Nghiên cứu thực nghiệm được thực hiện để khảo sát tác dụng hướng nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) và tác dụng tăng lực của viên Kim sư, một chế phẩm kết hợp các dược liệu (Dâm dương hoắc, Cửu thái tử, Đinh lăng và Bạch quả) theo hướng hỗ trợ hạn chế quá trình mãn dục nam, giảm lão hoá, duy trì chất lượng sống cho nam giới.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH, TÁC DỤNG KIỂU NỘI TIẾT TỐ SINH DỤC NAM VÀ TÁC DỤNG TĂNG LỰC CỦA VIÊN KIM SƯ (CHẾ PHẨM PHỐI HỢP DÂM DƯƠNG HOẮC, CỬU THÁI TỬ, ĐINH LĂNG VÀ BẠCH QUẢ) TRÊN THỰC NGHIỆM Trần Mỹ Tiên*, Nguyễn Thị Thu Hương* TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu: Sau lứa tuổi 40, nam giới có nguy đối diện hội chứng mãn dục nam (PADAM) với triệu chứng sa sút khả tình dục sức khỏe tồn thân Y học cổ truyền có phương thuốc, thuốc dành cho nam giới Minh Mạng thang, Ama Công dược liệu Dâm dương hoắc, Bách bệnh, Ba kích….Nghiên cứu thực nghiệm thực để khảo sát tác dụng hướng nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) tác dụng tăng lực viên Kim sư, chế phẩm kết hợp dược liệu (Dâm dương hoắc, Cửu thái tử, Đinh lăng Bạch quả) theo hướng hỗ trợ hạn chế trình mãn dục nam, giảm lão hố, trì chất lượng sống cho nam giới Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu thực nghiệm có so sánh, lựa chọn ngẫu nhiên, thực Trung tâm Sâm Dược liệu Tp HCM, từ tháng 3/2011 đến tháng 10/2011 gồm: Khảo sát độc tính cấp độc tính bán trường diễn, khảo sát tác dụng hướng nội tiết tố sinh dục nam đối tượng chuột nhắt trắng đực bình thường chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục, khảo sát tác dụng tăng lực nghiệm pháp chuột bơi kiệt sức Brekhman Đối tượng nghiên cứu: Chuột nhắt trắng đực, chủng Swiss albino, - tuần tuổi, trọng lượng 25 ± g, cung cấp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế Nha Trang Chuột bị gây giảm sinh dục cách cắt bỏ hai tinh hoàn để nghỉ hai tuần trước thử nghiệm Chỉ tiêu đánh giá: Các thông số huyết học (số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hemoglobin, hematocrit), sinh hóa gan-thận (men ALT, AST, triglycerid, protein, creatinin, urea), khảo sát đại thể tim, gan, thận chuột, nồng độ testosteron huyết tương, trọng lượng tinh hoàn, túi tinh - tuyến tiền liệt nâng hậu môn, thời gian bơi thể trọng chuột thử nghiệm chuột bơi Kết quả: Viên Kim sư liều uống chuột thử nghiệm gấp hai lần liều sử dụng hàng ngày người khơng có biểu bất thường độc tính bán trường diễn sau thời gian uống liên tục hàng ngày hai tháng Viên Kim sư liều uống tương đương liều sử dụng hàng ngày người sau 14 đến 30 ngày có gia tăng thể trọng, có tác dụng tăng lực-hồi phục sức thể tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam địa bình thường làm tăng hàm lượng testosteron huyết tương, làm tăng trọng lượng tinh hoàn, làm tăng trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt làm tăng hoạt tính đồng hóa protein Đặc biệt tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam viên Kim sư thể điển hình địa bị giảm sinh dục tác dụng phục hồi 50% suy giảm hàm lượng testosteron huyết tương làm tăng trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt Tuy nhiên viên Kim sư chưa thể tác dụng làm tăng hoạt tính đồng hóa protein địa bị giảm sinh dục Kết luận: Kết tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam viên Kim sư gợi ý triển vọng ứng dụng viên Kim sư liệu pháp thay bổ sung trường hợp sản sinh androgen nội sinh mức sinh lý bình thường ∗ Trung Tâm Sâm Dược liệu Tp Hồ Chí Minh-Viện Dược liệu Tác giả liên lạc: PGS.TS Nguyễn Thị Thu Hương ĐT:38292646 Email: huongsam@hotmail.com 114 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Từ khóa: Viên Kim sư, độc tính cấp bán trường diễn, tác dụng androgen, tác dụng tăng lực-hồi phục sức ABSTRACT STUDY ON TOXICITY, ANDROGENIC-LIKE EFFECT AND INVIGORATION EFFECT OF “KIM SU” CAPSULE COMBINED FROM HERBA EPIMEDII, ALLIUM TUBEROSUM, POLYSCIAS FRUTICOSA AND GINKGO BILOBA Tran My Tien, Nguyen Thi Thu Huong * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No – 2014: 114 - 122 Aims: The term “male menopause”, or andropause, prefers to “partial androgen deficiency of the ageing male” (PADAM) Production of testosterone (the principal male-determining sex steroid) falls gradually and progressively from the 40s onwards The symptoms of PADAM are composed of decreased interest in or desire for sex, diminished muscle mass and muscle strength, decreased vigor and physical energy, etc Traditional medicine has used many ethnic formula such as “Minh Mang remedy”, “Ama Kong remedy” or medicinal plants (Herba Epimedii, Radix Morindae, Eurycoma longifolia) The experimental study was carried out to evaluate the safety and efficacy of “Kim su” capsule, an herbal drug for the combined treatment of PADAM symptoms Study design and setting: Comparative experimental study was performed at The Research Center of Ginseng and Medicinal Materials, Ho Chi Minh City, from March- 2011 to October– 2011 Acute oral toxicity and subchronic oral toxicity tests were performed to evaluate the safety of this herbal drug Androgenic activity was studied on non-castrated and castrated mice Invigoration effect was evaluated by Brekhman’s mouse swimming test Subjects: - weeks old Swiss albino male mice, weighing 25 ± g, were purchased from Institute of Vaccines and Biomedicines, Nha Trang City Mouse testicles were removed to get androgen deficiency model and mice were let recovery for weeks before testing Observed parameters: Hematological parameters (red blood cells, white blood cells, platelets, hematocrit, hemoglobin), blood biochemistry parameters (transaminase AST, ALT, triglyceride, protein, creatinin, urea) and pathological examination were recorded for safety evaluation Plasma testosterone levels, body weight, the wet weights of internal genital organs (seminal vesicles, prostate glands, testicles, levator ani muscle), and swimming time were recorded for efficacy evaluation Results: “Kim su” capsule did not show signs of acute toxicity in mice and not induce any abnormal changes in observed parameters of subchronic oral toxicity test at the oral dose of capsules/kg mouse body weight (twice in daily human dose, calculated according to the conversion index) “Kim su” capsule at the doses of - capsules/kg mouse body weight (oral treatment for 14 - 30 days) showed androgenic and anabolic effects on both non-castrated and castrated mice “Kim su” capsule increased plasma testosterone levels and the weights of internal genital organs “Kim su” capsule increased mouse swimming time and mouse body weight in swimming test Conclusion: “Kim su” capsule is safe for long-term administration “Kim su” capsule might be useful to replace testosterone in treatment of PADAM symptoms Keywords: “Kim su” capsule, acute oral toxicity and subchronic oral toxicity, androgenic effect, anabolic effect, invigoration effects Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền 115 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 ĐẶT VẤN ĐỀ Testosteron đánh giá nội tiết tố quan trọng nam giới, chìa khóa cho người đàn ơng có sức khỏe dẻo dai, cường tráng, đời sống tình dục sung mãn tràn đầy hạnh phúc Theo quy luật lão hóa tự nhiên, sau tuổi 30, hoạt động tinh hoàn suy giảm 2% năm, dẫn đến suy giảm nồng độ testosteron máu Sau lứa tuổi 40, nam giới có nguy đối diện hội chứng mãn dục nam (PADAM) với triệu chứng sa sút khả tình dục sức khỏe toàn thân Sự suy giảm testosteron ảnh hưởng tới chuyển hóa lipid, qua trung gian chuyển hóa tác động tới hệ thống mạch máu, làm tăng nguy xơ vữa động mạch, mỡ máu cao, nhồi máu tim, rối loạn nhịp tim, tăng huyết áp, thiếu máu não Y học cổ truyền có phương thuốc, thuốc dành cho nam giới Minh Mạng thang, Ama Công dược liệu Dâm dương hoắc, Bách bệnh, Nhục thung dung, Ba kích, Lộc nhung, Nhân sâm, Kỷ tử…Việc sử dụng sản phẩm có nguồn gốc thiên nhiên, bào chế từ dược liệu, có tác dụng kích thích thể tổng hợp testosteron nội sinh, làm chậm trình mãn dục nam giới xu hướng phổ biến Viên Kim sư, chế phẩm kết hợp dược liệu gồm Dâm dương hoắc (50%), Cửu thái tử (20%), Đinh lăng (20%) Bạch (20%) khảo sát tác dụng hướng nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) tác dụng tăng lực chuột nhắt trắng nhằm chứng minh tác dụng chế phẩm việc hỗ trợ hạn chế trình mãn dục nam, giảm lão hố, trì chất lượng sống cho nam giới PHƯƠNG TIỆN- PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Phương tiện nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Viên Kim sư cung cấp Cơng ty TNHH Giai Cảnh, đóng gói hộp 60 viên nang, lô sản xuất: 18/2011, ngày sản xuất 116 13/04/2011 hạn dùng 03/2014 Thành phần viên: 420 mg cao khơ gồm gồm Dâm dương hoắc (50%), Cửu thái tử (20%), Đinh lăng (20%), Bạch (20%) tá dược vừa đủ 500 mg Viên nang tháo bỏ vỏ nang, cân trọng lượng bột viên 10 viên xác định khối lượng trung bình 01 viên 500 mg Động vật thử nghiệm Chuột nhắt trắng đực (chủng Swiss albino, 5-6 tuần tuổi, trọng lượng trung bình 25 g ± g) cung cấp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế Nha Trang, nuôi điều kiện ổn định chế độ dinh dưỡng Chuột bị gây giảm sinh dục cách cắt bỏ hai tinh hoàn để nghỉ hai tuần trước thử nghiệm Hóa chất: Các kit định lượng sinh hóa định lượng testosterone (hãng Human Co., Germany), dầu oliu Thuốc đối chiếu: Viên Testocaps (Organon Co.) chứa testosterone undecanoat 40 mg/viên Thiết bị: Máy phân tích sinh hóa bán tự động Screen Master 3000, máy đọc máy rửa ELISA số dụng cụ thí nghiệm Phương pháp Chọn liều thử nghiệm(7) Được tính tốn dựa liều dự kiến sử dụng người ngày uống - lần, lần uống viên, trung bình viên cho 60 kg thể trọng/ngày (tính theo thể trọng trung bình nam giới) Các bước quy đổi liều dự kiến thử chuột nhắt trắng sau: - Liều bột viên tính theo kg thể trọng: 510 mg x viên / 60 kg = 42,5 mg /kg thể trọng - Liều có hiệu tương đương chuột nhắt trắng: 42,5 mg/kg x 11,76 (*hệ số ngoại suy quy đổi từ liều người sang chuột nhắt trắng) = 499,8 mg/kg Chúng chọn liều 510 mg/kg, tương đương với viên/kg (liều thử 1) liều viên/kg (liều thử 2) Thử nghiệm độc tính cấp (3, 7) Trước tiến hành thí nghiệm 14 giờ, không cho chuột ăn, uống nước tự Chia Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 chuột nhắt làm lô, lô 10 chuột Dùng kim đầu tù chuột uống Mỗi chuột uống 0, ml/10g thể trọng với nồng độ thuốc thử nghiệm khác Theo dõi tỉ lệ chuột chết 72 sau uống thuốc Xác định liều thấp có tác dụng mà không làm chết chuột liều làm chết 100% chuột Tính LD50 theo cơng thức Karber - Behrens Trường hợp tất liều thử khơng có vật chết, liều lớn thử ký hiệu Dmax Thử nghiệm độc tính bán trường diễn (1, 7) Chia ngẫu nhiên chuột nhắt trắng thành lơ, lơ 12 con: - Lơ bình thường: Uống nước cất, thể tích 0, ml/10g thể trọng - Lơ thử: Uống viên Kim sư, thể tích 0, ml/10g thể trọng liều viên/kg Thời gian dùng thuốc: 60 ngày liên tục Các tiêu theo dõi: Thể trọng (g), số lượng hồng cầu (triệu/mm3), số lượng bạch cầu (ngàn/mm3), hemoglobin (g/L), hematocrit (%), AST (U/L), ALT (U/L), ure, creatinin (mg/dL),triglycerid, protein, giải phẫu đại thể tim, gan, thận Phương pháp khảo sát tác dụng androge (5,6) Những thuốc có tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) xem liệu pháp thay điều kiện sản sinh androgen nội sinh mức sinh lý bình thường Chỉ tiêu để xác định hoạt tính androgen gia tăng hàm lượng testosteron huyết tương, tăng trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt tăng trọng lượng nâng hậu môn Việc nghiên cứu xác định hai địa: động vật bình thường động vật bị giảm sinh dục (cắt bỏ hai tinh hoàn) Chuột chia ngẫu nhiên thành lô (Mỗi lô từ 10 – 15 con) sau: Chuột bình thường: Gồm lơ chứng (Uống nước cất), lô thử (Uống viên Kim sư liều viên/kg), lô thử (Uống viên Kim sư liều Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Nghiên cứu Y học viên/kg) lô đối chiếu (Uống Testocaps liều mg/kg) Chuột gây giảm sinh dục: Gồm lô chứng (Uống nước cất), lô thử (Uống viên Kim sư liều viên/kg), lô thử (Uống viên Kim sư liều viên/kg) lô đối chiếu (Uống Testocaps liều mg/kg) Các lơ cho uống với thể tích cho uống 10 ml/kg thể trọng chuột, liên tục 15 ngày, uống lần vào buổi sáng Sau 15 ngày, xác định tiêu sau: Hàm lượng testosteron huyết tương (theo quy trình kit cung cấp hãng Human, Đức) Trọng lượng tinh hoàn, túi tinh - tuyến tiền liệt nâng hậu môn Phương pháp khảo sát tác dụng tăng lực Nghiệm pháp chuột bơi kiệt sức Brekhman (2) Chuột mang vào đuôi gia trọng 5% thể trọng, cho chuột bơi thùng nước có dung tích 20 lít, đường kính 30 cm; chiều cao cột nước 25 cm; nhiệt độ 29 ± 10C Chuột cho bơi lần 1, thời gian bơi tính từ chuột thả vào thùng nước, bơi đến chìm khỏi mặt nước 20 giây khơng trồi lên nữa, lúc vớt chuột lau khô (T0) Cho chuột nghỉ phút, chia ngẫu nhiên lơ thí nghiệm gồm lơ chứng (Uống nước cất), lô thử (Uống viên Kim sư liều viên/kg), lô thử (Uống viên Kim sư liều viên/kg) Một sau cho chuột uống viên Kim sư, ghi nhận thời gian bơi lần (T1) Chuột cho uống nước cất viên Kim sư liên tục (mỗi ngày vào định) đến ngày thứ ngày thứ 14, sau uống thuốc thử 60 phút, tiến hành cho chuột bơi lần ( T7 ngày) lần (T14 ngày) Nhận định kết quả: T1 / T0 (%) lô thử lớn T1 / T0 (%) lô chứng: viên Kim sư có tác động hồi phục sức 117 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học KẾT QUẢ T7 ngày / T0 (%) lô thử lớn T7 ngày / T0 (%) lô chứng: viên Kim sư có tác động tăng lực sau ngày Kết khảo sát độc tính cấp Theo dõi sau 72 thử nghiệm, liều tối đa cho uống viên Kim sư chuột nhắt trắng 16,3 g bột viên/kg thể trọng chuột (tương đương với 32 viên/kg thể trọng chuột) có phân suất tử vong 0% xác định LD50 Sau 14 ngày tiếp tục theo dõi không ghi nhận triệu chứng bất thường Cho thấy viên Kim sư cho chuột uống liều gấp 6,4 lần liều sử dụng người khơng có biểu độc tính cấp đường uống Từ liều Dmax = 32 viên/kg thể trọng chuột chọn liều viên/kg; viên/kg viên/kg thể trọng chuột để tiến hành khảo sát độc tính bán trường diễn tác dụng dược lý T14 ngày / T0 (%) lô thử lớn T14 ngày / T0 (%) lô chứng: viên Kim sư có tác động tăng lực sau 14 ngày Phương pháp xử lý thống kê số liệu thực nghiệm: số liệu thực nghiệm thể số trung bình (M) ± sai số chuẩn giá trị trung bình (SEM) Xử lý số liệu phần mềm MS Excel 2007, xử lý thống kê dựa vào phép kiểm One–Way ANOVA Student-Newman-Keuls test (phần mềm Jandel Scientific SigmaStat-98) Kết thử nghiệm đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% P < 0,05 so với lô chứng tương ứng Kết khảo sát độc tính bán trường diễn Bảng 1: Kết khảo sát độc tính bán trường diễn Viên Kim sư Chỉ tiêu khảo sát Trước thử nghiệm Sau tháng Sau tháng 5,10 ± 0,19 6,30 ± 0,20 6,29 ± 0,19 Chứng Hồng cầu (triệu tế bào/µl) Hemoglobin (g/dl) Hematocrit (%) Tiểu cầu (10 tế bào/µl) Bạch cầu(tế bào/µl) GOT(IU/l) GPT(IU/l) Protein toàn phần (g/l) Triglycerid (mg/dl) Creatinin (mg/dl) Urea (mg/dl) Viên Kim sư 5,17 ± 0,14 5,80 ± 0,22 Chứng 7,88 ± 0,78 12,13 ± 0,79 a 13,16 ± 0,61 a Viên Kim sư 7,40 ± 0,10 11,40 ± 0,70 a 14,30 ± 0,59 a Chứng 27,90 ± 0,76 31,90 ± 0,61 31,15 ± 1,11 Viên Kim sư 28,65 ± 0,67 28,95 ± 1,16 30,45 ± 1,11 Chứng 529,33 ± 46,02 640,11 ± 52,62 699,67 ± 66,51 Viên Kim sư 575,0 ± 43,29 644,5 ± 34,35 740,0 ± 58,07 Chứng 5050 ± 456,1 7000 ± 537,5 6700 ± 416,3 Viên Kim sư 5500 ± 258,2 6600 ± 355,9 6850 ± 365,5 Chứng 48,6 ± 5,2 41,2 ± 3,0 40,8 ± 3,4 Viên Kim sư 45,1 ± 0,9 44,8 ± 2,8 42,5 ± 2,9 50,3 ± 3,6 Chứng 45,9 ± 3,4 46,2 ± 9,1 Viên Kim sư 45,8 ± 1,6 53,8 ± 3,4 Chứng 4,94 ± 0,14 5,56 ± 0,08 a 5,71 ± 0,31 a Viên Kim sư 4,55 ± 0,16 6,35 ± 0,09 ab 5,42 ± 0,13 a Chứng 123,8 ± 16,7 88,7 ± 6,0 Viên Kim sư 106,9 ± 17,5 91,2 ± 6,4 116,8 ± 9,1 Chứng 0,50 ± 0,03 0,61 ± 0,03 0,59 ± 0,04 Viên Kim sư 0,50 ± 0,04 0,60 ± 0,02 0,61 ± 0,03 Chứng 52,46 ± 3,32 55,01 ± 2,99 56,80 ± 5,35 Viên Kim sư 51,34 ± 1,47 54,20 ± 1,56 52,20 ± 3,47 22,90 ± 0,31 31,0 ± 1,47 a 35,0 ± 1,36 a Chứng Thể trọng (g) 5,87 ± 0,24 Viên Kim sư 23,90 ± 0,23 54,2 ± 3,4 95,5 ± 6,6 31,40 ± 1,48 a 41,50 ± 1,32 ab b P < 0,05 so với trước thử nghiệm; : P < 0,05 so với lô chứng 118 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Sau hai tháng thử nghiệm, số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hemoglobin, men gan AST, ALT, triglycerid, ure, creatinin khơng có khác biệt đạt ý nghĩa thống kê lô uống viên Kim sư với lô chứng uống nước cất Giải phẫu đại thể tim, gan, thận lơ bình thường Riêng thể trọng hàm lượng protein huyết tương chuột sau hai tháng uống viên Kim sư tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng (Bảng 1) Như vậy, viên Kim sư liều uống viên/kg thể trọng chuột sau hai tháng khơng có biểu bất thường độc tính bán trường diễn So với lơ chứng uống nước cất, lơ uống viên Kim sư có gia tăng thể trọng hàm lượng protein Tác dụng androgen viên Kim sư Kết bảng cho thấy, chuột bình thường hàm lượng testosteron lô uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg lô thuốc đối chiếu Testocaps tăng so với lô chứng uống nước cất, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 14 ngày uống có tác dụng làm tăng hàm lượng testosteron địa bình thường Hàm lượng testosteron huyết tương lô chứng giảm sinh dục uống nước cất giảm so với lơ chứng bình thường, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Hàm lượng testosteron lô bị gây giảm sinh dục uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg hay lô thuốc đối chiếu Testocaps tăng so với lô chứng, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Hàm lượng testosteron lô uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg không khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với trị số lơ chứng bình thường, chứng tỏ viên Kim sư sau 14 ngày uống có tác dụng phục hồi suy giảm hàm lượng testosteron địa bị giảm sinh dục Kết bảng cho thấy, chuột bình thường hàm lượng testosteron lơ uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg sau 30 ngày không khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Nghiên cứu Y học chứng uống nước cất Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống tác dụng làm tăng hàm lượng testosteron địa bình thường Hàm lượng testosteron huyết tương lô chứng giảm sinh dục uống nước cất sau 30 ngày giảm so với lơ chứng bình thường, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Hàm lượng testosteron huyết tương lô chứng cắt tinh hoàn sau 30 ngày giảm mạnh (giảm 63%) so với thời điểm định lượng sau 14 ngày (giảm 40,6%, bảng 2) Bảng 2: Tác dụng viên Kim sư sau 14 ngày uống hàm lượng testosteron chuột đực bình thường chuột giảm sinh dục Hàm lượng Hàm lượng Liều testosteron testosteron chuột bình chuột giảm (viên/kg) thường (ng/ml) sinh dục (ng/ml) # Chứng 0,367 ± 0,019 0,218 ± 0,009 0,476 ± 0,037* 0,375 ± 0,028* Viên Kim sư 0,550 ± 0,043* 0,301 ± 0,033* # Testocaps mg/kg 1,575 ± 0,145* 1,008 ± 0,042* Lô thử nghiệm N = 10 *P < 0,05 so với chứng giảm sinh dục # P < 0,05 so với chứng bình thường Bảng 3: Tác dụng viên Kim sư sau 30 ngày uống hàm lượng testosteron chuột đực bình thường chuột giảm sinh dục Hàm lượng Hàm lượng Liều testosteron testosteron (viên/kg) chuột bình chuột giảm thường (ng/ml) sinh dục (ng/ml) # Chứng 0,425 ± 0,026 0,155 ± 0,009 0,510 ± 0,033 0,295 ± 0,020* Viên Kim sư 0,506 ± 0,055 0,287 ± 0,013* Lô thử nghiệm N = 10 *P < 0,05 so với chứng giảm sinh dục # P < 0,05 so với chứng bình thường Hàm lượng testosteron lô bị gây giảm sinh dục uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg sau 30 ngày tăng so với lô chứng, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Mức độ giảm hàm lượng testosteron lô giảm sinh dục uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg so với trị số lơ chứng bình thường 30% Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống có tác dụng phục hồi 119 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 suy giảm hàm lượng testosteron địa bị giảm sinh dục Kết bảng cho thấy, trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt chuột bình thường lơ uống thuốc đối chiếu Testocaps uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng uống nước cất Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống thể tác dụng androgen, làm tăng trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt địa bình thường Trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt lô chứng giảm sinh dục giảm 82,73% so với lơ chứng bình thường, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt lô bị gây giảm sinh dục uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg tăng so với lô chứng bị gây giảm sinh dục, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95%, chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống có tác dụng phục hồi giảm trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt địa bị giảm sinh dục Bảng 4: Tác dụng viên Kim sư sau 30 ngày uống trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt chuột đực bình thường chuột giảm sinh dục Trọng lượng túi Trọng lượng túi Lô thử Liều tinh-tuyến tiền liệt tinh-tuyến tiền nghiệm liệt chuột (viên/kg) chuột bình giảm sinh N = 10 thường (mg%) dục (mg%) # Chứng 188,2 ± 17,7 32,5 ± 2,0 276,4 ± 18,9* 78,1 ± 6,3* Viên Kim sư 268,4 ± 19,7* 74,4 ± 5,3* Testocaps mg/kg 370,1 ± 27,2* 150,4 ± 2,5* *P < 0,05 so với chứng giảm sinh dục # P < 0,05 so với chứng bình thường Kết bảng cho thấy, trọng lượng nâng hậu mơn chuột bình thường lô uống thuốc đối chiếu Testocaps uống viên Kim sư liều viên/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng uống nước cất Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống thể tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam theo hướng làm tăng hoạt tính đồng hóa địa bình thường Trọng lượng nâng hậu mơn lô chứng giảm sinh dục giảm 92% so với lơ 120 chứng bình thường, đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Lô giảm sinh dục uống thuốc đối chiếu Testocaps có trọng lượng nâng hậu môn tăng đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% so với lô chứng Trọng lượng nâng hậu môn lô bị gây giảm sinh dục uống viên Kim sư liều viên/kg viên/kg không khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng bị gây giảm sinh dục Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống tác dụng phục hồi giảm trọng lượng nâng hậu môn, chưa thể tác dụng làm tăng hoạt tính đồng hóa địa bị giảm sinh dục Kết bảng cho thấy, trọng lượng tinh hồn lơ uống thuốc đối chiếu Testocaps uống viên Kim sư liều 1-3 viên/kg sau 30 ngày tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng uống nước cất Kết chứng tỏ viên Kim sư sau 30 ngày uống thể tác dụng androgen, làm tăng trọng lượng tinh hoàn địa bình thường Bảng 5: Tác dụng viên Kim sư sau 30 ngày uống trọng lượng nâng hậu mơn chuột đực bình thường chuột giảm sinh dục Trọng lượng Trọng lượng Lô thử Liều nâng hậu môn nâng hậu môn nghiệm (viên/kg) chuột bình chuột giảm N = 10 thường (mg%) sinh dục (mg%) # Chứng - 331,2 ± 25,7 27,8 ± 2,1 Viên Kim sư 380,6 ± 29,7 30,5 ± 2,0 517,1 ± 49,0* 23,9 ± 2,4 488,5 ± 28,3* 168,8 ± 12,7* Testocaps mg/kg * P < 0,05 so với chứng giảm sinh dục # P < 0,05 so với chứng bình thường Bảng 6: Tác dụng viên Kim sư sau 30 ngày uống trọng lượng tinh hoàn chuột đực bình thường Lơ thử nghiệm N = 10 Chứng Viên Kim sư Testocaps Liều (viên/kg) mg/kg Trọng lượng tinh hoàn (mg%) 325,5 ± 18,8 431,0 ± 34,4* 437,1 ± 33,8* 486,4 ± 24,7* *P < 0,05 so với chứng Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Tác dụng tăng lực viên Kim sư Kết bảng cho thấy, tỷ lệ (%) thời gian bơi so với trước thử nghiệm lô uống viên Kim sư sau không khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Như viên Kim sư tác dụng tăng lực tức thời Tỷ lệ (%) thời gian bơi sau ngày so với trước thử nghiệm lô uống viên Kim sư liều viên/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng, Nghiên cứu Y học nhiên lô uống viên Kim sư liều viên/kg tỷ lệ (%) thời gian bơi sau ngày so với trước thử nghiệm có tăng chưa đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Tỷ lệ (%) thời gian bơi sau 14 ngày so với trước thử nghiệm lô uống viên Kim sư liều viên/kg liều viên/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Như viên Kim sư thể tác dụng tăng lực liều hay viên/kg Bảng 7: Tỷ lệ % thời gian bơi chuột sau (T60 ) sau 7, 14 ngày uống viên Kim sư so với thời gian bơi trước thử nghiệm (T0) Lô Chứng Viên Kim sư Liều (viên/kg) T60/T0 (%) T7 ngày/T0 (%) T14 ngày/T0 (%) 54,73 ± 6,01 68,21 ± 13,22 70,91 ± 13,75 99,25 ± 18,85 210,58 ± 38,16* 153,45 ± 23,47 142,31 ± 18,50 242,84 ± 31,58* 238,37 ± 49,63* * P < 0,05 so với lô chứng tương ứng Tác dụng viên Kim sư thể trọng Kết bảng cho thấy, thể trọng so với trước thử nghiệm lô chứng uống nước cất lô uống viên Kim sư liều viên/kg liều viên/kg sau 14 ngày tăng đạt ý nghĩa thống kê Tuy nhiên, thể trọng lô uống viên Kim sư liều viên/kg liều viên/kg khơng có khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Như viên Kim sư không ảnh hưởng thể trọng chuột bình thường sau 14 ngày uống Thể trọng so với trước thử nghiệm lô chứng uống nước cất lô uống viên Kim sư liều viên/kg liều viên/kg sau 30 ngày tăng đạt ý nghĩa thống kê Thể trọng lô uống viên Kim sư liều viên/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Như viên Kim sư có tác dụng làm tăng thể trọng chuột bình thường sau 30 ngày uống Bảng 8: Tác dụng viên Kim sư thể trọng chuột nhắt trắng đực bình thường Lơ thử nghiệm N = 10 Chứng Kim sư Liều (viên/kg) Thể trọng trước TN (g) Thể trọng Sau 14 ngày (g) Thể trọng Sau 30 ngày (g) 24,30 ± 0,75 35,25 ± 3,25 34,40 ± 2,48 25,29 ± 1,37 35,85 ± 1,38 36,08 ± 1,86 28,29 ± 2,23 35,92 ± 1,30 41,17 ± 1,72* *P < 0,05 so với lô chứng BÀN LUẬN Y học đại sử dụng liệu pháp hormon thay để điều trị hội chứng mãn dục nam suy giảm testosteron nam giới, nhiên liệu pháp có nhiều tác dụng phụ (4) Các thuốc, vị thuốc y học cổ truyền có ưu điểm an tồn, dược liệu lại có sẵn, vừa có tác dụng tăng cường sinh lực, vừa kích thích thể tiết testosteron cách tự nhiên, từ hạn chế q trình mãn dục nam, giảm lão hố, trì tuổi xuân nâng cao chất lượng sống cho nam giới Chế phẩm Kim sư sản phẩm bổ trợ Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền sức khỏe cho nam giới, bào chế dựa nguyên lý y học cổ truyền từ chủ vị dâm dương hoắc (chiếm 50%), kết hợp với Cửu thái tử, Đinh lăng Bạch Đây phối hợp hoàn hảo hiệu giúp tăng cường sức khỏe cho nam giới, Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế chứng nhận cho phép lưu hành toàn quốc Theo Y học cổ truyền, Dâm dương hoắc Cửu thái tử có tác dụng bổ thận tráng dương, khu phong trừ thấp, tăng cường chức sinh dục cho nam giới; đinh lăng có tác dụng tăng lực, giảm mệt mỏi, giúp ăn ngon ngủ tốt, bồi bổ 121 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 khí huyết Bạch có tác dụng hoạt huyết, tăng cường tuần hoàn máu lưu lượng máu đến quan; tăng trí nhớ khả tập trung Kết thực nghiệm cho thấy viên Kim sư an toàn qua khảo sát độc tính bán trường diễn sau hai tháng sử dụng tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) thể điển hình qua việc phục hồi giá trị bình thường suy giảm hàm lượng testosteron huyết tương giảm trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt địa bị giảm sinh dục Trên địa bình thường viên Kim sư thể tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam theo hướng làm tăng hoạt tính đồng hóa, có tác dụng tăng lực tăng thể trọng Những kết đề tài chứng minh mặt khoa học tác dụng dược liệu thực nghiệm phù hợp với quan điểm sử dụng theo y học cổ truyền, tác dụng Dâm dương hoắc Cửu thái tử tác dụng chủ lực viên Kim sư Những kết đề tài gợi ý triển vọng việc ứng dụng viên Kim Sư liệu pháp thay bổ sung điều kiện sản sinh androgen nội sinh (nội tiết tố sinh dục nam) mức sinh lý bình thường KẾT LUẬN Viên Kim sư an tồn qua khảo sát độc tính bán trường diễn sau hai tháng sử dụng liều uống tương đương liều sử dụng hàng ngày 122 người sau 14 đến 30 ngày có tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam, tác dụng tăng lực tăng thể trọng Tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam viên Kim sư thể điển hình địa bị giảm sinh dục Đề tài thực với tài trợ kinh phí cơng ty TNHH Giai Cảnh TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (1996) Quyết định 371/BYT-QĐ Bộ Y tế ngày 12/3/1996 việc ban hành "Quy chế đánh giá tính an toàn hiệu lực thuốc cổ truyền" Brekhman I.I Eleutherococcus senticosus (1976) The New medicinal herb of the Araliaceae Family, In: Proceeding II- International Pharmacological Meeting, Prague, pp 7, 97 – 102 Đỗ Trung Đàm (1996) Phương pháp xác xác định độc tính cấp thuốc NXB Y học Hà Nội, tr 7-12 Jerald Bain (2010) Testosterone and the aging male: To treat or not to treat? Maturitas 66, pp 16 - 22 Nguyen Thi Thu Huong, Tran My Tien, Tran Cong Luan, Nguyen Minh Duc (2009) Androgenic effect of AMA KONG’ remedy on castrated mice Journal of Medicinal Materials, 4(2), pp 108 - 114 Trần Mỹ Tiên, Hồ Việt Anh, Lê Minh Triết, Nguyễn Thị Thu Hương, Trần Công Luận (2008) Ứng dụng kỹ thuật ELISA định lượng testosteron nghiên cứu tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam gai chống (Tribulus terrestris L Zygophylaceae) Tạp chí Y học TP HCM, tập12, phụ số 4, tr 148 - 151 Viện Dược liệu – Bộ Y Tế (2006) Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ Dược thảo Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, tr 220 - 222, 355 - 367, 377 - 387 Ngày nhận báo: 28/09/2013 Ngày phản biện nhận xét báo: 06/10/2013, 15/10/2013 Ngày báo đăng: 02/01/2014 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền ... dụng liều uống tương đương liều sử dụng hàng ngày 122 người sau 14 đến 30 ngày có tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam, tác dụng tăng lực tăng thể trọng Tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam. .. tiền liệt địa bị giảm sinh dục Trên địa bình thường viên Kim sư thể tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam theo hướng làm tăng hoạt tính đồng hóa, có tác dụng tăng lực tăng thể trọng Những kết... vọng việc ứng dụng viên Kim Sư liệu pháp thay bổ sung điều kiện sản sinh androgen nội sinh (nội tiết tố sinh dục nam) mức sinh lý bình thường KẾT LUẬN Viên Kim sư an tồn qua khảo sát độc tính bán