ẢNH HƯỞNG của THỜI GIAN ủ NOÃN TRƯỚC ICSI đến kết QUẢ THỤ TINH và CHẤT LƯỢNG PHÔI

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG I HC Y H NI NG THU HNG ảNH HƯởNG CủA THờI GIAN ủ NOÃN TRƯớC ICSI ĐếN KếT QUả THụ TINH Và CHấT LƯợNG PHÔI LUN VN THC S Y HỌC HÀ NỘI - 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NI NG THU HNG ảNH HƯởNG CủA THờI GIAN ủ NOÃN TRƯớC ICSI ĐếN KếT QUả THụ TINH Và CHấT LƯợNG PHÔI Chuyờn ngnh: Mụ - Phụi thai hc Mó số: 60720102 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa hoc: PGS TS Nguyễn Khang Sơn HÀ NỘI - 2016 LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn: - Đảng ủy, ban giám hiệu, phòng quản lý đào tạo sau đại học, Bộ môn Mô phôi thai học trường đại học Y Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu trường môn - Đảng ủy, ban giám đốc, phòng Nghiên cứu khoa học, Trung tâm Hỗ trợ sinh sản Quốc gia - bệnh viện Phụ sản Trung ương tạo điều kiện để thực luận văn - Tập thể lãnh đạo, cán bộ, nhân viện Trung tâm Hỗ trợ sinh sản Quốc gia - bệnh viện Phụ sản Trung ương tạo điều kiện giúp đỡ cho q trình học tập Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Nguyễn Khang Sơn, người Thầy truyền đạt kiến thức, niềm say mê học tập, sát tận tình bảo tơi tồn q trình nghiên cứu, hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn Thầy cô Hội đồng bảo vệ đề cương Hội đồng chấm luận văn đóng góp nhiều ý kiến vơ q báu q trình thực luận văn Đặc biệt tơi xin kính trọng bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới ba mẹ tơi, chồng tôi, người thân gia đình ln ủng hộ, động viên tơi học tập, phấn đấu trưởng thành sống nghiệp Xin trân trọng cảm ơn ! Hà Nội, ngày 21 tháng 12 năm 2016 Đặng Thu Hằng LỜI CAM ĐOAN Tôi Đặng Thu Hằng học viên lớp Cao học khóa XXIII, Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Mô phôi thai học, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS TS Nguyễn Khang Sơn Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm cam kết Hà Nội, ngày 21 tháng 12 năm 2015 Đặng Thu Hằng DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BVPSTƯ : Bệnh viện Phụ sản Trung ương BTĐN CCs CLG COC FSH GCs GnRH : Buồng trứng đa nang : Corona cells: Tế bào vành tia : Centrally located granular: Đám hạt trung tâm bào tương : Cumulus Oocyte Complex: Phức hợp noãn - tế bào nang : Follicle-stimulating Hormone: Hormone kích thích nang nỗn : Granulosa cells: Tế bào hạt : Gonadotropin Releasing Hormone (Hormone giải phóng gonadotropin) Gran GV GVBD hCG ICM ICSI : Granularity: Độ mịn bào tương : Germinal Vesicle: Nang mầm : Germinal Vesicle Break Down: Nang mầm tiêu biến : Human Chorionic Gonadotropin: Hormone rau thai người : Inner Cell Mass: Khối tế bào nội phôi : Intra-cytoplasmic Sperm Injection: (Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn) Incls IVF KTBT LH : Inclusion hay refractile body: Thể vùi : In-vitro Fertillization: Thụ tinh ống nghiệm : Kích thích buồng trứng : Luteinizing Hormone: Hormone hồng thể hóa LNMTC : Lạc nội mạc tử cung MI MII : Metaphase I: Kỳ giảm phân I : Metaphase II: Kỳ giảm phân II NP : Non – progressive Motility: Di động không tiến tới NPB NST PB : Nucleolar Precursor Body: Thể hạt nhân : Nhiễm sắc thể : Polar Body: Thể cực PM PN : Post mature: Quá trưởng thành : Pro Nuclear: Tiền nhân PR : Progressive motility: Di động tiến tới PVP PVS SER TB TE TTTON : Polyvinyl Pyrolidone : Perivitelline Space: Khoang quanh noãn : Smooth Endoplasmic Reticulum: Lưới nội bào : Tế bào : Trophectoderm: Nguyên bào nuôi : Thụ tinh ống nghiệm VS : Vô sinh VAC : Vacuole: Không bào ZP : Zona pellucida: Màng suốt MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 SỰ PHÁT TRIỂN CỦA NOÃN NGƯỜI .3 1.1.1 Sự hình thành nỗn 1.1.2 Sự trưởng thành noãn .5 1.2 THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM 1.2.1 Định nghĩa .7 1.2.2 Các bước tiến hành TTTON 1.3 ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG NOÃN .9 1.3.1 Đánh giá phức hợp noãn - tế bào nang 1.3.2 Đánh giá chất lượng noãn .10 1.4 ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ TTTON 16 1.4.1 Đánh giá hợp tử .16 1.4.2 Đánh giá phôi giai đoạn phân chia ngày -3 19 1.5 KỸ THUẬT TIÊM TINH TRÙNG VÀO BÀO TƯƠNG NOÃN 19 1.5.1 Sự đời kỹ thuật ICSI 19 1.5.2 Chỉ định trường hợp tiêm tinh trùng vào bào tương noãn 20 1.5.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến kết ICSI .20 1.5.4 Các nghiên cứu thời gian ủ trứng trước ICSI 21 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 24 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 24 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 24 2.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 25 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu .25 2.2.2 Cỡ mẫu nghiên cứu .25 2.2.3 Quy trình thực .26 2.3 CÁC CHỈ SỐ, BIẾN SỐ NGHIÊN CỨU .33 2.3.1 Các số đặc điểm mẫu nghiên cứu .33 2.3.2 Các số chất lượng noãn, kết thụ tinh phân loại phôi.34 2.4 KHỐNG CHẾ SAI SỐ TRONG NGHIÊN CỨU 34 2.5 CÁC TIÊU CHUẨN CỦA NGHIÊN CỨU 35 2.5.1 Các số tinh dịch đồ bình thường .35 2.5.2 Đánh giá chất lượng noãn .35 2.5.3 Đánh giá thụ tinh hợp tử 37 2.5.4 Đánh giá chất lượng phôi 37 2.6 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU .38 2.7 ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU 38 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 39 3.1 ĐẶC ĐIỂM CỦA ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 39 3.1.1 Đặc điểm tuổi 39 3.1.2 Đặc điểm tinh dịch đồ 40 3.1.3 Thời điểm chọc hút noãn .40 3.1.4 Số noãn thu sau tách noãn 41 3.1.5 Mức độ trưởng thành noãn 41 3.1.6 Đặc điểm hình thái nỗn .42 3.1.7 Kết thụ tinh .44 3.1.8 Tỷ lệ tạo phôi chất lượng phôi 44 3.2 SO SÁNH CHẤT LƯỢNG NỖN CỦA BA NHĨM NGHIÊN CỨU .45 3.2.1 Mức độ trưởng thành nỗn theo nhóm 45 3.2.2 Đặc điểm hình dạng kích thước nỗn .47 3.2.3 Đặc điểm hình thái nỗn 49 3.3 SO SÁNH KẾT QUẢ THỤ TINH CỦA BA NHÓM NGHIÊN CỨU 59 3.3.1 Kết thụ tinh .59 3.3.2 Phân loại hợp tử 60 3.4 SO SÁNH CHẤT LƯỢNG PHƠI CỦA NHĨM NGHIÊN CỨU 63 3.4.1 Tỷ lệ tạo phôi 63 3.4.2 Chất lượng phôi .64 Chương 4: BÀN LUẬN .68 4.1 BÀN LUẬN VỀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .68 4.2 BÀN LUẬN VỀ ĐẶC ĐIỂM CỦA ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 70 4.2.1 Tuổi vợ 70 4.2.2 Đặc điểm tinh dịch đồ 71 4.2.3 Thời điểm chọc hút noãn .71 4.2.4 Số noãn nghiên cứu 71 4.2.5 Tỷ lệ noãn trưởng thành số yếu tố liên quan .72 4.3 BÀN LUẬN VỀ ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN Ủ NOÃN TRƯỚC ICSI ĐẾN CHẤT LƯỢNG NOÃN 74 4.3.1 Mức độ trưởng thành noãn 74 4.3.2 Đặc điểm hình thái nỗn 76 4.4 BÀN LUẬN VỀ ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN Ủ NOÃN TRƯỚC ICSI ĐẾN KHẢ NĂNG THỤ TINH 80 4.4.1 Kết thụ tinh chung 80 4.4.2 Kết thụ tinh theo nhóm 81 4.5 BÀN LUẬN VỀ ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN Ủ NOÃN TRƯỚC ICSI ĐẾN CHẤT LƯỢNG PHÔI 84 KẾT LUẬN 88 KHUYẾN NGHỊ VÀ HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP .90 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 92 KHUYẾN NGHỊ VÀ HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP - Nỗn sau chọc hút ủ khoảng thời gian 2,5 đến 4,5 trước ICSI mà khơng có khác khác biệt đáng kể tỉ lệ thụ tinh, tạo phôi chất lượng phơi - Tuy nhiên nỗn ủ đến 4,5 có xu hướng trưởng thành tốt đầy đủ - Nên nghiên cứu với cỡ mẫu lớn hơn, đa dạng để tìm khoảng thời gian tối ưu cho việc ủ trưởng thành noãn giúp nâng cao hiệu thụ tinh ống nghiệm cho đối tượng khác TÀI LIỆU THAM KHẢO Cao Ngọc Thành, Lê Minh Tâm (2006) Điều trị vô sinh - Hiện tương lai Tạp chí Y học thực hành, 550, 45-50 Trounson A.O., Mohr L.R., Wood C., et al (1982) Effect of delayed insemination on in-vitro fertilization, culture and transfer of human embryos Journal of Reproduction and Fertility, 64(2), 285–294 Harrison K L., Wilson L M., Breen T M., et al (1988) Fertilization of human oocytes in relation to varying delay before insemination Fertility and Sterility, 50(2), 294–297 Veeck L L (1988) Oocyte assessment and biological performance Annals of the New York Academy of Sciences, 541, 259– 274 Khan I., Staessen C.,Van Den Abbeel E et al (1989) Time of insemination and its effect on in-vitro fertilization, cleavage and pregnancy rates in GnRH agonist/HMG-stimulated cycles Human Reproduction, 4(8), 921–926 Rienzi L., Ubaldi F., Anniballo R et al (1998) Preincubation of human oocytes may improve fertilization and embryo quality after intracytoplasmic sperm injection Human Reproduction, 13(4), 1014– 1019 Yanagida K., Yazawa H., Katayose H et al (1998) Influence of oocyte preincubation time on fertilization after intracytoplasmic sperm injection Human Reproduction, 13(8), 2223–2226 Velde H van de, Vos A de, Joris H et al (1998) Effect of timing of oocyte denudation and micro-injection on survival, fertilization and embryo quality after intracytoplasmic sperm injection Human Reproduction, 13(11), 3160–3164 Jacobs M., Stolwijk A M., Wetzels A M (2001) The effect of insemination/ injection time on the results of IVF and ICSI Human Reproduction, 16(8), 1708–1713 10 Ho J Y., Chen M J., Yi Y C et al (2003) The effect of preincubation period of oocytes on nuclear maturity, fertilization rate, embryo quality, and pregnancy outcome in IVF and ICSI Journal of Assisted Reproduction and Genetics, 20(9), 358–364 11 Isiklar A., Mercan R., Balaban B et al (2004) Impact of oocyte preincubation time on fertilization, embryo quality and pregnancy rate after intracytoplasmic sperm injection Reproductive BioMedicine Online, 8(6), 682–686 12 Dozortsev D., Nagy P., Abdelmassih S et al (2004) The optimal time for intracytoplasmic sperm injection in the human is from 37 to 41 hours after administration of human chorionic gonadotropin Fertility and Sterility, 82(6), 1492– 1496 13 Falcone P., Gambera L., Pisoni M et al (2008) Correlation between oocyte preincubation time and pregnancy rate after intracytoplasmic sperminjection Gynecological Endocrinology, 24(6), 295–299 14 Catherine P., Aida K., Lucie D et al (2012) Optimal Timing for Oocyte Denudation and Intracytoplasmic Sperm Injection Hindawi Publishing Corporation Obstetrics and Gynecology International Volume, 403531 15 Kubiak J Z (1989) Mouse oocytes gradually develop the capacity for activation during the metaphase II arrest Developmental Biology, 136(2), 537–545 16 Balakier H., Sojecki A., Motamedi G et al (2004) Time dependent capability of human oocytes for activation and pronuclear formation during metaphase II arrest Human Reproduction, 19( 4), 982–987 17 Eppig J J., Schultz R M., O’Brien M et al (1994) Relationship between the developmental programs controlling nuclear and cytoplasmic maturation of mouse oocytes Developmental Biology, 164(1), 1–9 18 Sundstrom P and Nilsson B O (1988) Meiotic and cytoplasmic maturation of oocytes collected in stimulated cycles is asynchronous Human Reproduction, 3(5), 613–619 19 Trịnh Bình (2013), Mơ-Phơi: phần mơ học Nhà xuất Y học, Hà Nội 20 Hồ Mạnh Tường, Đặng Quang Vinh, Vương Thị Ngọc Lan (2011), Thụ Tinh ống nghiệm Nhà xuất Giáo dục, Hà Nội 21 Steven F., Simon C (2009), Textbook of Assisted Reproduction for Scientists in Reproductive Technology 22 Voronina E., Wessel, Gary M (2003), The Regulation of Oocyte Maturation Current Topics in Developmental Biology, 58, 53-110 23 Morito Yoshiharu (2009), Ultrastructure of the Human Oocyte during in vitro maturation J Mamm Ova Res, 26, pp 10-17 24 Tanghe S.,Van Soom A., Nauwynck H., Coryn M., de Kruif A (2002), Minireview: Functions of the cumulus oophorus during oocyte maturation, ovulation, and fertilization Mol Reprod Dev, 2002 61(3): p 414-24 25 Voronina, E., Wessel, Gary M (2003), The Regulation of Oocyte Maturation Current Topics in Developmental Biology, 2003 58: p 53-110 26 Hồ Mạnh Tường cộng (2000), Thụ tinh ống nghiệm, Tạp chí Y học TP HCM, 14, 17-19 27 Phan Trường Duyệt Phan Khánh Vy (2001), Thụ tinh ống nghiệm, Nhà xuất Y học, Hà Nội 28 Cristina M., Jones G M., Lundin K et al (2012) Atlas of Human Embryology: from Oocytes to Preimplantation Embryos Human Reproduction, 27(1), 27-37 29 Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology (2011) The Istanbul consensus workshop on embryo assessment: preceedings of an expert meeting Hum Reprod, 26, 1270-1283 30 Akani M., Palermo G., Adler A et al (1995) Intracytoplasmic sperm injection in dysmorphic human oocytes Zygote 3, 283 –8 31 Ebner T., Yaman C., Moser M et al (2000) Prognostic value of first polar body morphology on fertilization rate and embryo quality in intracytoplasmic sperm injection Hum Prod 15, 427 – 30 32 Ebner T., Moser M., Tews G (2006) Is oocyte morphology prognostic of embryo developmental potential after ICSI? Reprod Biomed Online, 12, 507 – 512 33 Ebner T., Moser M., Shebl O et al (2008) Prognosis of oocytes showing aggregation of smooth endoplasmic reticulum Reprod Biomed Online,16(1), 113-8 34 Ebner T., Landes- Frauen- und Kinderklinik (2008), Morphological Markers of Oocyte Quality IVF-Unit Linz, Austria 35 Hội Phụ sản khoa sinh đẻ có kế hoạch Việt Nam (VINAGOFPA) (2012), Đồng thuận đánh giá phân loại nỗn, phơi hỗ trợ sinh sản, Chi hội Y học sinh sản Việt Nam (VSRM) 36 De Sutter P., Dozortsev D., Qian C et al (1996) Oocyte morphology does not correlate with fertilization rate and embryo quality after intracytoplasmic sperm injection Hum Reprod,11, 595–597 37 Van Blerkom J., Henry G (1992) Oocyte dysmorphism and aneuploidy in meiotically mature human oocytes after ovarian stimulation Hum Reprod, 7, 379-390 38 Ebner T., Moser M., Sommergruber M et al (2005) Occurrence and developmental consequences of vacuoles throughout preimplantation development Fertil Steril, 83, 1635 – 1640 39 Junko Otsuki (2009) Mini review – Intracytoplasmic Morphological Abnormalities in Human Oocytes J Mamm Ova Res, 26, 26-31 40 Xia P (1997) Intracytoplasmic sperm injnection: correlation of oocyte grade based on polar body, perivitelline space and cytoplasmic inclusions with fertilization rate and embryo quality Human Reproduction, 12(8), 1750-1755 41 Wilding M., Di M L., D’Andretti S et al (2007) An oocyte score for use in assisted reproduction J Assist Reprod Genet, 24, 350 – 358 42 Vutyvanich T (2003) Laboratory management of A.R.T Assisted Reproduction technology Chiang Mai: Nopburi, 57 – 43 Veeck L L.(1999) An Atlas of human gametes and conceptuses New York: The Parthenon Publishing Group, 15-24, 32-68 44 Hassan – Ali H., Hisham – Saleh A., El-Gezeiry D et al (1998) Perivitelline space granularity: a sign of human menopausal gonadotropin overdose in intracytoplasmic sperm injection Human Reproduction, 13(12), 3425-3430 45 Sadowy S., Tomkin G., Munne S (1998) Impaired development of zygotes with uneven pronuclear size Zygote, 6, 137 – 141 46 Scott L (2009) Analysis of fertilization, in Gardner D, Weissman A, Howles CM and Shoham Z (eds), Textbook of Assisted reproductive technologies, Informa healthcare, NewYork, 207-217 47 Scott L (2003) Pronuclear score as a predictor of embryo development Reprod Biomed Online, 6, 201–214 48 Palermo G., Joris H., Devroey P et al (1992) Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte, 340, 17-8 49 Van Steirteghem A C., Liu J., Joris H et al (1993) Higher success rate by intracytoplasmic sperm injection than by subzonal insemination Report of a second series of 300 consecutive treatment cycles Hum Reprod, 8, 1055 – 60 50 Andersen A.N., Gianaroli L., Felberbaum R et al (2005) Assisted reproductive technology in Europe, Results generated from European registers by ESHRE Hum Reprod, 24,1267-87 51 Palermo G., Neri Q., Monahan D et al (2012) Development and current applications of assisted fertilization Fertil Steril, 97, 248-59 52 Nagy Z., Liu J., Joris H et al (1995) The result of intracytoplasmic sperm injection is not related to any of the three basic sperm parameters Hum Reprod, 10, 1123-1129 53 Hồ Mạnh Tường, Vương Thị Ngọc Lan, Nguyễn Thị Ngọc Phượng cộng (2002) Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn: Các yếu tố liên quan đến tỷ lệ thành công Y Học TPHCM, 6(2), 361-4 54 Nasr-Esfahani M.H., Salehi M., Razavi S et al (2005) Effect of sperm DNA damage and sperm protamine deficiency on fertilization and embryo development post-ICSI Reprod Biomed Online, 11, 198-205 55 Jamieson M E (1991) In vivo and in vitro maturation of human oocytes: effects on embryo development and polyspermic fertilization Fertil Steril, 56, 93 - 97 56 Mansour R T., Aboulghar M.A., Serour G I (1994) Study of the optimum time for human chorionic gonadotropin-ovum pickup interval in in vitro fertilization J Assist Reprod Genet,11, 478 – 481 57 Raziel A (2006) In vivo maturation of oocytes by extending the interval between human chorionic gonadotropin administration and oocyte retrieval Fertil Steril, 86, 583- 587 58 Wang W., Zhang X H., Wang W H (2011) The time interval between hCG priming and oocyte retrieval in ART program: a meta-analysis J Assist Reprod Genet, 28, 901 - 910 59 Bomsel-Helmreich O., Salat-Baroux J., Huyen LVN et al (1987) Timing of nuclear maturation and cumulus dissociation in human oocytes stimulated with clomiphene citrate, human menopausal gonadotropin, and human chorionic gonadotropin Fertil Steril, 48, 586–595 60 Nguyễn Xuân Hợi, Lê Hoàng (2016) Thời điểm tối ưu chọc hút noãn thụ tinh ống nghiệm phác đồ antagonist, Tạp chí nghiên cứu Y học, 99 61 Jamieson M E., Fleming R., Kader S et al (1991) In vivo and in vitro maturation of human oocytes: Effects on embryo development and polyspermic fertilization Fertil Steril, 56, 93–97 62 Vanessa Y R., Catherine M H C, (2009) Human Oocyte abnormalities: Basic Analyses and Clinical Applications, Biennial Review of Infertility, 45, 1-14 63 Dandeker P., Talbot P (1992) Perivetelline space in mamalian oocytes: extracellular matrix of unfertilizated oocytes and formation of cortical granule envelope following fertilization Mol Reprod, 31(2), 135-43 64 Sathananthan A H (1997) Ultrastructure of the human egg Hum Cell, 10, 21–38 65 Rienzi L., Ubaldi F M., Iacobelli M et al (2008) Significance of metaphase II human oocyte morphology on ICSI outcome, Fertility and Sterility, 90(5), 1692-1700 66 Eichenlaub R U., Schmiady H., Kentenich H et al (1995) Recurrent failure in polar body formation and premature chromosome condensation in oocytes from a human patient: indicators of asynchrony in nuclear and cytoplasmic maturation, Human Reprod, 10(9), 2343-9 67 Ciotti P M., Notarangelo L., Morselli-Labate A M et al (2004) First polar body morphology before ICSI is not related to embryo quality or pregnancy rate Human Reproduction, 19(10), 2334–2339 68 Kahraman S., Yakin K., Donmez E et al (2000) Relationship between granular cytoplasm of oocytes and pregnancy outcome following intracytoplasmic sperm injection, Human Reproduction, 15(11), 23902393 69 Tesarik, J and Greco E (1999) The probability of abnormal preimplantation development can be predicted by a single static observation on pronuclear stage morphology Hum Reprod, 14, 13181323 70 Scott L and Smith S (2000) The successful use of pronuclear embryo transfers the day following oocyte retrieval Human Reproduction, 13 (4), 1003-1013 71 David K G., Weissman A., Colin M H et al (2009) Textbook of Assisted Reproductive Technologies, Laboratory and Clinical Perspectives, 273-274 72 Depa-Martynow M., Jedrzejczak P., Pawelczyk L (2007) Pronuclear scoring as a predictor of embryo quality in in vitro fertilization program, Folia Histochemica Et Cytobiologica, 45 (1), 87-91 73 Rienzi L., Ubaldi F M., Iacobelli M et al (2008), Significance of metaphase II human oocyte morphology on ICSI outcome, Fertility and Sterility, 90(5), 1692-1700 74 Balaban B., Urman B., Sertac A et al (1998), Oocyte morphology does not affect fertilization rate, embryo quality and implantation rate after intracytoplasmic sperm injection, Hum Reprod, 13(12), 3431-3 Phụ lục PHIẾU ĐỒNG Ý THAM GIA NGHIÊN CỨU Họ tên đối tượng nghiên cứu…………………………… ………… Tuổi………………………………………………………… ……… Địa chỉ……………………………………………………… ……… Điện thoại…………………………………………………… ……… Sau cán nghiên cứu thơng báo mục đích, quyền lợi, nghĩa vụ, nguy tiềm tàng thông tin chi tiết nghiên cứu liên quan đến đối tượng nghiên cứu Tôi đồng ý tham gia vào nghiên cứu Tôi xin tuân thủ quy định nghiên cứu Hà Nội, ngày….tháng….năm 2016 Đối tượng nghiên cứu (Ký ghi rõ họ tên) Phụ lục PHIẾU THU THẬP SỐ LIỆU Nghiên cứu mối liên quan thời gian ủ trứng trước ICSI với kết thụ tinh chất lượng phôi thụ tinh ống nghiệm Số thứ tự:…………………………………Số hồ sơ IVF:………………… Họ tên vợ:……………………………………………………………… Họ tên chồng:…………………………………………………………… Số điện thoại:……………………………………………………………… I ĐẶC ĐIỂM CỦA NHÓM NGHIÊN CỨU Tuổi □ < 30 tuổi □ từ 30 – 35 tuổi Thời gian vô sinh…………………………… Ngun nhân vơ sinh □ Do vịi tử cung □ Do chồng □ Do buồng trứng đa nang Tinh dịch đồ - Mật độ tinh trùng:……… (triệu/ml) - Tổng số tinh trùng: …… (triệu/ml) - PR (di động tiến tới):……….(%) - NP (di động chỗ):……….(%) - Tinh trùng sống:……………(%) - Tinh trùng bình thường:……(%) Ngày - Giờ tiêm hCG:………………Giờ OR:………………Giờ ICSI:………… -Đặc điểm noãn thực ICSI Đđ STT Nhóm 10 Nhóm 10 Nhóm 3 10 GV, MI, MII Hình dạng Kích thước Bào tương Gran VAC SER ZP PVS PB Incls II KẾT QUẢ THỤ TINH Đặc điểm hợp tử (Ngày 1) STT Đđ Số nỗn thối hóa sau ICSI Thụ tinh (2PN) Phân loại Z1 Z1 – Z4 Z2 Z3 Z4 Đặc điểm màng suốt Đặc điểm cực cầu Nhóm Nhóm Nhóm Đđ STT Nhóm Nhóm Nhóm Phân loại Z1 – Z4 Thối hóa PN 10 10 10 Chất lượng phôi N2/ N3 PN Z1 Z2 Z3 Z4 Đđ màng suốt Đđ cực cầu Đđ Kích thước STT Nhóm Nhóm Nhóm 3 10 10 10 Số lượng phôi bào Độ đồng phôi bào Phôi bào đa nhân Tỷ lệ fragm ent Màng suốt KẾT LUẬN Độ Độ Độ Độ ... NĂNG THỤ TINH 80 4.4.1 Kết thụ tinh chung 80 4.4.2 Kết thụ tinh theo nhóm 81 4.5 BÀN LUẬN VỀ ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN Ủ NOÃN TRƯỚC ICSI ĐẾN CHẤT LƯỢNG PHÔI 84 KẾT LUẬN... GIAN Ủ NOÃN TRƯỚC ICSI ĐẾN CHẤT LƯỢNG NOÃN 74 4.3.1 Mức độ trưởng thành noãn 74 4.3.2 Đặc điểm hình thái noãn 76 4.4 BÀN LUẬN VỀ ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN Ủ NOÃN TRƯỚC ICSI ĐẾN... 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI ĐẶNG THU HNG ảNH HƯởNG CủA THờI GIAN ủ NOÃN TRƯớC ICSI ĐếN KếT QUả THụ TINH Và CHấT LƯợNG PHÔI Chuyên ngành: Mô - Phôi thai học Mã