Ứng dụng công nghệ gen động vật, vi sinh vật trong nông nghiệp, y tế

Ứng dụng công nghệ gen động vật, vi sinh vật trong nông nghiệp, y tế

ứng dụng công nghệ gen động vật, vi sinh vật nông nghiệp, y tế I Chẩn đoán phân tử ã Chẩn đoán bệnh ã Chẩn đoán giới tính ã Nhận dạng cá thể qua giám định ADN ã Xác định quan hệ huyết thống qua phân tích ADN ty thể 1.1.ứng dụng chẩn đoán bệnh ã Sử dụng kỹ thuật công nghệ gen để phát hiện, chẩn đoán cách xác, nhanh chóng bệnh di truyền truyền nhiễm gây nấm, khuẩn, virus dựa sở nguyên nhân gây bệnh làm xuất axit nucleic ngoại lai thể bị bƯnh hay xt hiƯn sù biÕn ®ỉi axit nucleic thể ã Trong kỹ thuật thao tác ADN, ARN kỹ thuật lai axit nucleic khuếch đại axit nucleic kỹ thuật đợc sử dụng chẩn đoán bệnh khả ứng dụng rộng nhiều loại bệnh, tốc độ chẩn đoán nhanh, xác ã Phổ biến phơng pháp khuyếch đại axit nucleic phơng pháp PCR dạng cải biến (real time PCR, RT-PCR…) Cã h¬n 100 bƯnh cã thĨ chẩn đoán đợc phơng pháp Nguyên lý ã Chẩn đoán bệnh truyền nhiễm : Xác định có mặt hay mặt axit nucleic tác nhân gây bệnh đối tợng chẩn đoán để xác định cá thể mang bệnh giai đoạn sím (cha cã triƯu chøng vµ dÊu hiƯu bƯnh lý) ã Chẩn đoán bệnh di truyền: phát biến đổi đặc trng axit nucleic liên quan đến bệnh đối tợng chẩn đoán để phát bệnh giai đoạn phát triển cá thể, chí giai đoạn phôi ã Quá trình chẩn đoán bệnh nhờ lai khuyếch đại axit nucleic bao gồm giai đoạn chính: Thu thập mẫu để chẩn đoán Tiến hành kỹ thuật phù hợp để phát axits nuclei ngoại lai hay biến đổi axits nuclei nội tế bào chủ mẫu chẩn đoán Phân tích, đánh giá kết PCR for Medical Diagnostics Chẩn đoán bệnh truyền nhiễm PCR Việt nam ã Bệnh ung th vòm họng Epstein-Bar virus víi cỈp måi: –TH1: 5’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’ –TH2: 5’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’-GCTTGGATGGCCGAGTCAGCGACGG-3’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’ • BƯnh viªm gan B Hepatitis B virus b»ng PCR lång víi hai cỈp måi:  CỈp måi 1: HBV P1 vµ HBV M1: 5’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’- AGTAAACCCTGTTCCGACTACTGCC-3’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’ 5’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’- AGTTGGCGAGAAAGTGAAAGCCTG-3’-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3’  Cặp mồi 2:HBV P2 HBV M2: 5-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3- GACATGGAGAGCACAACATCCAGG-3-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3 5-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3- GCATTAAAGGCATCAAAGGCAGG-3-AGCCAATTGTCAGTTCTAGGGAGGG-3 Chẩn đoán bệnh truyền nhiễm PCR Việt nam ã Bệnh sốt rét: 80% trờng hợp sốt rÐt ë níc ta nhiƠm ký sinh trïng Plasmodium falciparum, số bệnh nhân nhiễm phối hợp 2-3 loại ký sinh trïng sèt rÐt kh¸c (P vivax, P ovale, P.malariae) Sử dụng phơng pháp PCR lồng với cặp mồi: Plu5-Plu6 (PCR lần1) PCR lần với cỈp måi: Fal1-Fal2 (P falciparum), Viv1-Viv2 (P vivax), Mal1-Mal2 (P.malariae), ova1-ova2 (P ovale) chẩn đoán nhanh xác loài ký sinh trùng lây nhiễm bệnh nhân • BƯnh cóm gia cÇm H5N1: sư dơng RT-PCR víi mồi (primes) đầu dò (DNA probes) đặc hiệu cho locus khác gen HA phân lập từ mẫu bệnh phẩm Việt nam đà chẩn đoán nhanh, nhạy có mặt chủng virus (bảng sau) Giíi thiƯu vỊ virut H5N1 • Thc hä orthomyxoviridae : gây bệnh đờng hô hấp ngời, động vật, gia cầm, chim ã Gồm typ A, B, C A gây dịch cúm chính, B nhẹ hơn, C nguy hiĨm cho ngêi • Virut cóm typ A, B thc chi influenzavirus trun bƯnh qua sol khÝ, dßng níc, tiếp xúc ã Virion có vỏ đa hình thái, thờng có hình cầu đờng kính 80-120nm ã Bề mặt virut có loại gai: Hemaglutinin (H) neuraminidaza (N) ã Virut typ A có 16 loại gai H H1, H2, H3 gây bệnh cho ngời Có loại gai N N1, N2 gây bệnh cho ngời Giíi thiƯu vỊ virut H5N1 • Genome cđa virut có nhiều phân đoạn nên dẫn đến thay đổi kháng nguyên liên tục: Thay đổi lớn: hoán vị kháng nguyên, xảy có hay nhiều chủng virut có nhiều đoạn ARN khác biệt xâm nhiễm vào tế bào Các đoạn hoán vị cho nhau, thí dụ thay đoạn mà hoá cho Hemaglutinin ngời đoạn động vật, kết tạo chủng virut với kháng nguyên thay đổi, kháng lại đợc kháng thể đà hình thành trớc Thay đổi nhỏ: biến thể kháng nguyên, đột biến ngẫu nhiên, gây khó khăn cho việc sản xuất vacxin hữu hiệu ... chẩn đoán nhanh, nh? ?y có mặt chủng virus (bảng sau) Giới thiệu virut H5N1 ã Thuộc họ orthomyxoviridae : g? ?y bệnh đờng hô hấp ngời, động vật, gia cầm, chim ã Gồm typ A, B, C A g? ?y dịch cúm chính,... huyết thống qua ph©n tÝch ADN ty thĨ 1.1.øng dơng chÈn đoán bệnh ã Sử dụng kỹ thuật công nghệ gen để phát hiện, chẩn đoán cách xác, nhanh chóng bệnh di truyền truyền nhiễm g? ?y nấm, khuẩn, virus... (N) ã Virut typ A có 16 loại gai H H1, H2, H3 g? ?y bệnh cho ngời Có loại gai N N1, N2 g? ?y bệnh cho ngời Giới thiệu virut H5N1 ã Genome virut có nhiều phân đoạn nên dẫn đến thay đổi kháng nguyên