Nghiên cứu sử dụng chitosan trong thu hoạch vi tảo nước mặn chlorella sp làm thức ăn tươi sống trong nuôi trồng thủy sản

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VIỆN NUÔI TRỒNG THỦY SẢN  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Nghiên cứu sử dụng Chitosan thu hoạch vi tảo nƣớc mặn Chlorella sp làm thức ăn tƣơi sống nuôi trồng thủy sản Giảng viên hƣớng dẫn : ThS MAI ĐỨC THAO Sinh viên thực : Tạ Thị Nhƣ Hằng Mã số sinh viên : 57137319 Khánh Hoà – 2019 TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VIỆN NI TRỒNG THỦY SẢN BỘ MƠN QUẢN LÍ SỨC KHOẺ ĐỘNG VẬT THUỶ SẢN  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Nghiên cứu sử dụng Chitosan thu hoạch vi tảo nƣớc mặn Chlorella sp làm thức ăn tƣơi sống nuôi trồng thủy sản GVHD : ThS Mai Đức Thao SVTH : Tạ Thị Nhƣ Hằng MSSV : 57137319 Khánh Hoà, tháng 6/ 2019 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan nghiên cứu thân Các số liệu, kết nghiên cứu nghiên cứu trình bày đồ án hồn tồn trung thực chƣa có cơng bố cơng trình nghiên cứu khoa học Nha Trang, tháng năm 2019 Sinh viên thực hiện: Tạ Thị Nhƣ Hằng i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đồ án tốt nghiệp này, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới : Ban Giám hiệu Trƣờng Đại học Nha Trang, tồn thể thầy giáo Viện Ni trồng Thủy sản tạo điều kiện giúp đỡ dạy dỗ em suốt trình học tập trƣờng Phịng thí nghiệm vi tảo, Viện Ni Trồng Thủy Sản - Trƣờng Đại học Nha Trang trung tâm Thí nghiệm Công nghệ cao - Trƣờng Đại Học Nha Trang tạo điều kiện sở vật chất giúp em hoàn thành đồ án Đặc biệt cho em gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến giáo viên hƣớng dẫn ThS Mai Đức Thao ThS Phạm Thị Đan Phƣợng Đã giành nhiều thời gian quan tâm, dạy tận tình tạo điều kiện thuận lợi cho em trình thực đề tài hoàn thành đồ án tốt nghiệp Em xin cảm ơn gia đính, bạn bè ngƣời ln bên cạnh chia em gặp khó khăn động viên để em hoàn thành tốt suốt năm học qua Em xin chân thành cảm ơn! Nha Trang, tháng năm 2019 Sinh viên thực Tạ Thị Nhƣ Hằng ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU viii MỞ ĐẦU 1.1 Hệ thống phân loại đặc điểm sinh học Chlorella sp 1.1.1 Hệ thống phân loại ( trích theo [8]) 1.1.2 Đặc điểm hình thái cấu tạo vi tảo Chlorella sp 1.1.3 Đặc điểm sinh sản vòng đời 1.1.4 Phân bố môi trƣờng sống [13] 1.1.5 Đặc điểm sinh trƣởng 1.2 Thành phần hóa sinh vi tảo 1.3 Một số yếu tố ảnh hƣởng đến sinh trƣởng phát triển tảo 1.3.1 Nhiệt độ 1.3.2 Ánh sáng 1.3.3 Chế độ sục khí, xáo trộn nƣớc 10 1.3.4 Ảnh hƣởng pH 11 1.3.5 Độ mặn 11 1.3.6 Nhu cầu dinh dƣỡng tảo 11 1.4 Vai trị vi tảo nói chung Chlorella nói riêng .15 1.4.2.Vi tảo nguồn thực phẩm ngƣời .16 1.4.3.Vi tảo ngành công nghiệp mĩ phẩm .16 1.4.4 Vi tảo nhiên liệu sinh học 16 1.4.5 Vi tảo dƣợc phẩm 17 1.4.6.Vi tảo nuôi trồng thủy sản 17 1.5 Giới thiệu chitosan 17 1.5.1 Cấu trúc hóa học tính chất chitosan 18 1.5.2 Ứng dụng chitosan 19 1.5 Các phƣơng pháp thu sinh khối vi tảo 20 iii 1.6.1 Phƣơng pháp ly tâm .21 1.6.2 Phƣơng pháp lọc 21 1.6.3 Phƣơng pháp lắng .21 1.6.4 Phƣơng pháp keo tụ 21 1.7 Tình hình nghiên cứu ngồi nƣớc thu sinh khối vi tảo 23 1.7.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 23 1.7.2.Tình hình nghiên cứu ngồi nƣớc 24 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tƣợng, thời gian, địa điểm nghiên cứu 26 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 26 2.1.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 26 2.2 Chuẩn bị điều kiện thí nghiệm 26 2.2.1 Nguồn nƣớc 26 2.2.2 Chitosan .27 2.2.3 Thiết bị, dụng cụ môi trƣờng dinh dƣỡng 28 2.3 Bố trí thí nghiệm 29 2.3.1 Nuôi sinh khối tảo Chlorella sp nƣớc biển tự nhiên nhân tạo điều kiện thí nghiệm 29 2.3.1.1 Nuôi vi tảo Chlorella sp nƣớc biển tự nhiên: 29 2.3.1.2 Nuôi vi tảo Chlorella sp nƣớc biển nhân tạo: 30 2.3.2 Ảnh hƣởng pH đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 31 2.3.3 Xác định loại chitosan 32 2.3.4 Xác định nồng độ chitosan dùng để thu sinh khối vi tảo 33 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 34 2.4.1 Xác định điều kiện thu sinh khối vi tảo 34 2.4.2 Phƣơng pháp xác định sinh trƣởng tảo .35 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Ảnh hƣởng nƣớc biển tự nhiên nhân tạo điều kiện thí nghiệm sinh khối tảo Chlorella sp 39 3.2 Ảnh hƣởng pH đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 40 3.3 Ảnh hƣởng loại chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 43 3.4 Ảnh hƣởng nồng độ chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối 45 iv 3.5 Ảnh hƣởng thời gian lắng đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 49 CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 52 4.1 Kết luận 52 Kết sinh trƣởng quần thể vi tảo Chlorella sp nuôi nƣớc biển tự nhiên nhân tạo điều kiện thí nghiệm .52 Ảnh hƣởng pH đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 52 Ảnh hƣởng loại chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 52 Ảnh hƣởng nồng độ chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 52 Ảnh hƣởng thời gian đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 52 4.2 Đề xuất 52 PHỤ LỤC v DANH MỤC BẢNG Bảng1.1: Thành phần sinh hóa Chlorella [16] Bảng 1.2: Composition and preparation of Walne medium (modified from Laing, 1991) 13 Bảng 1.3: F/2 Medium (Guillard and Ryther 1962, Guillard 1975) 15 Bảng 1.4: Hóa chất keo tụ vi tảo 21 Bảng 1.5: Tác dụng vi tảo 22 Bảng 2.1: Công thức pha nƣớc biển nhân tạo 27 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Tế bào tảo Chlorella sp Hình 1.2 Hình dạng tế bào tảo Chlorella sp trạng thái phân chia tế bào[12] Hình 1.3 Đƣờng cong sinh trƣởng quần thể vi tảo [14] Hình 1.6 Cấu trúc chitosan [37] 18 Hình 2.1 Tảo giống Chlorella sp 26 Hình 2.2 Đƣờng chéo pha lỗng 27 Hình 2.3 Dung dịch chitosan acid CH3COOH 28 Hình 2.4 Thiết bị dụng cụ sử dụng nghiên cứu 29 Hình 2.5 Sơ đồ bố trí quy trình ni Chlorella sp nƣớc biển tự nhiên 30 Hình 2.6 Tảo Chlorella sp ni nƣớc biển tự nhiên 30 Hình 2.7 Sơ đồ bố trí quy trình ni Chlorella sp nƣớc biển nhân tạo 30 Hình 2.8 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định pH 31 Hình 2.10 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định loài chitosan 33 Hình 2.11 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nồng độ chitosan 33 Hình 2.12 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian 34 Hình 2.13 Cách xác định chiều cao cột lắng [66] 35 Hình 2.14 Buồng đếm hồng cầu Neubauer 36 Hình 2.15 Cấu tạo buồng đếm Neubauer improved 36 Hình 2.16 Cách đếm tế bào tảo 37 Hình 3.1 Ảnh hƣởng nƣớc biển tự nhiên tới sinh trƣởng vi tảo Chlorella sp pha logarith 40 Hình 3.2 Ảnh hƣởng nƣớc biển nhân tạo tới sinh trƣởng vi tảo Chlorella sp pha logarith 40 Hình 3.3 Ảnh sinh khối vi tảo thí nghiệm điều chỉnh pH 42 Hình 3.4 Ảnh hƣởng pH đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Chlorella sp 43 Hình 3.5 Hình ảnh sinh khối vi tảo thu chitosan DD80 DD90 44 Hình 3.6 Ảnh hƣởng loại chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 45 Hình 3.7 Hình ảnh sinh khối vi tảo thu chitosan nồng độ khác 48 Hình 3.8 Ảnh hƣởng nồng độ chitosan đến hiệu suất thu sinh khối 48 Hình 3.9 Đánh giá hiệu suất thu hồi sinh khối thời gian khác 50 Hình 3.10 Ảnh hƣởng thời gian lắng đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 51 vii CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU DD : Độ deacetyl N : Nito P : Phosphat FE : Hiệu suất lắng CF : Hệ số lắng SSVF : Tỉ lệ thể tích phần chất rắn viii phút phút 10 phút 15 phút 20 phút 25 phút 40 phút 60 phút Hình 3.9 Đánh giá hiệu suất thu hồi sinh khối thời gian khác 50 Ảnh hƣởng thời gian lắng đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 120 99 92 100 99 72 80 57 60 Hiệu suất lắng 38 40 CF 20 0.64 1.11 2.44 5.34 8.02 8.73 Ảnh hƣởng thời gian lắng đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo 0.80 0.61 0.60 0.52 0.40 0.29 SSVF 0.20 0.17 0.04 0.00 0.04 Hình 3.10 Ảnh hƣởng thời gian lắng đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Chú thích:trục (x) biểu mức thời gian lần lƣợt 1- phút; – 5; –10 phút; – 15 phút; –20 phút; – 25 phút Trục ( y) biểu giá gị hiệu suất lắng H hệ số tập trung nồng độ CF tỉ lệ thể tích lắng SSVF 51 CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1 Kết luận Kết sinh trƣởng quần thể vi tảo Chlorella sp nuôi nƣớc biển tự nhiên nhân tạo điều kiện thí nghiệm  Trung bình mật độ cực đại vi tảo Chlorella sp nƣớc biển nhân tạo đạt giá trị 5.025×10^6 tb/mL, trung bính mật độ cực đại vi tảo Chlorella sp nƣớc biển tự nhiên đạt 0.88×10^6 tb/mL  Nhƣ vậy, dựa kết nghiên cứu cho thấy nuôi vi tảo Chlorella sp nƣớc biển nhân tạo tốt nuôi vi tảo Chlorella sp nƣớc Ảnh hƣởng pH đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Kết nghiên cứu cho thấy pH có ảnh hƣởng đáng kể đến hiệu suất thu hồi vi tảo Ở pH 10 cho hiệu suất thu hồi sinh khối cao Ảnh hƣởng loại chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Kết nghiên cứu cho thấy loại chitosan DD 90 cho hiệu suất thu hồi sinh khối cao Ảnh hƣởng nồng độ chitosan đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Kết nghiên cứu cho thấy nồng độ chitosan 10ppm cho hiệu suất thu hồi sinh khối cao Ảnh hƣởng thời gian đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Kết nghiên cứu cho thấy thời gian 20 phút cho hiệu suất thu hồi sinh khối cao 4.2 Đề xuất Để đƣa kết nghiên cứu vào thực tiễn, nghiên cứu cần tập trung vào số hƣớng sau đây: Thực lần lặp khoảng pH ảnh hƣởng đến hiệu suất thu hồi sinh khối vi tảo Thực thí nghiệm nhiều loại chitosan khác Nghiên cứu thêm yếu tố khác ảnh hƣởng đến trình thu hoạch vi tảo: nhiệt độ, độ mặn … Thử nghiệm sản phẩm thu hoạch làm thức ăn cho số đối tƣợng nuôi thủy sản 52 Thực thêm thí nghiệm liên quan tới trính lƣu giữ sản phẩm TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] A J R and C R Hays, G C., ―Natural and Climate Change Mediated Invasions,‖ Biol Invasions Mar Ecosyst., p pp 57-69, 2005 [2] P (Eds) Cotteau, P., Sorgeloos, P and Lavens, ―‗Micro - algae‘, in paper, Fisheries technical, Editor, Manual on the production and use of live food for aquaculture, Food and Agriculture Organization of the United Nations, Rome,‖ 1996 [3] R Pratt, ―STUDIES ON CHLORELLA VULGARIS XL RELATION BETWEEN SURFACE TENSION AND ACCUMULATION OF CHLORELLIN,‖ Am J Bot., vol 35, no 9, pp 634–637, 1948 [4] D K R and P C W Foley, J A., N Ramankutty, K A Brauman, E S Cassidy, J S Gerber, M Johnston, N D Mueller, C O‘Connell, ―Solutions for a cultivated planet.,‖ Nat 478, p (7369): 337, 2011 [5] R M Knuckey, M R Brown, R Robert, and D M F Frampton, ―Production of microalgal concentrates by flocculation and their assessment as aquaculture feeds,‖ Aquac Eng., vol 35, no 3, pp 300–313, 2006 [6] I De Godos et al., ―Coagulation/flocculation-based removal of algal–bacterial biomass from piggery wastewater treatment,‖ Bioresour Technol., vol 102, no 2, pp 923–927, 2011 [7] C Huang, S Chen, and J R Pan, ―Optimal condition for modification of chitosan: a biopolymer for coagulation of colloidal particles,‖ Water Res., vol 34, no 3, pp 1057–1062, 2000 [8] K Chung and D H Ferris, ―Martinus Willem Beijerinck (1851–1931),‖ J Am Med Assoc, vol 185, pp 40–41, 1963 [9] T C Bình, D T H Oanh, Q T Vinh, T T K T Trƣơng, and T Nghĩa, ―NUOI LUAN TRUNG (Brachionus plicatilis) THÂM CANH TRONG HỆ THỐNG TUẦN HOÀN KẾT HỢP VỚI BỂ NƢỚC XANH.‖ [10] Trần Văn Vĩ, ―Thức ăn tự nhiên.,‖ NXB Nông nghiệp, Hà Nội, 1995 [11] T Đ Toại and C V Minh, ―Rong biển dƣợc liệu Việt Nam,‖ Nxb Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, 2005 53 [12] N V Thôi, ―Nghiên cứu nuôi cấy tảo Chlorella thu nhận sinh khối,‖ Luận văn tốt nghiệp, 2013 [13] N T T TRANG, ―ẢNH HƢỞNG CỦA TẢO Chlorella LẮNG ĐẾN TỐC ĐỘ LỌC, CHỈ SỐ ĐỘ BÉO VÀ TỶ LỆ SỐNG CỦA SÕ HUYẾT (Anadara granosa),‖ LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH SINH HỌC BIỂN, TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN, 2013 [14] P Lavens and P Sorgeloos, Manual on the production and use of live food for aquaculture., no 361 Food and Agriculture Organization (FAO)., 1996 [15] Đ Đ K Trần Thị Tho, ―Nghiên cứu nuôi tảo lục Chlorella pyrenoidosachick phục vụ đối tƣợng thủy sản,‖ Luận văn thạc sĩ ngành NTTS, Đại Học Thủy Sản Bắc Ninh., 2000 [16] T Đ Toại, ―Rong biển dƣợc liệu Việt Nam,‖ NXB Khoa Học Kĩ Thuật Hà Nội, 2005 [17] S K Trƣơng, ―Kỹ thuật ni số lồi sinh vật làm thức ăn cho ấu trùng thủy sản.‖ Nông Nghiệp, 2004 [18] N T X Thu, ―Tảo đơn bào-cơ sở thức ăn động vật thủy sản,‖ Tuyển tập công trình nghiên cứu khoa học cơng nghệ (1984-2000), Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội, pp 405–422, 2004 [19] L W W Graham L E., ―Graham L E., L W Wilcox, 2000 Algae, Prentce Hall, Upper Saddle River, NJ 07458.),‖ 2000 [20] G Persoone, J Morales, H Verlet, and N De Pauw, ―Air-lift pumps and the effect of mixing on algal growth,‖ Algal Biomass, vol 11, pp 505–522, 1980 [21] T T T Nguyễn, ―Kỹ thuật sản xuất giống tôm xanh.‖ Nông Nghiệp, 2003 [22] C N B Anh, ―Ảnh hƣởng dinh dƣỡng đến sinh trƣởng quần thể, chất lƣợng ba loài vi tảo (Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana Tetraselmis chui) luân trùng (Brachionus plicatilis),‖ Luận án tiến sỹ nông nghiệp, Viện Nuôi Trồng Thủy Sản, trƣờng Đại Học Nha Trang, 2010 [23] Đ Đ Kim, ―Công nghệ sinh học vi tảo,‖ Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, p tr 5-125, 1998 [24] A Guerrero Valero, T Farina Tresguerras, and A Silva Abuin, ―Large-scale outdoor algal production for rearing seed oysters and clams to juvenile stage,‖ Cult bivalve molluscs, vol 7, 1981 54 [25] F Iriate and E Buitrago, ―Determination of concentration and optimal nitrogen source for Chlorella sp Culture used as inoculant for massive culture,‖ MEMSOC.–CIENC.-NAT.–SALLE, vol 51, pp 135–136, 1991 [26] M A Borowitzka and L J Borowitzka, Micro-algal biotechnology Cambridge University Press, 1988 [27] H T B Mai, ―Bài giảng thực vật nổi,‖ Đại học Thủy sản, Nha Trang, 1995 [28] T T T Nga, ―Ảnh hƣởng số loại muối dinh dƣỡng độ mặn khác lên phát triển vi tảo lục,‖ Luận văn tốt nghiệp, Khoa NTTS - Đại Học Nha Trang., 2005 [29] C Yan, Y Zhao, Z Zheng, and X Luo, ―Effects of various LED light wavelengths and light intensity supply strategies on synthetic high-strength wastewater purification by Chlorella vulgaris,‖ Biodegradation, vol 24, no 5, pp 721–732, 2013 [30] T T T Phƣơng, ―Phân lập lƣu giữ giống tảo lục Chlorella sp nƣớc mặn dùng ƣơng nuôi ấu trùng cá biển,‖ Luận văn tốt nghiệp Khoa Nuôi trồng thủy sản – Đại học Nha Trang, 2012 [31] J S García-Pérez et al., ―Influence of magnesium concentration, biomass concentration and pH on flocculation of Chlorella vulgaris,‖ Algal Res., vol 3, no 1, pp 24–29, 2014 [32] A J R and C R Hays, G C., ―Climate change and marine plankton.,‖ Trends Ecol Evol., vol 20, no 6, pp 337–344, 2005 [33] A microbiology and Biotechnology, ―Valuable products from biotechnology of microalgae.,‖ Pulz, O W Gross, vol 66, no 6, pp 635–648, 2004 [34] E D and A I Spolaore, P., C Joannis-Cassan, ―Commercial applications of microalgae.,‖ J Biosci Bioeng., vol 101, no 2, pp 87-96., 2006 [35] J algal biomass utln 3(4):, ―Commercial and industrial applications of micro algae–A review.,‖ Priyadarshani, I B Rath, vol 3, no 4, pp 89-100., 2012 [36] S Hirano, ―Chitin biotechnology applications,‖ in Biotechnology annual review, vol 2, Elsevier, 1996, pp 237–258 [37] T B T B Thoại, ―Chitosan: Nguyên liệu q từ vỏ tơm, cua,‖ Dân trí-khoahoc-cong-nghe, 2018 [38] P T N H Đức, ―Ứng dụng chitosan y học,‖ Đại học y dƣợc TPHCM 55 [39] P T Đ P Trang Sĩ Trung, ―Nghiên cứu ứng dụng chitosan việc làm giảm độ phân rã thức ăn tôm,‖ Tạp chí khoa học-Cơng nghệ Thủy sản, pp 18–22, 2005 [40] N J Zuidam and E Shimoni, ―Overview of microencapsulates for use in food products or processes and methods to make them,‖ in Encapsulation technologies for active food ingredients and food processing, Springer, 2010, pp 3–29 [41] T C Gudin, C., ―Chuyển đổi sinh học lƣợng mặt trời thành hóa chất hữu micoralgae,‖ Adv Cơng nghệ sinh học, pp 6: 73-110, 2009 [42] N.-H Norsker, M J Barbosa, M H Vermuë, and R H Wijffels, ―Microalgal production—a close look at the economics,‖ Biotechnol Adv., vol 29, no 1, pp 24–27, 2011 [43] E M Grima, E.-H Belarbi, F G A Fernández, A R Medina, and Y Chisti, ―Recovery of microalgal biomass and metabolites: process options and economics,‖ Biotechnol Adv., vol 20, no 7–8, pp 491–515, 2003 [44] G Buelna, K K Bhattarai, J De la Noue, and E P Taiganides, ―Evaluation of various flocculants for the recovery of algal biomass grown on pig-waste,‖ Biol wastes, vol 31, no 3, pp 211–222, 1990 [45] M L Y Lee, Hyuckjin Kwon, ―Harvesting of microalgae using flocculation combined with dissolved air flotation,‖ Biotechnol Bioprocess Eng., vol 19, no 1, pp 143–149, 2014 [46] P M P Divanach, ―Harvesting Chlorella minutissima using cell coagulants,‖ J Appl Phycol., vol Volume 22, no Issue 3, p pp 349–35 [47] S J L.-H P.-S K.-C K.-H Y.-S K.-D Yoon, ―Harvesting of Chlorella vulgaris using a bioflocculant from Paenibacillus sp AM49,‖ Biotechnol Lett., vol Volume 23, no Issue 15, p pp 1229–1234, 2001 [48] G Chen, L Zhao, Y Qi, and Y.-L Cui, ―Chitosan and Its Derivatives Applied in Harvesting Microalgae for Biodiesel Production: An Outlook,‖ J Nanomater., vol 2014, no 1, pp 1–9, 2014 [49] P M Divanach, ―Harvesting Chlorella minutissima using cell coagulants,‖ J Appl Phycol., vol Volume 22, no Issue 3, p pp 349–355 [50] S R T.-H S C M H M P Kruse, ―Second Generation Biofuels: High56 Efficiency Microalgae for Biodiesel Production,‖ BioEnergy Res., vol Volume 1, no Issue 1, p pp 20–43 [51] A A ZT Harith, FM Yusoff, MS Mohamed, M Shariff, M Din, ―Effect of different flocculants on the flocculation performance of flocculation performance of microalgae, Chaetoceros calcitrans, cells,‖ African J Biotechnol., vol 8, 2009 [52] M K Pontes SC, Goiris K, Foubert I, Pinoy LJ, ―Evaluation of electrocoagulation-flocculation for harvesting marine and freshwater microalgae,‖ Biotechnol Bioeng, 2011 [53] E S Beach, M J Eckelman, Z Cui, L Brentner, and J B Zimmerman, ―Preferential technological and life cycle environmental performance of chitosan flocculation for harvesting of the green algae Neochloris oleoabundans,‖ Bioresour Technol., vol 121, pp 445–449, 2012 [54] N T T Liên, ―ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT TẠO BÔNG ĐẾN HIỆU SUẤT KẾT BÔNG CỦA TẢO SILIC Skeletonema costatum,‖ Hue Univ J Sci Nat Sci., vol 127, no 1C, pp 221–229, 2018 [55] H Q Phong, T Đ Âu, T S Ngọc, and H T N Hiền, ―SẢN XUẤT CHẤT BÉO TỪ VI TẢO CHLORELLA SP SỬ DỤNG TỔNG HỢP DIESEL SINH HỌC,‖ Tạp chí Khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ, vol 35, pp 1–8, 2014 [56] Trƣơng Vĩnh, ―Báo cáo đề án quốc tế ‗Biodiesel Production from closed-algae growing systems using wastewater of Ethanol Plant in Vietnam,‘‖ Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học, Trƣờng Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh., p Mã số EEP-3V-053, 2013 [57] T S Trung, N T K Huyen, N C Minh, T T Le Trang, and N T Han, ―Optimization of harvesting of microalgal Thalassiosira pseudonana biomass using chitosan prepared from shrimp shell waste,‖ Asian J Agric Res., vol 10, no 5, pp 162–174, 2016 [58] L Chen, C Wang, W Wang, and J Wei, ―Optimal conditions of different flocculation methods for harvesting Scenedesmus sp cultivated in an open-pond system,‖ Bioresour Technol., vol 133, pp 9–15, 2013 [59] Y Xu, S Purton, and F Baganz, ―Chitosan flocculation to aid the harvesting of the microalga Chlorella sorokiniana,‖ Bioresour Technol., vol 129, pp 296– 57 301, 2013 [60] S Şirin, R Trobajo, C Ibanez, and J Salvadó, ―Harvesting the microalgae Phaeodactylum tricornutum with polyaluminum chloride, aluminium sulphate, chitosan and alkalinity-induced flocculation,‖ J Appl Phycol., vol 24, no 5, pp 1067–1080, 2012 [61] M S Farid, A Shariati, A Badakhshan, and B Anvaripour, ―Using nanochitosan for harvesting microalga Nannochloropsis sp.,‖ Bioresour Technol., vol 131, pp 555–559, 2013 [62] J Morales, J De La Noüe, and G Picard, ―Harvesting marine microalgae species by chitosan flocculation,‖ Aquac Eng., vol 4, no 4, pp 257–270, 1985 [63] M C J J Goldman, J.C., ―Steady state growth and ammonium uptake of a fastgrowing marine diatom,‖ 1978 [64] M Đ Thao, ―Bài Giảng Quản Lý Chất Lƣợng Nƣớc Trong NTTS.,‖ 2018 [65] J K Ahmad, A L., Mat Yasin, N H., Derek, C J C., & Lim, ―Optimization of microalgae coagulation process using chitosan,‖ Chem Eng J., p Trang 879882, 2011 [66] N H A T Nguy and N H Huy, ―Nghiên c ứu thu nhận đánh giá khả ch ống oxy hóa sinh khối vi tảo ( Thalassiosira pseudonana ),‖ 2015 [67] A Blanchemain and D Grizeau, ―Increased production of eicosapentaenoic acid by Skeletonema costatum cells after decantation at low temperature,‖ Biotechnol Tech., vol 13, no 7, pp 497–501, 1999 [68] T Si Trung and H N D Bao, ―Physicochemical Properties and Antioxidant Activity of Chitin and Chitosan Prepared from Pacific White Shrimp Waste,‖ Int J Carbohydr Chem., vol 2015, pp 1–6, 2015 [69] N J Z V Nedovic, ―Encapsulation Technologies for Active Food Ingredients and Food Processing,‖ 2010 [70] N Rashid, M S U Rehman, and J.-I Han, ―Use of chitosan acid solutions to improve separation efficiency for harvesting of the microalga Chlorella vulgaris,‖ Chem Eng J., vol 226, pp 238–242, 2013 [71] S Ş T I Salvad, ―Harvesting the microalgae Phaeodactylum tricornutum with polyaluminum chloride, aluminium sulphate, chitosan and alkalinity-induced flocculation,‖ J Appl Phycol., vol 24, no 5, p pp 1067–1080, 2012 58 [72] J Morales, J de la Noüe, and G Picard, ―Harvesting marine microalgae species by chitosan flocculation,‖ Aquac Eng., vol 4, no 4, pp 257–270, 1985 [73] Y Xu, S Purton, and F Baganz, ―Chitosan flocculation to aid the harvesting of the microalga Chlorella sorokiniana,‖ Bioresour Technol., vol 129, pp 296– 301, 2013 59 PHỤ LỤC Phụ lục hình Vi tảo Chlorella sp dùng thu Dung dịch NaOH 5% hồi sinh khối DD 80 Mẫu vi tảo Chlorella sp sau thu hồi DD 90 Bình tam giác 1L Máy bơm sục khí Ống đong thủy tinh Phụ lục bảng Bảng Hiệu suất lắng thí nghiệm ảnh hƣởng loại chitosan đến thu hồi sinh khối vi tảo Loại chitosan DD80 DD90 93 ± 0.57 92 93 95 ± 0.57 95 94 M ± SD Minimum Maximum Bảng Kết phân tích ANOVA yếu tố ảnh hƣởng loại chitosan lên hiệu thu sinh khối vi tảo Chlorella sp SUMMARY Groups DD80 DD90 Count 3 Sum Average Variance 278 92.66667 0.333333 284 94.66667 0.333333 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 1.333333 0.333333 Total 7.333333 SS df MS F P-value F crit 18 0.013236 7.708647 Bảng Hiệu suất lắng thí nghiệm ảnh hƣởng nồng độ chitosan đến thu hồi sinh khối vi tảo M ± SD Minimum Maximum 2.5 ppm ppm Nồng độ chitosan 7.5 ppm 82 ± 4.63 77 86 90 ± 2.29 96 91 91 ± 137 90 92 10 ppm 12.5 ppm 15 ppm 98 ± 038 98 98 95 ± 1.24 94 96 91 ± 1.15 90 92 Bảng Kết phân tích ANOVA yếu tố ảnh hƣởng nồng độ chitosan lên hiệu thu sinh khối vi tảo Chlorella sp SUMMARY Groups Count 2.5 pp ppm 7.5 ppm 10 ppm 12.5 ppm 15 ppm Sum 244.761 266.704 273.181 294.342 285.733 273.676 Average Variance 81.5873 88.9015 91.0603 98.1142 95.2444 21.49055 485.0462283 Within Groups 63.32783069 12 548.374059 17 Total 1.901618 0.144762 1.547876 91.2254 1.329463 ANOVA Source of Variation Between Groups SS 5.249645 df MS 97.0092 5.27731 F P-value 18.382 2.97E3 05 F crit 3.10587 Bảng Hiệu suất lắng thí nghiệm ảnh hƣởng thời gian đến thu hồi sinh khối vi tảo M ± SD Minimum Maximum phút phút Thời gian 10 phút 38 ± 5.32 34 44 57 ± 3.1.4 55 61 72 ± 8.76 63 81 15 phút 20 phút 25 phút 92 ± 051 92 93 99 ± 0.16 99 99 99 ± 0.22 99 99 Bảng Kết phân tích ANOVA yếu tố ảnh hƣởng thời gian lắng lên hiệu thu sinh khối vi tảo Chlorella sp SUMMARY Groups Count Sum Average Variance phút 115.4626 38.48754 28.37388 phút 171.6096 57.20321 9.916667 10 phút 215.0824 71.69413 76.74172 15 phút 277.0596 92.35319 0.262374 20 phút 296.147 98.71567 0.028326 25 phút 296.4132 98.80439 0.051618 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between 2.96EGroups 9246.75 1849.35 96.17456 09 3.105875 Within Groups 230.7492 12 19.2291 Total 9477.499 17 Bảng Kết phân tích ANOVA yếu tố ảnh hƣởng nƣớc biển tự nhiên nƣớc biển nhân tạo lên sinh trƣởng quần thể vi tảo Chlorella sp thông qua giá trị tốc độ sinh trƣởng pha logarithm SUMMARY Groups Count Sum Average Variance NT 15075000 5025000 1.42E+12 TN 2620000 873333.3 1.56E+10 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 2.59E+13 2.87E+12 2.59E+13 36.08172 0.003866 7.708647 7.17E+11 Total 2.87E+13 SS df MS F P-value F crit ... VI? ??N NUÔI TRỒNG THỦY SẢN BỘ MƠN QUẢN LÍ SỨC KHOẺ ĐỘNG VẬT THU? ?? SẢN  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Nghiên cứu sử dụng Chitosan thu hoạch vi tảo nƣớc mặn Chlorella sp làm thức ăn tƣơi sống nuôi trồng. .. lớn đến hiệu suất thu sinh khối vi tảo Xuất phát từ lý thực đề tài: ? ?Nghiên cứu sử dụng Chitosan thu hoạch vi tảo nƣớc mặn Chlorella sp làm thức ăn tƣơi sống nuôi trồng thủy sản? ?? Mục tiêu đề tài:... pháp thu hoạch vi tảo Chlorella nƣớc mặn vi? ??c sử dụng Chitosan Nội dung thực hiện:  Nghiên cứu ảnh hƣởng pH đến hiệu suất kết lắng thu sinh khối vi tảo Chlorella sp  Nghiên cứu ảnh hƣởng loại chitosan