Nhằm tiếp tục đóng góp vào công trình nghiên cứu tổng hợp các dẫn chất quang hoạt phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc (PDE4) và tác dụng kháng viêm mạnh, tác giả tiến hành tổng hợp các dẫn chất quang hoạt N-heptyl và N-benzyl của cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học TỔNG HỢP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC DẪN CHẤT QUANG HOẠT N-HEPTYL VÀ N-BENZYL CỦA CIS (+); CIS (−)-4-(3,4-DIMETHOXYPHENYL) HEXAHYDRO PHTHALAZINON CÓ TÁC DỤNG SINH HỌC Chương Ngọc Nãi*, Trương Ngọc Quỳnh Nhi**, Nguyễn Ngọc Vinh*, Nguyễn Đức Tuấn**, Đặng Văn Tịnh** TÓM TẮT Đặt vấn đề: Những năm gần đây, hoạt tính ức chế chọn lọc phosphodiesterase IV (PDE4) phát dẫn chất N-alkyl phthalazinon Bên cạnh đó, nhiều cơng trình nghiên cứu ngồi nước khảo sát thành cơng quy trình tổng hợp dẫn chất cis-N-alkyl phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc phosphodiesterase IV tác dụng kháng viêm mạnh Để tiếp tục cơng trình nghiên cứu, thực tổng hợp dẫn chất quang hoạt N-heptyl N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon, đồng thời thực phương pháp xác định cấu trúc sản phẩm sau tổng hợp Mục tiêu nghiên cứu: Nhằm tiếp tục đóng góp vào cơng trình nghiên cứu tổng hợp dẫn chất quang hoạt phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc (PDE4) tác dụng kháng viêm mạnh, tiến hành tổng hợp dẫn chất quang hoạt N-heptyl N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Tiến hành tổng hợp dẫn chất quang hoạt N-heptyl Nbenzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon Thực phương pháp xác định cấu trúc kiểm tra độ tinh khiết quang học sản phẩm tổng hợp Kết quả: Đã tổng hợp thành công dẫn chất N-heptyl N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon có tiềm sinh học Kết luận: Quy trình tách acid carboxylic dạng racemic sử dụng tác nhân bất đối xứng base tinh khiết mặt quang học (R)-(+) (S)-(−)-α-methylbenzylamin thu sản phẩm acid carboxylic có tính quang hoạt với độ tinh khiết quang học cao Từ đó, tiến hành tổng hợp xác định cấu trúc dẫn chất N-heptyl Nbenzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon Từ khóa: cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon, kháng viêm, ức chế phosphodiesterase ABSTRACT SYNTHESIS, STRUCTURE DETERMINATION OF NEW CHIRAL DERIVATIVES N-HEPTYL AND N-BENZYL CIS (+); CIS (−)-4-(3,4-DIMETHOXYPHENYL) HEXAHYDRO PHTHALAZINONE WITH POTENTIAL BIOLOGICAL ACTIVITIES Chuong Ngoc Nai, Truong Ngoc Quynh Nhi, Nguyen Ngoc Vinh, Nguyen Duc Tuan, Dang Van Tinh * Y Hoc TP Ho Chi Minh* Vol 15 - Supplement of No - 2011: 359 - 364 Introduction: In recent years, the selective phosphodiesterase IV (PDE4) inhibitory activity was found in the N-alkyl phthalazinone derivatives Besides, much research at home and abroad has been surveyed successfully *Viện Kiểm nghiệm thuốc TP Hồ Chí Minh **Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS TS Đặng Văn Tịnh ĐT: 0909382233 Email: vantinhdang62@yahoo.com.vn Chuyên Đề Dược Khoa 359 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học the process synthesis cis-N-alkyl phthalazinone derivatives with selective inhibitory effects on phosphodiesterase IV (PDE4) and strong anti-inflammatory activity To continue the research, the new chiral derivatives N-heptyl and N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinone were synthesized and determinated the structure Aims: To continue contributing to the research of the synthesis of new chiral phthalazinone derivatives with selective inhibitory effects on phosphodiesterase IV (PDE4) and strong anti-inflammatory activity, the new chiral derivatives N-heptyl and N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinone were synthesized Objects and Methods: Synthesize new chiral derivatives N-heptyl and N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinone Determine the structure and specifications of the synthesized products Results: Successfully synthesized the new chiral derivatives N-heptyl and N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinone with potential biological activities Conclusions: The optical resolution of racemic carboxylic acid gave chiral of carboxylic acids with high optical purity by using R)-(+) and (S)-(−)-α-methylbenzylamine, which are pure chiral bases Then the chiral derivatives N-heptyl and N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinone were synthesized and determinated the structure Keywords: cis(+); cis(-)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydro phthalazinon, anti-inflammatory activity, phosphodiesterase inhibitory ĐẶT VẤN ĐỀ Những năm gần đây, hoạt tính ức chế chọn ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU - PHƯƠNG PHÁP lọc phosphodiesterase IV (PDE4) điều trị Trang thiết bị, hóa chất, dung mơi bệnh viêm cấp tính mạn tính bệnh viêm Trang thiết bị Bếp khuấy từ gia nhiệt Ika C-Mag HS7, cân kỹ thuật EK-610i, cân phân tích Mettler Toledo AB 265-S (Thụy Sĩ), máy quay Büchi (Thụy Sĩ), máy đo góc quay cực Horiba SEPA-300 (Nhật Bản), máy đo điểm chảy Büchi B545 (Thụy Sĩ), máy quang phổ hồng ngoại FTIR Magna-IR 760 Spectrometer Nicolet (Mỹ), máy sắc ký lỏng hiệu cao Shimadzu LC 20A (Nhật Bản)máy sắc ký lỏng ghép khối phổ Agilent 6410 Triple Quad (Mỹ), máy cộng hưởng từ hạt nhân Bruker 500, cột sắc ký Gemini C18 (250 x 4,6 mm, µm) (Mỹ), cột Lux Cellulose-1, 250 x 4,6 mm, 5µm (Mỹ) khớp dạng thấp bệnh hen suyễn phát dẫn chất N-alkyl phthalazinon(5,6) Hiện nay, có nhiều cơng trình nghiên cứu nước khảo sát tổng hợp thành công dẫn chất cis-N-alkyl phthalazinon với tác dụng ức chế chọn lọc PDE4 tác dụng kháng viêm mạnh dẫn chất trans(2) Tuy nhiên đồng phân hữu tuyền có hoạt tính ức chế chọn lọc PDE4 mạnh đồng phân tả tuyền dạng racemic(1,3,4), để tiếp tục cơng trình nghiên cứu, thực tổng hợp dẫn chất quang hoạt N-heptyl N-benzyl dimethoxyphenyl) cis(+); hexahydro cis(-)-4-(3,4phthalazinon, đồng thời thực phương pháp xác định cấu trúc sản phẩm sau tổng hợp 360 Hóa chất, dung mơi Silica gel 60 (0,040-0,063 mm), mỏng silica gel 60 F254 tráng sẵn (Merk) 1,2dimethoxybenzen, nhôm clorid, (R)-(+) (S)-methylbenzylamin (Merck) Benzyk (−)bromid, cis-1,2-cyclohexan dicarboxylic Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 anhydrid (Aldrich); calci clorid, hydrazin monohydrat, natri bicarbonat, natri clorid, natri hydrid 60%, natri sulfat khan (Trung Quốc) dùng cho tổng hợp; acid hydroclorid (Merck) Cloroform, diethyl ether, ethanol tuyệt đối, ether dầu hỏa, ethyl acetat, isopropanol, methanol, n- hexan (J.T.Baker), N,N-dimethylformamid (Prolabo) dùng cho phân tích Phương pháp tổng hợp Quy trình tổng hợp thiết kế sau: R(+)-α-methylbenzylamin/ EtOH H H3CO O H H3CO H+ H3CO H3CO H3CO O Nghiên cứu Y học H AlCl3, CH2Cl2, 50-60 oC H CO O O 2a H COOH S(-)-α-methylbenzylamin/ EtOH O COOH O COOH H3CO + 2 H H3CO 2b Hình Sơ đồ tổng hợp acid cis-2-(3,4-dimethoxybenzoyl)cyclohexan carboxylic có tính quang hoạt H3CO H2N H3CO NH2 R-Br o EtOH, 130-140 C H3CO 2a O NaH, DMF H3CO COOH N 3a N H3CO H3CO N O 4a, 4b H N O R 4a: R-: n-C7H154b: R-: C6H5-CH2- Hình Sơ đồ tổng hợp dẫn chất cis(−) N-alkyl hexahydro phthalazinon H3CO H2N H3CO NH2 R-Br o EtOH, 130-140 C H3CO 2b O NaH, DMF H3CO COOH 3b N H3CO H3CO N N O H 4c, 4d N O R 4c: R-: n-C7H154d: R-: C6H5-CH2- Hình Sơ đồ tổng hợp dẫn chất cis(+) N-alkyl hexahydro phthalazinon Các giai đoạn thực - Tổng hợp nguyên liệu acid cis-2-(3,4dimethoxybenzoyl)cyclohexan carboxylic dạng racemic từ anhydrid cis-1,2-cyclohexan dicarboxylic 1,2-dimethoxybenzen - Đóng vòng acid carboxylic vừa tổng hợp với hydrazin tạo phthalazinon dạng racemic có tính kháng viêm - Thế alkyl vào vị trí N- phthalazinon với xúc tác natri hydrid tạo dẫn chất cis(+) cis(−) N-alkyl hexahydro phthalazinon có tính kháng viêm Trong thực nghiệm - Theo dõi phản ứng sắc ký lớp mỏng Sơ tối ưu hóa phản ứng có hiệu suất thấp - Từ acid carboxylic dạng racemic trên, tiến hành tách đồng phân quang học (R)-(+) (S)-(−)-α-methylbenzylamin - Tinh chế sản phẩm sắc ký cột (SKC) kết tinh lại - Đóng vòng đồng phân quang học riêng lẻ tạo phthalazinon có tính quang hoạt Chun Đề Dược Khoa - Xác định cấu trúc phổ IR, LC-MS H-NMR 361 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 - Kiểm tra độ tinh khiết sản phẩm nhiệt độ nóng chảy, sắc ký lớp mỏng, sắc ký lỏng - Kiểm tra độ tinh khiết quang học góc quay cực riêng sắc ký lỏng với pha tĩnh bất đối Điều kiện sắc ký: Cột Lux Cellulose-1, 250 x 4,6 mm, 5µm (Phenomenex); bước sóng phát hiện: 317 nm; pha động: triethylamin 0,2% /nhexan: triethylamin 0,2% /isopropanol (90:10); tốc độ dòng: 0,8 ml/phút; thể tích tiêm mẫu: 5µl; nhiệt độ cột: 30 oC KẾT QUẢ Racemic cis-2-(3,4-dimethoxybenzoyl) cyclohexan carboxylic acid (2) Cho từ từ nhôm chlorid (8,01 g, 0,06 mol), 1,2-dimethoxybenzen (8,28 g, 0,06 mol) khan Na2SO4 Cô quay dịch chiết loại dung môi Hiệu suất 39,33% (1,18 g) cis(+)-2-(3,4-dimethoxybenzoyl)cyclohexan carboxylic acid (2b) Cho acid carboxylic dạng racemic (2) (3g, 0,01 mol), ethanol tuyệt đối (30 ml), S(−)-αmethylbenzylamin (1,24 g, 0,01 mol) vào bình cầu, khuấy 15 phút Để yên 16 giờ, lọc thu tủa Rửa tủa với ethanol tuyệt đối lần, kết tinh lại ethanol nóng lần Acid hóa tủa HCl 10%, chiết dichloromethan Rửa dịch chiết HCl 10%, nước, NaCl bão hòa, làm khan Na2SO4 Cô quay dịch chiết loại dung môi Hiệu suất 41% (1,23 g) cis(−)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on (3a) anhydrid (9,24 g, 0,06 mol) vào bình cầu chứa Cho acid carboxylic có tính quang hoạt (2a) sẵn dichloromethan lạnh (200 ml) Đun hồi lưu (1,15 g, 3,94 mmol), hydrazin (3g, 0,06 mol) vào 8h nhiệt độ 55-65 OC Cho hỗn hợp sau phản bình cầu chứa sẵn ethanol tuyệt đối (25 ml) Đun ứng vào hỗn hợp nước-đá, acid hóa HCl hồi lưu 130-140 oC Cô quay hỗn 10% Chiết dichloromethan Rửa dịch chiết hợp sau phản ứng, thu tủa cho vào hỗn hợp HCl 10%, nước, NaCl bão hòa, làm khan nước-đá, chiết ethyl acetat Rửa dịch chiết Na2SO4 Cô quay loại dung môi, thu tủa nước cất, NaHCO3 10%, HCl 5%, NaCl bão Kết tinh lại tủa diethylether/n-hexan Tiến hòa, làm khan Na2SO4 Cơ quay, thu tủa hành SKC với hệ dung môi n-hexan: ethyl acetat kết tinh lại cồn nóng, SKC với hệ dung (5:1) thu sản phẩm tinh khiết dạng kết môi n-hexan: ethyl acetat (3:2) thu sản phẩm tinh tinh, màu trắng ngà Hiệu suất 47% (8,2 g) khiết dạng bột kết tinh trắng Hiệu suất 80,2% cis(−)-2-(3,4-dimethoxybenzoyl)cyclohexan carboxylic acid (2a) Cho acid carboxylic dạng racemic (2) (3g, 0,01 mol), ethanol tuyệt đối (30 ml), R(+)-αmethylbenzylamin (1,24 g, 0,01 mol) vào bình cầu, khuấy 15 phút Để yên 16 giờ, lọc thu tủa Rửa tủa với ethanol tuyệt đối lần, kết tinh lại ethanol nóng lần Acid hóa tủa HCl 10%, chiết dichloromethan Rửa dịch chiết HCl 10%, nước, NaCl bão hòa, làm 362 (910 mg) [α ]D : −387,44o (0,4%, CH3OH) m/z: 20 289,1 [M-H]+ cis(+)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on (3b) Thực phản ứng đóng vòng acid carboxylic có tính quang hoạt (2b) (1,15 g, 3,94 mmol) tương tự Sản phẩm tinh khiết thu có dạng bột kết tinh trắng Hiệu suất 81,34% (923 mg) [α ]D : +388,64o (0,4%, CH3OH) 20 m/z: 289,1 [M-H]+ Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học cis(−)-2-heptyl-4-(3,4-dimethoxyphenyl)4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on (4a ) cis(−)-2-benzyl-4-(3,4-dimethoxyphenyl)4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on (4b) Cho phthalazinon có tính quang hoạt (3a) Thực phản ứng benzyl hóa phthalazinon (3a) (300 mg, 1,04 mmol) tương tự với benzyl bromid (257 mg, 1,5 mmol) Sản phẩm tinh khiết thu có dạng bột kết tinh thô, màu vàng, mùi hắc Hiệu suất 78% (307 mg) Mp: 87-99 oC IR (KBr) 1668 cm-1 (C=O), 1574 cm-1 (nhân thơm) 1H NRM (500MHz, CDCl3) δ 1,281-1,800 (m, 7H, H5, H6, H7, H8), 2,563-2,581 (d, J = Hz, 1H, H8a), 2,72 (s, 1H, H8’), 3,051-3,095 (m, 1H, H4a), 3,876-3,894 (t, 6H, OCH3), 4,916-4,945 (d, J = 14,5 Hz, 1H, CH2), 5,130-5,159 (d, J = 14,5 Hz, 1H, CH2), 6,829-6,846 (t, 1H, H5-arom), 7,182-7,202 (m, 1H, H6-arom), 7,221-7,261 (m, 1H, H2-arom), 7,286-7,442 (m, (300 mg, 1,04 mmol) vào bình cầu chứa DMF (10 ml), khuấy Sau cho NaH (60% dầu khống trắng, 30 mg, 1,25 mmol) vào khuấy Tiếp tục thêm heptyl bromid (269 mg, 1,5 mmol) khuấy trong mơi trường khí trơ nhiệt độ phòng Cho hỗn hợp sau phản ứng vào nước cất lạnh, chiết ethyl acetat Rửa dịch chiết với nước cất, NaCl bão hòa, làm khan Na2SO4 Cơ quay thu tủa, tiến hành SKC với hệ dung môi ether dầu hỏa (60:90): ethyl acetat (10:1) thu sản phẩm tinh khiết có dạng bột mịn, màu trắng ngà, mùi hắc Hiệu suất 77,11% (310 mg) Mp: 95-99 oC IR (KBr) 1644 cm-1 (C=O), 1579 cm-1 (nhân thơm) m/z: 387,2 [M-H]+ [α ]D : −381,73 o (0,4%, CHCl3) 20 Độ tinh khiết quang học: 93,25 % ee cis(+)-2-heptyl-4-(3,4-dimethoxyphenyl)4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on (4c) Thực phản ứng heptyl hóa phthalazinon (3b) (300 mg, 1,04 mmol) tương tự Sản phẩm tinh khiết thu có dạng bột mịn, màu trắng ngà, mùi hắc Hiệu suất 85,58% (340 mg) Mp: 95-99 oC IR (KBr) 1644 cm-1 (C=O), 1579 cm-1 (nhân thơm) 1H NRM (500MHz, CDCl3) δ 0,8570,885 (t, 3H, CH3), 1,272-1,468 (m, 12 H, CH2), 1,161-2,572 (m, 7H, H5, H6, H7, H8), 3,040-3,084 (m, 1H, H8a), 3,703-3,758 (m, 1H, H8’), 3,916-3,941 (s, 6H, OCH3), 3,960-4,016 (m, 1H, H4a), 6,8586,875 (d, J = 8,5 Hz, 1H, H5-arom), 7,212-7,233 (dd, J = Hz, 10,5 Hz, 1H, H6-arom), 7,471-7,475 (d, J = Hz, 1H, H2-arom) m/z: 387,2 [M-H]+ [α ]D : 20 +381,40o (0,4%, CHCl3) Độ tinh khiết quang học: 88,43 % ee Chuyên Đề Dược Khoa 5H, CH) m/z: 379,1 [M-H]+ [α ]D : −307,98o (0,4%, 20 CHCl3) Độ tinh khiết quang học: 94,42 % ee cis(+)-2-benzyl-4-(3,4-dimethoxyphenyl)4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on (4d) Thực phản ứng benzyl hóa phthalazinon (3b) (300 mg, 1,04 mmol) tương tự Sản phẩm tinh khiết thu có dạng bột kết tinh thơ, màu vàng, mùi hắc Hiệu suất 75,24% (296 mg) Mp: 87-99 oC IR (KBr) 1668 cm1 (C=O), 1574 cm-1 (nhân thơm) m/z: 379,1 [MH]+ [α ]D : +303,23o (0,4%, CHCl3) Độ tinh khiết 20 quang học: 88,34 % ee KẾT LUẬN Trong nghiên cứu này, tổng hợp nguyên liệu sản phẩm trung gian tinh khiết để tổng hợp thành công dẫn chất N-heptyl N-benzyl cis(+); cis(-)-4-(3,4dimethoxyphenyl)hexahydro phthalazinon Đồng thời xác định cấu trúc sản phẩm tổng hợp dựa vào nhiệt độ nóng chảy, góc quay cực riêng, phổ IR, phổ MS, phổ 1H NRM Từ kết thu được, tiếp tục nghiên cứu tổng hợp hợp chất phthalazinon 363 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 tiến hành thử nghiệm khả kháng viêm in vivo dẫn chất tổng hợp TÀI LIỆU THAM KHẢO 364 Dang Van Tinh, Jin CK, Miyamoto M, Ikee Y, Masuda T, Sano S, Shiro M, and Nagao Y (2006), “Pratical synthesis of new chiral cis-phthalazinones with potential for high phosphodiesterase (PDE4) inhibitory activity”, Heterocycles, 68 (10), pp 2133-2144 Van der May M., Boss H., Hatzelmann A., Van der Laan I J., Sterk G J., Thibaut U and Timmerman H (2002), “Novel selective PDE4 inhibitor In vivo antiinflammatory activity of a new series of N-substituted cis-tetra- and cishexahydrophthalazinones”, J Med Chem, 45, pp 2520-2525 Van der May, Boss M H., Couwunberg D., Hatzelmann A., Sterk G J., Goubitz K., Schenk H., and Timmerman H (2002), J Med Chem, 45, pp 2626 Van der Mey M., Boss H., Couwenberg D., Hatzelmann A., Sterk G J., Goubitz K., Schenk H., and Timmerman H (2002), J Med Chem, 45, pp 2526-2533 Van der Mey M., Hatzelmann A., Van der Laan I.J., Sterk G.J., Thibaut U., and Timmerman H (2001), “Novel Selective PDE4 Inhibitors Synthesis, Structure- Activity Relationships, and Molecular Modeling of 4-(3,4dimethoxyphenyl)-2H-phthalazin-1-ones and Analogues”, J Med Chem, 44 (16), pp 2511-2522 Van der Mey M., Hatzelmann A., Van Klink G.P.M,Van der Laan I.J., Sterk G J., Thibaut U., Ulrich W.R., and Timmerman H (2001), “Novel Selective PDE4 Inhibitors Synthesis, Structure- Activity Relationships of 4-Aryl-Substituted cistetra- and cis-hexahydrophthalazinones”, J Med Chem, 44 (16), pp 2523-2535 Chuyên Đề Dược Khoa ... phát dẫn chất N-alkyl phthalazinon( 5,6) Hiện nay, có nhiều cơng trình nghiên cứu ngồi nước khảo sát tổng hợp thành công dẫn chất cis-N-alkyl phthalazinon với tác dụng ức chế chọn lọc PDE4 tác dụng. .. dẫn chất quang hoạt N-heptyl N-benzyl dimethoxyphenyl) cis(+); hexahydro cis(-)-4-(3, 4phthalazinon, đồng thời thực phương pháp xác định cấu trúc sản phẩm sau tổng hợp 360 Hóa chất, dung mơi Silica... tinh lại - Đóng vòng đồng phân quang học riêng lẻ tạo phthalazinon có tính quang hoạt Chun Đề Dược Khoa - Xác định cấu trúc phổ IR, LC-MS H-NMR 361 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15