MỤC LỤC
DANH MỤC CÁC BẢNG
DANH MỤC CÁC HÌNH
MỞ ĐẦU
CHƯƠNG 1 - TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Tổng quan về tình hình kháng kháng sinh
1.1.1. Thực trạng kháng kháng sinh
1.2.2. Peptide kháng khuẩn tích điện dương (CAMPs) và cecropin
1.3. Sản xuất cecropin theo con đường tái tổ hợp
1.3.1. Lựa chọn hệ thống tê bao biêu hiên
1.3.2. Lựa chọn hệ thống vector biểu hiện
1.3.3. Tối ưu hóa điều kiện biểu hiện
1.3.4. Tinh sạch cecropin tái tổ hợp
CHƯƠNG 2 - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Nguyên liệu
2.1.1. Các hệ vector
2.1.2. Các chủng vi khuẩn
2.1.3. Các cặp mồi
2.1.4. Gel sắc ký ái lực Glutathione Sepharose 4B, Ni-NTA agarose
2.1.5. Các hóa chất và thiết bị
2.2. Phương pháp
2.2.1. Sơ đồ nghiên cứu
2.2.2. Tách chiết plasmid bằng phƣơng pháp biến tính kiềm
2.2.3. Xử lý ADN với enzyme giới hạn
2.2.4. Biến nạp bằng phƣơng pháp sốc nhiệt
2.2.5. Phương pháp thẩm tách
2.2.6. Phương pháp đo nồng độ protein
2.2.7. Phương pháp điện di
CHƯƠNG 3 - KẾT QUẢ
3.1. Tách dòng (subclone) chuyển các gen cecropin vào các vector biểu hiện
3.1.1. Chuyển các gen cecH và cecN sang vector pBS
3.1.2. Thiết kế vector biểu hiện pGEX-cecropin
3.1.3. Thiết kế vector biểu hiện pET-28a-cecropin
3.1.4. Thiết kế vector biểu hiện pET-32b-cecropin
3.2. Biểu hiện các cecropin tái tổ hợp
3.2.1. Tối ƣu hóa điều kiện biểu hiện các cecropin dung hợp
3.2.2. Xử lý cặn tế bào và thu nhận cecropin dung hợp dạng tan
3.2.3. Kết quả tinh sạch GST-cecropin, Trx-cecropin
3.2.4. Kết quả xử lý cecropin dung hợp GST-cecropin và Trx-cecropin với
protease
CHƯƠNG 4-THẢO LUẬN
4.1. Khả năng biểu hiện của cecropin dung hợp phụ thuộc vào hệ thống biểu hiện
4.2. Trạng thái biểu hiện của cecropin phụ thuộc vào đuôi dung hợp
4.3. Phương pháp thu nhận cecropin dung hợp dạng hòa tan và cách thức tinh
ạch ảnh hưởng tới hiệu suất tinh sạch
KẾT LUẬN
KIẾN NGHỊ
TÀI LIỆU THAM KHẢO
PHỤ LỤC