Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng tăng lực của cây Đinh lăng răng thu hái tại Thái Bình

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐINH THỊ VÂN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG TĂNG LỰC CỦA CÂY ĐINH LĂNG RĂNG THU HÁI TẠI THÁI BÌNH LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐINH THỊ VÂN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG TĂNG LỰC CỦA CÂY ĐINH LĂNG RĂNG THU HÁI TẠI THÁI BÌNH LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC LIỆU – DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720206 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển HÀ NỘI 2019 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực luận văn này, tơi nhận nhiều hướng dẫn, hỗ trợ, giúp đỡ tận tình động viên thầy cơ, gia đình bạn bè, đặc biệt PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển thầy giáo, cô giáo Bộ môn Dược học cổ truyền, Bộ môn Thực vật, Bộ môn Dược liệu, Bộ môn Dược lực – Trường Đại học Dược Hà Nội khoa Hố phân tích tiêu chuẩn, khoa Dược lý sinh hóa – Viện Dược liệu Tơi nhận giúp đỡ chu đáo hết lòng Ban Giám hiệu nhà trường phòng Sau Đại học ln giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi suốt trình học tập thực luận văn Trường Đại học Dược Hà Nội Vậy xin chân thành cảm ơn bày tỏ lòng yêu mến tới PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển tận tình hướng dẫn, động viên, khích lệ, dành thời gian trao đổi định hướng cho suốt thời gian thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới thầy Ban Giám hiệu, phòng Sau Đại học Bộ mơn giúp đỡ tận tình để tơi hồn thành luận văn Do điều kiện chủ quan khách quan, chắn luận văn nhiều thiếu sót, mong nhận ý kiến đóng góp q giá thầy hội đồng Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 01 tháng 04 năm 2019 Học viên Đinh Thị Vân MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC HÌNH VẼ DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI POLYSCIAS 1.1.1.Vị trí phân loại .3 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Polyscias 1.1.3 Thành phần hóa học chi Polyscias .4 1.1.4 Tác dụng sinh học 14 1.2 CÔNG DỤNG CỦA ĐINH LĂNG 19 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 20 2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 20 2.1.2 Động vật thí nghiệm 20 2.1.3 Trang thiết bị nghiên cứu 20 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.2.1 Nghiên cứu thực vật học 21 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 22 2.2.3 Nghiên cứu tác dụng tăng lực 24 2.2.4 Nơi tiến hành thí nghiệm 25 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 26 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 26 3.1.1 Đặc điểm thực vật mẫu nghiên cứu 26 3.1.2 Giám định tên khoa học Đinh lăng 28 3.1.3 Đặc điểm vi học 28 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC 35 3.2.1 Định tính phân lập số hợp chất thân Polyscias guilfoylei (W.Bull) L.H.Bailey cv quinquefolia 35 3.2.2 Xác định cấu trúc hợp chất 40 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG TĂNG LỰC 56 CHƯƠNG BÀN LUẬN 60 4.1 VỀ ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 60 4.2 VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 63 4.3 VỀ TÁC DỤNG TĂNG LỰC 65 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Công thức số saponin chi Polyscias Bảng 3.1 Khóa phân loại chi Polyscias [69] thứ trồng trọt [43] 28 Bảng 3.2 Kết định tính thân phản ứng hóa học 35 Bảng 3.3 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo 41 Bảng 3.4 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo 43 Bảng 3.5 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo 45 Bảng 3.6 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo 47 Bảng 3.7 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo 49 Bảng 3.8 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo 51 Bảng 3.9 So sánh số liệu NMR hợp chất 2a với tài liệu tham khảo 55 Bảng 3.10 Thời gian bám trụ quay chuột thời điểm trước uống sau uống cao Đinh lăng 60 phút (n=12-13) 56 Bảng 3.11 Thời gian bám trụ quay chuột thời điểm trước uống sau uống cao Đinh lăng ngày (n=12-13) 57 Bảng 3.12 Thời gian bám trụ quay chuột thời điểm trước uống sau uống cao Đinh lăng 14 ngày (n=12-13) 58 Bảng 3.13 Trọng lượng chuột thời điểm ngày 1, ngày ngày 14 uống cao Đinh lăng (n=12-13) 59 DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 Cơng thức hợp chất sterol glycosid sterol Hình 1.2 Công thức hợp chất polyacetylen Hình 1.3 Cơng thức hợp chất tinh dầu Hình 1.4 Cơng thức hợp chất phenol Hình 1.5 Cơng thức triterpenoid Hình 1.6 Cơng thức ceramid cerebrosid Hình 1.7 Cơng thức số saponin lồi Polyscias guilfoylei 14 Hình 3.1 Đặc điểm thực vật mẫu Đinh lăng 27 Hình 3.2 Vi phẫu rễ Đinh lăng 29 Hình 3.3 Vi phẫu thân mẫu Đinh lăng 31 Hình 3.4 Cấu tạo giải phẫu Đinh lăng 32 Hình 3.5 Bột rễ Đinh lăng 33 Hình 3.6 Bột thân Đinh lăng 34 Hình 3.7 Bột Đinh lăng 35 Hình 3.8 Sơ đồ chiết xuất, phân lập hợp chất từ Polyscias guilfoylei cv quinquefolia 38 Hình 3.9 Sơ đồ chiết xuất, phân lập hợp chất từ thân Polyscias guilfoylei cv quinquefolia 40 Hình 3.10 Cơng thức cấu tạo hợp chất 42 Hình 3.11 Công thức cấu tạo hợp chất 44 Hình 3.12 Cơng thức cấu tạo hợp chất 46 Hình 3.13 Cơng thức cấu tạo hợp chất 48 Hình 3.14 Cơng thức cấu tạo hợp chất 50 Hình 3.15 Cơng thức cấu tạo hợp chất 53 Hình 3.16 Tương tác HMBC ( ) hợp chất 54 Hình 3.17 Cơng thức cấu tạo hợp chất 2a 56 Hình 4.1 Lồi Polyscias guilfoylei cv quinquefolia [78] 62 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Viết đầy đủ CD3OD Deuterated methanol cv Cultivar ESI-MS ElectroSpray Ionization Mass Spectroscopy EtOAc Ethyl acetat EtOH Ethanol HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation MeOH Methanol NMR Nuclear magnetic resonance P Polyscias ppm Parts per million SE Standard error SKLM Sắc ký lớp mỏng TLC Thin-layer chromatography TT Thuốc thử ĐẶT VẤN ĐỀ Thế giới thực vật nguồn tài nguyên phong phú vô quý giá hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học Việt Nam quốc gia nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, có nhiều điều kiện thuận lợi cho sinh vật phát triển, tạo hệ thực vật phong phú đa dạng, cung cấp nguyên liệu cho y học cổ truyền Việt Nam Nguồn thuốc dân gian tri thức sử dụng dược liệu phong phú nhân dân kho tàng quý giá để khám phá, tìm kiếm loại thuốc có hiệu lực cao phòng chữa bệnh Ngày nay, xu hướng sâu nghiên cứu tìm kiếm hoạt chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao từ loài thực vật làm dược phẩm chữa bệnh ngày thu hút quan tâm nhà khoa học ưu điểm chúng không độc có độc tính, dễ hấp thu chuyển hóa thể Chi Polyscias chi lớn thứ hai thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae) [67], với nhiều loài sử dụng thuốc cổ phương, nhiên giới có số lồi chi Polyscias nghiên cứu thành phần hóa học: P fruticosa (L.) Harms, P filicifolia Bail., P scutellaria (Burm f.) Merr., P amplifolia (Baker) Harms, P.dichroostachya Baker, P fulva, P murrayi Harms Polyscias sp nov Ở Việt Nam, có 10 loài Đinh lăng [9], đa số Đinh lăng sử dụng làm cảnh, có vài lồi sử dụng làm thuốc, loài Đinh lăng sử dụng làm thuốc phổ biến Polyscias fruticosa (L.) Hams Tuy nhiên số vùng, loài Polyscias fruticosa (L.) Hams số lồi Đinh lăng khác trồng với nhu cầu sử dụng cao loài Đinh lăng Đây loài Đinh lăng trồng phổ biến Thái Bình, nhân dân sử dụng làm cảnh làm thuốc tương tự Đinh lăng xẻ để tăng cường sức khỏe, nâng cao sức đề kháng, giảm đau đầu, giảm mệt mỏi Tuy nhiên, có nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng dược lý loài Đinh lăng 180.21 174.92 149.51 149.29 149.08 144.48 135.97 135.78 135.58 123.70 123.50 123.30 122.36 106.08 104.54 89.13 83.53 77.92 77.14 76.83 76.46 74.63 74.52 71.04 77.92 77.14 76.83 76.46 74.63 74.52 71.04 61.93 55.50 47.65 46.45 46.22 41.87 41.70 39.43 39.15 38.29 36.62 33.93 33.02 32.90 30.67 28.01 27.93 26.07 25.94 23.51 23.39 18.18 17.13 16.72 15.13 H-NMR, 13C- 2a ( i ESI-MS) 1.02 7.943 7.939 1.11 7.615 7.611 7.598 7.594 1.09 6.933 6.916 1.07 6.414 6.410 1.00 6.222 6.218 1.03 5.420 5.416 5.409 5.405 3.04 3.963 1.04 3.767 3.763 3.743 3.739 1.12 3.596 3.585 3.572 3.561 2.13 3.508 3.491 3.484 3.480 3.475 3.468 3.450 1.15 3.369 3.351 3.336 3.333 3.330 3.327 3.323 3.319 3.314 3.281 3.277 3.270 3.266 3.262 3.257 3.251 3.246 179.44 165.96 163.08 158.67 158.46 150.85 148.40 135.36 123.84 123.11 116.00 114.42 105.80 103.71 99.88 94.74 78.53 78.09 75.93 71.52 62.58 56.80 -S STT 11 12 23 25 27 29 35 41 48 STT 10 11 15 16 30 31 32 40 44 45 47 m1 24 21.6 21.2 20.4 21.1 25.6 23.2 20.8 20.2 24.7 20.4 20.4 m1 23.6 25.6 22.8 20.4 22 21 20.5 20.3 21.1 20.9 22.5 20 21.7 m7 26 23.3 23.9 21 25 26.6 24.8 23.2 21.9 24.7 21.1 21.4 m7 25.9 26.9 23.6 23 23.1 23.6 21.8 22.2 22.4 22.4 23.8 20.2 23.2 m14 25.6 26.5 24.5 22.7 26 27.1 25.5 22.4 22.7 26.8 22.5 22.1 m14 28.3 27.4 24.7 24.7 24.5 25.5 22.6 24.3 23.7 24 24.3 21.3 24.6 i tr STT 13 17 19 20 24 28 37 38 39 43 STT 14 18 21 22 26 33 34 36 42 46 ng chu t m1 23.1 21 20.4 21.8 24.3 25 21.4 24.2 20.3 20.5 22.3 20.3 m7 26.5 23 21 23.3 26.1 24.4 22.8 26.5 21.4 21.3 23.9 21.5 Arcalion 100 mg m1 m7 21.8 22.8 24.4 24.3 20.6 22.4 24 26.6 23.7 25.8 20 25.3 20.7 21.4 20.7 21.6 20.4 24.4 21.7 24.6 21.3 22.5 20.8 22.7 m14 27 23.1 22.8 25.8 26.1 27.3 23.9 26.4 23.6 22.7 23.6 22.3 m14 25.5 25.2 24.2 28.8 25.3 26.6 23.7 23.7 22.3 26.5 23.8 23.3 ... NGHIÊN CỨU 20 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THI T BỊ NGHIÊN CỨU 20 2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 20 2.1.2 Động vật thí nghiệm 20 2.1.3 Trang thi t bị nghiên cứu 20 2.2 PHƯƠNG... Standard error SKLM Sắc ký lớp mỏng TLC Thin-layer chromatography TT Thuốc thử ĐẶT VẤN ĐỀ Thế giới thực vật nguồn tài nguyên phong phú vô quý giá hợp chất thi n nhiên có hoạt tính sinh học Việt... vữa động mạch - Tác dụng cải thi n trí nhớ cao Đinh lăng liều 50, 100 200 mg/kg thử nghiệm cho thấy liều 100 mg/kg làm tăng thời gian bơi vùng có phao Thể tác dụng cải thi n trí nhớ thực nghiệm