Bài viết trình bày xác định mối tương quan giữa chỉ số phân mảnh DNA tinh trùng (DFI) được đo bằng phương pháp khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng (SCSA) và kết quả tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI).
PHỤ KHOA – NỘI TIẾT, VÔ SINH NGUYỄN MINH TÀI LỘC, MÃ PHẠM QUẾ MAI, NGUYỄN ẤN BÌNH, NGUYỄN TRƯƠNG THÁI HÀ, PHAN THỊ KIM ANH, DƯƠNG NGUYỄN DUY TUYỀN, NGUYỄN THỊ QUỲNH TIÊN, HỒ MẠNH TƯỜNG MỐI TƯƠNG QUAN GIỮA KẾT QUẢ TIÊM TINH TRÙNG VÀO BÀO TƯƠNG NOÃN VÀ SỰ PHÂN MẢNH DNA TINH TRÙNG ĐƯỢC ĐO BẰNG PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT CẤU TRÚC NHIỄM SẮC CHẤT TINH TRÙNG (SCSA) Nguyễn Minh Tài Lộc(1), Mã Phạm Quế Mai(1), Nguyễn Ấn Bình(2), Nguyễn Trương Thái Hà(1), Phan Thị Kim Anh(3), Dương Nguyễn Duy Tuyền(3), Nguyễn Thị Quỳnh Tiên(3), Hồ Mạnh Tường(1) (1) Trung tâm Nghiên cứu Di truyền Sức khỏe Sinh sản – CGRH, (2) Đại học Quốc gia TP.HCM, (3) Bệnh viện Đa khoa Mỹ Đức Từ khóa: Khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng, vô sinh nam, phân mảnh DNA tinh trùng, ICSI, thụ tinh, mang thai Keywords: Sperm chromatin structure assay, infertile men, sperm DNA fragmentation, ICSI, fertilization, pregnancy Tóm tắt Mục tiêu: Xác định mối tương quan số phân mảnh DNA tinh trùng (DFI) đo phương pháp khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng (SCSA) kết tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu đoàn hệ tiến cứu Bệnh nhân: 65 bệnh nhân điều trị ICSI Kết thu nhận: DFI kết ICSI Kết quả: Chỉ số DFI tương quan nghịch với tỷ lệ thụ tinh sau ICI có ý nghĩa thống kê (r = -0,28; p = 0,02) Tỷ lệ thụ tinh nhóm bệnh nhân có số DFI > 15% thấp có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh nhân có DFI ≤ 15% (91% so với 84%; p = 0,03) Khơng tìm thấy tương quan có ý nghĩa thống kê số DFI chất lượng phôi Tỷ số nguy (ORs) ước tính cho kết thai sinh hóa khơng có ý nghĩa thống kê nhóm bệnh nhân có số DFI > 15% Kết tương tự tìm thấy ước tính ORs cho kết thai lâm sàng sau tuần Kết luận: Kết DFI – SCSA có tương quan nghịch với tỷ lệ thụ tinh sau ICSI Từ khóa: Khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng, vô sinh nam, phân mảnh DNA tinh trùng, ICSI, thụ tinh, mang thai Tập 14, số 04 Tháng 02-2017 Abstract 70 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Nguyễn Minh Tài Lộc, email: nmtl19111992@gmail.com Ngày nhận (received): 10/10/2016 Ngày phản biện đánh giá báo (revised): 23/10/2016 Ngày báo chấp nhận đăng (accepted): 30/12/2016 RELATIONSHIP BETWEEN THE OUTCOMES OF INTRACYTOPLASMIC SPERM INJECTION AND SPERM DNA FRAGMENTATION AS MEASURED BY THE SPERM CHROMATIN STRUCTURE ASSAY (SCSA) Objective(s): To determine the relationship between sperm chromatin structure assay (SCSA) parameters (DNA fragmentation index – DFI) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) outcomes Patient(s) and method Design: Prospective cohort study Đặt vấn đề tinh trùng nhằm giúp bác sĩ đưa phương pháp điều trị hiệu cho bệnh nhân Trong năm gần đây, nhiều nghiên cứu cho thấy nguy thất bại thụ tinh xảy cao người đàn ông mang bất thường DNA tinh trùng [3], bất thường DNA tinh trùng liên quan mật thiết tới vô sinh nam giới [4] Cơ hội mang thai cặp vợ chồng tiến hành bơm tinh trùng vào buồng tử cung (IUI) giảm đáng kể số DFI người chồng gần 30% gần không số DFI vượt 30% [5] Xa nữa, cần đánh giá ảnh hưởng phân DNA tinh trùng lên kết kỹ thuật hỗ trợ sinh sản khác thụ tinh ống nghiệm (IVF) hay ICSI Tuy có nhiều chứng cho thấy ảnh hưởng phân mảnh DNA tinh trùng lên tỷ lệ thụ tinh, chất lượng phôi, tỷ lệ mang thai tỷ lệ trẻ sinh sống [6, 7] Tuy nhiên, nghiên cứu tập trung chủ yếu nước châu Âu, Hoa Kỳ Trung Quốc mà chưa có nghiên cứu thực Việt Nam Vì vậy, mục tiêu nghiên cứu chúng tơi xác định tương quan số phân mảnh DNA tinh trùng (được đo phương pháp SCSA) kết sau ICSI bao gồm tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ phơi tốt, kết thai sinh hóa kết thai lâm sàng Đồi tượng phương pháp nghiên cứu Thiết kế nghiên cứu Đây nghiên cứu đoàn hệ tiến cứu với kết sau ICSI bao gồm tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ phơi tốt, Tập 14, số 04 Tháng 02-2017 Sự tồn vẹn DNA tinh trùng yếu tố then chốt truyền đạt thông tin di truyền từ người cha Các trường hợp dị tật tinh trùng tồn 30% – 50% trường hợp vô sinh nam giới [1] Các bất thường tinh trùng bao gồm mật độ thấp tinh trùng, tinh trùng di động kém, hình dạng tinh trùng bất thường ảnh hưởng lên q trình có thai tự nhiên Sự đời kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) giúp cho bệnh nhân nam gặp bất thường nêu điều trị cách hiệu [2] Tuy nhiên, tổn thương liên quan tới DNA tinh trùng (được tính số phân mảnh DNA tinh trùng – DFI) nguyên nhân dẫn tới thất bại chu kỳ điều trị ICSI Vấn đề mối quan tâm nhà khoa học lâm sàng học, nhắm tới việc nâng cao hiệu điều trị vô sinh nguyên nhân nam giới Hiện nay, phương pháp khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng (SCSA) công cụ hiệu việc đánh giá phân mảnh DNA tinh trùng SCSA cho phép đánh giá 5000 tế bào tinh trùng/mẫu tinh dịch với thời gian ngắn so với phương pháp truyền thống (SCD hay COMET) sử dụng kính hiển vi đếm 200 – 400 tinh trùng/ mẫu tinh dịch yêu cầu kinh nghiệm kỹ thuật viên Với nhiều ưu điểm mang tính thống kê cao, độ bao quát chất lượng mẫu lớn, độ nhạy độ đặc hiệu cao nên SCSA xem phương pháp tiềm cho việc đánh giá tổn thương DNA TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 14(04), 70 - 74, 2017 Patient(s): Sixty-five couples undergoing ICSI Main outcome measure(s): DFI and ICSI outcomes Result(s): A significant negative association between DFI and ICSI fertilization rates were found (r = -0.28; p = 0.02) Patients with DFI > 15% had lower ICSI fertilization rates than patients with DFI ≤ 15% (91% and 84%; p = 0.03) No significant association was found between DFI and good quality embryo Odd ratios (ORs) for chemical pregnancy calculated were not significant in groups with DFI > 15% The such results were seen when calculated ORs for pregnancy (> weeks) Conclusion(s): SCSA parameters had a significant negative association with ICSI fertilization rates Keywords: Sperm chromatin structure assay, infertile men, sperm DNA fragmentation, ICSI, fertilization, pregnancy 71 PHỤ KHOA – NỘI TIẾT, VÔ SINH Tập 14, số 04 Tháng 02-2017 72 NGUYỄN MINH TÀI LỘC, MÃ PHẠM QUẾ MAI, NGUYỄN ẤN BÌNH, NGUYỄN TRƯƠNG THÁI HÀ, PHAN THỊ KIM ANH, DƯƠNG NGUYỄN DUY TUYỀN, NGUYỄN THỊ QUỲNH TIÊN, HỒ MẠNH TƯỜNG kết thai sinh hóa kết thai lâm sàng liên quan tới số DFI khác bệnh nhân Thu nhận mẫu tinh dịch từ bệnh nhân Nghiên cứu thu nhận 65 mẫu tinh dịch từ cặp vợ chồng điều trị vô sinh phương pháp ICSI bệnh viện đa khoa Mỹ Đức từ tháng 04/2015 tới tháng 06/2016 Tiêu chuẩn nhận loại mẫu Tiêu chuẩn nhận mẫu Bệnh nhân nam cặp vợ chồng điều trị vô sinh phương pháp ICSI có tuổi từ 20 đến 40 tuổi Khơng bị triệu chứng vơ tinh (azoospermia), tinh (cryptospermia), trường hợp thu nhận tinh trùng từ phương pháp PESA, TESA, TESE Khơng q trình điều trị bệnh hiểm nghèo Không mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục Tiêu chuẩn loại mẫu Chu kỳ điều trị ≥ Tuổi vợ ≥ 38 tuổi Số nang noãn có kích thước 14 mm trước ngày chọc hút < nang Số trứng ICSI < trứng Vợ có bất thường tử cung (Lạc nội mạc tử cung, u xơ tử cung niêm, dị dạng tử cung…) Niêm mạc tử cung < mm Chỉ định IVM, IUI Trữ phơi tồn Mẫu tinh dịch sau thu nhận phương pháp thủ dâm đánh giá mật độ, độ di động hình dạng tinh trùng theo chuẩn WHO (2010), liệu mô tả bảng Mẫu tinh dịch tiếp chia ra, phần cho việc lọc rửa tiến hành ICSI, phần lại vận chuyển trung tâm Nghiên cứu Di truyền Sức khỏe Sinh sản (CGRH) để tiến hành đánh giá số DFI phương pháp SCSA Quy trình SCSA Quy trình SCSA tiến hành mô tả Evenson (2000) [8], có số thay đổi nhằm tối ưu hóa quy trình Việt Nam Mẫu tinh dịch sau pha loãng xử lý với dung dịch HCl lỗng (0,08N) 30 giây với mục đích biến tính DNA tinh trùng Sau đó, tế bào tinh trùng mẫu nhuộm với thuốc nhuộm DNA huỳnh quang acridine orange (AO) 30 giây Sau 20,000 tinh trùng/mẫu chạy qua máy đếm dòng chảy tế bào FCM BD Accuri C6 (BD, Hoa Kỳ), DNA nguyên vẹn cho tín hiệu màu xanh DNA bị tổn thương cho tín hiệu màu đỏ Chỉ số DFI tính phần mềm BD Accuri C6 (ver 1.0, 264.21) với độ xác phịng thí nghiệm chúng tơi > 95% (CV < 5%) Quy trình ICSI Quá trình ICSI tiến hành 40 – 42 sau tiêm hCG theo quy trình thường quy bệnh viện Mỹ Đức Kết thụ tinh đánh giá sau 17 ± sau ICSI dựa vào xuất tiền nhân Tiến hành đánh giá chất lượng phôi vào 66 ± sau ICSI trước phôi chuyển vào tử cung người mẹ Việc đánh giá chất lượng phôi dựa vào đồng thuận alpha (2011) [9] Vào ngày thứ 12 sau thời điểm ICSI, tiến hành xác định kết thai sinh hóa dựa vào nồng độ βhCG (βhCG ≥ 5mIU/mL) đánh giá thai lâm sàng vào tuần thứ sau ICSI Phân tích số liệu Dữ liệu thu phân tích phần mềm R (ver 3.2.4) Chỉ số DFI thu từ 65 bệnh nhân chia làm nhóm (DFI ≤ 15%, 15% < DFI ≤ 30%, DFI > 30%) đánh giá mức độ tương quan với tỷ lệ thụ tinh tỷ lệ phôi tốt Để đánh giá ảnh hưởng phân mảnh DNA tinh trùng lên kết thai, nhóm DFI ≤ 15% (nhóm có chất lượng DNA tinh trùng tốt) sử dụng làm nhóm tham khảo, nhóm cịn lại tính tỷ số nguy (ORs) cho kết thai sinh hóa kết thai lâm sàng Kết Tỷ lệ thụ tinh Tỷ lệ thụ tinh tỷ lệ số noãn thụ tinh tổng số noãn tiến hành ICSI, tỷ lệ thụ tinh trung bình từ 65 cặp vợ chồng 87,35% ± 12,78% Trong nhóm bệnh nhân, khác biệt có ý nghĩa thống kê tìm thấy nhóm bệnh nhân có số DFI ≤ 15% nhóm cịn lại (91% so với 84%; p = 0,03), kết thể biểu đồ Khi tiến hành đánh giá mức độ tương quan số DFI tỷ lệ thụ tinh, nhận thấy tương quan nghịch có ý nghĩa thống kê (r = -0,28; p = 0,02) nghĩa số DFI cao tỷ lệ thụ tinh có xu hướng giảm, kết thể biểu đồ Tỷ lệ phôi tốt Tỷ lệ phôi tốt tỷ lệ phôi loại I phôi loại II (theo đồng thuận alpha, 2011) tổng số phôi thu nhận Tỷ lệ phơi tốt trung bình thu nhận 68,07% ± 31,7% khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê tỷ lệ phôi tốt ghi nhận nhóm bệnh nhân Khi tiến hành đánh giá mức độ tương quan số DFI tỷ lệ phôi tốt, không ghi nhận tương quan có ý nghĩa thống kê (p = 0,3), kết thể biểu đồ Tỷ lệ thai sinh hóa thai lâm sàng Bảng thể tỷ số nguy ORs cho tỷ lệ thai sinh hóa tỷ lệ thai lâm sàng nhóm bệnh nhân có số DFI > 15% (nhóm DFI ≤ 15% Bàn luận Nghiên cứu chúng tơi tìm thấy tương quan nghịch có ý nghĩa thống kê số DFI tỷ lệ thụ tinh cặp vợ chồng điều trị ICSI Điều có nghĩa, bệnh nhân có số DFI cao tỷ lệ thụ tinh giảm Kết nghiên cứu phù hợp với số nghiên cứu khác tương quan nghịch số DFI tỷ lệ thụ tinh sau ICSI [10 – 13] Chúng không tìm tương quan có ý nghĩa thống kê số DFI tỷ lệ phôi tốt, kết trái ngược với nghiên cứu vừa nêu kết lại tương tự với nghiên cứu tác giả khác [1, 5, 14] Một nghiên cứu phân tích tổng hợp (meta – analysis) thực Collins (2008) cho thấy có mối tương quan nghịch số DFI tỷ lệ có thai chu kỳ điều trị IVF/ICSI [15] Tuy nhiên, nhiều tác giả cho tầm vóc nghiên cứu chưa đủ mạnh để cung cấp định lâm sàng bệnh nhân điều trị IVF/ICSI [16] Kết nghiên cứu đưa tỷ số OR khơng có ý nghĩa thống kê cho khả có thai Tuy nhiên, nhận thấy số DFI 15% khả mang thai sinh hóa bệnh nhân giảm 3,0% – 4,0% Dữ liệu nghiên cứu cho thấy suy giảm tỷ lệ thụ tinh sau ICSI số DFI tăng Vì vậy, chúng tơi cho ảnh hưởng phân mảnh Bảng 1: Dữ liệu bệnh nhân thu nhận vào nghiên cứu Đặc điểm Trung bình ± độ lệch chuẩn Tuổi chồng 33,2 ± 3,5 Tuổi vợ 31,2 ± 3,1 Mật độ (x106 tinh trùng/mL) 33,1 ± 23,2 Độ di động (%) 28,1 ± 13,0 Biểu đồ dạng tinh trùng (%) 1,2 ± 0,6 Giới hạn 27 – 40 23 – 38 – 112 – 60 0–4 Biểu đồ 1: Tỷ lệ thụ tinh nhóm bệnh nhân có số DFI khác Chú thích: Nhóm bệnh nhân có số DFI ≤ 15% có tỷ lệ thụ tinh cao nhóm bệnh nhân có số DFI > 15% có ý nghĩa thống kê (p = 0,03) Biểu đồ 2: Sự tương quan số DFI tỳ lệ thụ tinh sau ICSI Chú thích: Mối tương nghịch số DFI tỷ lệ thụ tinh (hệ số tương quan r = -0,28 p = 0,02) Phương trình hồi quy y = -0,38x + 95 Biểu đồ 3: Sự tương quan số DFI tỷ lệ phôi tốt sau ICSI Chú thích: Khơng tìm tương quan số DFI tỷ lệ phôi tốt sai ICSI (p = 0,3 > 0,05) Tập 14, số 04 Tháng 02-2017 Bảng 2: Tỷ số nguy cho thai sinh hóa thai lâm sàng sau chuyển phôi cặp vợ chồng nhóm có số DFI khác Thai sinh hóa Thai lâm sàng Nhóm DFI Số lượng (%) OR (95% CI) P - value OR (95% CI) P - value – 15 25 Ref Ref 15 – 30 29 0,96 (0,80 – 1,14) 0,62 1,05 (0,88 – 1,25) 0,62 > 30 11 0,97 (0,87 – 1,27) 0,59 1,20 (0,94 – 1,53) 0,14 Chú thích: Nhóm bệnh nhân DFI ≤ 15% dùng làm nhóm chứng (ref) Khơng có tương quan có ý nghĩa thống kê nhóm bệnh nhân có số DFI khác (p > 0,05) DNA tinh trùng tồn giai đoạn sớm trình thụ tinh, trình phụ thuộc chủ yếu vào chất lượng hai giao tử Chính điều này, bệnh nhân có mức độ phân mảnh DNA tinh trùng cao khó thụ tinh mang thai tự nhiên Sau thụ tinh, hợp tử nuôi cấy phát triển thành phôi trước chuyển vào tử cung người mẹ Trong giai đoạn này, trình phát triển hợp tử cịn phụ thuộc vào nhiều yếu tố chất TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 14(04), 70 - 74, 2017 sử dụng làm nhóm tham khảo – ref) Tuy nhiên, chúng tơi khơng tìm thấy khác biệt có ý nghĩa thống kê nhóm bệnh nhân có số DFI khác (p > 0,05) 73 PHỤ KHOA – NỘI TIẾT, VÔ SINH NGUYỄN MINH TÀI LỘC, MÃ PHẠM QUẾ MAI, NGUYỄN ẤN BÌNH, NGUYỄN TRƯƠNG THÁI HÀ, PHAN THỊ KIM ANH, DƯƠNG NGUYỄN DUY TUYỀN, NGUYỄN THỊ QUỲNH TIÊN, HỒ MẠNH TƯỜNG lượng phịng ni cấy, chất lượng mơi trường ni cấy, chất lượng nỗn… nên chúng tơi cho cỡ mẫu chưa đủ độ lớn để đánh giá ảnh hưởng phân mảnh DNA tinh trùng lên chất lượng phôi Sau chuyển vào tử cung người mẹ, phôi làm tổ phát triển thành thai (thai sinh hóa tuần thứ thai lâm sàng tuần thứ sau ICSI) Trong giai đoạn này, tuổi người mẹ, số phôi chuyển yếu tố ảnh hưởng tới khả thành công chu kỳ ICSI [17] Trên sở đó, so sánh tỷ lệ trường hợp phát triển từ giai đoạn thai sinh hóa tới giai đoạn thai lâm sàng phụ nữ trẻ (tuổi ≤ 30) phụ nữ lớn tuổi (tuổi > 30) Kết cho thấy nhóm phụ nữ trẻ, tỷ lệ cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm phụ nữ 30 tuổi (100% 68%; p < 0,05) Như vậy, bên cạnh số DFI tuổi người vợ đóng vai trị quan trọng phát triển thai Bên cạnh kết sau ICSI, chúng tơi tiến hành phân tích mối liên hệ số DFI số tinh dịch đồ mật độ tinh trùng, độ Tập 14, số 04 Tháng 02-2017 Tài liệu tham khảo 74 Larson-Cook KL, Brannian JD, Hansen KA, Kasperson KM, Evenson DP Relationship between the outcomes of assisted reproductive techniques and sperm DNA fragmentation as measured by the sperm chromatin structure assay Fer & Ster 2003 Oct; 80(4):895-902 Nagy ZP, Liu J, Joris H, et al The result of intracytoplasmic sperm injection is not related to any three basic sperm parameters Hum Reprod 1995; 10:1123-9 Sakkas D, Urmer F, Bianchi PG, et al Sperm chromatin abnormalities can influence decondensation after intracytoplasmic sperm injection Hum Reprod 1996; 11:837-43 Giwercman A, Linsteddt L, Larsson M, Bungum M, Spano M & Rylander L Sperm chromatin structure assay as an independent predictor of fertility in vivo: a case – control study Int J Androl 2010; 33:221-227 Bungum M, Humaidan P, Axmon A, Spano M, Bungum L, Giwercman A Sperm DNA Integrity assessment in prediction of assisted reproduction technology outcome Hum Reprod 2007; 22:174-179 Zhang Z, Zhu L, Jiang H, Chen H, Chen Y & Dai Y Sperm DNA fragmentation index and pregnancy outcome after IVF or ICSI: a metaanalysis J Assist Reprod Genet 2015; 32:17-26 Niu ZH, Shi HJ, Zhang HQ, Zhang AJ, Sun YJ & Feng Y Sperm chromatin structure assay results after swim-up are related only to embryo quality but not to fertilization and pregnancy rates following IVF Asian J Androl 2011, 13:862-866 Evenson DP & Jost L Sperm chromatin structure assay is useful for fertility assessment Method in Cell Science 2000; 22(2-3):169-189 Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology The Istanbul consensus workshop on di động hình dạng tinh trùng Tuy nhiên, khơng có số tinh dịch đồ tương quan có ý nghĩa thống kê với số DFI (p > 0,05) Vì vậy, số tinh dịch đồ phản ánh chất lượng DNA tinh trùng cần phương pháp chẩn đốn tổn thương DNA tinh trùng nhằm tìm phương pháp điều trị hợp lý cho bệnh nhân Vì SCSA khảo nghiệm khơng xâm lấn với độ nhạy độ đặc hiệu cao nên SCSA công cụ hữu dụng nhằm đánh giá số DFI cho nam giới [8] Từ kết DFI – SCSA, bác sĩ chọn phương pháp điều trị hiệu cho bệnh nhân, đồng thời, khuyến khích bệnh nhân cải thiện chất lượng sống để cải thiện số phân mảnh DNA tinh trùng Kết luận Có tương quan nghịch số DFI tỷ lệ thụ tinh bệnh nhân điều trị ICSI Dựa vào kết này, đưa xét nghiệm phân mảnh DNA tinh trùng ứng dụng lâm sàng để góp phần tiên lượng kết điều trị embryo assessment: preceedings of an expert meeting Hum Reprod 2011; 26(6):1270 – 1283 10 Virro MR, Larson-Cook KL & Evenson DP Sperm chromatin strucrure assay (SCSA) parameters are related to fertilizatiom, blastocyst development, and ongoing pregnancy in in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection cycles Fer & Ster 2004; 81:1289-1295 11 Check JH, Graziano V, Cohen R, Krotec J & Check ML Effect of an abnormal sperm chromatin structure assay (SCSA) on pregnancy outcome following (IVF) with ICSI in previous IVF faliures Arch Androl 2005; 51:121-124 12 Zini A, Meriano J, Kder K, Jarvi K, Laskin CA & Cadesky K Potential adverse effect of sperm DNA damage on embryo quality after ICSI Hum Reprod 2005; 20:3476-3480 13 Jiang HH, HeXJ, Song B & Cao YX Sperm chromatin integrity test for predicting the outcomes of IVF and ICSI Zhonghua Nan Ke Xue 2011; 17:1083-1086 14 Dar S, Grover SA, Moskovstev SI, Swanson S, Baratz A & Librach CL In vitro fertilization – Intracytoplasmic sperm injection outcome in patients with a markedly high DNA fragmentation index (> 50%) Fer & Ster 2013; 100:75-80 15 Collins JA, Barnhart KT & Schlegel PN Do sperm DNA integrity tests predict pregnancy with in vitro fertilization? Fer & Ster 2008; 89:823-831 16 Oleszczuk K, Giwercman A & Bungum M Sperm chromatin structure assay in prediction of in vitro fertilization outcome Andrology 2016; 4:290-296 17 Hồ Mạnh Tường, Vương Thị Ngọc Lan, Phạm Việt Thanh, Nguyễn Thị Ngọc Phượng Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn: Các yếu tố liên quan đến tỷ lệ thành công Y Học TpHCM 2002; 6:361-364 ... giới Hiện nay, phương pháp khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng (SCSA) công cụ hiệu việc đánh giá phân mảnh DNA tinh trùng SCSA cho phép đánh giá 5000 tế bào tinh trùng/ mẫu tinh dịch với... xác định tương quan số phân mảnh DNA tinh trùng (được đo phương pháp SCSA) kết sau ICSI bao gồm tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ phơi tốt, kết thai sinh hóa kết thai lâm sàng Đồi tượng phương pháp nghiên... nhiên Sự đời kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) giúp cho bệnh nhân nam gặp bất thường nêu điều trị cách hiệu [2] Tuy nhiên, tổn thương liên quan tới DNA tinh trùng (được tính số phân