Tuyển chọn và nghiên cứu các chủng nấm men sinh coenzym q10 nhằm đáp ứng dụng trong lĩnh vực y học và mỹ phẩm

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI VIỆN VI SINH VẬT VÀ CÔNG NGHỆ SINH HỌC — &&&— BÁO CÁO ĐÈ TÀI “ TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN cứu CÁC CHỦNG NẤM MEN SINH COENZYM Q10 NHẰM ỨNG DỤNG TRONG LĨNH vực Y HỌC VÀ MỸ PHẨM” Mã số: QG.09.47 Chủ trì đề tài: TS ĐÀO THỊ LƯƠNG í ĐAI H Ọ C Q U Ố C GI A HA NỌI ì trụng Tẩ m thố ng tin th v iệ n GOOGOCGC ' i ị c Hà Nội, 2011 MỤC LỤC Trang MỜ ĐÀU Chương - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giói thiệu chung Coenzym Q10 1.1.1 Khái niệm chung Coenzyme Q 10 1.1.2 Lịch sử nghiên cứu CoQ 10 1.1.3 Tính chất hóa học, vật lý chế hoạt động cùa CoQlO 1.1.3.1 Cấu trúc hóa học 1.1.3.2 Tính chất vật lý 1.1.3.3 Co chế hoạt động CoQ 10 1.1.4 Cơ chế sinh tổng hợp CoQ 10 1.4.1 Sinh tổng hợp CoQlO người 4.2 Sinh tổng hợp CoQlO nấm men 1.1.5 ứng dụng cùa CoQ 10 10 1.1.5.1 Trong y học 10 1.1.5.2 Trong mỹ phẩm 11 1.1.6 Tình hình nghiên cứu CoQlO giới Việt Nam 12 1.6.1 Tình hình nghiên cứu CoQ 10 giới 12 1.1.6.2 Tình hình nghiên cứu CoQlO Việt Nam 13 1.2 Nấm men 14 1.2.1 Khái niệm chung nấm men 14 1.2.2 ửng dụng cùa nấm men 14 1.2.3 Coenzyme Q10 nấm men ]5 1.2.3.1 Các loại CoQ nấm men 15 1.2.3.2 Đặc điểm chung số chi nấm men có CoQlO chù yếu 16 Chương N G U Y Ê N LIỆU VÀ PH Ư Ơ N G PHÁP 2.1 Nguyên liệu 19 19 2.1.1 Chủng vi sinh vật 19 2.1.2 Hóa chất 20 1.3 Thiết bị ">0 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.2.1 Khảo sát khả sinh CoQio cùa chủng nấm men nghiên cứu 21 2.2.2 Nghiên cứu hoạt tính sinh học chủng nâm men 22 2.2.2.1 Khả lên men đường 22 2.2.2.2 Khả sinh enzyme ngoại bào 22 2.2.2.3 Khả sinh chất kháng vi sinh vật 22 2.22.3 Khả sinh carotenoid 23 2.2.3 Phân loại nấm men 23 2.2.3.1 Phân loại dựa đặc điểm hình thái 23 2.2.3.2 Phân loại dựa vào sinh học phân từ 23 2.2.4 Nghiên cứu điều kiện ni cấy thích họp cho khả sinh trưởng tổng họp CoQlO chủng nấm men 25 2.2.2.1 Lựa chọn môi trường nuôi cấy 25 2.22.2 Lựa chọn nguồn carbon 26 2.2.2.3 Lựa chọn nguồn nitơ 26 2.2.2.4 Lựa chọn pH nuôi cấy 27 2.2.2.5 LẠia chọn nhiệt độ nuôi cấy 27 2.2.2.6 Lựa chọn thời gian nuôi cấy 27 2.2.4.7 Lựa chọn điều kiện chiếu sáng thơng khí 27 2.2.4.8 Anh hường tiền tố tự nhiên đen sinh tổng hợp CoQ|i, 27 2.2.4.9 Nuôi cấy nấm men thiết bị lên men 27 2.2.5 Khảo sát phươns pháp tách chiết CoQio 28 2.2.5.1 Phương pháp xác định sinh khối khô 28 2 5.2 28 Các phương pháp tách chiết CoQio Chương - K Ế T Q U Ả VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Khâ sinh CoQlO 80 chủng nấm men 30 3.2 Hoạt tính sinh học chủng nấm men nghiên cứu 33 3.3 Phân loại chủng nấm men nghiên cứu 3.3.1 Nhóm nấm men thuộc chi Cryptncoccus, Derxnmyces vaHannaeỉỉa 33 3.3.2 Nhóm nấm men thuộc chi Rhodosporidium 39 3.3.3 Nhóm nấm men thuộc chi Trichosporon 41 3.4 Nghiên cứu điều kiện nuôi cấy thích họp cho khả sinhtrường tơng họp CoQlO chủng nấm men 3.4.1 CoQio nhóm chủng có hàm lượng CoQio cao 43 ■*- 3.4.2 Lựa chọn mơi trường ni cấy thích hợp 44 3.4.3 Lựa chọn nguồn carbon thích hợp 45 3.4.4 Lựa chọn nguồn nitơ thích hợp 46 3.4.5 Lựa chọn pH ni cấy thích họp 47 3.4.6 Lựa chọn nhiệt độ ni cấy thích hợp 48 3.4.7 Lựa chọn thời gian ni cấy thích hợp 49 3.4.8 Ảnh hường độ thơng khí ánh sáng đến sinh trường tổng hợp CoQ ịo chủng nấm men PL 5-2 50 3.4.9 Ảnh hưởng tiền tố tự nhiên đến sinh trưởng tổng họp CoQio chủng nấm men PL 5-2 51 3.4.10 Nuôi cấy nấm men thiết bị lên men 52 3.5 Khảo sát số phưotig pháp tách chiết CoQlO 53 3.6, Quy trình lên men nấm men tách chiết CoQio quy mơ phịng thí nghiệm 55 KÉT LUẬN 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ LỤC 62 DANH M ỤC CÁC CH Ữ V IÉT TẤ T ADN Acid deoxyribonucleic ATP Adenosine triphosphate bp Base pair BSA Bovin serum albumin CoQiũ Coenzyme Qio DBB Diazonium blue B DMSO Dimethyl sulfoxide dNTPs Deoxyribonucleotide triphosphate DW Khói lưọng khô EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid HPLC High performance liquid chromatography LDL Low density lipoprotien PCI Phenol-Chloroform-isoamyl alcohol PCR Polymerase chain reaction rDNA Ribosomal deoxyribonucleic acid SDS Sodium dodecvl sulfate TAE Tris-Acetic-EDTA (đệm) Taq Thermus aquaticus DNA TE Tris-EDTA (đệm) uv Ultraviolet YM Yeast extract-mak extract DANH SÁCH NH Ữ N G NG Ư Ờ I THAM GIA T H ự C H IỆN ĐÈ TÀI Chủ trì: TS Đào Thị Lương, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, ĐHQGHN Nhũng người thực hiện: ThS Trần Thị Lệ Quyên, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, ĐHQGHN ThS Hoàng Văn Vinh, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, ĐHQGHN CN Hà Thị Hẳng, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, ĐHQGHN DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Khả sinh CoQio số chủng vi sinh vật nghiên cứu giới 12 Sự phân bố loại CoQ chi nấm men 15 Các chùng nấm men sử dụng cho nghiên cứu 19 Thành phần cho phản ứng PCR 24 Các môi trường nuôi cấy dùng cho nghiên cứu 26 Hàm lượng CoQio 80 chùng nấm men khảo sát 30 Khả sinh CoQio chủng nấm men thuộc chi khác 32 Khả sinh enzyme ngoại bào chất kháng sinh cácchủng nấm men 33 Khả nãng sinh trường sinh CoQio cùa chủng nấm men 44 10 Lựa chọn mơi trường ni thích hợp 45 11 Lựa chọn nguồn carbon thích hợp 46 12 Lựa chọn nguồn nitơ thích hợp 47 13 Lựa chọn pH ni cấy thích hợp 48 14 Lựa chọn nhiệt độ ni cấy thích hợp 49 15 Lựa chọn thời gian ni cấy thích hợp 50 16 Hiệu tách CoQlO số phương pháp sử dụng 54 Bảc DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hỉnh Trang Cấu trúc hóa học CoQ 10 Ba dạng cấu trúc CoQlũ Sơ đồ chuỗi hô hấp tế bào Dạng khử CoQ 10 Dạng oxy hóa cùa CoQiũ Gốc semiquinon hình thành từ dạng khử dạng oxy hóa 7 Con đường sinh tổng hợp CoQ giả định sinh vật nhân chuẩn Đồ thị thể mối tương quan nồng độ CoQ 10 diện tích đỉnh 21 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chùng DN2.3 34 10 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chủng S02 35 11 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chùng S09.5 35 12 Hình thái khuần lạc (a) tế bào (b) chủng S I3.2 36 í3 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chùng S09.4 36 14 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chủngVY140 37 J, Vị trí phân loại chủng DN2.3, S02, S09.4, S09.5, S13.2 VY140 với lồi có quan hệ họ hàng gần dựa vào trình tự rDNA 26S đoạn D1/D2 38 ]6 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chủng PL5.2 39 17 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chùng L21 40 Vị trí phân loại chủng L21 PL5.2 với lồi có quan hệ họ hàng gần dựa vào trình tự rDNA 26S đoạn D1/D2 19 0J 41 Hình thái khuẩn lạc (a) tế bào (b) chủng PL4.2 42 VỊ trí phân loại chủng PL4.2 với lồi có quan hệ họ hàng ân dựa vào trình tự rDNA 2ỐS đoạn D1/D2 43 Anh hưởng độ thơng khí đẽn sinh trường sinh tơng hợp CoQ lO chùng 51 nam men PL5-2 Anh hườne; môi trường nước chiêt cà chua cà rôt đên sinh trư ờn hàm lượn2 CoQ 10 trons tế bào nấm men 23 Tách chiết CoQlO tử tế bào nấm men PL5-2 Quy trình lên men nấm men tách chiết CoQlO qu\ mỏ phịna thí nehiệm 52 BÁO CÁO TÓM TẮT a, Tên đề tài: “Tuyển chọn nghiên cứu chủng nấm men sinh coenzyme Q10 nhằm ứng dụng lĩnh vực y học mỹ phẩm” Mã số: QG 09.47 b, Chủ trì đề tài: TS Đào Thị Lương c, Các cán tham gia: ThS Trần Thị Lệ Quyên, ThS Hoàng Văn Vinh, CN Hà Thị Hằng d, Mục tiêu nội dung nghiên cứu đề tài: - Mục tiêu đề tài: Tuyển chọn chủng nấm men có tiềm cho nghiên cứu sản xuất CoQ 10 đưa quy trình thực nghiệm lên men, tách chiết thu nhận chế phẩm C oQ 10 quy mơ thí nghiệm - Nội dung nghiên cứu: + Khảo sát khả sinh C Q 10 số chủng nấm men lưu giữ giống nấm men Bảo tàng Giống Vi sinh vật - Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, Đại học Quốc Gia Hà Nội + Nghiên cứu số đặc điểm sinh học phân loại chủng có khả sinh C Q 10 cao + Nghiên cứu yếu tố môi trường ảnh hưởng đến lên men thu sinh khối sinh CoQio+ Tách chiết CoQ 10 bàng phương pháp khác nhàm tìm phương pháp tách chiết đơn giản hiệu e, Kết đề tài Kết quả: - Khảo sát khả sinh C Q 10 80 chủne nấm men lưu Ĩữ Bảo tàn giống Vi sinh vật cho thấy có 11,25% số cho hàm lượne CoQio cao (> m s/ẹ tế bào), 41,25% chủng cho hàm lượng trung bình (>1.0 m s/e vả < mg/a tế bào) 47,5% chủng có hàm lượng CoQio thấp {< 1.0 m e / tế bào) Trong số chủns nấm men cho hàm lượng CoQio cao, chủng thuộc chi Cryptococcns, chủng lại thuộc chi Rhodosporium, Trichosporon, Dexomvces Có 7/ chùng phân lập từ Vườn Quốc gia Phona Nha-Kẻ Bàna - Lên men đường không quan sát thấy chủng nghiên cứu Khả sinh so enzyme ngoại bào chất kháng vi sinh vật kiểm định chủng nấm men tương đối thấp Hai chủng L21 PL5.2 cịn có khả sinh carotenoid Phân loại bang sinh học phân tử kết hợp với đặc đểm hình thái chủng nấm men cho thấy chủng S02, S09.5 S I3.2 thuộc loài Cryptococcuspodzolicus; chủng S09.4 thuộc loài Hannaella sinensis', chủng L21 PL5.2 thuộc loài Rhodosporidium paludigenum\ chủng PL4.2 thuộc loài Trichosporon de r mat is: chủng VY140 loài Derxomyces haininhensis\ cịn chủng DN2.3 lồi chưa công bố - Các điều kiện nuôi cấy nguồn carbon, nitơ, nhiệt độ, pH thời gian có ảnh hường rõ rệt đến khả sinh trường chủng nấm men lựa chọn, khả sinh CoQio không bị tác động yếu tố - Đối với chủng nam men PL5-2, ánh sáng không ảnh hưởng đến sinh trưởng sinh tổng hợp CoQio- Ngược lại, điều kiện ni cấy hiểu khí thu sinh khối gấp lần hàm lượng CoQ 10 gấp lân so với điều kiện kị khí khơng nghiêm ngặt Nước chiết cà chua 50% cà rốt 50-100% có khống làm tăng đáng kể hàm lượng CoQlO Ở nồng độ nước ép cà chua 100% khơng thích hợp cho sinh trưởng chủng nghiên cứu - Tách chiết CoQlO theo 5, phương pháp từ tài liệu công bố, phương pháp 1, thu lượng CoQlO nhiều Phương pháp có thời gian thí nghiệm ngắn, hóa chât phổ biến sẵn có lựa chọn - Xây dựng quy trình lên men, tách chiết CoQio quy mơ phịng thí nghiệm với thời gian ngấn, đơn giản, hóa chất thơng dụng dễ kiếm Những đóng góp đề tài - Đây báo cáo chi tiết nghiên cứu sản xuất CoQlO đối tượng nấm men - Từ nghiên cứu tìm chủng nấm men dại có CoQlO cao, dùng làm chủng đột biến dùng cho lên men công nghiệp sản xuất CoQlO nhàm ứng dụna trone lĩnh vực y học mỹ phẩm Việt Nam - Đào tạo cử nhân, thạc sĩ nâng cao nãns lực chuyên môn cho cán Bảo tàng Giống Vi sinh vật Viện Vi sinh vật Côns nghệ Sinh học ĐHQGRN Các cơng trình cơng bổ sản phẩm đào tạo Cơng trình cơng bơ: Nội dung nghiên cứu, tiến độ, sản phẩm đề tài ghi ban phụ lục fíiều : Kinh phí thời gian thực nhiệm vụ Kinhphí thực hiện: 100.000.000 đồng (M ột trăm triệu đồng chẵn) Thời gian thực hiện: 1/4/2009 đến 31/12/2010 Điều 3: Trách nhiệm bên B: - Thực nội dung nghiên cứu, tiến độ kết đề tài theo Phụ lục - Sử dụng tốn kinh phí cấp theo Phụ lục - Viết báo cáo kết nghiên cứu đề tài theo quy định Bộ KH&.CN Điều 4: Trách nhiệm bên A: Bên A có trách nhiệm hướng dẫn làm thủ tục đánh giá đề tài theo quy định Bộ KH&CN Điều 5: - Hai bên cam kết thực điều khoản đă ghi hợp đồng, bên vi phạm phải chịu hoàn toàn trách nhiệm theo quy định hành - Hợp đồng có hiệu lực từ ngày ký Họp đồng làm thành ban có giá trị nhau: Tài vụ (2 bản), Văn phịng (1 bản) chủ trì (2 bản) ĐẠI DIỆN BÊN B ĐẠỈ DIỆN BÊN A , PHỤ LỤC HỢP ĐỊNG Phu• luc • Tên đề tài: “Tuyển chọn ngh iên cứu chủng nấm men sinh Coenzy m nhằm ứ n g d ụ n g tro n g ỉĩnh vực y học m ỹ p hẩm ” Má số: QG.09.47 Chủ tri: TS Đào Thị Lương NỘI DUNG, TIẾN Đ ộ VÀ SẢN PHẨM c ụ THỂ H oạt động nghiên cứu TT Thu thập viết tổng quan tài liệu Thời gian thực Từ tháng Đen thána 4/2009 5/2009 Sản phẩm khoa học Phân tône quan Xây dựng đề cương nghiên cứu chi tiết 4/2009 5/2009 Đê cương chi tiết Điều tra khảo sát, thí nghiệm, thu thập số liệu - Chuyên đề 1: Tuyển chọn chủng 5/2009 9/2009 nấm men có khả sinh tổng họp CoQlO từ giống nấm men Bảo tàng giống Vi sinh vật Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học Chuyên đề 2: Phân loại chủng nấm men tuyển chọn đến chi, lồi: Dựa vào đặc điểm hố phân loại, phàn chủng phân lập vào chi Phân tích trật tự rADN ITS, 26S; xây dựng phát sinh chủng loại để xác định đến loài - Hoàn thành báo cáo chuyên đê 9/2009 12/2009 — -—j Hoàn thành báo cáo chuvên đẻ , Viêt báo - Chuyên đê 3: Xác định điều kiện tối uu cho trình '2010 2010 sinh tổng hơp ì Hồn thành báo cáo CoQlO: Nghiên cứu ảnh hưởĩi2 chuyên đề nguồn Carbon, nguồn Nitơ, nhiệt độ pH thơng khí đến sinh trường sinh tổng hợp CoQlO chùng chọn lựa Chuyên đề 4: Nghiên cứu tách chiết 5/2010 10/2010 Hoàn thành CoQlO quy mơ phịng thí nghiệm: báo cáo So sánh phương pháp tách chiết chuyên đề khác nhằm đưa qui trình tách chiết, thu nhận CoQlO qui mơ thí nghiệm với ngun liệu rẻ tiền phù hợp với điều kiện sản xuất cơng nghiệp Việt Nam Xử lý kết 10/2010 11/2010 11/2010 12/2010 Viết báo cáo chuyên đề: ,2 ,3 Số chuyên đề (như mục 2) Hội thảo gỉữa kỳ _ Bổ sung số liệu/thử nghiệm/ứng dụne Tổng kết số liệu Viết báo cáo tổng hợp Báo cáo tông kết Viết bai báo Hội thảo lần cuối Hoàn thiện báo cáo 12/2010 Nộp sản phẩm 12/2010 » Nghiệm thu đề tài 12/2010 Phu• luc • (Dự tốn kinh phí) Tên đề tài: “Tuyển chọn nghiên cứu chủng nấm men sinh Coenzỵm 010 nhằm ứng dụng ừ-ong lĩnh vực y học mỹ phâm " Má số: QG.09.47 Chủ trì: TS Đào Thị Lương Nội dung TT Kinh phí Năm thứ 1 Xây dựng đề cương chi tiết Năm thứ 1,0 1,0 Thu thập viết tổng quan tài liệu Ị* Thu thập tư liệu (mua, thuê) Dich tài liệu tham khảo (số trang X đon giá) Viết tổng quan tư liệu 1,0 18,0 Điều tra, khảo sát, thí nghiệm, thu thập số liệu, nghiên cứu 18,0 Chi phí tàu xe, cơng tác phí Chi phí th mướn 18,0 18,0 Chi phí hoạt động chun mơn Thuê, mua sắm trang thiết bị, nguyên vật liệu 20,5 20,0 Thuê trang thiết bị Mua trang thiết bị Mua nguyên vật liệu, cây, 20,5 Viêt báo cáo khoa học, thẩm định, nghiệm thu 20,0 2,8 1,3 Viêt báo cáo 1,5 Hội thảo Thẩm định, Nghiệm thu í Chi khác 1.3 1,3 8,2 9,2 Mua văn phòng phẩm — In ấn, photocopy Quản lý phí Thù lao trách nhiệm chủ trì đề tài' (100 000 d/th) Tổng kinh phí: ỉ 00 triệu đồng 1,0 1.0 — 2.0 - 1.0 5.0 t ỉ 5.0 - 1.2 50,0 50,0 \ ĐẠI H Ọ C Q UÓ C G IA H À N Ộ I CỘ NG H O À X à H Ộ I C H Ủ N G H Ià V IỆ T N a m Đ ộc lập - T ự - H n h phú c Hà Nội, ngày 27 tháng ỉ năm 2010 BIÊN B Ả N KIỂM TRA TIẾN Đ Ộ TH Ự C HIẸN ĐÈ TÀ I KHCN Tên đề tài : Tuyển chọn nghiên cửu chùng Hẩm men vi sinh coenzvm e OỈO nhăm ứng (lụng lĩnh vực y học mỹ phàm Mã số: QG.09.47 Chù nhiệm đề tài: TS Đào Thị Lương Cơ quan chù tri: Viện Vi sinh vật Cơng nghệ sình học Thời gian thực đề tài: '• /2009 đến /2011 Ngày kiểm tra tiến độ: 27/01/2010 Địa điểm : Phòng 603 Viện Vi sinh vật cỏns nshệ sinh học Thánh viên đồn kiểm tra: v ề phía Đại học Quốc gia Hà Nội: - GS TS Nguyễn Cao Huẩn - Trưởng Ban Khoa học Công nshệ - ThS Vũ Thị Mai Phương - Chuyên viên Ban Khoa học Công nghệ phía đơn vị: s /íQ U ụín.- /'.KwịỊ4 fy.WA .(jẻu ' .> ^ ỉ x C h a c & ỹ _ f < K u ijn /I 4Ỉ - f a d /? £ f ỹ ứ ■> ' j_ ' C — V v) .■'£,p.ĩ nhilji xicjoa i ĨS .|\(g.L.U]-c,Cv .f i i u j j a ( i liiji.n điff o , r ' u 0p V ^ • ỹ n I /1 t Cf\CỈX , M x ú c đ x v x  I X Á iO ia iA H í ĩ L C : đ i ^T ?o a a\C An.{\ ỊiÀhoỹ/ Aư.y< vb >\McŨ.oh.đ.l .+ Tg ìslcịx.iỹLn 7inij.o ,th M k n i x A ix ji 1.1 y ± ia r n ỳ ía y ủ trx ũ / j j i i r t j l $ a n ij Ẩ V C .Jk l.K l d cik-1 "■■ ■' B>Cl>x : tỉ \ i.w W Ỉ/ t l x I o/ I c u CL ìv X ìcịs .j> /.u \L đ ì i t j r f i M J ắct i y ổŨ \ cti I VO -frrt ch Jbfl i Ả V Ị.Ị /Ạ í l i b $ u ĨỈẰ I k J a l ĩ!ũ.l í ử.T ỹ/ .+ ĩm rJ n i h i i L l Ả ị ỷ &L f / A /1 :h N lc‘i.L • • t - • • %.>A Ỉ SĨAC\ Ẩ a J X v i h o í ỷ i x O ' I ' ^ ịpn.i.-ị d o n ỹ / /i\ i & v } C i x - i l A / _ t jfiC tix c / y x A f y i ,iự ? p ill c ; - 1.0 mg/g < mg/ẹ tế bào) 47.5% chùng có hàm lượng CoQ ]0 thấp (< 1.0 mg/e tế bào) Trona số chủns nấm men cho hàm lượng CoQio cao chùn? thuộc chi Crvptococcus chùng cịn lại thuộc chi Rhodosporium, Trichosporon, Dexomyces Có 7/ chủne phàn lập từ Vườn Quốc gia Phong Nha-Kẻ Bàne - Lên men đường không quan sát thấy chùng nghiên cứu Khả sinh so enzyme ngoại bào chất kháng vi sinh vật kiêm định cùa chùne nam men tương đối thấp Hai chùng L21 PL5.2 cịn có khả sinh carotenoid Phân loại bàng sinh học phân tử kết hợp với dặc đểm hình thái cùa chủng nấm men cho thấy chủng S02, S09.5 S I3.2 thuộc loài Crỵptococcus podzolicus: cluing S09.4 thuộc loài Hannaellci sinensis; chùng L21 PL5.2 thuộc loài Rhodosporiđium puludigenum; chủng PL4.2 thuộc loài Trichosporon dermatis: chủng VY140 loài Derxomyces haininhensis; cịn chùng DN2.3 có thê lồi chưa công bô - Các diều kiện nuôi cấy nguôn carbon, nitơ nhiệt độ pli thời gian có ánh hường rõ rệt đến khả sinh trưởng chủng nâm men lựa chọn, nhưnẹ sinh CoỌio không bị tác độne yêu tô - Đối với chủng nấm men PL5-2, ánh sáng khône anh hường đèn sinh trươno sinh I tồng hợp CoQ10- Ngược lại, điều kiện ni cày hiêu khí thu sinh khôi gấp lần hàm lượng CoQio gấp lần so với điều kiện kị khí không nghiêm neặt Nước chiết cà chua 50% cà rốt 50-100% có khống làm tăng đáng kế hàm lượng CoỌlO - Tách chiết CoỌlO theo phương pháp từ tài liệu côngbố, cácphương pháp ] thu lượng CoQlO nhiều Phương pháp 1cỏ thời gianthi nghiệm ngẩn, hóa chất phổ biến sẵn có lựa chọn - Xây dụng quy trình lên men tách chiết C oỌ |fj quy mơ phịng thi nghiệm với thời gian ngắn, đơn giản, hóa chât thơng đụng dê kiêm Sản phẩm khoa học đào tạo : Các báo công bổ tạp chi khoa học: Đào Thị Lương, Tràn Thị Lệ Quyên (2009), “Tuyền chọn nehièn cứu đặc điểm phân loại cùa chủng nấm men sinh CoQlO phân lập Việt Nam", Tạp chí Di truyền học ủng dụng, Chuyên san Công nehệ Sinh học, số trang 8-14 Tran Thi Le Quyen, Phan Lac Dune and Dao Thi Luona (2010) Abstract "Screenine Coenzyme Q10 Producing Strains among Yeast Collection at the VTCC and Study Phylogeny of Group with the Highest Activity", ISPS Asian Core Program- Hanoi Meeting 2010 Trân Thị Lệ Quvên Đào Thị Lương (2010) “ Phân loại nehièn cứu điều kiện ni thích hợp cho sinh trường sinh tổng hợp CoQlO chùng nấm men PL 5-2" Tạp chi Di truyền học ứng dụng, Chuyên san Cône nghệ Sinh học sô 6, trang 7-13 Kết tham gia đào tạo Sau Đại học : - Trần Thị Lệ Quyên (2009)- luận vãn thạc sỉ: “Tuyển chọn nehicn cứu chúng nấm men sinh coenzyme Q10 nham ứng dụng lĩnh vực V học mỹ phẩm” Kiến nghị quy mô đối tượng áp dụng nghiên cứu : Chức vụ Chủ nhiệm dề tài Họ tên Đào Thị Lương Học vị Thủ trường quan chủ trì đề tà ịVviC íam V ịn Kt?i> T 'v \ỷjA Vi Tiến sĩ Chủ tịch hội đông Thù trường quan đánh giá thức quàn lý đê tài av TLGIÁM ĐỐC KJJWỎN•4ẠNKHOA HỌC-CƠNG L( -7*^ -£ n u FVUUNG EAN / Ký tên J ỉ Ù(ư< V' ■ / í x / VI SINH VÃT y Ị ivA CĨNG NGH-J1 S'NH HOC / -p // í^ '-XẾ \ / // W ỉ ỉ\ L í-o / I — Đóng dấu ĨS K K Vẻq * f v ; PGS.TS • iy 'r'i /aVlíỉ" Ị ... CoQ10 chủng nấm men nghiên cứu Các chủng nấm men c? ?y đĩa thạch YM, nuôi 28°c, sau ng? ?y gạt l? ?y sinh khối CoQio tất 80 chủng nấm men tách chiết bàng phương pháp (trình b? ?y đ? ?y) định lượng m? ?y. .. 30 3.1 Khâ sinh CoQlO 80 chủng nấm men 30 3.2 Hoạt tính sinh học chủng nấm men nghiên cứu 33 3.3 Phân loại chủng nấm men nghiên cứu 3.3.1 Nhóm nấm men thuộc chi Cryptncoccus, Derxnmyces vaHannaeỉỉa... gia Hà Nội” - Trần Thị Lệ Quyên (2009)- luận văn thạc sĩ: ? ?Tuyển chọn nghiên cứu chủng nấm men sinh coenzyme Q 10 nhàm ứng dụng lĩnh vực y học mỷ phâm” f, Tình hình sử dụng kinh phí đề tài - Kinh