Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 9528:2012 - ISO 15303:2001. Tiêu chuẩn về Dầu mỡ động vật và thực vật - phát hiện và nhận biét chất nhiễm bẩn hữu cơ dễ bay hơi bằng sắc kí khí/phổ khối lượng (GC/MS). Tiêu chuẩn này quy định phương pháp phát hiện và nhận biết chất nhiễm bẩn hữu cơ dễ bay hơi trong dầu thực phẩm.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9528:2012 ISO 15303:2001 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - PHÁT HIỆN VÀ NHẬN BIÉT CHẤT NHIỄM BẨN HỮU CƠ DỄ BAY HƠI BẰNG SẮC KÍ KHÍ/PHỔ KHỐI LƯỢNG (GC/MS) Animal and vegetable fats and oils - Detection and indentification of a volatile organic contaminant by GC/MS Lời nói đầu TCVN 9528:2012 hồn tồn tương đương với ISO 15303:2001; TCVN 9528:2012 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Công nghệ công bố DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - PHÁT HIỆN VÀ NHẬN BIÉT CHẤT NHIỄM BẨN HỮU CƠ DỄ BAY HƠI BẰNG SẮC KÍ KHÍ/PHỔ KHỐI LƯỢNG (GC/MS) Animal and vegetable fats and oils - Detection and indentification of a volatile organic contaminant by GC/MS Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp phát nhận biết chất nhiễm bẩn hữu dễ bay dầu thực phẩm Phương pháp áp dụng để nhận biết loại hóa chất công nghiệp dễ bay dầu thực phẩm thô dầu thực phẩm tinh luyện bị nghi ngờ nhiễm bẩn Phương pháp cho phép xác định nồng độ chất nhiễm bẩn Tiêu chuẩn không áp dụng để xác định nồng độ hóa chất phản ứng với dầu thực phẩm với thành phần tự nhiên dầu thực phẩm Trong trường hợp này, có mặt chất nhiễm bẩn đơi lúc nhận biết dựa định tính ban đầu Ngồi ra, tiêu chuẩn không áp dụng cho loại hóa chất khơng bay Phương pháp áp dụng để nhận biết nhóm hợp chất sau đây: - hydrocacbon halogen hóa bão hòa; - hydrocacbon halogen hóa khơng bão hòa; - este, aldehyt, rượu, amin, xeton, ete; - hợp chất thơm hợp chất dạng vòng; - họp chất nitơ; - acrylat v.v Phương pháp đánh giá nồng độ dải từ mg/kg đến 10 mg/kg Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm công bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi bổ sung (nếu có) TCVN 6128:1996 (ISO 661:1989) *) ,Dầu mỡ động vật thực vật-Chuẩn bị mẫu thử Nguyên tắc Cho chất chuẩn deuteri hóa có thời gian lưu sắc kí khí (GC) gần giống thời gian lưu chất nhiễm bẩn bị nghi ngờ vào dầu nồng độ gần giống nồng độ chất nhiễm bẩn bị *) TCVN 6128:1996 (ISO 661:1989) thay TCVN 6128:2007 (ISO 661:2003) nghi ngờ Mẫu dầu sau đưa vào đầu vào bẫy lạnh giải hấp nhiệt thiết bị GC/MS Các thành phần dễ bay bay khỏi dầu giữ lại bẫy lạnh Bẫy lạnh sau gia nhiệt nhanh đến 160 oC chất giải phóng khỏi bẫy lạnh quét thiết bị GC/MS để phân tích Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước cất, nước khử ion nước có độ tinh khiết tương đương, trừ có quy định khác 4.1 Hợp chất đối chứng chuẩn, tương ứng với chất nhiễm bẩn bị nghi ngờ (độ tinh khiết 99 %) 4.2 Metanol, loại dùng cho phân tích 4.3 Chất chuẩn nội deuteri hóa hồn tồn benzen, etyl benzen naptalen (độ tinh khiết 99 %) 4.4 Heli, loại tinh khiết hóa học 4.5 Dầu lạc tinh luyện, khử màu, khử mùi (RBD), dầu thực vật dạng lỏng có tính ổn định tương đương, khơng chứa hóa chất cơng nghiệp có liên quan đến chất cần phân tích Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị, dụng cụ phòng thử nghiệm thông thường thiết bị, dụng cụ cụ thể sau: 5.1 Sắc kí khí mao quản 5.2 Máy đo phổ khối lượng 5.3 Bẫy lạnh giải hấp nhiệt1) 5.4 Cột mao quản, dài 50 m, chứa metyl polysiloxan có pha tĩnh (hoặc tương đương) OV101, chiều dày màng 0,5 m, đường kính 0,32 mm 5.5 Máy sắc kí khí phổ khối lượng, tiến hành điều kiện sau: a) Chương trình nhiệt độ bẫy lạnh giải hấp nhiệt (khi bơm): - lò bẫy lạnh nhiệt 160 °C; - bẫy lạnh nhiệt - 40 oC Bẫy lạnh giữ nhiệt độ - 40 oC sau gia nhiệt nhanh đến nhiệt độ 160 oC Chương trình nhiệt độ GC bắt đầu đồng thời với việc làm nóng nhanh bẫy lạnh Bẫy lạnh giữ nhiệt độ 160 oC b) Cài đặt chương trình nhiệt độ GC: - nhiệt độ ban đầu 50 oC min; - nhiệt độ tăng 7,5 oC/min; - nhiệt độ kết thúc 250 oC c) Điều kiện MS: - quét giây quét lần nhanh hơn; - nguồn 70 eV, 200 oC , 100 A, kV d) Tốc độ dòng khí: - cột heli, ml/min; - tốc độ chia dòng bẫy lạnh ml/min 5.6 Máy trộn vortex 1) The Chrompack Purge and Trap System ví dụ sản phẩm phù hợp có bán sẵn Thơng tin đưa tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn tiêu chuẩn không ấn định phải sử dụng chúng 6 Cách tiến hành 6.1 Chuẩn bị mẫu chuẩn mẫu trắng 6.1.1 Sử dụng dầu thực vật tinh luyện, khử màu khử mùi [ví dụ dầu lạc (4.5)] làm chất mang làm mẫu trắng 6.1.2 Bổ sung chất chuẩn (4.1) (nghĩa hóa chất tinh khiết biết thành phần, tương ứng với thành phần chất nhiễm bẩn bị nghi ngờ) có dạng đặc (ví dụ 100 mg/kg) vào dầu chất mang (6.1.1) Hỗn hợp dung dịch gốc Pha loãng dung dịch gốc dầu chất mang đến nồng độ yêu cầu (thường dải từ mg/kg đến 10 mg/kg) Dung dịch chuẩn phải có nồng độ tương tự nồng độ chất nhiễm bẩn mẫu 6.1.3 Pha loãng dầu nghi ngờ bị nhiễm bẩn dầu chất mang (4.5), cần, cho nồng độ chất nhiễm bẩn bị nghi ngờ dải từ 1,0 mg/kg đến 10 mg/kg, nghĩa dải tuyến tính thiết lập để định lượng phương pháp 6.2 Chuẩn bị chất chuẩn nội Chuẩn bị chất chuẩn nội benzen, etyl benzen naptalen deuteri hóa (4.3) metanol (4.2) nồng độ 0,1 g/l (0,1 g/ l) yêu cầu Dung dịch chuẩn nội chọn có thời gian lưu GLC gần giống với thời gian lưu chất phân tích 6.3 Chuẩn bị mẫu phân tích Cân xác 1,00 g dầu để phân tích Thêm 5,0 l dung dịch chuẩn nội chọn theo 6.2 vào dung dịch metanol (4.2) Trộn máy trộn vortex (5.6) Lặp lại bước với tất mẫu, mẫu chuẩn mẫu trắng Để thu kết tốt nhất, nên để mẫu qua đêm để đạt trạng thái cân 6.4 Xác định phép phân tích GC/MS Các điều kiện cho đáp ứng: Nút ống bẫy lạnh nhiệt (TCT) rỗng thủy tinh đến chiều dài khoảng từ cm đến cm Lấy khoảng 10 mg mẫu cho vào ống Nếu nồng độ chất nhiễm bẩn vượt q 10 mg/kg sau phân tích phần dầu 10 mg, lặp lại phép xác định với cỡ mẫu 2,5 mg Nếu nồng độ chất nhiễm bẩn lớn hơn, nên pha lỗng xác mẫu mẫu dầu trắng (6.1.1) nồng độ nằm dải từ mg/kg đến 10 mg/kg (xem 6.1.3) Làm lạnh sơ bẫy lạnh xuống - 20 oC tiếp tục làm lạnh xuống - 40 oC Nối ống chứa dầu vào lò TCT khởi động chương trình TCT GC/MS 6.5 Nhận biết So sánh thời gian lưu GC phổ khối lượng chất phân tích với thời gian lưu GC phổ khối lượng chất chuẩn Việc nhận biết đòi hỏi phù hợp cao phổ khối lượng thời gian lưu GC Tiến hành định lượng cách sử dụng sắc đồ ion ion chọn từ chất phân tích, chất chuẩn nội lấy tích phân diện tích chúng Phương pháp sử dụng để giảm thiểu gây nhiễu chất rửa giải Tính biểu thị kết 7.1 Tính kết Diện tích pic ion chất phân tích phân chia cho diện tích pic ion chất chuẩn nội hệ số phản ứng R: Trong K số; C nồng độ ion chất phân tích; Cis nồng độ chất chuẩn nội Trong RSAM giá trị R mẫu; CSAM nồng độ ion chất phân tích mẫu Khi Cis số theo định nghĩa: Trong hệ số F là: Tương tự, giá trị R chất chuẩn là: Trong CSTD nồng độ ion chất phân tích chất chuẩn Do 7.2 Biểu thị kết Tiến hành hai phép xác định lặp lại Báo cáo việc nhận biết chất nhiễm bẩn giá trị trung bình nồng độ thu từ hai phép xác định lặp lại, với điều kiện đáp ứng giới hạn lặp lại nêu 8.2 Ngoài ra, lặp lại phép xác định hai phần mẫu thử Nếu chênh lệch lần xác định vượt 0,6 mg/kg lấy kết trung bình cộng bốn lần xác định, với điều kiện chênh lệch tối đa kết đơn lẻ không vượt 1,0 mg kilogam dầu Báo cáo kết đến chữ số thập phân Độ chụm 8.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm độ chụm phương pháp nêu Phụ lục A Giá trị nhận từ phép thử liên phòng thử nghiệm khơng áp dụng cho dải nồng độ chất khác với dải nồng độ chất nêu 8.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử riêng rẽ độc lập thu được, sử dụng phương pháp, vật liệu thử giống hệt nhau, phòng thử nghiệm, người thao tác, sử dụng thiết bị, khoảng thời gian ngắn, không % trường hợp lớn 0,6 mg/kg 8.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử riêng rẽ thu được, sử dụng phương pháp, vật liệu thử giống hệt nhau, phòng thử nghiệm khác nhau, người thao tác khác nhau, sử dụng thiết bị khác nhau, không % trường hợp lớn 1,43 mg/kg CHÚ THÍCH: Phương pháp thử nghiệm vòng với 1,1,1-tridoetan, 2-etyl hexyl acrylat, dicytopentandien, tetracloetylen, N,N-etylmetyllanilin N,N -dimetylanalin, hexan-2-ol, benzen, cumen, etyl acrylat (xem Thư mục tài liệu tham khảo) PHỤ LỤC A (Tham khảo) Kết phép thử liên phòng thử nghiệm A.1 Yêu cầu chung Hai phép thử liên phòng thử nghiệm tiến hành để xác định chất nhiễm bẩn hóa học hữu dầu thực phẩm Các phép thử tiến hành lần thứ vào năm 1993 nêu Bảng A.1 Lần thứ hai tiến hành vào năm 1994 nêu Bảng A.3 CHÚ THÍCH Kết phép thử liên phòng thử nghiệm thống hội nghị Tiểu ban kỹ thuật ISO/TC 34/SC 11 tổ chức vào tháng năm 1996, có tính đến thiết bị chuyên biệt cần cho việc xác định, kết phép thử liên phòng thử nghiệm quốc tế chấp nhận số lượng phòng thử nghiệm tham gia kết thu bị giới hạn Cần lưu ý tài liệu có liên quan khơng phù hợp với ISO 5725:1986 2) TCVN 6910-1:2001 (ISO 5725-1:1994) A.2 Phép thử liên phòng thử nghiệm lần thứ nhất, năm 1993 Số lượng phòng thử nghiệm mời tham gia: 21 phòng từ 10 quốc gia Số lượng phòng thử nghiệm đưa kết : phòng từ quốc gia Các phòng thử nghiệm tham gia cung cấp tám mẫu dầu thực phẩm dán nhãn từ A đến H Để mô thực tế hoạt động vận chuyển tàu biển biết chất ba chất cuối có khả nhiễm bẩn, người phân tích thơng báo chất nhiễm bẩn bị nghi ngờ ba hợp chất Chi tiết mẫu nêu Bảng A.1 Các kết thống kê nêu Bảng A.2 Phương pháp phù hợp để phát có mặt chất nhiễm bẩn biết dầu mỡ Tuy nhiên, liệu độ chụm thu phép thử nghiệm cộng tác không coi đạt yêu cầu để khẳng định chất nhiễm bẩn mức độ thấp theo yêu cầu thương mại ISO Bảng A.1 – Mẫu dùng cho phép thử lần thứ chất nhiễm bẩn có dầu thực phẩm Kí hiệu mẫu Danh mục chất nhiễm bẩna giả định Nồng độ chất chuẩn thêm vào cho trước dầu mg/kg A Diclometan 1,2-Dibrometan 1,12 1,1,1-TRICLOETAN B 2-ETYL HEXYL ACRYLAT Metyl acrylat 1,25 Dipenten C Metyl t-butyl ete DICLOPENTADIEN 1,29 Furfural D Tricloetylen TETRACLOETYLEN 2-Furalđehit 2) ISO 5725:1986 hủy 1,03 E N,N-DIMETYLANILIN 5-Etyl-2-metylpyridin 1,04 N,N-Dimetyl anilin F Pyridin N,N-DIMETYLANILIN 1,10 Nitrotoluen G Butan HEXAN-2-OL 1,04 Di-isobutyl xeton H Cumen Pyridin 1,04 Benzen a Các hóa chất viết chữ in hoa hóa chất thực tế có dầu, thông tin không đưa cho người phân tích thực phép thử cuối Bảng A.2 – Phân tích thống kê kết phép thử liên phòng thử nghiệm lần thứ Mẫu A B C D E F G H 7 7 7 7 Nồng độ trung bình quan sát (mg/kg) 1,11 1,32 1,53 1,05 1,58 1,18 0,83 0,91 Nồng độ thêm chuẩn (mg/kg) 1,12 1,25 1,29 1,03 1,04 1,10 1,04 1,04 2 3 2 Độ lệch chuẩn lặp lại, sr (mg/kg) 0,15 0,08 0,12 0,08 0,13 0,04 0,11 0,04 Hệ số biến thiên lặp lại (%) 13,7 5,6 15,9 6,6 19,4 3,5 14,3 4,0 Giới hạn lặp lại, r (2,83 sr) 0,43 0,23 0,62 0,21 0,51 0,11 0,31 0,11 7 6 Độ lệch chuẩn tái lập, SR (mg/kg) 0.64 0.57 1,09 0,29 1.80 0,43 0,44 0,18 Hệ số biến thiên tái lập (%) 58,2 42,2 79,0 29,7 13,5 36,8 53,0 19,6 Giới hạn tái lập, R (2,83 SR) 1.82 1.61 3,09 0,81 5,09 1,22 1,25 0,51 Dải kết (mg/kg) 0,58 0,58 0,57 0,68 0,40 0,4 0.17 0,6 đến đến đến đến đến đến đến đến 2,50 2,10 3,50 1,30 4.73 1.7 1.37 1,10 Số lượng phòng thử nghiệm Số lượng kết chấp nhận phép xác định độ lặp lại Số lượng kết chấp nhận phép xác định độ tái lập CHÚ THÍCH Mặc dù phép thử liên phòng thử nghiệm lần thứ khơng thống kê xác giá trị trung bình r R kết thu mẫu khác nhau, xem thỏa thuận chấp nhận việc ước tính độ chụm phương pháp chung trường hợp Từ bảng tính giới hạn lặp lại trung bình (r) 0,36 giới hạn tái lập trung bình (R) 2,38 A.3 Phép thử liên phòng thử nghiệm lần thứ hai, năm 1994 Số lượng phòng thử nghiệm mời tham gia: 16 phòng từ quốc gia Số lượng phòng thử nghiệm đưa kết : phòng từ quốc gia Các phòng thử nghiệm tham gia cung cấp tám mẫu dầu thực phẩm dán nhãn từ A đến H Để mô thực tế hoạt động vận chuyển tàu biển biết chất ba chất cuối có khả nhiễm bẩn, người phân tích thông báo chất nhiễm bẩn bị nghi ngờ ba hợp chất Chi tiết mẫu nêu Bảng A.3 Các kết thống kê nêu Bảng A.4 Bảng A.3 – Mẫu dùng cho phép thử lần thứ hai chất nhiễm bẩn có dầu thực phẩm Mã mẫu Danh mục chất nhiễm bẩna giả định cho trước Nồng độ chất chuẩn thêm vào dầu mg/kg 2-Etyl hexyl acrylat I ETYL SCRYLAT 1,03 Vinyl axetat N,N -Dimetylanilin J Epiclohrydrin 1,3-Diclopropen CUMEN K Tetracloetylen 1,25 N,N -Etymetylanilin a Các hóa chất viết chữ in hoa hóa chất thực tế bổ sung vào dầu thực phẩm tinh luyện, khử màu, khử mùi (RBD), thông tin không đưa cho người phân tích phép thử cuối J mẫu trắng Bảng A.4 - Các kết phân tích thống kê phép thử liên phòng thử nghiệm lần thứ hai Mẫu (m/z) l (55) K (105) K (105) K (120) K(120) Chất chuẩn nội (m/z) Benzen (84) Etylbenzen (98) Etylbenzen (116) Số lượng phòng thử nghiệm 9 8 Số lượng kết chấp nhận 8 Giá trị trung bình (mg/kg) 1,19 0,94 0,99 0,92 0,97 Độ lệch chuẩn lặp lại, sr(mg/kg) 0,48 0,07 0,08 0,04 0,08 Hệ số biến thiên lặp lại (%) 40,0 7.7 8.5 4,15 8.7 Giới hạn lặp lại, r (2,83 Sr) 1.3 0,2 0,24 0.11 0.24 Độ lệch chuẩn tái lập, SR (mg/kg) 0.50 0,50 0,51 0,52 0,52 Hệ số biến thiên tái lập (%) 42 53,25 51,2 56.8 53,5 Giới hạn tái lập, R (2,83 SR) 1,4 1,4 1,4 1,47 1,47 0,5 đến 2,75 0,16 đến 1,69 0,15 đến 1,66 0,1 đến 1,47 0,09 đến 1,67 Dải kết (mg/kg) EtylEtyl-benzen benzen (98) (116) CHÚ THÍCH Mặc dù phép thử liên phòng thử nghiệm khơng thống kê xác giá trị trung bình r R kết thu mẫu khác nhau, xem thỏa thuận chấp nhận việc ước tính độ chụm phương pháp chung trường hợp Từ bảng tính từ kết giới hạn lặp lại trung bình (r) 0,61 giới hạn tái lập trung bình (R) 1,43 THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1 ] ISO 5725:1986, Precision of test method - Detemination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests [2] TCVN 6910-1:2001 (ISO 5725-1:1994), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo - Phần 1: Định nghĩa nguyên tắc chung [3] Leatherheard Food Research Association, Research Reports, No.708 (June 1993) [4] Leatherheard Food Research Association, Research Notes, No.110 (April 1994) [5] Leatherheard Food Research Association, Research Reports, No.742 (February 1997) ... 5725:1986 hủy 1,03 E N,N-DIMETYLANILIN 5-Etyl-2-metylpyridin 1,04 N,N-Dimetyl anilin F Pyridin N,N-DIMETYLANILIN 1,10 Nitrotoluen G Butan HEXAN-2-OL 1,04 Di-isobutyl xeton H Cumen Pyridin 1,04 Benzen... phù hợp với ISO 5725:1986 2) TCVN 691 0-1 :2001 (ISO 572 5-1 :1994) A.2 Phép thử liên phòng thử nghiệm lần thứ nhất, năm 1993 Số lượng phòng thử nghiệm mời tham gia: 21 phòng từ 10 quốc gia Số lượng... KHẢO [1 ] ISO 5725:1986, Precision of test method - Detemination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests [2] TCVN 691 0-1 :2001 (ISO 572 5-1 :1994),