Xác định một số hợp chất Hydrocacbon đa vòng thơm (PAH) trong thịt và sản phẩm từ thịt bằng kỹ thuật sắc ký khí khối phổ hai lần (GC-MS/MS)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Tâm XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT HYDROCACBON ĐA VÒNG THƠM (PAH) TRONG THỊT VÀ SẢN PHẨM TỪ THỊT BẰNG KỸ THUẬT SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ HAI LẦN (GC-MS/MS) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Tâm XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT HYDROCACBON ĐA VÒNG THƠM (PAH )TRONG THỊT VÀ SẢN PHẨM TỪ THỊT BẰNG KỸ THUẬT SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ HAI LẦN (GC-MS/MS) Chun ngành : Hóa phân tích Mã số : 60 44 01 18 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS LÊ ĐÌNH CHI Hà Nội - 2015 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành biết ơn sâu sắc đến TS Lê Đình Chi – người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, động viên, dành nhiều thời gian đọc thảo, đóng góp nhiều ý kiến quý báu suốt trình học tập nghiên cứu để tơi hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn q báu đến TS Lê Thị Hồng Hảo, TS Trần Cao Sơn, ThS Nguyễn Thị Hà Bình cán Khoa Độc học dị nguyên, Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh thực phẩm Quốc gia nơi thực đề tài giúp đỡ thời gian qua Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Phịng Sau Đại học, Ban Chủ nhiệm Khoa Hóa học trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên - Đại Học Quốc Gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập trường Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh thực phẩm Quốc gia tạo điều kiện thuận lợi cho tham gia học tập hoàn thành luận văn thời gian quy định Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn đồng nghiệp, bạn bè, gia đình động viên, giúp đỡ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu để hồn thiện luận văn Thái Bình, tháng 12 năm 2015 Học viên Nguyễn Thị Tâm MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 12 1.1 Tổng quan PAH 12 1.1.1 Giới thiệu chung PAH 12 1.1.2 Tính chất vật lý hố học PAH 12 1.1.2.1 Tính chất vật lý 12 1.1.2.2 Tính chất hố học 15 1.1.3.Độc tính PAH ảnh hưởng PAH tới môi trường sống 16 1.1.3.1.Ảnh hưởng thực vật 16 1.1.3.2.Ảnh hưởng động vật, người 16 1.1.4 Giới hạn cho phép PAH thực phẩm 17 1.1.5 Hiện trạng ô nhiễm PAH giới Việt Nam 19 1.2 Các phƣơng pháp xác định PAH 20 1.2.1 Các phương pháp chiết tách hợp chất PAH 20 1.2.1.1 Phương pháp chiết lỏng – lỏng 20 1.2.1.2 Phương pháp chiết pha rắn 12 1.2.1.3 Phương pháp chiết QuEChERS 22 1.2.2 Phương pháp phân tích dư lượng PAH thực phẩm 23 1.2.2.1 Sắc ký khí 23 1.2.2.2 Sắc ký lỏng 25 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 27 2.2 Thiết bị, dụng cụ hoá chất 27 2.2.1 Thiết bị dụng cụ 27 2.2.1.1 Thiết bị 27 2.2.1.2 Dụng cụ thí nghiệm 27 2.2.2 Hoá chất 28 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 29 2.3.1 Phương pháp lấy mẫu 29 2.3.2 Phương pháp xử lý mẫu 29 2.3.3 Phân tích PAH GC-MS/MS 30 2.3.4 Phương pháp xác nhận giá trị hiệu lực phương pháp 31 2.3.4.1 Tính chọn lọc 31 2.3.4.2 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) 31 2.3.4.3 Khoảng tuyến tính, đường chuẩn 32 2.3.4.4 Độ lặp lại (độ chụm), độ thu hồi (độ đúng) 33 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu 34 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 Khảo sát điều kiện phân tích PAH GC-MS/MS 35 3.1.1 Lựa chọn điều kiện tách GC 35 3.1.2 Lựa chọn điều kiện phân tích MS/MS 38 3.2 Khảo sát quy trình xử lý mẫu 42 3.2.1 Lựa chọn dung môi chiết hỗn hợp muối chiết 43 3.2.2 Khảo sát bước làm 43 3.3 Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp 46 3.3.1 Đánh giá tính đặc hiệu, chọn lọc phương pháp phân tích 46 3.3.2 Khảo sát khoảng tuyến tính lập đường chuẩn 47 3.3.3 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) 50 3.3.4 Độ lặp lại độ thu hồi 52 3.4 Ứng dụng phƣơng pháp để phân tích mẫu 45 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 Kết luận 59 Kiến nghị 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số tính chất vật lý PAH Bảng 1.2 Giới hạn ấn định Quy chế EC 835/2011 cho benzo (a)pyren tổng 4PAH thực phẩm Bảng 1.3 So sánh QuEChERS với phương pháp truyền thống 13 Bảng 1.4 Một số nghiên cứu sử dụng sắc ký khí xác định dư lượng 15 PAH mẫu thực phẩm Bảng 1.5 Một số ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng xác 16 định PAH mẫu béo Bảng 2.1 Danh sách chất chuẩn PAH nồng độ 19 Bảng 2.2 Giới hạn sai lệch cho phép tối đa tỷ lệ ion 22 Bảng 2.3 Độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ khác 24 (theo AOAC) Bảng 2.4 Độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác 25 theo AOAC Bảng 3.1 Bảng chương trình nhiệt độ khảo sát sử dụng 27 Bảng 3.2 Thời gian lưu điều kiện MS/MS để phân tích PAH 29 Bảng 3.3 Tỷ lệ ion PAH 38 Bảng 3.4 Các phương trình hồi quy tuyến tính mối tương quan 39 diện tích pic nồng độ PAH Bảng 3.5 MDL MQL PAH mẫu thịt 42 Bảng 3.6 Độ lặp lại độ thu hồi PAH mẫu thịt 44 Bảng 3.7 Kết xác định PAH thịt sản phẩm thịt 45 DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo benzo(a)pyren Hình 2.1 Sơ đồ xử lý mẫu 20 Hình 3.1 Sắc ký đồ tổng hỗn hợp 16 PAH nồng độ 28 1000 ng/mL Hình 3.2 Sắc ký đồ MRM PAH 32 Hình 3.3 Quy trình dự kiến xử lý mẫu phân tích PAH 33 Hình 3.4 Khảo sát ảnh hưởng việc sử dụng PSA C18 bước 35 làm đến độ thu hồi PAH Hình 3.5 Quy trình xử lý mẫu phân tích PAH 36 Hình 3.6 Sắc đồ 16 PAH mẫu trắng, mẫu trắng thêm 37 chuẩn mẫu chuẩn Hình 3.7 Một số đường chuẩn phân tích PAH 41 Hình 3.8 Sắc đồ số mẫu phân tích nồng độ LOQ 43 Hình 3.9 Sắc đồ tổng ion phân tích số mẫu thực 47 Hình 3.10 Kết phân tích tổng PAH mẫu thịt quay, thịt 48 xiên, thịt xơng khói Hình 3.11 Kết phân tích benzo(a)pyren mẫu thịt quay, thịt xiên, thịt xơng khói 48 DANH MỤC KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT Nội dung đầy đủ TT Chữ viết tắt ACN AOAC Acetonitril Hiệp hội cộng đồng phân tích (Association of Analytical Communities) APCI Ion hóa hóa học áp suất khí (Atmospheric Pressure Chemical Ionization) APPI Ion hóa quang hóa áp suất khí (Atmospheric Pressure Photo Ionization) d-SPE Chiết phân tán pha rắn (Dispersive Solid Phase Extraction) Uỷ ban Châu Âu (European Commission ) EC FLD Detector huỳnh quang (Fluorescence Detector) GC Sắc ký khí (Gas chromatography) GC-MS/MS Sắc ký khí khối phổ hai lần (Gas chromatography tandem Mass Spectrometry) 10 HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) LC-MS/MS Sắc ký lỏng khối phổ hai lần (Liquid chromatography tandem Mass Spectrometry) 11 LOD Giới hạn phát (Limit of Detection) 12 LOQ Giới hạn định lượng (Limit of Quantification) 13 MRM Kiểm soát đa phản ứng (Multireaction mornitoring) 14 MS Khối phổ (Mass Spectrometry) 15 NCI Ion hóa hóa học âm (Negative Chemical Ionization) 16 NPD Detector nitơ phosphor (Nitrogen Phosphorus Detector) Nội dung đầy đủ TT Chữ viết tắt 17 PAH Hydrocarbon thơm đa vòng (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons) 18 PCI Ion hóa hóa học dương (Positive Chemical Ionization) 19 POP Các chất hữu gây ô nhiểm tồn dư dai dẳng (Persistant Organic Pollutants) 20 PSA Các amin bậc bậc (Primary Secondary Amines) 21 PS-DVB 22 QuEChERS 23 RSD Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Deviation) 24 R(%) Độ thu hồi (Recovery) 25 SD Độ lệch chuẩn (Standard Deviation) 26 S/N Tỉ lệ tín hiệu nhiễu (Signal to Noise ratio ) 27 tR 28 USEPA Polystyren divinylbenzen ? Thời gian lưu (Retention Time) Cục Bảo vệ môi trường Mỹ (Environmental Protection Agency) 29 UV 30 WHO Tử ngoại (Ultra Violet) Tổ chức Y tế giới (World Health Organization) MỞ ĐẦU Các chất hydrocacbon thơm đa vòng (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons – PAH) nhóm hợp chất nhiễm nguy hiểm chúng có độc tính cao có mặt khắp nơi mơi trường (đất, khơng khí, nguồn nước, lớp trầm tích đặc biệt thực phẩm) Các hợp chất PAH tan nước, dễ dàng hịa tan chất béo, dung môi hữu hay axit hữu PAH hấp thụ vào thể thông qua chuỗi thức ăn, tuỳ theo cấu tạo PAH đối tượng tác động mà PAH có mức độ tác động khác Sự có mặt liều lượng định PAH thường gây tác động không tốt đến sinh sản, sinh trưởng, phát triển khả miễn dịch Sau thời gian dài tích tụ thể, PAH gây ảnh hưởng trực gián tiếp đến sức khỏe người thông qua số đường khác Tổ chức bảo vệ môi trường Mỹ (USEPA) xếp PAH vào nhóm chất nhiễm điển hình tiến hành kiểm sốt có mặt PAH hệ sinh thái nước cạn Trong chế biến thực phẩm có sử dụng nhiệt chiên, nướng hay trình bảo quản thịt, cá xơng khói thường làm cho thực phẩm bị nhiễm PAH Điều nguy hại người tiêu dùng có thói quen sử dụng nhiều thực phẩm chiên, nướng hay thực phẩm chế biến sẵn đồ hun khói… Hàm lượng PAH mẫu sinh phẩm, mơi trường xác định phương pháp như: sắc ký khí (GC), sắc ký khí khối phổ (GC-MS), sắc ký khí khối phổ hai lần (GC-MS/MS), sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), quang phổ hấp thụ phân tử (UV) Trong đó, GC-MS cơng cụ lựa chọn để phát hợp chất hữu nhiễm mơi trường Chi phí vận hành thiết bị GC-MS giảm đáng kể đồng thời độ tin cậy tăng việc sử dụng GC-MS nghiên cứu môi trường ngày nhiều Trong đó, kỹ thuật GC-MS/MS lựa chọn lý tưởng độ nhạy độ đặc hiệu, đáp ứng việc phân tích nồng độ thấp Nhằm thiết lập quy trình phân tích đáng tin cậy để xác định hàm lượng 10 Tổng PAH Benzo(a)pyren (µg/kg) (µg/kg) Thái Bình 7,3 KPH Thịt xiên Chợ Trần Cung- Hà 246 1,1 16 Thịt xiên Nội 214 1,0 17 Thịt xiên Chợ Cầu Giấy- Hà 84 KPH 18 Thịt xiên Nội 80 KPH 19 Thịt xiên Chợ Tiền Hải- Thái 457 1,0 20 Thịt xiên Bình 421 1,1 21 Thịt xiên Chợ An Đồng – Thái KPH KPH 22 Thịt xiên Bình KPH KPH 23 Thịt xơng khói Chợ Cổ Nhuế- Hà 6,0 KPH 24 Thịt xơng khói Nội 5,0 KPH 25 Thịt xơng khói 14 KPH 26 Thịt xơng khói Siêu thị Big C – Hà 16 KPH 27 Thịt xơng khói Nội 5,0 KPH 28 Thịt xơng khói 4,1 KPH 29 Thịt xơng khói 4,3 KPH 4,0 KPH TT Tên mẫu Địa điểm lấy mẫu 14 Thịt quay 15 Siêu thị Thái Bình 30 Thịt xơng khói *Ghi chú: KPH : không phát thấy 55 Hỗn hợp chuẩn 16 PAH Mẫu thịt quay Mẫu thịt xiên nướng Mẫu thịt xiên nướng Mẫu thịt Hình 3.9 Sắc đồ tổng ion phân tích số mẫu thực Sau xây dựng đồ thị thể kết phân tích mẫu thịt sản phẩm chế biến từ thịt gồm thịt quay, thịt xiên thịt xơng khói với hai tiêu đánh giá tổng số PAH benzo(a)pyren 56 Hình 3.10: Kết phân tích tổng PAH mẫu thịt quay, thịt xiên, thịt xơng khói Hình 3.11: Kết phân tích benzo(a)pyren mẫu thịt quay, thịt xiên, thịt xơng khói Nhận xét: Qua kết phân tích, rút số nhận xét sau: - Có mẫu thịt tươi sống không phát chứa PAH - Tất mẫu có hàm lượng benzo(a)pyren thấp khơng phát hiện, khơng có mẫu vượt giới hạn tối đa cho phép (5 µg/kg) 57 - Trong mẫu thịt quay tất mẫu phát có PAH, nồng độ PAH dao động khoảng từ 4,8 µg/kg đến 165 µg/kg Trong có 2/8 (25%) mẫu có tổng PAH vượt ngưỡng giới hạn cho phép (35 µg/kg) - Trong mẫu thịt xiên có mẫu phát có chứa PAH, có mẫu (75%) vượt ngưỡng giới hạn cho phép (35 µg/kg) - Trong mẫu thịt xơng khói khơng có mẫu có tổng PAH vượt ngưỡng giới hạn cho phép Như vậy, qua kết cho thấy, đánh giá tiêu hàm lượng benzo(a)pyren mẫu thịt phân tích khơng phát phát nồng độ thấp giới hạn tối đa cho phép Nhưng đánh giá tiêu tổng hàm lượng 16PAH nhận thấy rằng, mẫu thịt tươi thịt xơng khói khơng bị nhiễm PAH, cịn mẫu thịt quay, thịt xiên bị nhiễm chất hữu khó phân hủy PAH Đặc biệt mẫu thịt quay 1, thịt quay có tổng hàm lượng PAH vượt 4,7 lần 4,5 lần , mẫu thịt xiên gấp lần, mẫu thịt xiên gấp 6,1 lần, mẫu thịt xiên gấp 2,4 lần, mẫu thịt xiên gấp 2,3 lần, mẫu thịt xiên gấp 13 lần, mẫu thịt xiên gấp 12 lần so với giới hạn tối đa cho phép 35 µg/kg Các mẫu thịt quay thịt xiên lưu hành chợ quán vỉa hè ảnh hưởng không tốt tới sức khỏe người thói quen sử dụng thực phẩm So với thịt tươi thịt xơng khói, tổng hàm lượng PAH thịt quay thịt xiên cao nhiều lần hệ q trình chế biến sản phẩm thịt có tiếp xúc với nguồn lửa mạnh thời gian dài 58 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Trên sở kết thực nghiệm nghiên cứu để xác định hàm lượng số PAH từ thịt sản phẩm từ thịt phương pháp sắc ký khí khối phổ hai lần (GC-MS/MS), chúng tơi thu kết sau: * Xây dựng phương pháp phân tích PAH từ thịt sản phẩm thịt Khảo sát phương pháp phân tích PAH từ thịt sản phẩm thịt bao gồm: Nghiên cứu tối ưu hóa điều kiện chạy sắc ký khí để xác định 16 PAH bao gồm: - Tối ưu hoá phương pháp hệ thống GC – MS/MS: khảo sát điều kiện cho phân tích sắc ký gồm: Cột sắc ký DB5-MS (30 m x 0,25 mm; 0,25 μm), nhiệt độ buồng bơm mẫu: 310oC, chế độ tiêm mẫu: khơng chia dịng, thời gian khơng chia dịng: phút, khí mang heli, tốc độ dịng 1,0 mL/phút, chương trình nhiệt độ: 70oC (giữ phút), tăng 10oC /phút lên 310oC (giữ phút), nhiệt độ phận kết nối sắc ký khí khối phổ: 310oC, thể tích tiêm mẫu µL.Với khối phổ MS : nguồn ion hoá:là EI 70 eV, nhiệt độ nguồn ion: 250oC, thời gian cắt dung môi: phút - Khảo sát điều kiện tách chiết mẫu: mẫu chiết acetonitrril, cạn khí nitơ hòa cặn n – hexan trước qua cột, hỗn hợp muối chiết 150 mg MgSO4 50 mg C18 50 mg PSA cho dịch chiết * Thẩm định phương pháp phân tích - Tính chọn lọc: điều kiện khảo sát phân tích dung dịch chuẩn có tín hiệu pic tương đối cân xứng Thời gian lưu chất dao động từ đến 27 phút Trong khi tiêm mẫu trắng, khơng thu tín hiệu pic khoảng thời gian từ đến 27 phút Như thấy hệ thống sắc ký khí khối phổ hai lần (GC-MS/MS) có độ chọn lọc đạt yêu cầu cho 16 PAH 59 - Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ): giới hạn phát phương pháp khoảng 1,5-10 ng/mL, tương ứng 0,3-2 µg/kg; giới hạn định lượng khoảng 5-30 ng/mL, tương ứng 1-3 µg/kg - Khoảng tuyến tính: xây dựng khoảng tuyến tính từ 20-1000 ng/mL - Độ thu hồi PAH tốt (trên 80%): từ 80 đến 110% - Độ lệch chuẩn tương đối RSD% PAH dao động từ 2,7% đến 14% , hệ số xác định R2 > 0,99 * Ứng dụng phương pháp phân tích mẫu thực tế: Tiến hành phân tích 30 mẫu thịt (thịt tươi sống, thịt xiên, thịt quay, thịt xơng khói) mua chợ siêu thị địa bàn Hà Nội Thái Bình, có phát mẫu chứa PAH, có mẫu thịt quay mẫu thịt xiên vượt ngưỡng giới hạn cho phép Kiến nghị Từ kết thu chúng tơi nhận thấy phương pháp phân tích có độ nhạy đạt u cầu, phân tích nhanh xác, phân tích hợp chất PAH với độ tin cậy cao Chúng tơi mở rộng phân tích với đồng thời nhiều chất khác thuộc nhóm PAH tiếp tục mở rộng đối tượng phân tích, khơng hạn chế phạm vi thịt sản phẩm thịt mà đối tượng sản phẩm thực phẩm khác Phát triển phương pháp thành phương pháp chuẩn áp dụng rộng rãi cho phịng thí nghiệm có thiết bị GC-MS/MS Ngoài mở rộng hướng nghiên cứu với nhiều chất mẫu phức tạp hơn, với thiết bị đại 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO A - Tài liệu tiếng Việt Bùi Long Biên (2011), Hóa học phân tích định lượng, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Hoàng Minh Châu (2002), Cơ sở Hóa học phân tích 2, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Lê Thị Hồng Hảo, Phạm Xuân Đà (2013), Xử lý mẫu phân tích thực phẩm, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Xuân Trung, Nguyễn Văn Ri (2003), Các phương pháp phân tích cơng cụ, Nhà xuất Đại Học Quốc Gia Hà Nội Nguyễn Đức Huệ (2005), Các phương pháp phân tích hữu cơ, Nhà xuất Đại Học Quốc Gia Hà Nội Lê Tiến Mạnh (2008), Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu khả phân hủy sinh học hydrrocacbon thơm số vài chủng vi khuẩn phân lập từ nước ô nhiễm dầu quảng Ninh, Luận văn thạc sĩ Sinh học, Đại học Thái Nguyên Phạm Luận (2004), Một số vấn đề sở chiết phân tích, Trường đại học Quốc gia Hà Nội Nguyễn Văn Ri (2009), Giáo trình phương pháp tách, Đại học khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc Gia Hà Nội Trần Cao Sơn (2015), Nghiên cứu xác định dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật dược liệu sản phẩm từ dược liệu sắc ký khối phổ, Luận án Tiến sĩ Dược học, Đại học Dược Hà Nội 10 Tạ Thị Thảo (2010), Bài Giảng Chun đề thống kê hố phân tích, Đại học khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc Gia Hà Nội 11 Nguyễn Thị Thủy (2011), Nghiên cứu xử lý PAH khí thải phương pháp oxi hóa hệ xúc tác kim loại, Luận văn thạc sĩ khoa học, Đại học Bách khoa Hà Nội 61 12 Nguyễn Thị Khánh Trâm, Lê Thị Hồng Hảo (2013), Lấy mẫu thực phẩm phục vụ công tác tra kiểm tra chất lượng ATTP, Nhà xuất Y học, Hà Nội 13 Nguyễn Đình Triệu (2007), Các phương pháp phổ hóa học hữu hóa sinh, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội 14 Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh thực phẩm quốc gia (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hóa học vi sinh, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 15 Phạm Hùng Việt (2003), Cơ sở lý thuyết phương pháp sắc ký khí, Nhà xuất khoa học kỹ thuật B - Tài liệu tiếng Anh 16 Afolabi A.O., Adesulu E.A., & Oke O.L (1983), “Poly-nuclear aromatic hydrocarbons in some Nigerian preserved freshwater fish species”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 31(5), pp 1083-1090 17 Albert L Juhasz, Naidu R (2000), “Bioremediation of high molecular weight polycyclic aromatic hydrocarbons: a review of the microbial degradation of Benzo[a]Pyren”, International Biodeterioration & Biodegradation, 45(1), pp 57-88 18 Al-Omair A., & Helaleh M.I.H (2004), “ Selected-Ion Storage GCMS Analysis of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Palm Dates and Tuna Fish”, Chromatographia, 59(11-12), pp 715 - 719 19 Anastasio A., Mercogliano R., Vollano L., Pepe T., & Cortesi M.L (2004), “Levels of benzo(a)pyrene (BaP) in "mozzarella di bufala campana" cheese smoked according to different procedures”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52(14), pp 4452-4455 20 Araki R.Y., Dodo G.H., Reimer S.H., & Knight M.M (2001), “ Protocol for the determination of selected neutral and acidic semi-volatile organic contaminants in fish tissue”, Journal of Chromatography A , 923(1-2), pp 177-185 62 21 Bogusz M.J., El Hajj S.A., Ehaideb Z., Hassan H., & Al-Tufail M (2004), “Rapid determination of benzo(a)pyrene in olive oil samples with solidphase extraction and low-pressure, wide-bore gaschromatography–mass spectrometry and fast liquid chromatography with fluorescence detection”, Journal of Chromatography A, 1026(1), pp 1-7 22 Canadian Environmental Protection Act (1994), Polycyclic Aromatic Hydrocarbons, Minister of supply and services Canada, Catalogue No En 40-215/42E 23 Canadian Food Inspection Agency (2001), Industry Advisory, http://www.oagvg.gc.ca/internet/docs/0025ce.pdf 24 Cejpek K, Hajslová, Jehlicková Z, Merhant J (1995), “ Simplified extraction and clean-up procedure for the determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in fatty and protein-rich matrices”, International Journal of Environmental Analytical Chemistry, 61(1), pp 65-80 25 Chen B H., Wang C Y., & Chiu C P (1996), “ Evaluation of analysis of polycyclic aromatic hydrocarbons in meat products by liquid chromatography”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 44(8), pp 2244-2251 26 Chen B.H., & Lin Y.S., (1997), “Formation of polycyclic aromatic hydrocarbons during processing of duck meat”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 45(4), pp 1394-1403 27 Chiu C P., Lin Y S., & Chen, B H (1997), “ Comparison of GC-MS and HPLC for overcoming matrix interferences in the analysis of PAHs in smoked food”, Chromatographia, 44(9-10), pp 497 -504 28 Cerniglia C E (1993), “Biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbons”, Current Opinion in Biotechnology, 4, pp 331-338 29 Djinovic, J., Popovic A., & Jira, W (2008), “ Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in different types of smoked meat products from Serbia”, European Food Research and Technology, 80(2), pp 449−456 63 30 Djinovic, J., Popovic, A., & Jira, W (2008), “ Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in traditional and industrial smoked beef and pork ham from Serbia”, European Food Research and Technology, 227(4), pp 1191−1198 31 European Food Safety Authority (EFSA) (2007), A Report from the Unit Collection and Exposure on a Request from the European Commission, http://www.efsa.europa.eu/en/efsajournal/pub/305r 32 European Commission (EC) Directive 92/59/EC (1992), Council Directive 92/59/EEC of 29 June 1992 on general product safety, Official Journal of the European Communication, pp 228- 24 33 European Commission Regulation (EC) No 208/2005 (2005), Commission regulation (EC) No 208/2005 of February 2005 amending Regulation (EC) No 466/2001 as regards polycyclic aromatic hydrocarbons, Official Journal of the European Communication, pp 34- 37 34 European Commission Regulation (EC) No 1881/2006 (2006), Commission regulation (EC) No 1881/2006 of 19 December 2006 setting maximum levels for certain contaminants in foodstuffs, Official Journal of the European Communication, pp 364 - 369 35 European Commission Recommendation (EC) 2005/108/EC (2005), GC Analysis of Pesticide/PAH Compounds on SLB-5ms application for GC, Official Journal of the European Communication, pp 34 -43 36 European Commission Regulation (EC) 333/2007, (2007), Laying down the methods of sampling and analysis for the official control of the levels of lead, cadmium, mercury, inorganic tin, 3-MCPD and benzo(a)pyrene in foodstuffs , Official Journal of the European Communication, pp 88 -29 37 European Food Safety Authority (EFSA), (2008), Polycyclic aromatic hydrocarbons in food, Scientific opinion of the panel on contaminants in the food chain , The EFSA Journal, 724, pp 1-114 64 38 European Commission Regulation (EC) 835/2011 (2011), Commission regulation (EU) No 835/2011 of 19 August 2011 amending Regulation (EC) No 1881/2006 as regards maximum, levels for benzo(a)pyrene, benz(a)anthracene, benzo(b)fluoranthene and chrysene, Annual Report No 3801, pp 1-19 39 Forsberg N.D., Wilson G.R., & Anderson K.A (2011), “Addition to the determination of parent and substituted polycyclic aromatic hydrocarbons in high-fat salmon using a modified QuEChERS extraction, dispersive SPE and GC-MS”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 59 (19), pp 8108-8116 40 Fretheim K (1976), “ Carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons in Norwegian smoked meat sausages”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 24(5), pp 976-979 41 Gomaa, A., Gray, I.J., Rabie S., & Lopez-Bote, C., (1993 ), “Polycyclic aromatic hydrocarbons in smoked food products and commercial liquid smoke flavourings”, Food Addit Contam, 10(5), pp 503-521 42 Gratz S.R., Ciolino L.A., & Johnson Y.S (2011), “Screening and determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in seafoods using QuEChERS based extraction and high performance liquid chromatography with fluorescence detection”, Journal of Assoc Off Anal Chemistry International, 94(5), pp 1601–1616 43 Grimmer, G., & Bohnke, H (1975), “Polycyclic aromatic hydrocacbon profile analysis of hight protein foods, oils and fast by gas chromatograpphy”, Journal of Assoc Off Anal Chemistry , 58(4), pp 725- 733 44 Hamann C., Hegemann J., & Hildebrandt A (1999), “Detection of polycyclic aromatic hydrocarbon degradation genes in different soil bacteria by polymerase chain reaction and AND hydridization”, FEMS Microbiology Letters, 173, pp 255-263 65 45 Hiroshi, A., Stephanie, B., David, K., & Rob P (1998), Polyluclear Aromatic Hydrocacbons: Properties and Environmental Fate, Environmental Organic Chemistry 46 Hubschmann H.J., (2009), Handbook of GC/MS: Fundamentals and applications, 2nd edition, Wiley-VCH, Weiheim 47 Jánská M., Tomaniová M., Hajšlová J., & Kocourek V (2004), “Appraisal of "classic" and "novel" extraction procedure efficiencies for the isolation of polycyclic aromatic hydrocarbons and their derivatives from biotic matrices”, Analytica Chimica Acta, 520, pp 93–103 48 Jira, W (2004), “A GC/MS method for the determination of carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) in smoked meat products and liquid smokes”, European Food Research and Technology, 218(2), pp 208-212 49 Johnson Y.S (2012), “Determination of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Edible Seafood by QuEChERS-Based Extraction and Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry”, Journal of Food Science, 77(7), pp 1750-3841 50 Karl, H., & Leinemann, M (1996), “ Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in smoked fishery products from different smoking kilns”, Europen Food Reseach and Technolohy, 202(6), pp 458-464 51 Kastner M., Breuer – Jammali, M., & Mahro B (1998), “Impact of Innoculation Protocols, Salinity anh pH on the Degradation of Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) and survival of PAH –degrading Bacteria Introduced into Soil”, Applied and Environmental Microbiology, 64(1), pp 359 - 362 52 Laffon Lage, B., Garcia Falcon, S., Gonzalez Amigo, M S., Lage Yusty, M A., & Simal Lozano, J (1997), “Comparison of supercritical fluid extraction and conventional liquidsolid extraction for the determination of benzo(a)pyrene in water-soluble Contaminants, 14(5), pp 469-474 66 smoke”, Food Additives and 53 Lehotay, S.J., Mastovska, K., & Yun S.J (2005), “Evaluation of two fast and easy methods for pesticide residue analysis in fatty food matrixes”, Journal of AOAC International, 88(2), pp 630–638 54 Liu L.B., Hashi Y., Liu M., Wei Y., Lin J.M (2007), “Determination of Particle-associated Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Urban Air of Beijing by GC/MS”, Analytical Sciences, 23(6), pp 667- 671 55 Lu, A.Y.H , Miwa, G.T., & Wislocki, P.G (1988), “Toxicological significance of covalently bound drug residues”, Rev Biochem Toxicol, 9(1), pp 1–27 56 Luo, D., Yu, Q., Yin, H., & Feng, Y (2007) , “Humic acid-bonded silica as a novel sorbent for solid-phase extraction of benzo[a]pyrene in edible oils”, Analytica Chimica Acta, 588(2), pp 261-267 57 Manahan S.E (1994), Environmental chemistry 6th ed, Boca Raton, FL: Lewis, 811 58 MarõÂa Dolores GuilleÂn, Patricia Sopelana, & MarõÂa AraÂnzazu Partearroyo (2000), “Determination of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Commercial Liquid Smoke Flavorings of Different Compositions by Gas ChromatographyMass Spectrometry” Journal of Agricultural and Food Chemistry, 48(2), pp 126-131 59 Moreda, W., Pérez-Camino, M.C., & Cert, A (2001), “Gas and liquid chromatography of hydrocarbons in edible vegetable oils”, Journal of Chromatography A, 936, pp 159-171 60 Moret, S., & Conte L.S (2000) , “Polycyclic aromatic hydrocarbons in edible fats and oils: occurrence and analytical methods”, Journal of Chromatography A, 882, pp 245-253 61 Nyman, P J., Diachenko, G W , Perfetti, G A., McNeal, T P., Hiatt, M H., & Morehouse, K M (2008), “Survey results of benzene in soft drinks and other beverages by headspace gas chromatography/mass spectrometry”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 56(2), pp 571 – 576 67 62 Pang G.F et al (2006), “Validation study on 660 pesticide residues in animal tissues by gel permeation chromatography cleanup/gas chromatography– mass spectrometry and liquid chromatography–tandem mass spectrometry”, Journal of Chromatography A, 1125(1), pp 1–30 63 Pagliuca G., Gazzotti T., Zironi E., Serrazanetti G.P., Mollica D., Rosmini R., & Agric J (2003), “Determination of high molecular mass polycyclic aromatic hydrocarbons in a typical Italian smoked cheese by HPLC-FL”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51(17), pp 5111- 5115 64 Pharmacopoeia Commission (2010), Pharmacopoeia of the People's Republic of China 2010 - English edition 65 Plaza-Bolanos P., Frenich A.G., & Vidal J.L.M (2010), “Polycyclic aromatic hydrocacbons in food and beverages Analytical methods and trend”, Journal of Chromatography A, 1217(41), pp 6303–6326 66 Purcaro G., Moret S., & Conte L.S (2013), “Overview on polycyclic aromatic hydrocarbons: Occurrence, legislation and innovative determination in foods”, Talanta, 105, pp 292–305 67 Purcaro G., Moret S., & Conte L.S (2009), “Optimisation of microwave assisted extraction (MAE) for polycyclic aromatic hydrocarbon (PAH) determination in smoked meat”, Meat Science, 81(1), pp 275-280 68 Smoker, M., Tran K., & Smith R.E (2011), “Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in shrimp”, Journal of Agricultural Chemistry, 58(23), pp 12101–12104 69 Stockholm Convention on Persistent Organic Pollutants, http://en.wikipedia.org/wiki/Stockholm_Convention_on_Persistent_Organi c_Pollutants 70 Suchanová, M., Hajslová, J., Tomaniová, M., Kocourek, V., & Babi cka, L.(2008), “Polycyclic aromatic hydrocarbons in smoked cheese”, Journal of the Science of Food and Agriculture, 88(8), pp 1307-1317 71 Takatsuki, K., Suzuki, S., Sato, N., & Ushizawa, I (1985), “Liquid chromatographic determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in fish and shellfish”, Journal Association of Official Analytical Chemists, 68(5), pp 945-949 68 72 Veyrand, B., Brosseaud, A., Sarcher, L., Varlet, V., Monteau, F., Marchand, P., Andre, F., & Le Bizec, B (2007), “Innovative method for determination of 19 polycyclic aromatic hydrocarbons in food and oil samples using gas chromatography coupled to tandem mass pectrometry based on an isotope dilution approach”, Journal of Chromatography A,1149(2), pp 333-344 73 Vinas L., Franco M.A and González J.J (2009), “ Polycyclic aromatic hydrocarbon composition of sediments in the Ria de Vigo (NW Spain)” Archives of Environmental Contammination and Toxicol, 57(1), pp 42-49 74 Wang, G., Lee, A.S., Lewis, M., Kamath, B., Archer, R.K (1999), “ Accelerated solvent extraction and gas chromatography/mass spectrometry for determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in smoked food samples”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 47(3), pp 10621066 75 Weissenfels W.D., Beyer M., Klein J (1990), “Degradation of phenanthrene, fluorene and fluoranthene by our bacteria cultures”, Appl Environ Microbiol, 32(4), pp 479-484 76 Weißhaar, R (2002), “Rapid determination of heavy polycyclic aromatic hydrocarbons in edible fats and oils”, European Journal of Lipid Science and Technology, 104(5), pp 282–285 77 WHO (1998), Selected Non – Heterocylic Polycyclic Aromatic Hydrocarbons, Geneva 78 Wu, J., Liu, Y., Zhao, R., & Xu R (2011), “Fast pesticide multiresidue analysisin american ginseng (Panax quinquefolium L.) by gas chromatography withelectron capture detection”, Journal of Natural Medicines, 65(2), pp 406–409 79 Zakaria M.P., Takada, H., Tsutsumi S., Ohno K., Yamada J., Kouno E and Kumata H (2002), “ Distribution of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in rivers and estuaries in Malaysia: a widespread input of petrogenic PAHs”, Environmental Science and Technology, 36, 19071918 69