Nghiên cứu tác động của nano bạc đến quá trình phát sinh hình thái trong nuôi cấy in vitro hoa đồng tiền

Nghiên cứu được tiến hành với mục đích đánh giá tác động của nano bạc đến quá trình phát sinh hình thái của hoa đồng tiền nuôi cấy mô từ nguồn vật liệu là các mẫu lá in vitro.

Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 11(96)/2018 NGHIÊN CỨU TÁC ĐỘNG CỦA NANO BẠC ĐẾN Q TRÌNH PHÁT SINH HÌNH THÁI TRONG NI CẤY IN VITRO HOA ĐỒNG TIỀN Bùi Thị Thu Hương1, Đồng Huy Giới1, Trần Thị Thu Thủy1, Nguễn Thị Ngọc Quỳnh1 TĨM TẮT Nghiên cứu tiến hành với mục đích đánh giá tác động nano bạc đến trình phát sinh hình thái hoa đồng tiền ni cấy mô từ nguồn vật liệu mẫu in vitro Kết nghiên cứu rằng: (i) Mơi trường thích hợp cho việc tạo mơ sẹo từ mẫu in vitro hoa Đồng tiền môi trường MS có bổ sung 30 g/l saccharose; 6,5 g/l agar; 1,5 mg/l 2,4D; pH 5,7 10 ppm nano bạc, với tỉ lệ tạo mô sẹo cao đạt 95,56%, mơ sẹo mềm có màu vàng sáng; (ii) Mơi trường MS có bổ sung 0,7 mg/l BA; 0,1 mg/l IAA ppm nano bạc cho hiệu tái sinh chồi từ mô sẹo tốt nhất, tỉ lệ tái sinh chồi đạt 84,45%, số chồi trung bình đạt 3,29 chồi/mô sẹo sau tuần nuôi cấy; (iii) Môi trường MS có bổ sung mg/l BAP; 0,1 mg/l α- NAA ppm nano bạc cho hiệu nhân nhanh chồi hoa Đồng tiền tốt nhất, hệ số nhân chồi đạt 8,22 lần, chiều cao chồi trung bình đạt 5,75 cm sau tuần nuôi cấy; (iv) Chồi in vitro hoa Đồng tiền rễ hiệu mơi trường MS có bổ sung 50 g/l saccharose; 6,5 g/l agar; 1,0 mg/l α-NAA ppm nano bạc, tỉ lệ chồi rễ đạt 100%, số rễ trung bình 5,73 rễ/chồi chiều dài rễ trung bình đạt 5,93 cm sau tuần ni cấy Từ khóa: Hoa đồng tiền, in vitro, mơi trường MS, nano bạc I ĐẶT VẤN ĐỀ Hoa Đồng tiền (Gerbera jamesonii Bolus ex Hook F.) loài hoa đẹp, có giá trị kinh tế cao, trồng phổ biến Việt Nam nhiều quốc gia giới, nhiên nguồn giống tốt cung cấp cho sản xuất thiếu, người trồng hoa thường phải mua giống khơng rõ nguồn gốc, có mua phải giống bị thối hóa, giống bị nhiễm bệnh (Đỗ Năng Vịnh, 2003) Phương pháp nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật áp dụng phổ biến nhiều đối tượng trồng khác Một ưu điểm bật nhân giống phương pháp nuôi cấy mô hệ số nhân cao, thời gian ngắn tạo số lượng lớn giống tương đối đồng nhất, giống bệnh, giá thành thấp Hiện có số nghiên cứu thành cơng việc nhân giống hoa đồng tiền nuôi cấy mô từ nguồn vật liệu khác nụ hoa non, cuống lá, phiến (Bhavya Bhargava et al., 2013; Shylaja et al., 2014; Nguyễn Thị Mỹ Duyên Trương Thị Hằng, 2014) Tuy nhiên số nghiên cứu cho kết chưa thực tốt, bên cạnh việc sử dụng đế hoa non làm nguyên liệu cho ni cấy mơ làm thất số lượng lớn bơng hoa đẹp, cần thiết tìm kiếm loại vật liệu khác phù hợp để thay Vật liệu nano nói chung nano bạc nói riêng ứng dụng rộng rãi đời sống năm gần đây, tạo nên bước đột phá nhiều lĩnh vực Nano bạc ý sử dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật đặc điểm kháng khuẩn tuyệt vời nó, bên cạnh nano bạc cịn có vai trị tích cực tới phát sinh hình thái in vitro (Rostami and Shahsavar , 2009; Shokri et al., 2015) Xuất phát từ lí nêu trên, nghiên cứu thực nhằm nhân giống hoa Đồng tiền nuôi cấy mô từ nguồn vật liệu in vitro, đồng thời bước đầu sử dụng nano bạc nhằm nâng cao hiệu q trình ni cấy II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Chồi in vitro giống hoa Đồng tiền ĐTH125 có nguồn gốc từ Hà Lan Dung dịch nano bạc với kích thước hạt dao động 15 - 20 nm điều chế Bộ môn Sinh học, Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam; môi trường MS (T Murashige & F Skoog, 1962) số loại hóa chất cần thiết khác sử dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Điều kiện thí nghiệm Mơi trường ni cấy điều chỉnh pH 5,7 hấp khử trùng 1210C, áp suất 1,1 atm 15 phút Các thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên (RCB), cơng thức lần nhắc lại, lần nhắc lại 15 mẫu Điều kiện phịng ni: Nhiệt độ 250C - 270C; Cường độ ánh sáng: 2400 lux - 2600 lux; Độ ẩm: 70%; Thời gian chiếu sáng: 16 h chiếu sáng/ngày Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam 55 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 11(96)/2018 2.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nano bạc đến khả tạo mô sẹo từ mẫu in vitro Các mẫu in vitro bệnh cắt thành mảnh có kích thước cm ˟ cm, sau cấy vào mơi trường tạo mơ sẹo: Mơi trường MS có bổ sung 30 g/l saccharose; 6,5 g/l agar; 1,5 mg/l 2,4D (Nguyễn Thị Mỹ Duyên ctv., 2014) bổ sung thêm nano bạc với nồng độ khác (0, 6, 8, 10 12 ppm) Tiến hành theo dõi tỉ lệ tạo mô sẹo đặc điểm mô sẹo sau tuần nuôi cấy 2.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo Các mơ sẹo có màu vàng sáng, mềm chuyển sang mơi trường tái sinh chồi: Mơi trường MS có bổ sung 0,7 mg/l BA; 0,1 mg/l IAA (Phạm Thị Bích Ngọc ctv., 2009) bổ sung thêm nano bạc với nồng độ 0, 2, 4, ppm Tiến hành theo dõi tiêu tỉ lệ mô sẹo tái sinh chồi, số chồi/mô sẹo sau tuần nuôi cấy 2.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng nano bạc đến khả nhân nhanh chồi hoa Đồng tiền từ chồi in vitro Các chồi sinh trưởng bình thường có đầy đủ thân (khơng bị dị dạng), cao từ - cm sử dụng làm vật liệu cấy chuyển sang môi trường nhân nhanh: Mơi trường MS có bổ sung 30 g/l saccharose; mg/l BAP; 0,1 mg/l α-NAA; 6,5 g/l agar (Son et al 2011; Shylaja et al., 2014) bổ sung thêm nano bạc với nồng độ 0, 2, 4, ppm Tiến hành theo dõi tiêu hệ số nhân chồi, chiều cao chồi, đặc điểm chồi sau tuần, tuần tuần nuôi cấy 2.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng nano bạc đến khả rễ chồi hoa Đồng tiền Chồi hoa Đồng tiền khỏe mạnh có từ - nuôi cấy môi trường rễ: Môi trường MS có bổ sung 30 g/l saccharose, 1,0 mg/l α-NAA, 6,5 g/l agar (Nguyễn Văn Hồng, 2009; Paduchuri et al., 2010) bổ sung thêm nano bạc với nồng độ 0, 2, 4, ppm Tiến hành theo dõi tiêu tỉ lệ rễ, số rễ/chồi, chiều dài rễ, màu sắc rễ sau tuần nuôi cấy 2.2.6 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu xử lý theo chương trình Microsoft Excel IRRISTART 5.0 Các công thức so sánh tiến hành theo phương pháp kiểm tra sai khác giá trị trung bình phép ước lượng sử dụng tiêu chuẩn LSD (Least Significant Different) độ tin cậy 95% 56 2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực phịng thí nghiệm Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam từ tháng 8/2017 đến tháng 8/2018 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến khả tạo mô sẹo từ mẫu in vitro Nhằm đánh giá tác động nồng độ nano bạc khác đến trình hình thành mơ sẹo, thí nghiệm mẫu in vitro hoa Đồng tiền nuôi cấy môi trường có bổ sung nano bạc với nồng độ khác ppm, ppm, 10 ppm 12 ppm (Emad et al., 2015) Kết thu sau tuần nuôi cấy thể bảng Bảng Kết tạo mô sẹo từ mẫu in vitro hoa Đồng tiền sau tuần nuôi cấy Nồng độ nano bạc (ppm) Tổng số mẫu 45 30 66,67d 45 34 75,56c 45 38 84,45b 10 45 43 95,56a 12 45 30 66,67d CV (%) LSD0,05 Số mẫu Tỷ lệ tạo tạo mô mô sẹo sẹo (%) Đặc điểm Mô sẹo Mềm, màu vàng sáng Mềm, màu vàng sáng Mềm, màu vàng sáng Mềm, màu vàng sáng Rắn, màu sậm 4,6 0,77 Ghi chú: Bảng 1, 2, 3, 4: Trong cột, giá trị mang chữ khác khác có ý nghĩa mức α = 0,05 Kết nghiên cứu thể bảng cho thấy, tỷ lệ tạo thành mô sẹo công thức thí nghiệm cao, dao động từ 66,67% đến 95,56% Ở hầu hết cơng thức có bổ sung nano bạc cho tỉ lệ tạo mô sẹo cao so với công thức đối chứng (không bổ sung nano bạc) Khi tăng nồng độ nano bạc từ ppm - 10 ppm tỉ lệ tạo mơ sẹo tăng lên theo, cơng thức bổ sung 10 ppm nano bạc cho tỉ lệ tạo mô sẹo cao đạt 95,56%, cao có ý nghĩa thống kê so với tất cơng thức cịn lại, mơ sẹo mềm có màu vàng sáng Tuy nhiên, tăng nồng độ nano bạc lên 12 ppm tỉ lệ tạo mơ sẹo lại giảm xuống đáng kể, cịn 66,67%, mơ sẹo rắn có màu vàng sậm Theo kết nghiên cứu Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 11(96)/2018 Zainab M Almutairi (2016), hạt cà chua xử lý nano bạc với nồng độ lớn mg/l gây tăng số phân bào, có xuất hình dạng sai nhiễm sắc thể làm giảm tỷ lệ nảy mầm Điều ppm ppm lý giải nồng độ thích hợp nano bạc kích thích tạo mơ sẹo mạnh, ngưỡng lại gây ức chế phân chia tế bào gây biến đổi màu sắc mô sẹo ppm 10 ppm 12 ppm Hình Ảnh mơ sẹo hoa Đồng tiền sau tuần nuôi cấy môi trường có bổ sung nano bạc với nồng độ khác 3.2 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo Kết đánh giá ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo hoa Đồng tiền sau tuần ni cấy trình bày Bảng Bảng Kết tái sinh chồi từ mô sẹo sau tuần nuôi cấy Nồng Số mô Tỷ lệ Số chồi Số Tổng độ nano sẹo tái sinh trung bình mẫu số bạc tái sinh chồi (chồi/mô chồi (ppm) chồi (%) sẹo) d 45 19 42,22 21 1,10d 45 29 64,45b 62 2,14c a 45 38 84,45 125 3,29a 45 22 48,89c 56 2,55b CV (%) 11,2 4,6 LSD0,05 3,8 0,2 Kết thu bảng cho thấy, tất công thức bổ sung nano bạc cho tỉ lệ mô sẹo tái sinh chồi số chồi trung bình cao so với cơng thức khơng bổ sung nano bạc mức có ý nghĩa, điều chứng tỏ nano bạc có tác dụng thúc đẩy tái sinh chồi từ mô sẹo hoa Đồng tiền Cụ thể, tiêu tỉ lệ tái sinh chồi, công thức không bổ sung nano bạc cho tỉ lệ tái sinh chồi 42,22%, cơng thức bổ sung nano bạc tỉ lệ tái sinh chồi dao động từ 48,89% (bổ sung ppm) đến 84,45% (bổ sung ppm) Đối với tiêu số chồi trung bình, cơng thức khơng bổ sung nano bạc thu 1,10 chồi/mơ sẹo, cơng thức bổ sung nano bạc dao động từ 2,14 đến 3,29 chồi/mơ sẹo Trong cơng thức thí nghiệm, cơng thức bổ sung ppm nano bạc cho kết tốt với tỉ lệ tái sinh chồi đạt 84,45% hệ số tái sinh chồi đạt 3,29 chồi/ mô sẹo 3.3 Ảnh hưởng nano bạc đến khả nhân nhanh từ chồi in vitro hoa Đồng tiền Nhân nhanh chồi giai đoạn thiếu với quy trình sản xuất giống có tính chất cơng nghiệp phương pháp nhân giống in vitro Trong giai đoạn sinh trưởng phát triển mô nuôi cấy phụ thuộc vào điều kiện nuôi cấy (nhiệt độ, ánh sáng), môi trường nuôi cấy (thành phần dinh dưỡng, chất điều tiết sinh trưởng tỷ lệ chúng) Tùy loại mà người ta bổ sung vào môi trường nuôi cấy chất điều tiết sinh trưởng với nồng độ tỷ lệ khác để thu hệ số nhân chồi chất lượng chồi tốt Kết nghiên cứu ảnh hưởng nano bạc đến khả nhân nhanh từ chồi in vitro hoa Đồng tiền thể Bảng Hình Bảng Ảnh hưởng nano bạc đến khả nhân nhanh chồi hoa Đồng tiền Nồng Hệ số nhân chồi Chiều độ cao trung bình sau nano tuần tuần tuần bạc tuần (cm) Đặc điểm chồi sau tuần nuôi cấy ppm 1,17c 3,38c 5,71c 4,22b Chồi xanh, phát triển bình thường ppm 2,42a 6,62a 8,22a 5,75a Chồi xanh, phát triển tốt ppm 1,62b 3,78b 6,55b 2,86c Chồi xanh, phát triển không ppm 0,62d 2,35d 3,44d 2,13d Chồi có màu tím, phát triển CV (%) 1,2 2,5 2,9 2,3 LSD0,05 0,14 0,19 0,33 0,21 57 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 11(96)/2018 ppm ppm ppm ppm Hình Chồi hoa Đồng tiền in vitro sau tuần ni cấy mơi trường có bổ sung nồng độ nano bạc khác Từ kết thu cho thấy nồng độ nano bạc khác có ảnh hưởng khác đến trình nhân nhanh chồi hoa Đồng tiền Cụ thể, công thức bổ sung ppm ppm nano bạc cho hệ số nhân chồi cao có ý nghĩa so với cơng thức đối chứng không bổ sung nano bạc thời gian theo dõi Đặc biệt công thức bổ sung ppm nano bạc cho kết tốt với hệ số nhân chồi 8,22 lần sau tuần ni cấy, chiều cao trung bình chồi đạt 5,75 cm, chồi xanh, phát triển tốt đồng Tuy nhiên tăng nồng độ nano bạc lên ppm ppm hệ số nhân chồi, chiều cao trung bình chồi chất lượng chồi giảm đáng kể Ở công thức bổ sung ppm nano bạc, hệ số nhân chồi sau tuần nuôi cấy đạt 6,55 lần, cao so với công thức không bổ sung nano bạc (5,71), nhiên công thức chồi tạo có cuống phát triển nên chiều cao trung bình chồi đạt 2,36 cm, thấp so với công thức không bổ sung nano bạc (4,22 cm) Ở công thức bổ sung ppm nano bạc tiêu hệ số nhân chồi, chiều cao trung bình chồi chất lượng chồi cho kết thấp nhất, xuất nhiều chồi dị dạng, chồi có nhiều chuyển sang màu tím (Hình 2) Theo kết nghiên cứu Nguyễn Thị Mỹ Duyên cộng tác viên (2014), sử dụng chất điều tiết sinh trưởng khác để nhân chồi hoa Đồng tiền kết thu tốt sau tuần nuôi cấy hệ số nhân chồi đạt 5,4 lần, chiều cao chồi đạt 1,87 cm; Son cộng tác viên (2011) thu hệ số nhân chồi tốt nhân nhanh chồi giống hoa đồng tiền là 7,4 lần giống Arianna, 4,6 lần giống Bonnie 5,4 lần giống Tobia Như nhận thấy, bổ sung ppm nano bạc vào môi trường nhân nhanh chồi hoa đồng tiền cho hiệu tốt so với kết nghiên cứu trước công bố 3.4 Ảnh hưởng nano bạc đến khả rễ chồi hoa Đồng tiền Kích thích cho chồi rễ cơng đoạn cuối 58 quy trình nhân giống phương pháp nuôi cấy in vitro Kết thúc giai đoạn thu hoàn chỉnh (đầy đủ rễ thân, lá) cung cấp cho giai đoạn luyện vườn ươm Kết nghiên cứu ảnh hưởng nano bạc đến khả rễ chồi hoa Đồng tiền sau tuần nuôi cấy thể Bảng Bảng Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến khả rễ chồi hoa Đồng tiền sau tuần nuôi cấy Nồng độ nano bạc (ppm) Tỷ lệ rễ (%) Số rễ/ chồi (rễ) Chiều dài rễ (cm) Màu sắc rễ 100 1,73d 2,50d Vàng nhạt 100 3,47b 3,33c Vàng nhạt 100 5,73a 5,93a Vàng nhạt 100 2,53 4,23 Vàng nhạt CV (%) 1,9 4,0 LSD0,05 0,12 0,30 c b Kết thu bảng cho thấy nano bạc có ảnh hưởng tích cực đến khả rễ chồi hoa Đồng tiền in vitro, tất công thức bổ sung nano bạc cho số rễ/chồi chiều dài rễ cao so với công thức không bổ sung nano bạc Đối với tiêu số rễ/chồi, công thức không bổ sung nano bạc 1,73 rễ/chồi, tiêu công thức bổ sung nano bạc dao động từ 2,53 (ở công thức bổ sung ppm nano bạc) đến 5,73 (ở công thức bổ sung ppm nano bạc) Đối với tiêu chiều dài rễ, công thức không bổ sung nano bạc chiều dài trung bình rễ 2,50 cm, tiêu cơng thức bổ sung nano bạc dao động từ 3,33 cm (ở công thức bổ sung ppm nano bạc) đến 5,93 cm (ở công thức bổ sung ppm nano bạc) Công thức cho hiệu rễ tốt công thức bổ sung ppm nano bạc với 5,73 rễ/chồi chiều dài rễ trung bình đạt 5,93 cm Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 11(96)/2018 Hình Rễ hoa Đồng tiền mơi trường có bổ sung nồng độ nano bạc khác sau tuần nuôi cấy Ghi chú: CT1: ppm; CT2: ppm; CT3: ppm; CT4: ppm ppm ppm ppm ppm Hình Rễ hoa Đồng tiền mơi trường có bổ sung nồng độ nano bạc khác sau tuần nuôi cấy IV KẾT LUẬN - Mơi trường thích hợp cho việc tạo mô sẹo từ mẫu in vitro hoa Đồng tiền mơi trường MS có bổ sung 30 g/l saccharose; 6,5 g/l agar; 1,5 mg/l 2,4D; pH 5,7 10 ppm nano bạc Sau tuần nuôi cấy, tỉ lệ tạo mô sẹo đạt 95,56%, mô sẹo mềm có màu sáng - Khả tái sinh chồi từ mô sẹo đạt hiệu cao mơi trường MS có bổ sung 0,7 mg/l BA; 0,1 mg/l IAA ppm nano bạc, tỉ lệ tái sinh chồi đạt 84,45%, số chồi trung bình đạt 3,29 chồi/mô sẹo sau tuần nuôi cấy - Hiệu nhân nhanh chồi hoa Đồng tiền tốt môi trường MS có bổ sung mg/l BAP; 0,1 mg/l α- NAA ppm nano bạc, hệ số nhân chồi đạt 8,22 lần, chiều cao chồi đạt 5,75 cm sau tuần nuôi cấy - Chồi in vitro hoa Đồng tiền rễ hiệu môi trường MS có bổ sung 50 g/l saccharose; 6,5 g/l agar; 1,0 mg/l α-NAA ppm nano bạc, với 5,73 rễ/chồi chiều dài rễ trung bình đạt 5,93 cm sau tuần nuôi cấy LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu hỗ trợ kinh phí từ đề tài “Nghiên cứu sử dụng nano bạc nuôi cấy in vitro hoa Đồng tiền (Gerbera jamesonii Bolus ex Hook F.)”, mã số: SV 2017 - 12 - 14 MST TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Thị Mỹ Duyên, Trương Thị Hằng, 2014 Khảo sát khả tạo mô sẹo từ cuống lá, phiến nụ hoa non phục vụ cho việc vi nhân giống hoa Đồng tiền (Gerbera jamesonii Bolus) Tạp chí Khoa học, Trường Đại học An Giang, (3): 114-120 Nguyễn Văn Hồng, 2009 Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống hoa Đồng tiền phương pháp nuôi cấy mô Thái Nguyên Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên Phạm Thị Bích Ngọc, Phan Ngơ Hồng, 2009 Tìm hiểu phát sinh chồi từ mô sẹo dây chiều (Tetracera scandens L.) Tạp chí Phát triển KH&CN, 12 (7): 79-85 Đỗ Năng Vịnh, 2003 Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhânh nhanh giống hoa Đồng tiền nhập nội cơng nghệ in vitro Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, 8: 1012-1014 Bhavya Bhargava, B S Dilta, Y.C Gupta, S.R Dhiman & Manju Modgil, 2013 Studies on micropropagation of gerbera (Gerbera jamesonii Bolus) Indian Journal of Applied Research, (11): 8-11 Emad A Ewais, Said A Desouky, Ezzat H Elshazly, 2015 Evaluation of Mô sẹo Responses of Solanum nigrum L Exposed to Biologically Synthesized Silver Nanoparticles Nanoscience and Nanotechnology, (3): 45-56 Murashige T & F Skoog, 1962 A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue cultures Physiol Plant, 15: 473-497 Son N.V., A.N Mokashi, R Hegde, V.S Patil & S Lingaraju, 2011 Response of gerbera (Gerbera jamesonii Bolus) varieties to micropropagation Karnataka J Agric Sci., 24 (3): 354-357 59 ... độ nano bạc đến khả tạo mô sẹo từ mẫu in vitro Nhằm đánh giá tác động nồng độ nano bạc khác đến q trình hình thành mơ sẹo, thí nghiệm mẫu in vitro hoa Đồng tiền ni cấy mơi trường có bổ sung nano. .. ppm nano bạc, với 5,73 rễ/chồi chiều dài rễ trung bình đạt 5,93 cm sau tuần nuôi cấy LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu hỗ trợ kinh phí từ đề tài ? ?Nghiên cứu sử dụng nano bạc nuôi cấy in vitro hoa Đồng tiền. .. nano bạc đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo hoa Đồng tiền sau tuần ni cấy trình bày Bảng Bảng Kết tái sinh chồi từ mô sẹo sau tuần nuôi cấy Nồng Số mô Tỷ lệ Số chồi Số Tổng độ nano sẹo tái sinh trung