Ảnh hưởng của BAP và NAA đến quá trình phát sinh hình thái mô nuôi cấy của giống cúc Vàng Hè

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN - LÊ THỊ NGỌC SÂM ẢNH HƢỞNG CỦA BAP (6 – benzyl amino purin) VÀ NAA (α – napthalene acetic acid) ĐẾN QUÁ TRÌNH PHÁT SINH HÌNH THÁI MƠ NI CẤY CỦA GIỐNG CÚC VÀNG HÈ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật HÀ NỘI, 2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI TRƢỜNG KHOA ĐẠI HỌC SƢ–PHẠM SINH KTNNHÀ NỘI KHOA SINH – KTNN - LÊ THỊ NGỌC SÂM LÊ THỊ NGỌC SÂM ẢNH HƢỞNG CỦA BAP (6 – benzyl amino purin) VÀ NAA (α – napthalene acetic acid) ĐẾN QUÁ TRÌNH PHÁT SINH HÌNH THÁI MƠ NI CẤY ẢNH HƢỞNG CỦA BAP VÀ NAA ĐẾN QUÁ TRÌNH CỦA GIỐNG CÚC VÀNG HÈ PHÁT SINH HÌNH THÁI MƠ NI CẤY CỦA GIỐNG CÚC VÀNG HÈ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI Chuyên ngành: Sinh lý học thực vậtHỌC Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: Ngƣời hƣớng dẫn khoa học PGS TS NGUYỄN VĂN ĐÍNH PGS.TS NGUYỄN VĂN ĐÍNH HÀ NỘI, 2018 Hà Nội, 2018 LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Nguyễn Văn Đính – Khoa Sinh KTNN Trƣờng Đại học Sƣ phạm Hà Nội tận tình hƣớng dẫn, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Tôi xin cảm ơn tới Ban Giám hiệu trƣờng ĐHSP Hà Nội 2, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh – KTNN trƣờng ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành khóa luận Trong thời gian thực đề tài nhận đƣợc giúp đỡ tận tình TS La Việt Hồng, Mai Thị Hồng - Phòng thí nghiệm Sinh lý học thực vật giúp đỡ, đóng góp ý kiến để tơi hồn thành đề tài khóa luận, nhân xin gửi lời cảm ơn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Phòng thí nghiệm Sinh lí thực vật, Phòng thí nghiệm Thực vật- trƣờng ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi thiết bị, phƣơng tiện để tơi hồn thành khóa luận Cảm ơn gia đình bạn bè ln động viên, góp ý cho tơi q trình học tập hồn thành đề tài Hà Nội, 14 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Lê Thị Ngọc Sâm LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi PGS.TS Nguyễn Văn Đính hƣớng dẫn số kết cộng tác với cộng khác Các số liệu, kết nghiên cứu khóa luận trung thực chƣa đƣợc công bố Hà Nội, 14 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Lê Thị Ngọc Sâm DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT NAA α- Napthalene acetic acid BAP 6- Benzyl amino purin MS Murashige Skoog ĐHSP Đại học Sƣ phạm Cs Cộng TP.HCM Thành phố Hồ Chí Minh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài .1 Mục đích nghiên cứu 3 Nhiệm vụ nghiên cứu .3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm sinh học sinh thái hoa cúc 1.1.1 Đặc điểm phân loại 1.1.2 Phân bố giống hoa cúc trồng .5 1.1.3 Đặc điểm hình thái .5 1.1.4 Điều kiện sinh thái hoa cúc 1.2.Tình hình nghiên cứu nhân giống cúc giới Việt Nam 1.2.1 Các nghiên cứu giới .8 1.2.2 Các nghiên cứu Việt Nam .10 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG - PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu .12 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 12 2.1.2 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 12 2.1.3 Điều kiện nuôi cấy 12 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 13 2.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 13 2.2.2 Phương pháp nghiên cứu 14 2.3 Địa điểm tiến hành nghiên cứu 15 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đặc điểm phát sinh hình thái từ mơ giống hoa cúc Vàng Hè .16 3.1.1 Sự tạo mô sẹo (callus) 16 3.1.2 Sự phát sinh chồi từ mô sẹo .18 3.2 Đặc điểm giải phẫu mô sẹo từ giống hoa cúc Vàng Hè 21 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO 27 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Cơng thức thí nghiệm Bảng 3.1 Số chồi phát sinh môi trƣờng khác nhau, sau tuần ni cấy DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Các mảnh đƣợc cắt từ thân hoa cúc Hình 3.1 Mơ sẹo hình thành từ cuống mơi trƣờng MS với BAP 0,75mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.2 Mơ sẹo hình thành từ mép mơi trƣờng MS với BAP 1,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.3 Mơ sẹo hình thành mặt tiếp xúc với mơi trƣờng nuôi cấy môi trƣờng MS với BAP 1,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.4 Mơ sẹo bắt đầu hình thành sau 10 – 14 ngày nuôi cấy môi trƣờng MS với BAP 0,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.5 Các nốt nhỏ li ti xuất sau 10 ngày ni cấy Hình 3.6 Chồi mọc riêng lẻ mơi trƣờng MS với BAP 0,25mg/l NAA 0,5mg/l Hình 3.7 Chồi mọc thành cụm môi trƣờng MS với BAP 0,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.8 Chồi hồn chỉnh mơi trƣờng MS với BAP 0,75mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.9 Chồi hồn chỉnh mơi trƣờng MS với BAP 0,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.10 Mơ sẹo biệt hóa thành rễ môi trƣờng MS với BAP 0,75 mg/l NAA 0,25 mg/l Hình 3.11 Mơ sẹo biệt hóa thành rễ môi trƣờng MS với BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l Hình 3.12 Lát cắt ngang qua v ng tạo mô sẹo cúc sau tuần nuôi cấy môi trƣờng MS với BAP 1,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.13 Li be bắt màu hồng cacmin môi trƣờng MS với BAP 0,75 mg/l NAA 0.25 mg/l Hình 3.14 Các vòng Li be màu hồng đậm hình thành sau tuần ni cấy môi trƣờng MS với BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l Hình 3.15 Các trung tâm mơ phân sinh chồi hình thành mơi trƣờng MS với BAP 0,75mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.1 Hình 3.2 Hình 3.3 Hình 3.4 Chú thích: Hình 3.1 Mơ sẹo hình thành từ cuống môi trƣờng MS với BAP 0,75mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.2 Mơ sẹo hình thành từ mép môi trƣờng MS với BAP 1,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.3 Mơ sẹo hình thành mặt tiếp xúc với môi trƣờng nuôi cấy môi trƣờng MS với BAP 1,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.4 Mơ sẹo bắt đầu hình thành sau 10 – 14 ngày nuôi cấy môi trƣờng MS với BAP 0,5mg/l NAA 0,25mg/l 17 3.1.2 Sự phát sinh chồi từ mô sẹo Trên môi trƣờng nuôi cấy, khối mơ sẹo có biểu khác nhau, mơ sẹo phát triển khơng theo quy luật nhƣng có khả biệt hóa thành rễ, chồi để hình thành hoàn chỉnh Sau 10 ngày mẫu cấy xuất chồi nhỏ li ti ( Hình 3.5) Sau khoảng 16-18 ngày, quan sát đƣợc chồi xuất mơ sẹo dƣới kính hiển vi soi nổi.Các chồi xuất riêng lẻ thành cụm (Hình 3.6, 3.7) Ở tuần thứ 3, tất mẫu cấy có chồi xuất Ở tuần thứ 4, chồi tiếp tục phát triển diện rõ với mang nhiều lông, số lƣợng chồi xuất môi trƣờng khác biệt (Hình 3.8, 3.9) Hình 3.5 Hình 3.6 Chú thích: Hình 3.5 : Các chồi nhỏ li ti xuất sau 10 ngày ni cấy 18 Hình 3.6 Chồi mọc riêng lẻ môi trƣờng MS với BAP 0,25mg/l NAA 0,5mg/l Hình 3.7 Hình 3.9 Hình 3.8 Hình 3.10 Chú thích: Hình 3.7 Chồi mọc thành cụm môi trƣờng MS với BAP 0,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.8 Chồi hồn chỉnh mơi trƣờng MS với BAP 0,75mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.9 Chồi hồn chỉnh môi trƣờng MS với BAP 0,5mg/l NAA 0,25mg/l 19 Hình 3.10 Mơ sẹo biệt hóa thành rễ môi trƣờng MS với BAP 0,75 mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.11 Mơ sẹo biệt hóa thành rễ môi trƣờng MS với BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l Bảng 3.1 Số chồi phát sinh môi trƣờng khác nhau, sau tuần nuôi cấy Công thức Số chồi / mẫu Công thức 4,33 ± 3,22ab Công thức 15,33 ± 6,43c Công thức ± 3b Công thức 10 ± 4,58bc Công thức 11 ± 3c Công thức ± 4b Công thức 3,67 ± 1,53a Công thức ± 1,73a Các chữ khác cột thể khác biệt với mức ý nghĩa α = 0,05 Kết khảo sát ảnh hƣởng tổ hợp chất BAP kết hợp với NAA đến 20 khả phát sinh chồi in vitro hoa cúc Vàng Hè cho thấy khác biệt có ý nghĩa BAP NAA kích thích tạo chồi cụ thể BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l cho chất lƣợng tốt số lƣợng chồi (15,33 chồi/mẫu) Số chồi hình thành mơi trƣờng bổ sung BAP 0,75 mg/l NAA 0,5 mg/l, chủ yếu tăng kích thƣớc mô sẹo công thức 3.2 Đặc điểm giải phẫu mô sẹo từ giống hoa cúc Vàng Hè Mơ sẹo đƣợc hình thành sau ni cấy mô môi trƣờng đƣợc quan sát mẫu giải phẫu cắt ngang kính hiển vi soi Quan sát giải phẫu nhận thấy có phân chia mạnh tế bào nhu mô vị trí vết thƣơng Các tế bào tiếp tục phân chia lộn xộn tạo thành khối mơ sẹo (Hình 3.12) Nhƣ vậy, mẫu cấy mơi trƣờng có diện auxin cytokinin giúp cho tế bào nhu mô v ng vết thƣơng phân chia để hình thành khối mơ sẹo Sau 14 ngày ni cấy công thức xuất mô dẫn Libe li ti bắt màu hồng cacmin ( Hình 3.13).Tuy nhiên tỉ lệ bắt màu khác cơng thức kích thƣớc nốt li ti tăng dần qua tuần ni cấy, sau hình thành vòng li be màu tím đậm Mẫu đƣợc ni môi trƣờng bổ sung BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l xuất nốt li ti bắt màu cacmin nhiều Chứng tỏ Libe xuất sớm nhanh cơng thức ( Hình 3.14) Qua lát cắt dọc chồi có cấu trúc đầy đủ chồi với mô phân sinh phác thể xung quanh (Hình 3.15) 21 Hình 3.12 Hình 3.13 Chú thích: Hình 3.12 Lát cắt ngang qua v ng tạo mơ sẹo cúc sau tuần nuôi cấy mơi trƣờng MS với BAP 1,5mg/l NAA 0,25mg/l Hình 3.13 Li be bắt màu hồng cacmin môi trƣờng MS với BAP 0,75 mg/l NAA 0.25 mg/l Hình 3.14a 22 Hình 3.14b Hình 3.14c Hình 3.14d Hình 3.14; 3.14b; 3.14c; 3.14d Các vòng Li be màu hồng đậm hình thành sau tuần ni cấy mơi trƣờng MS với BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l Hình 3.15 Các trung tâm mơ phân sinh chồi hình thành môi trƣờng MS với BAP 0,75mg/l NAA 0,25mg/l 23 MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG Q TRÌNH NI CẤY 24 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận BAP NAA kích thích tạo mơ sẹo tạo chồi: - Môi trƣờng MS bổ sung BAP 0,5 mg/l với NAA 0,25 mg/l môi trƣờng MS bổ sung BAP 0,75 mg/l với NAA 0,25 mg/l có hiệu cao tạo mơ sẹo Mơ sẹo có dạng mềm, màu trắng xanh - Mẫu hoa cúc Vàng Hè đƣợc nuôi môi trƣờng bổ sung BAP 0,5 mg/l NAA 0,25 mg/l ph hợp cho trình phát sinh hình thái giống cúc Vàng Hè Kiến nghị Mô sẹo tạo từ mô với tỷ lệ cao có khả sinh trƣởng nhanh nên cần tiếp tục nghiên cứu mơi trƣờng thích hợp cho tái mô sẹo tạo chồi Tiếp tục nuôi cấy để tạo in vitro dƣỡng nhà lƣới 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tài liệu tiếng Việt Tạ Nhƣ Thục Anh, Trần Dụ Chi, Vũ Văn Vụ, 2008 Bƣớc đầu nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến phát sinh hình thái mơ hoắc hƣơng (Pogostemon cablin (Blaco) Benth) nuôi cấy in vitro Tạp chí Khoa học Đại học Quốc gia Hà Nội, Khoa học Tự nhiên Công nghệ, pp 44 - 49 Nguyễn Thị Quý Cơ, Trần Văn Tiến, Võ Thị Bạch Mai, Trần Trọng Tuấn, Nguyễn Hải Sơn, 2014 Q trình phát sinh hình thái mơ sẹo chồi Long Não (Cinnamomum camphora (L.) Sieb.) nuôi cấy in vitro Tạp chí Khoa học Phát triển , pp 1034-1041 Võ Văn Chi, Dƣơng Đức Tiến, 1978 Phân loại thực vật bậc cao Hà Nội: NXBĐHTHCN Hà Nội Lê Hồng Giang Nguyễn Bảo Toàn, 2010 Tạo mô sẹo tái sinh chồi từ mô non bí Kỳ Nam (Hydnophytum formicarum jack.) Tạp chí Khoa học , pp 216-222 Nguyễn Thị Diệu Hƣơng, Dƣơng Tấn Nhựt, 2004 Hồn thiện quy trình nhân nhanh giống hoa cúc (Chysanthemum indicum L.) kỹ thuật ni cấy đỉnh sinh trƣởng Tạp chí sinh học, pp 45-48 Trần Thanh Hƣơng, Ngô Phƣớc Hạnh, Phan Ngô Hồng, 2013 Biến đổi hình thái sinh lý trình phát sinh chồi từ mảnh cúc Hà Lan ni cấy in vitro Tạp chí Khoa học Phát triển , pp 466-472 Trần Thị Thu Hiền, Phạm Thị Nhƣ Quỳnh, Mai Văn Chung, Nguyền Đình San, 2007 Nhân nhanh giống hoa cúc CN97 kỹ thuật ni cấy invitro Tạp chí nơng nghiệp phát triển nơng thơn, pp 30-33 27 Trần Văn Hồng, 2005 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng đến q trình ni cấy In vitro hai giống lan Dendrobium Cymbidium Khóa luận tốt nghiệp Đại học Nơng Lâm TP.HCM Nguyễn Bá Lộc, Phùng Thị Bích Hòa, 2010 Ảnh hƣởng Giberelin đến q trình sinh trƣởng phát triển giống cúc Pha Lê (Chrysanthemum sp.) trồng Phú Mậu, Phú Vang, Thừa Thiên Huế Tạp chí Khoa Học ĐHSP TP HCM , pp 116 - 122 10 Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong, 2013, Phƣơng pháp nghiên cứu sinh lý học thực vật, Nxb Đại học quốc gia Hà Nội 11 Dƣơng Tấn Nhựt, Nguyễn Bá Nam, 2009 Ảnh hƣởng hệ thống chiếu sáng đơn sắc lên sinh trƣởng phát triển hoa cúc (Chrysanthemum morifolium cv “Nút”) ni cấy invitro Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, pp 93-100 12 Dƣơng Tấn Nhựt, Nguyễn Quốc Thiện, Vũ Quốc Luận, 2005 Nâng cao chất lƣợng giống hoa cúc nuôi cấy invitro thông qua nuôi cấy thống khí Tạp chí Sinh học, pp 92-95 13 Nguyễn Bá Nam, Nguyễn Đình Lâm, Dƣơng Tấn Nhựt, 2012 Nghiên cứu ảnh hƣởng loại mẫu cấy hệ thống chiếu sáng đơn sắc lên khả tái sinh chồi hoa cúc (Chrysanthemum morifolium Ramat Cv “Jimba”), nuôi cấy in vitro Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, pp 595-606 14 Phạm Thị Bích Ngọc, Phan Ngơ Hoang , 2009 Tìm hiểu phát sinh chồi từ mơ sẹo Dây Chiều (Tetracera scandens L.) Tạp chí phát triển KH&CN, pp 79 - 85 15 Nguyễn Quang Thạch, Đặng Văn Đông, 2002 Cây hoa cúc kỹ thuật trồng s.l.:NXB Nơng nghiệp, Hà Nội 28 16 Hồng Thị Thanh, 2016 Xây dựng quy trình nhân nhanh năm giống hoa cúc (tím huế, pha lê, phan trắng, pháo hoa, kim cƣơng) kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật Khóa luận tốt nghiệp Trƣờng ĐHSP Hà Nội 17 Phạm Thị Tƣơi, 2014 Xây dựng quy trình nhân giống hoa cúc CN01 (Chrysanthemum maximum Seiun - 3) kỹ thuật ni cấy in vitro Khóa luận tốt nghiệp Trƣờng ĐHSP Hà Nội 18 Bùi Văn Thế Vinh, Vũ Thị Thủy, Thái Thƣơng Hiền, Đỗ Khắc Thịnh, Dƣơng Tấn Nhựt, 2004 Nghiên cứu hình thái giải phẫu cấu trúc phơi trog q trình phát sinh phơi vơ tính sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis et grushv) Tạp chí Khoa học Phát triển , pp 1140-1148  Tài liệu tiếng Anh 19 Bremer, K., 1994 Asteraceae, Cladistics & Classification Nordic Journal of Botany, pp 176-178 20 Benetka L.A, Pavingerova D, 1995 Phenotypic diferences In transgenic plants of Chrysanthemum Plant Breeding (Germany), pp 167-173 21 Christian L, Jane K, Theodore A, Isidore M, Bancy W, Modeste K, Edmond K, Siaka K and Peter Y.S, 2013 In vitro regeneration of pyrethrum (Chrysanthemum cinerariaefolium) plantlets from nodal explants of in vitro raised plantlets International Journal of Application or Innovation in Engineering & Management , pp 207-213 22 Fukai S, Goi M, Tanaka M, 1991 Cryopreservation of shoot tips of Chrysanthemum morifotium and related species native to Japan Euphytica, pp 201-204 23 Hitmi, Sallanon H, Barthomeuf C, 2001 Effects of plant growth regulators on the growth and pyrethrins production by cell cultures of Chrysanthemum cinerariaefolium Austral J Bot, pp 81- 88 29 24 Kenneth C Toress, 1990 Tissue culture techniques for horticulture s.l.:pp 26-34 25 Khattak A.M, S.Pearson, 2004 The ecffects of far red spectral filters and plant density on the growth and development of chrysanthemums Scientia Horticulturae, pp 335-341 26 Kothari L.S and Chandra N, 1986 Plant Regeneration in Callus and Suspension Cultures of Tagetes erecta l (African Marigold) J Plant Physiol, pp 235- 241 27 Lu C-Y, Nugent G, Wardley T, 1990 Efficient, direct plant regeneration from stem segments of chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium Ramat cv Royal Purple) s.l.:Plant Cell Rep pp 733-736 28 Lu C-Y, Wardley T, 1990 Effcienct, direct plant regeation from stem segment of chrysanthemum s.l.:plant cell report pp 733-736 29 Muthusamy S.K, Subhash C.N, 2015 High frequency plant regeneration with histological analysis of organogenic callus from internode explants of Asteracantha longifolia Nees Journal of Genetic Engineering and Biotechnology, pp 31-37 30 Malaure S.R, Barclay G, Power B.J, Davey R.M, 1991 The Production of Novel Plants from Florets of Chrysanthemum morifolium Using Tissue Culture Shoot Regeneration from Ray Florets and Somaclonal Variation Exhibited by the Regenerated Plants J PlantPbysiol, pp 8-13 31 Mani T, Senthil K, 2011 Multiplication of Chrysanthemum through Somatic Embryogenesis Asian Journal of Pharmacy and Technology, pp 13-16 32 Mitouchkina T.Y.U, Dolgov, 2000 Modification of Chrysanthemum plant and flower architechure by RolC gene from Agrobacterium rhizogenesiss introduction Acta Hort (ISHS), pp 163-172 30 33 Ojeda H, Trione O.S, 1994 Effect of (2-chloroethyl) trimethylammonium chloride (CCC) on the growth, biochemistry and rubber yield of guayule plants (Parthenium argentatum Gray) Journal of Arid Environments , pp 129-138 34 Roest S, Bokelmann S.G, 1975 Vegetative propagation of Chrysanthemum cinerariaefolium in vitro Scientia Hort, pp 120-122 35 Sun J.K, Eun J.H, Jeong W.H, Kee Y.P, 2004 Effects of LEDs on net photosynthetic rate, growth and leaf stomata of chrysanthemum plants in vitro Scientia Horticulturae, pp 143-151 36 Wambugu F.M, Rangan S.T, 1981 In vitro clonal multiplication of pyrethrum Chrysanthemum cinerariaefolium Plant Science letters, pp 219-226 37 Zahed H, Abul K.A.M, Subodh K D, Amal K.B, 2007 Journal of Biotechnology Development of NaCl - Tolerant line in Chrysanthemum morifolium Ramat through shoot organogenesis of selected callus line, pp 658-667  Tài liệu Internet 38 http://kinhhienvioptika.blogspot.com/2014/06/cach-su-dung-kinh-hien-visoi-noi.html 39 https://www.slideshare.net/tranthanhthuy81/khv-va-pp-lam-tieu-ban 40 https://toc.123doc.org/document/664271-bang-2-tinh-hinh-san-xuat-hoacuc-ca-c-nc-v-mt-s-vung.htm 31 ... acetic acid) ĐẾN Q TRÌNH PHÁT SINH HÌNH THÁI MƠ NI CẤY ẢNH HƢỞNG CỦA BAP VÀ NAA ĐẾN QUÁ TRÌNH CỦA GIỐNG CÚC VÀNG HÈ PHÁT SINH HÌNH THÁI MƠ NI CẤY CỦA GIỐNG CÚC VÀNG HÈ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC... nghiên cứu Nghiên cứu đặc điểm phát sinh hình thái mô hoa cúc Vàng Hè dƣới ảnh hƣởng BAP NAA Nghiên cứu đặc điểm giải phẫu mô sẹo từ hoa cúc Vàng Hè dƣới ảnh hƣởng BAP NAA Ý nghĩa khoa học ý nghĩa... tồn phát triển nguồn gen 2 Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu ảnh hƣởng BAP NAA đến hoa cúc Vàng Hè nhằm mục đích xác định đƣợc cơng thức ph hợp cho q trình phát sinh hình thái giống cúc Vàng Hè Nhiệm