BÀI KIỂM NGHIỆM VIÊN NANG PARACETAMOL (Viên nang chứa paracetamol 500mg) Công thức: C8H9NO2 Yêu cầu kỹ thuật: Tính chất: Nang cứng, bên chứa bột thuốc màu trắng, không mùi Độ đồng khối lượng: % Định tính: Phải có phản ứng paracetamol Giới hạn 4-aminophenol: Không 0,1% Tạp chất liên quan: Đạt yêu cầu phép thử Định lượng hàm lượng paracetamol (C8H9NO2): từ 95,0% - 105,0% so với hàm lượng ghi nhãn Độ hòa tan: :theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Phương pháp thử: Tính chất : Cảm quan: viên nang cứng, bên chứa bột thuốc màu trắng, không mùi Kết luận: ĐẠT Độ đồng khối lượng: dùng phương pháp Cân khối lượng nang Tháo rời vỏ nang → dùng lau bên vỏ & cân khối lượng vỏ nang mthuốc nang = m nang thuốc - mvỏ Tiến hành tương tự với 24 đơn vị lấy khác lấy ngẫu nhiên ta có thơng số: Khối lượng bột thuốc có nang (g) m = mcả viên thuốc nang - mVỏ nang m1 = 0,5603 m7 = 0,5451 m13 = 0,5353 m2 = 0,5544 m8 = 0,5394 m14 = 0,5428 m3 = 0,5487 m9 = 0,5388 m15 = 0,5368 m4 = 0,5544 m10 = 0,5429 m16 = 0,5422 m5 = 0,5406 m11 = 0,5422 m17 = 0,5532 m6 = 0,5334 m12 = 0,5409 m18 = 0,5544 Tính khối lượng trung bình bột thuốc có nang: = = = 0,5408g m19 = 0,5445 m20 = 0,5374 m21 = 0,5357 m22 = 0,5448 m23 = 0,5483 m24 = 0,4615 -15% = 85% -7,5% = 92,5% 100% = +7,5% = 107,5% +15% = 115% 0,5408g 0,4597 0,5002g 0,5814g 0,6219g So sánh: khối lượng bột thuốc viên với thông số giới hạn vừa tính bên Nhận xét: có viên (m24 = 0,4615g ) thấp giới hạn – 7,5% cho phép nằm giới hạn -15% Khuấy kỹ Kết luận: ĐẠT 4.Định tính: A Phản ứng hóa học: Lấy lượng bột thuốc tương đương khoảng 0,5g paracetamol Thêm 30ml acetol (TT) Khuấy kỹ Lọc → lấy dịch Làm bay dịch lọc đến cắn ( làm nồi cách thủy đặt tủ hút) Lấy cắn làm phản ứng sau đây: Lấy khoảng 0,1g cắn cho vào ống nghiệm Thêm 2ml acid hydrochloric 10% Đun sôi đèn cồn phút Thêm 10 ml nước cất vào ống nghiệm đun Để nguội Thêm giọt dung dịch kali dicromat 5% (TT) Nhận xét: xuất màu tím, khơng chuyển sang màu đỏ Lọc lấy dịch Kết B Sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) o Sắc ký đồ thu Bản mỏng: Silicagel GF254 hoạt hoá 105 C Hệ dung môi khai triển: Methylen clorid- methanol (4: 1) Dung dịch thử: Hoà tan lượng bột thuốc nang tương ứng với 10 mg paracetamol 10 ml methanol (TT) → Lọc Dung dịch đối chiếu : Hoà tan 10 mg paracetamol 10 ml methanol (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 20 ml dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Lấy mỏng để khô ngồi khơng khí Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm: Vết thu sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng vị trí màu sắc với vết thu sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Nhận xét kết luận: Khơng vết thu sắc ký đồ dung dịch thử không tương ứng với vết thu sắc ký đồ dung dịch đối chiếu hình dáng Tạp chất liên quan: Phương pháp: sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4): Kết Sắc ký đồ thu Chuẩn bị: Bản mỏng: Silicagel GF254 hoạt hoá 105 oC Dung môi khai triển: Toluen- aceton- cloroform (10: 25: 65) Dung dịch thử (1): Lấy lượng bột chế phẩm tương ứng với 1,0 g paracetamol vào ống ly tâm có nắp , thêm xác ml ether ethylic khơng có peroxyd(TT), đậy nắp, lắc học 30 phút Ly tâm với tốc độ 1000 vòng/phút khoảng 15 phút thu dung dịch hồn tồn Dung dịch thử (2): Lấy xác ml dung dịch thử (1) pha loãng vừa đủ với 10 ml ethanol 96 % (TT) Dung dịch đối chiếu (1): Chứa 0,0050 % 4′- cloroacetanilid ethanol 96% (TT) Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 0,25 g 4′- cloroacetanilid 0,1 g paracetamol vừa đủ 100 ml với ethanol 96 % (TT) Cách tiến hành: Lượng chấm dung dịch thử (1): 200 ml Lượng chấm dung dịch thử (2), dung dịch đối chiếu (1) (2): 40 ml Cho dung môi khai triển bình sắc ký khơng lót giấy đặt mỏng vừa chấm dung dịch vào bình Triển khai sắc ký dung mơi khoảng 14 cm Sau triển khai để mỏng khơ hồn tồn Xem tiêu chuẩn nhận xét kết quả: quan sát sáng tử ngoại bước sóng 254 nm: Tiêu chuẩn: Bất kỳ vết có sắc ký đồ dung dịch thử (1) tương ứng với vết 4′cloroacetanilid không đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) Bất kỳ vết có sắc ký đồ dung dịch thử (2), có giá trị Rf thấp giá trị Rf 4′- cloroacetanilid không đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) Thử nghiệm có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2)có vết tách rõ ràng, vết tương ứng với 4′- cloroacetanilid phải có giá trị Rf cao Kết quả: Dung dịch thử (1) ( đậm đặc dung dịch thử ( 2)→ không thu vết Dung dịch thử (2) thu vết đậm màu vết dung dịch đối chiếu (1) Kết luận: không đạt Định lượng: Phương pháp quang phổ hấp thụ UV-Vis ( phụ lục 4.1) Cân 24 viên nang → tính khối lượng trung bình bột thuốc nang: ( làm phần xác định độ đồng khối lượng ) nghiền thành bột mịn Cân xác lượng thuốc bột viên tương ứng với khoảng 0,075g paracetamol: Tính tốn: Trong (g) = 0,5408 Vậy mcân ? bột thuốc chứa 0,5g hoạt chất X (yêu cầu cân tương ứng với 0,075g ) mcân = = = 0,08112g Cân xác 0,08112g bột thuốc nghiền mịn cho vào BĐM 100ml Dùng ống đong thêm 25 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 M (TT) Thêm 50 ml nước cất Thêm nước đến định mức 100ml Lắc → Lọc Loại bỏ 10 ml dịch lọc đầu ( tránh dịch bị lỗng dùng dung mơi nước để thấm ướt giấy lọc ban đầu) Lắc Dùng pipet bầu lấy xác 10 ml dịch vừa lọc cho vào bình định mức 100 ml, Pha lỗng với nước đến định mức 100ml Lắc 15 phút Lọc & bỏ 10ml dd đầu Lắc Lấy xác 10 ml dung dịch vừa pha cho vào bình định mức 100 ml khác, Thêm 10 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 M (TT), Pha loãng với nước đến định mức 100ml Lắc Đo độ hấp thụ (Phụlục 4.1) dung dịch thu được: Ở bước sóng 257 nm, Cốc dày cm Dùng dung dịch natri hydroxyd 0,01 M làm mẫu trắng Làm lần mẫu thử ta có thơng số: m1 = 0,0806 m = = 0,08075g m2 = 0,0809 A1 = 0,5348 A2 = 0,5345 A = = 0,53465 Và ta có (g) = 0,5408g Tính hàm lượng paracetamol, C8H9NO2 theo A(1 %, cm) Lấy 715 giá trị A(1 %, cm) bước sóng 257 nm Lượng paracetamol có viên tính theo cơng thức: X% = x100 = x 100 = 95,48% Nhận xét: 95,0% X% = 95,48% 105,0% Kết quả: ĐẠT Độ hòa tan:theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ... phản ứng sau đây: Lấy khoảng 0,1g cắn cho vào ống nghi m Thêm 2ml acid hydrochloric 10% Đun sôi đèn cồn phút Thêm 10 ml nước cất vào ống nghi m đun Để nguội Thêm giọt dung dịch kali... đồ dung dịch đối chiếu (1) Thử nghi m có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2)có vết tách rõ ràng, vết tương ứng với 4′- cloroacetanilid phải có giá trị Rf cao Kết quả: Dung dịch thử (1)... viên nang → tính khối lượng trung bình bột thuốc nang: ( làm phần xác định độ đồng khối lượng ) nghi n thành bột mịn Cân xác lượng thuốc bột viên tương ứng với khoảng 0,075g paracetamol: Tính