Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 9047:2012 - ISO 7328:2008 trình bày về kem lạnh thực phẩm chứa sữa và kem lạnh hỗn hợp - xác định hàm lượng chất béo - phương pháp khối lượng (phương pháp chuẩn). Tiêu chuẩn này quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo trong phần lớn các loại kem lạnh thực phẩm chứa sữa và kem lạnh hỗn hợp. Tiêu chuẩn này cũng áp dụng cho kem lạnh hỗn hợp dạng cô đặc và dạng bột.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9047 : 2012 ISO 7328 : 2008 KEM LẠNH THỰC PHẨM CHỨA SỬA VÀ KEM LẠNH HỖN HỢP - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Milk - based edible ices and ice mixes - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method) Lời nói đầu TCVN 9047:2012 hoàn toàn tương đương với ISO 7328:2008; TCVN 9047:2012 Cục An toàn vệ sinh thực phẩm tổ chức biên soạn, Bộ Y tế đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố KEM LẠNH THỰC PHẨM CHỨA SỬA VÀ KEM LẠNH HỖN HỢP - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Milk - based edible ices and ice mixes - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method) CẢNH BÁO - Việc áp dụng tiêu chuẩn liên quan đến vật liệu, thiết bị thao tác gây nguy hiểm Tiêu chuẩn đưa hết tất vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng Người sử dụng tiêu chuẩn phải tự thiết lập thao tác an tồn sức khỏe thích hợp xác định khả áp dụng giới hạn quy định trước sử dụng tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo phần lớn loại kem lạnh thực phẩm chứa sữa kem lạnh hỗn hợp Tiêu chuẩn áp dụng cho kem lạnh hỗn hợp dạng cô đặc dạng bột Tiêu chuẩn không áp dụng cho số loại kem lạnh thực phẩm chứa sữa kem lạnh hỗn hợp, có chứa lượng chất nhũ hóa, chất ổn định chất làm dày, có chứa lòng đỏ trứng, loại trái hỗn hợp chúng làm cho phương pháp Rose-Gottlieb trở nên khơng thích hợp CHÚ THÍCH: Đối với sản phẩm nêu trên, phương pháp sử dụng nguyên tắc Weibull-Berntrop [xem TCVN 6688-2 (ISO 8262-2)[3]] thích hợp Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm cơng bố áp dụng nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 7150 (ISO 835), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Pipet chia độ TCVN 7153 (ISO 1042), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Bình định mức TCVN 8488 (ISO 4788), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Ống đong chia độ ISO 3889, Milk and milk products - Determination of fat content - Mojonnier type fat extraction flasks (Sữa sản phẩm sữa - Xác định hàm lượng chất béo - Bình chiết chất béo kiểu Mojonnier) Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn sử dụng thuật ngữ định nghĩa sau đây: 3.1 Hàm lượng chất béo kem lạnh thực phẩm chứa sữa kem lạnh hỗn hợp (fat content of milk-based edible ices and ice mixes) Phần khối lượng chất xác định quy trình quy định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH: Hàm lượng chất béo tính phần trăm khối lượng Nguyên tắc Phần mẫu thử dung dịch etanol amoniac chiết dietyl ete dầu nhẹ Loại bỏ dung môi cách chưng cất cho bay Xác định khối lượng chất chiết CHÚ THÍCH: Nguyên tắc thường gọi nguyên tắc Rose-Gottlieb Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử tinh khiết phân tích, trừ có quy định khác sử dụng nước cất, nước loại khống nước có chất lượng tương đương Các thuốc thử không để lại lượng cặn đáng kể thực phép thử theo quy định (xem 9.2.2) 5.1 Dung dịch amoniac, chứa khoảng 25% khối lượng NH3, ( 20 = 910 g/l) CHÚ THÍCH Nếu khơng có sẵn dung dịch amoniac nồng độ sử dụng dung dịch có nồng độ biết trước cao (xem 9.4.2) 5.2 Etanol (C2H5OH), etanol biến tính metanol, có chứa 94% thể tích etanol (xem A.5) 5.3 Dung dịch đỏ Congo Hòa tan g đỏ Congo (C32H22N6Na2O6S2) vào nước đựng bình định mức vạch dung tích 100 ml (6.14) Pha lỗng nước đến vạch CHÚ THÍCH: Dung dịch để phân biệt rõ lớp phân cách dung môi với nước việc sử dụng dung dịch tùy chọn (xem 9.4.4) Có thể sử dụng dung dịch thị dạng lỏng khác với điều kiện chúng không ảnh hưởng đến kết xác định 5.4 Dietyl ete (C2H5OC2H5), khơng chứa peroxit (xem A.3), có chứa khơng nhiều mg/kg chất chống oxi hóa phù hợp với yêu cầu phép thử trắng (xem 9.2.2, A.1 A.4) CẢNH BÁO - Việc sử dụng dietyl ete gây nguy hiểm Cần tuân thủ quy định an tồn xử lí, sử dụng thải bỏ thuốc thử 5.5 Dầu nhẹ, có dải nhiệt độ sơi từ 300C đến 600C, tương đương pentan (CH3[CH2]3CH3) có điểm sơi 360C, phù hợp với yêu cầu cho phép thử trắng (xem 9.2.2, A.1 A.4) Nên sử dụng pentan pentan có độ tinh khiết cao chất lượng ổn định 5.6 Dung môi hỗn hợp Ngay trước sử dụng, trộn thể tích dietyl ete (5.4) dầu nhẹ (5.5) Thiết bị, dụng cụ CẢNH BÁO - Vì phép xác định có sử dụng dung mơi bay dễ cháy nên thiết bị dùng phải tuân theo quy định an tồn sử dụng dung mơi Sử dụng thiết bị, dụng cụ phòng thử nghiệm thông thường cụ thể sau: 6.1 Cân phân tích, cân xác đến mg, đọc đến 0,1 mg 6.2 Máy li tâm, giữ bình chiết ống chiết chất béo (6.6) đạt vận tốc từ 500 r/min đến 600 r/min để tạo gia tốc hướng tâm khoảng 80 g đến 90 g miệng bình chiết ống chiết Việc sử dụng máy li tâm tùy chọn, nên dùng loại thiết bị (xem 9.4.7) 6.3 Thiết bị chưng cất thiết bị làm bay hơi, để chưng cất dung môi etanol từ bình cầu bình đun sơi, làm bay từ cốc có mỏ đĩa (xem 9.4.14) nhiệt độ không 1000C 6.4 Tủ sấy, chạy điện, có cửa thơng gió mở hồn tồn, trì nhiệt độ 102 0C 20C toàn khoang sấy Tủ sấy phải gắn với nhiệt kế thích hợp 6.5 Nồi cách thủy, trì nhiệt độ 650C 20C 6.6 Bình chiết chất béo kiểu Mojonnier, theo quy định ISO 3889 CHÚ THÍCH Cũng dùng ống chiết chất béo, có ống si phơng nối với chai rửa, quy trình có khác nêu Phụ lục B Các bình chiết phải đậy nút bần chất lượng tốt đậy nắp làm vật liệu khác (ví dụ cao su silicon polytetrafloetylen) không bị ảnh hưởng thuốc thử sử dụng Nút bần phải chiết dietyl ete (5.4), ngâm nước 15 nhiệt độ 600C cao sau để nguội nước để nút bần bão hòa nước sử dụng 6.7 Giá đỡ, để giữ bình chiết chất béo (hoặc ống chiết chất béo (6.6) 6.8 Chai rửa, thích hợp để dùng cho dung mơi hỗn hợp (5.6) Không dùng chai rửa chất dẻo 6.9 Bình thu nhận chất béo, ví dụ bình đun sơi (đáy phẳng), có dung tích từ 125 ml đến 250 ml, bình nón có dung tích 250 ml đĩa kim loại Nếu sử dụng đĩa kim loại đĩa phải thép khơng gỉ, đáy phẳng, có đường kính từ 80 mm đến 100 mm có chiều cao khoảng 50 mm 6.10 Hạt trợ sôi, không chứa chất béo, sứ không xốp silic cacbua (tùy chọn dùng đĩa kim loại) 6.11 Ống đong, dung tích ml 25 ml, phù hợp với loại A TCVN 8488 (ISO 4788), dụng cụ thích hợp khác sản phẩm có liên quan 6.12 Pipet, có chia độ, dung tích 10 ml, phù hợp với loại A TCVN 7150 (ISO 835) 6.13 Bộ kẹp, kim loại để giữ bình, cốc có mỏ đĩa 6.14 Pipet, có đầu rộng, có khả phân phối phần mẫu thử dạng lỏng CHÚ THÍCH: Việc sử dụng pipet tùy chọn (xem 9.1) 6.15 Máy trộn tốc độ cao, có bình khuấy dung tích lít có nắp đậy kín, dụng cụ thích hợp khác để chuẩn bị mẫu thử 6.16 Bình định mức, vạch, dung tích 100 ml phù hợp với loại A TCVN 7153 (ISO 1042) Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện mẫu không bị hư hỏng bị biến đổi chất lượng suốt trình vận chuyển bảo quản Việc lấy mẫu không quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 6400 (ISO 707) [1] Bảo quản mẫu phòng thử nghiệm nhiệt độ không lớn - 18 0C từ lấy mẫu tiến hành thử nghiệm, ngoại trừ mẫu kem lạnh hỗn hợp dạng bột Chuẩn bị mẫu thử 8.1 Kem lạnh thực phẩm chứa sữa, kem lạnh hỗn hợp kem lạnh hỗn hợp dạng cô đặc 8.1.1 Không để nhiệt độ vượt 120C thời điểm trình chuẩn bị phần kem Loại bỏ tất lớp phủ bên ngồi khơng phải kem khỏi mẫu thử 8.1.2 Nếu có thể, tách riêng lớp sản phẩm có nhiều lớp, lớp chứa hàm lượng chất béo khác nhau, mẫu trạng thái đông lạnh Chuẩn bị mẫu thử riêng rẽ từ lớp tách theo 8.1.3 8.1.3 Cắt mẫu thử thành miếng Chọn vài miếng ngẫu nhiên để có tổng khối lượng khoảng 100 g, Cho miếng vào máy trộn Đậy nắp bình trộn làm mềm mẫu nhiệt độ phòng Đối với mẫu thử đơn giản tiến hành trộn min, với mẫu có chứa chất dạng hạt (ví dụ: loại hạt, miếng kẹo cứng) trộn khơng q để thu hỗn hợp đồng Nếu chất béo bị tách mẫu bị "đánh kem" loại bỏ hỗn hợp lặp lại quy trình chuẩn bị với thời gian trộn ngắn Chuyển mẫu thử trộn vào hộp kín khí thích hợp tiến hành xác định vòng h 8.2 Kem lạnh hỗn hợp dạng bột Trộn kĩ cách xoay đảo chiều hộp chứa mẫu Nếu cần, chuyển mẫu thử qua hộp kín khí thích hợp khác, có dung tích đủ để trộn Nếu mẫu thử chứa cục mảng đồng hóa máy trộn thích hợp (6.15) Cách tiến hành CHÚ THÍCH 1: Nếu cần kiểm tra xem giới hạn lặp lại (11.2) có thỏa mãn hay khơng tiến hành hai phép xác định riêng rẽ theo quy định từ 9.1 đến 9.4 CHÚ THÍCH 2: Quy trình thay sử dụng ống chiết chất béo có gắn si phơng chai rửa (xem Chú thích 6.6) nêu Phụ lục B 9.1 Phần mẫu thử Trộn mẫu thử (Điều 8) cách đảo chiều chai đựng nhẹ nhàng ba lần bốn lần Cân phần mẫu thử sau đây, trực tiếp gián tiếp, xác đến 1mg, cho vào bình chiết chất béo (6.6): a) kem lạnh thực phẩm chứa sữa kem lạnh hỗn hợp: từ 4,000 g đến 5,000 g; b) kem lạnh hỗn hợp dạng cô đặc: từ 2,000 g đến 2,500 g; c) kem lạnh hỗn hợp dạng bột: từ 0,900 g đến 1,100 g Chuyển triệt để tốt phần mẫu thử sang bầu thấp (nhỏ) bình chiết chất béo Sử dụng pipet (6.14) thích hợp 9.2 Phép thử trắng 9.2.1 Phép thử trắng phương pháp Tiến hành phép thử trắng đồng thời với phép xác định, sử dụng quy trình dùng loại thuốc thử, thay phần mẫu thử 9.4.1 10 ml nước (xem A.2) Khi sử dụng mẫu trắng cho mẻ mẫu thử mà mẫu riêng rẽ khơng có điều kiện giống hồn tồn cần đảm bảo quy trình cung cấp giá trị thử trắng để dùng tính kết phù hợp hồn tồn với quy trình sử dụng cho mẫu thử riêng rẽ Khi giá trị thu phép thử trắng vượt 1,0 mg kiểm tra thuốc thử, trước chưa kiểm tra (9.2.2) Việc hiệu giá trị lớn 2,5 mg cần nêu báo cáo thử nghiệm 9.2.2 Phép thử trắng thuốc thử Tiến hành phép thử trắng theo 9.2.1 để kiểm tra chất lượng thuốc thử Sử dụng thêm bình thu nhận chất béo rỗng, chuẩn bị theo 9.3 với mục đích kiểm sốt khối lượng Các thuốc thử không để lại lượng cặn lớn 1,0 mg (xem A.1) Nếu phần cặn thu phép thử trắng thuốc thử lớn 1,0 mg xác định lượng cặn dung môi riêng rẽ cách chưng cất 100 ml dietyl ete (5.4) dầu nhẹ (5.5) Sử dụng bình thu nhận chất béo rỗng, chuẩn bị theo mơ tả với mục đích kiểm soát khối lượng, để thu khối lượng thực cặn, khối lượng không lớn 1,0 mg Rất dung mơi chứa chất bay bị giữ lại nhiều chất béo Nếu có dấu hiệu cho thấy có mặt chất tiến hành phép thử trắng tất thuốc thử dung mơi, sử dụng bình thu nhận chất béo chứa khoảng g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung mơi với có mặt g butterfat khan 100 ml dung môi Sử dụng dung môi sau chưng cất lại Thay thuốc thử, dung môi không đạt yêu cầu, chưng cất lại dung mơi 9.3 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Làm khơ bình thu nhận chất béo (6.9) có vài hạt trợ sơi (6.10) tủ sấy (6.4) trì nhiệt độ 102 0C, thời gian h CHÚ THÍCH 1: Hạt trợ sơi để giúp cho sơi nhẹ q trình loại bỏ dung mơi, đặc biệt trường hợp sử dụng bình thu nhận chất béo thủy tinh; trường hợp dùng đĩa kim loại, việc sử dụng hạt trợ sôi tùy chọn Bảo vệ bình thu nhận chất béo khỏi bụi để nguội đến nhiệt độ phòng cân (bình thủy tinh để 1h, đĩa kim loại để 30 min) Khơng nên đặt bình thu nhận chất béo bình hút ẩm để tránh chưa đủ nguội thời gian làm nguội bị kéo dài Dùng kẹp (6.13) đặt bình thu nhận chất béo lên cân Cân bình thu nhận chất béo, xác đến 1,0 mg CHÚ THÍCH 2: Việc dùng kẹp để tránh làm thay đổi nhiệt độ 9.4 Phép xác định 9.4.1 Tiến hành xác định Thêm ml, ml 10 ml nước làm nóng nhiệt độ 65 0C 20C vào phần mẫu thử đựng bình chiết chất béo (9.1) để thu tổng thể tích từ 10 ml đến 11 ml Dùng nước để rửa phần mẫu thử vào bầu nhỏ bình chiết Trộn kỹ mẫu thử bầu nhỏ Làm nguội phần mẫu thử, trừ phần mẫu thử kem lạnh hỗn hợp dạng bột, đến nhiệt độ phòng dòng nước chảy 9.4.2 Thêm ml dung dịch amoniac (5.1) thể tích tương ứng dung dịch amoniac đậm đặc (xem Chú thích 5.1) vào phần mẫu thử (9.4.1) Trộn kỹ phần mẫu thử đựng bầu nhỏ bình chiết chất béo 9.4.3 Đun nóng bình chiết chất béo chứa phần mẫu thử kem lạnh hỗn hợp dạng bột nồi cách thủy (6.5) trì nhiệt độ 650C, thời gian từ 15 đến 20 min, lắc Làm nguội đến nhiệt độ phòng dòng nước chảy 9.4.4 Thêm 10 ml etanol (5.2) Trộn kỹ cách nhẹ nhàng cách cho lượng chứa bình chiết chất béo chảy chảy lại bầu lớn bầu nhỏ Tránh không chất lỏng dâng lên gần cổ bình Nếu cần, thêm hai giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) 9.4.5 Thêm 25 ml dietyl ete (5.4) Đậy bình chiết chất béo nút bần bão hòa nước đậy nắp làm vật liệu khác làm ẩm nước (xem 6.6) Lắc mạnh bình khơng lắc q mạnh để tránh tạo nhũ Trong trình lắc, giữ bình tư nằm ngang bầu nhỏ hướng lên trên, định kì cho chất lỏng bầu lớn chảy sang bầu nhỏ Làm mát bình dòng nước chảy đến gần nhiệt độ phòng, cần Cẩn thận mở nắp bình, tráng nắp phía cổ bình chiết chất béo dung mơi hỗn hợp (5.6) Dùng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào bình 9.4.6 Thêm 25 ml dầu nhẹ (5.5) Đậy bình chiết chất béo nút bần nắp đậy làm ẩm lại (ngâm nước) Lắc nhẹ bình 30 s theo 9.4.4 Tiến hành lắc theo 9.4.5 9.4.7 Li tâm bình chiết chất béo đậy kín thời gian từ đến gia tốc quay từ 80 g đến 90 g Nếu khơng có máy li tâm (6.2) để n bình chiết chất béo đậy kín giá đỡ (6.7) 30 lớp phía tách hẳn khỏi lớp nước Nếu cần, làm nguội bình chiết chất béo dòng nước chảy đến nhiệt độ phòng 9.4.8 Cẩn thận tháo nắp bình, dùng dung mơi hỗn hợp (5.6) để tráng nắp phía cổ bình chiết chất béo Dùng chai rửa (6.8) để tráng cho nước rửa chảy vào bình Nếu mặt lớp phân cách thấp chỗ thắt cổ bình cần nâng cao mức lên chút cách nhẹ nhàng thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để dung mơi gạn dễ dàng CHÚ THÍCH: Trong Hình Hình mơ tả ba loại bình quy định ISO 3889, điều khơng có nghĩa loại bình ưu tiên loại khác 9.4.9 Giữ bầu nhỏ bình chiết chất béo cẩn thận gạn triệt để tốt lớp bề mặt vào bình thu nhận chất béo chuẩn bị (xem 9.3) có chứa vài hạt trợ sơi (6.10) trường hợp sử dụng bình nón bình đun sơi (đối với đĩa kim loại tùy chọn) Khơng gạn phần lớp nước vào bình (xem Hình 2) 9.4.10 Tráng phía ngồi cổ bình chiết chất béo dung mơi hỗn hợp (5.6) Thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo Chú ý không để dung môi hỗn hợp tràn bên ngồi bình chiết Nếu cần, loại bỏ dung mơi phần dung mơi khỏi bình thu nhận chất béo cách chưng cất làm bay theo 9.4.14 9.4.11 Thêm ml etanol (5.2) vào bình chiết chất béo Dùng etanol để tráng bên cổ bình trộn theo 9.4.4 CHÚ DẪN Dung môi Lớp phân cách Lớp phân cách Lớp chất lỏng Lớp chất lỏng a Ở lần chiết thứ hai lần chiết thứ ba a Ở lần chiết thứ hai lần chiết thứ ba b Ở lần chiết thứ b Ở lần chiết thứ Hình - Trước gạn Hình - Sau gạn 9.4.12 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác quy định 9.4.5 đến hết 9.4.9 Chỉ dùng 15 ml dietyl ete (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) thay dùng 25 ml Dùng dietyl ete để tráng thành cổ bình chiết chất béo Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình (xem Hình 1) cách nhẹ nhàng thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để gạn dung môi triệt để tốt (xem Hình 2) 9.4.13 Thực chiết lần ba, không thêm etanol, cách lặp lại thao tác theo quy định 9.4.5 đến 9.4.9 Chỉ sử dụng 15 ml dietyl ete (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) Dùng dietyl ete để tráng bên cổ bình chiết chất béo Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình (xem Hình 1) cách nhẹ nhàng thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để gạn dung môi triệt để tốt (xem Hình 2) CHÚ THÍCH: Đối với sản phẩm sản phẩm hồn ngun có hàm lượng chất béo nhỏ 0,5 % khối lượng, bỏ qua lần chiết thứ ba 9.4.14 Loại bỏ dung mơi (kể etanol) khỏi bình thu nhận chất béo triệt để tốt cách chưng cất sử dụng bình đun sơi bình nón, cách làm bay sử dụng cốc có mỏ đĩa (xem 6.3) Tráng bên cổ bình đun sơi bình nón dung môi hỗn hợp (5.6) trước bắt đầu chưng cất 9.4.15 Đun nóng bình thu nhận chất béo tủ sấy (6.4) trì nhiệt độ 102 0C thời gian h, bình nón bình đun sơi đặt chúng nằm nghiêng để dung mơi Lấy bình thu nhận chất béo khỏi tủ sấy kiểm tra xem chất béo hay chưa Nếu chất béo không chứa tạp chất béo phải lặp lại tồn quy trình Nếu chất béo bảo vệ bình thu nhận chất béo khỏi bụi để nguội bình (khơng để bình hút ẩm) đến nhiệt độ phòng cân (đối với bình thủy tinh h đĩa kim loại 30 min) Khơng lau bình thu nhận chất béo trước cân Dùng kẹp (6.13) để đặt bình lên cân Cân bình thu nhận chất béo, xác đến 1,0 mg 9.4.16 Đun nóng bình thu nhận chất béo thêm 30 tủ sấy (6.4) trì nhiệt độ 1020C, bình nón bình đun sơi đặt chúng nằm nghiêng để dung mơi Để nguội cân lại theo 9.4.15 Nếu cần, lặp lại quy trình đun nóng cân chênh lệch khối lượng bình thu nhận chất béo hai lần cân liên tiếp nhỏ 1,0 mg Ghi lại giá trị nhỏ nhất, giá trị coi khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết 10 Tính biểu thị kết 10.1 Tính kết Tính hàm lượng chất béo mẫu thử, wf, biểu thị phần trăm khối lượng, theo Công thức (1): wf = X 100 Trong đó: m0 khối lượng phần mẫu thử (9.1), tính gam (g); m1 khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết được, xác định 9.4.16, tính gam (g); m2 khối lượng bình thu nhận chất béo chuẩn bị (9.3), tính gam (g); m3 khối lượng bình thu nhận chất béo sử dụng phép thử trắng (9.2) chất chiết xác định 9.4.16, tính gam (g); m4 khối lượng bình thu nhận chất béo (9.3) sử dụng phép thử trắng (9.2), tính gam (g) 10.2 Biểu thị kết Làm tròn kết đến hai chữ số thập phân 11 Độ chụm 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Các chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm phù hợp với ISO 5725:1986 1) (xem Tài liệu tham khảo [2]) độ chụm phương pháp đề cập Tài liệu tham khảo [3] Các giá trị độ lặp lại độ tái lập biểu thị theo mức xác suất 95% khơng thể áp dụng cho dải nồng độ chất khác với dải nồng độ chất nêu 11.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm riêng rẽ độc lập, thu sử dụng phương pháp, vật liệu thử giống hệt nhau, người phân tích, sử dụng thiết bị, khoảng thời gian ngắn, không 5% trường hợp lớn phần khối lượng chất béo sau đây: a) 0,03 % kem lạnh thực phẩm chứa sữa kem lạnh hỗn hợp; b) 0,05 % kem lạnh hỗn hợp dạng cô đặc; c) 0,20 % kem lạnh hỗn hợp dạng bột 11.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm riêng rẽ độc lập, thu tiến hành thử vật liệu thử giống hệt nhau, người phân tích khác thực hiện, sử dụng 1) ISO 5725:1986 (hiện bị hủy bỏ) sử dụng để thu số liệu độ chụm thiết bị khác phòng thử nghiệm khác nhau, khơng 5% trường hợp lớn phần khối lượng chất béo sau đây: a) 0,05% kem lạnh thực phẩm chứa sữa kem lạnh hỗn hợp; b) 0,10% kem lạnh hỗn hợp dạng cô đặc; c) 0,30% kem lạnh hỗn hợp dạng bột 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm thông tin sau: a) thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) tất thao tác chi tiết không quy định tiêu chuẩn xem tùy chọn, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết quả; e) việc hiệu chính, giá trị thu phép thử trắng phương pháp lớn 2,5 mg; f) kết thử nghiệm thu kiểm độ lặp lại ghi kết cuối thu Phụ lục A (Tham khảo) Một số ý cách tiến hành A.1 Phép thử trắng để kiểm tra thuốc thử (xem 9.2.2) Trong phép thử trắng này, bình thu nhận chất béo dùng để kiểm tra khối lượng sử dụng để đảm bảo thay đổi điều kiện mơi trường phòng cân ảnh hưởng nhiệt độ bình thu nhận chất béo khơng làm ảnh hưởng đến việc xem xét có mặt hay khơng có mặt chất khơng bay có phần chiết thuốc thử Bình dùng bình đối trọng trường hợp cân có hai đĩa cân Mặt khác, chênh lệch khối lượng biểu kiến (m - m4 công thức 10.1) bình kiểm chứng phải xem xét kiểm tra khối lượng bình thu nhận chất béo dùng phép thử trắng Do đó, thay đổi khối lượng biểu kiến bình thu nhận chất béo, điều chỉnh theo thay đổi khối lượng biểu kiến bình kiểm tra, khơng tăng q 1,0 mg Rất dung mơi có chứa chất dễ bay bị giữ lại nhiều chất béo Nếu thấy có mặt chất thế, cần tiến hành phép thử trắng tất thuốc thử dung mơi sử dụng bình thu nhận chất béo với khoảng g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung môi với có mặt g butterfat 100 ml dung môi Chỉ dùng dung môi khoảng thời gian ngắn sau chưng cất lại A.2 Phép thử trắng tiến hành đồng thời với phép xác định (xem 9.2.1) Giá trị thu phép thử mẫu trắng tiến hành đồng thời với phép xác định, cho khối lượng biểu kiến chất chiết từ phần mẫu thử (m - m2) hiệu theo có mặt chất khơng bay chiết từ thuốc thử thay đổi điều kiện mơi trường phòng cân chênh lệch nhiệt độ bình thu nhận chất béo phòng cân hai lần cân (9.4.15 9.3) Trong điều kiện thích hợp (phép thử trắng thuốc thử cho giá trị thấp, nhiệt độ phòng cân khơng thay đổi, thời gian làm nguội bình thu nhận chất béo thích hợp) giá trị thường nhỏ 1,0 mg sau bỏ qua phần tính kết phép xác định thông thường Cũng thường gặp giá trị lớn đến 2,5 mg (dương âm) Sau hiệu giá trị này, kết Khi phải hiệu giá trị lớn 2,5 mg phải đề cập báo cáo thử nghiệm (Điều 12) Nếu giá trị thu phép thử trắng thường lớn 1,0 mg cần kiểm tra thuốc thử trước chưa kiểm tra Thuốc thử có lẫn tạp chất có vết cần phải thay làm lại (xem 9.2.2 A.1) A.3 Phép thử peroxit Để thử peroxit, cho ml dung dịch kali iodua 100 g/l chuẩn bị vào 10 ml dietyl ete (5.4) đựng ống đong nhỏ có nắp thủy tinh tráng ete Lắc ống đong để yên Lớp dietyl ete khơng có màu vàng Có thể sử dụng phương pháp thử nghiệm thích hợp khác peroxit Để đảm bảo cho dietyl ete khơng chứa peroxit, xử lý ete ba ngày trước sử dụng sau: Cắt kẽm thành dải để chúng chạm đến nửa chai đựng ete, dùng khoảng 8000 mm2 kẽm cho lít dietyl ete Trước sử dụng, nhúng toàn dải kẽm dung dịch chứa 10 g đồng (II) sulfat ngậm năm phân tử nước (CuSO4.5H2O) ml axit sulfuric đậm đặc (98 % khối lượng) lít Rửa kỹ dải kẽm nhẹ nhàng nước, đặt dải mạ đồng ẩm vào chai đựng dietyl ete để chúng vào chai Có thể dùng phương pháp khác với điều kiện không làm ảnh hưởng đến kết xác định A.4 Dietyl ete có chứa chất chống oxi hóa Dietyl ete có chứa khoảng mg chất chống oxi hóa kilogam có bán sẵn số quốc gia, đặc biệt dùng để xác định chất béo Hàm lượng không dùng để đối chứng Tại số quốc gia có bán sẵn dietyl ete chứa hàm lượng chất chống oxi hóa cao hơn, ví dụ: đến mg/kg Những loại nên sử dụng phép xác định thông thường phải tiến hành phép thử trắng đồng thời với phép xác định, để hiệu sai số hệ thống dư lượng chất chống oxi hóa gây Phải chưng cất loại dietyl ete trước dùng để đối chứng A.5 Etanol Có thể sử dụng etanol biến tính cách thêm metanol, với điều kiện etanol khơng làm ảnh hưởng đến kết xác định Phụ lục B (Tham khảo) Quy trình thay dùng ống chiết chất béo có si phơng có nối với chai rửa B.1 Yêu cầu chung Nếu sử dụng ống chiết chất béo có si phơng có nối với chai rửa sử dụng quy trình quy định phụ lục Các ống phải có nắp đậy nút bần chất lượng tốt quy định bình chiết 6.6 (xem Hình B.1 ví dụ) B.2 Cách tiến hành B.2.1 Chuẩn bị mẫu thử Xem Điều B.2.2 Phần mẫu thử Tiến hành theo 9.1 dùng ống chiết chất béo (xem Chú thích 6.6 Hình B.1) Phần mẫu thử phải chuyển vào đáy ống chiết chất béo triệt để tốt B.2.3 Phép thử trắng Xem 9.2 A.2 B.2.4 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Xem 9.3 B.2.5 Phép xác định B.2.5.1 Tiến hành xác định Thêm ml, ml 10 ml nước làm nóng nhiệt độ 65 0C vào phần mẫu thử đựng ống chiết chất béo (B.2.2) để thu tổng thể tích từ 10 ml đến 11 ml Dùng nước để rửa phần mẫu thử vào bầu nhỏ ống chiết chất béo Trộn kỹ phần mẫu thử bầu nhỏ Làm nguội phần mẫu thử, trừ phần mẫu thử kem lạnh hỗn hợp dạng bột, đến nhiệt độ phòng dòng nước chảy B.2.5.2 Thêm 2ml dung dịch amoniac (5.1) thể tích tương đương dung dịch amoniac đậm đặc (xem Chú thích 5.1) vào phần mẫu thử đựng ống chiết chất béo (B.2.5.1) Trộn kỹ với phần mẫu thử xử lý trước đáy ống chiết chất béo a) có gắn ống si phơng b) có gắn bình rửa CHÚ DẪN a Dung tích tháo khớp nối 105 ml b Độ dày thành 1,5 mm ml 0,5 mm Hình B.1 - Các ví dụ ống chiết chất béo B.2.5.3 Đun nóng ống chiết chất béo chứa phần mẫu thử kem lạnh hỗn hợp dạng bột nồi cách thủy (6.5) trì nhiệt độ 650C thời gian từ 15 đến 20 min, lắc Làm nguội ống đến nhiệt độ phòng dòng nước chảy B.2.5.4 Thêm 10 ml etanol (5.2) Trộn kỹ cách nhẹ nhàng đáy ống chiết chất béo Nếu cần, thêm giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) B.2.5.5 Thêm 25 ml dietyl ete (5.4) Đậy nắp ống chiết chất béo nút bần bão hòa nước đậy nắp làm vật liệu khác làm ẩm nước (6.6) Lắc mạnh ống chiết cách đảo chiều min, không mạnh để tránh tạo nhũ Nếu cần, làm mát ống dòng nước chảy Mở nắp ống chiết cách cẩn thận, tráng nắp cổ ống chiết dung mơi hỗn hợp (5.6) Sử dụng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào ống B.2.5.6 Thêm 25 ml dầu nhẹ (5.5), đậy ống chiết chất béo nút bần nắp đậy làm ẩm lại (ngâm nước) Lắc nhẹ ống 30 s theo B.2.5.5 B.2.5.7 Li tâm ống chiết chất béo đậy kín máy li tâm (6.2) thời gian từ đến gia tốc quay từ 80g đến 90g Nếu khơng có máy li tâm để n ống giá đỡ (6.7) 30 thấy có lớp lên bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp dịch lỏng Nếu cần, làm nguội ống dòng nước chảy đến nhiệt độ phòng B.2.5.8 Cẩn thận tháo nắp ống chiết, tráng nắp cổ ống chiết chất béo dung mơi hỗn hợp (5.6) Sử dụng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào ống B.2.5.9 Lắp khớp nối si phông nối với chai rửa vào ống chiết chất béo Đẩy ống nối bên đến khoảng mm cao mặt tiếp xúc lớp Ống nối phía bên phải song song với trục ống chiết chất béo Cẩn thận gạn lớp bề mặt ống chiết chất béo vào bình thu nhận chất béo (xem 9.3) có chứa vài hạt trợ sơi (6.10) trường hợp bình đun sơi bình nón (đối với đĩa kim loại tùy chọn) Tránh khơng để lớp dịch lỏng lẫn vào Tráng phía ngồi khớp nối dung mơi hỗn hợp, thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo CHÚ THÍCH: Lớp phía chuyển khỏi ống chiết chất béo, ví dụ cách dùng bầu cao su nối với thân ngắn để tạo áp lực B.2.5.10 Tháo khớp nối khỏi cổ ống chiết chất béo Nâng nhẹ ống nối tráng phần thấp ống nối bên dung mơi hỗn hợp (5.6) Hạ thấp lắp lại ống nối chuyển nước rửa vào bình thu nhận chất béo Tráng rửa lại khớp nối dung mơi hỗn hợp, cho nước rửa vào bình thu nhận chất béo Tốt loại bỏ dung mơi phần dung mơi khỏi bình thu nhận chất béo cách chưng cất làm bay nêu 9.4.14 B.2.5.11 Tháo khớp nối khỏi cổ ống Nâng nhẹ ống nối thêm ml etanol vào lượng chứa ống chiết chất béo Dùng etanol để tráng thành khớp nối Trộn theo B.2.5.4 B.2.5.12 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác theo quy định B.2.5.5 đến B.2.5.11 Dùng 15 ml dietyl ete (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) thay 25 ml Dùng dietyl ete để tráng thành khớp nối trình tháo khớp nối khỏi ống chiết chất béo sau lần chiết đầu B.2.5.13 Thực chiết lần ba, không thêm etanol, cách lặp lại thao tác theo quy B.2.5.5 đến B.2.5.11 Tương tự, dùng 15 ml dietyl ete 15 ml dầu nhẹ Dùng dietyl ete để tráng thành khớp nối theo B.2.5.11 CHÚ THÍCH: Đối với sản phẩm sản phẩm hồn ngun có hàm lượng chất béo nhỏ 0,5% khối lượng, bỏ qua lần chiết thứ ba B.2.5.14 Tiến hành theo quy định 9.4.14 đến 9.4.16 THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa - Hướng dẫn lấy mẫu [2] ISO 5725:1986, Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests [3] TCVN 6688-2 (ISO 8262-2), Sản phẩm sữa thực phẩm từ sữa - Xác định hàm lượng chất béo phương pháp khối lượng Weibull-Berntrop (Phương pháp chuẩn) - Phần 2: Kem lạnh kem hỗn hợp [4] International Dairy Federation Interlaboratory Collaborative Studies, Second series, Bull.Int Dairy Fed 1988 (235) ... method by inter-laboratory tests [3] TCVN 668 8-2 (ISO 826 2-2 ), Sản phẩm sữa thực phẩm từ sữa - Xác định hàm lượng chất béo phương pháp khối lượng Weibull-Berntrop (Phương pháp chuẩn) - Phần 2: Kem... định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 6400 (ISO 707) [1] Bảo quản mẫu phòng thử nghiệm nhiệt độ khơng lớn - 18 0C từ lấy mẫu tiến hành thử nghiệm, ngoại trừ mẫu kem lạnh hỗn hợp dạng bột Chuẩn. .. 9.4.14 đến 9.4.16 THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa - Hướng dẫn lấy mẫu [2] ISO 5725:1986, Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility