015)[8] nghiên cứu sử Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 36 dụng môi trường môi trường MS Trong nghiên cứu này, môi trường sử dụng LV kết hợp BA Kinetin số chồi phát sinh sau khảo sát có khác biệt lớn mặt thống kê nghiệm thức 3.1 - 3.9: số chồi phát sinh 3,11 - 9,38 chồi; chiều cao chồi tốt nghiệm thức 3.1 13,11cm; số trung bình 9,48 nghiệm thức Chỉ so sánh riêng nồng độ BA biến thiên từ - 2mg/l nghiệm thức cho thấy BA 1mg/l thích hợp cho q trình phát sinh chồi cây: cao, màu xanh đậm thân mập Nồng độ BA 2mg/l có số chồi phát sinh 9,38 chồi; chiều cao chồi 6,48cm, số 5,82 - cao nghiệm thức 3.4 khơng chênh lệch thống kê xử lí Bảng Kết khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA Kinetin đến q trình ni cấy tạo chồi Măng tây Nghiệm thức BA (mg/l) Kinetin (mg/l) Số chồi phát sinh (chồi) Chiều cao chồi (cm) ĐC 3.1 3,11e 13,11a cd 3.2 0,1 4,86 11,41ab b 3.3 0,5 6,25 9,92bc 3.4 9,17a 6,88def a 3.5 9,38 6,48efg de 3.6 0,1 4,24 8,38cd d 3.7 0,5 4,76 8,00de 3.8 5,24bcd 5,99fg bc 3.9 6,11 4,98g Số (lá) 9,48a 9,37a 7,74b 6,01c 5,82c 6,03c 5,95c 4,47d 4,25d Các kí tự theo sau giá trị trung bình cột thể khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa P ≤ 0,01 trắc nghiệm phân hạng LSD Hình Chồi Măng tây ni cấy mơi trường có bổ sung Kinetin Hình Chồi Măng tây ni cấy mơi trường có bổ sung BA Hình Chồi Măng tây ni cấy mơi trường có bổ sung BA, NAA than hoạt tính Nồng độ kinetin 0,1 - 2mg/l cho thấy kết kinetin 2mg/l phát sinh chồi nhiều (6,11 chồi) chồi ốm nhạt màu; chiều cao 5,99cm nghiệm thức 3.8, số tương đồng Đại học Nguyễn Tất Thành nghiệm thức 3.8 - 3.9 (4,47 - 4,25 lá) so sánh với nghiên cứu Ngô Phương Ngọc (2015)[7] nhân chồi cây, cho thấy, việc lựa chọn mơi trường khống tác động không nhỏ đến kết nghiên cứu Tương đồng ảnh hưởng nồng độ điều hòa sinh trưởng kinetin cytokinin Nghiên cứu Ameena & Khaled (2010), nồng độ cytokinin cao làm ức chế gia tăng chiều cao Ficus anastasia.[9] Như môi trường lựa chọn để nuôi cấy tạo chồi Măng tây LV bổ sung BA 1mg/l 3.4 Kết thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng IBA, NAA, IAA đến trình tạo rễ Măng tây in vitro: Kết cho thấy tỉ lệ tạo rễ nghiệm thức có khác biệt có ý nghĩa thống kê Nồng độ NAA biến thiên Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 37 từ - 3mg/l nghiệm thức 4.1 - 4.4 cho kết tốt nghiệm thức 4.4 NAA 3mg/l chiều cao 16,52cm; tỉ lệ tạo rễ 67,51%; số rễ phát sinh trung bình 7,16 rễ; chiều dài rễ 1,53cm Thấp nghiệm thức đối chứng không bổ sung điều hịa sinh trưởng cao 12,92cm khơng hình thành rễ thời gian khảo sát Tương tự IBA IAA không gây phát sinh rễ nghiệm thức 4.5 - 4.10 Bảng Tỉ lệ phát sinh rễ bị ảnh hưởng nhiều yếu tố khác tùy theo loại cây[10]; loại chất điều hịa sinh trưởng[11], mơi trường cấy chuyền[12] Theo nghiên cứu Wang cộng sự, 2010, NAA (2,0mg/l) tỉ lệ tạo rễ 35,5% Măng tây nhạy cảm với NAA nên tạo rễ thường xuất hiện tượng phù gốc ảnh hưởng đến phát triển vườn ươm[13] Như kết luận chất điều hóa sinh trưởng thực vật NAA với nồng độ 3mg/l có tác động tốt đến trình tạo rễ Măng tây in vitro Tuy nhiên, thời gian rễ kéo dài, rễ chậm phát triển Cần phải có nghiên cứu để nâng cao hiệu rễ tỉ lệ sống Măng tây chuyển vườn ươm Bảng Kết khảo sát ảnh hưởng nồng độ IAA, IBA NAA đến q trình ni cấy tạo rễ Măng tây Điều hòa inh trưởng NAA NAA NAA IBA IBA IBA IAA IAA IAA Nghiệm thức ĐC 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 4.10 Nồng độ (mg/l) 3 Chiều cao (cm) 12,92c 14,55bc 16,27ab 16,52a 13,32c 13,74c 13,89c 13,52c 14,34c 14,55bc Tỉ lệ tạo rễ (%) Số rễ rễ 0d 35,56c 48,03b 67,51a 0d 0d 0d 0d 0d 0d 0d 4,43c 5,50b 7,16a 0d 0d 0d 0d 0d 0d Chiều dài rễ (cm) 0d 0,50c 0,85b 1,53a 0d 0d 0d 0d 0d 0d Các kí tự theo sau giá trị trung bình cột thể khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa P ≤ 0,01 trắc nghiệm phân hạng LSD A A B B C C Hình Chồi Măng tây nuôi cấy môi trường có bổ sung: IBA (A); IAA (B) NAA (C) Kết luận Hạt giống Măng tây vô trùng tốt nồng độ javel 75% 10 phút với tỉ lệ mẫu vô trùng 100%, tỉ lệ mẫu nảy mầm 45,81% Mơi trường thích hợp để ni cấy tạo chồi Măng tây LV + BA (1 mg/l) + sucrose (30 g/l) với số chồi phát sinh 9,17 (chồi/mẫu), chiều cao chồi 6,88 (cm), số 6,01 (lá/mẫu) Môi trường nuôi cấy tạo rễ Măng tây in vitro LV + NAA (3 mg/l) + sucrose (30g/l) với tỉ lệ tạo rễ (67,51%), số rễ (7,16 rễ/mẫu), chiều dài rễ (cm) chiều cao (16,52 cm) Lời cảm ơn Nghiên cứu tài trợ Quĩ Phát triển khoa học công nghệ NTTU, đề tài mã số 2019.01.39 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 38 Tài liệu tham khảo Murashige Ta, Skoog; F A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures Physiologia plantarum 1962;15(3):473-497 Gamborg, O.L.c., Miller RA, Ojima aK Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells Experimental cell research 1968;50(1):151-158 Litvay, J.D., D.C Verma, and M.A Johnson Influence of a loblolli pine (Pinus taeda L.) Culture medium and its components on growth and somatic embryogenesis of the wild carrot (Daucus carota L.) Plant Cell Reports 1985;4(6):325-328 Lloyd G & B McCown, 1981 Commercialli feasible micropropagation of mountain laurel, Kalmia latifolia, by use of shoot - tip culture In: Comb Proc Intl Plant Prop Soc., 30:421-426 Bùi Văn Lệ, Nguyễn Ngọc Hồng (2006), Ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật đường saccharose lên dịch nuôi cấy huyền phù tế bào Dừa cạn (Catharanthus roseus) Tạp chí Phát triển Khoa học Công nghệ 9(6), 5-66 Kozai T., Kubota C., Watanabe I., 1988 Effects of basal medium composition on the growth of carnation plantlets in auto and mixo-trophic tissue culture Acta Hort., 230: 159-166 Ngô Phương Ngọc, Lâm Ngọc Phương , 2015 Vi nhân giống Măng tây (Asparagus officinalis L Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ Phần B: Nông nghiệp, Thủy sản Công nghệ Sinh học: 83 – 89 Ameena Abdulla H S Al Malki and Khaled M Suliman Elmeer 2010 Influence of auxin and cytokinine on in vitro multiplication of Ficus Anastasia African Journal of Biotechnology Vol 9(5), pp 635-639 Jianwu Ren, Wenjing Chen, Mikołaj Knaflewski 2012 Factors affecting Asparagus (Asparagus officinalis L.) root development in vitro Acta Sci Pol., Hortorum Cultus 11(6) 2012, 107-118 10 Shen S., Zou D., Zhang C., Liu S., 1995.Improved rate of callus and plantlet from anther culture of asparagus (Asparagus officinalis L) Acta Hort 402, 299-305 11 Saharan V., 2010 Effect of gibberellic acid combined with saponin on shoot elongation of Asparagus officinalis Biologia Plant 54 (4), 740-742 12 Mamiya K., Sakamoto Y., 2000 Effects ofsugar concentration and strength of basal medium on conversion of somatic embryos in Asparagus officinalis L Sci Hortic 84(1-2), 15-26 13 Wang J.Y., Zhang X.P., Yang R., Li X.F., 2010 Effects of auxins on the propagation of Asparagus officinalis L J East China Normal Univ (Nature Science) 6, 101-108 Micropropagation of Asparagus officinalis L Thuy Hoang-Thi, Hang Cao-Bich, Phuong-Hoa Mai-Thi,Vinh Do-Tien* Faculty of Biotechology, Nguyen Tat Thanh University * dtvinh@ntt.edu.vn Abstract Asparagus officinalis L is a plants of high economic value, The chemical composition of asparagus includes glucid; lipid; protid; cellulose; sarsasapogenin; asparagin; coniferin; rutosid; vitamins A, B1, B2, C and manganese, iron, phosphorus, potassium, calcium four, brome, iodine ingredients Prevention and treatment of gastrointestinal disease, diabetes, liver and kidney failure, anti-oxidation, enhance vitality Suppli of domestic seedlings is not guaranteed, mainli importing seeds with high seed cost This research provides a solution for seedling production with low cost Research results show that asparagus seeds are best sterilized by javel with a sterility rate of 100% medium of shoot shoot LV supplemented BA for the number of generated shoots to reach 9.17 shoots The rooting rate reached 67.61% on LV medium supplemented with NAA This research will be the basis for further studies on asparagus seedling production process Keywords Asparagus officinalis L.,micropropagation, tissue culture Đại học Nguyễn Tất Thành ... Chồi Măng tây ni cấy mơi trường có bổ sung Kinetin Hình Chồi Măng tây ni cấy mơi trường có bổ sung BA Hình Chồi Măng tây ni cấy mơi trường có bổ sung BA, NAA than hoạt tính Nồng độ kinetin 0,1... trình sinh trưởng phát triển Măng tây Môi trường LV lựa chọn để nuôi cấy Măng tây thí nghiệm Bảng Kết khảo sát mơi trường khống ni cấy Măng tây Số chồi Nghiệm Môi trường Chiều cao ph t inh Số... hành với nồng độ BA Kinetin biến thiên từ - 2mg/l xác định BA thích hợp cho q trình tạo chồi Măng tây Số chồi gia tăng chiều cao gia tăng Măng tây mơi trường có nồng độ Kinetin TDZ khác nghiên