Metronidazol là kháng sinh trong các phác đồ điều trị viêm loét dạ dày để diệt trừ vi khuẩn helicobacter pylori. Vi khuẩn này định vị chủ yếu ở niêm mạc dạ dày, đề tài nghiên cứu bào chế metronidazol dưới dạng viên nổi nhằm kéo dài thời gian thuốc lưu tại dạ dày để tăng hiệu quả điều trị.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN CHỨA METRONIDAZOL 250 mg NỔI TRONG DẠ DÀY Nguyễn Hoài Thanh Tâm*, Lê Thị Thu Vân*, Lê Hậu* TÓM TẮT Mục tiêu: Metronidazol kháng sinh phác đồ điều trị viêm loét dày để diệt trừ vi khuẩn Helicobacter pylori Vi khuẩn định vị chủ yếu niêm mạc dày, đề tài nghiên cứu bào chế metronidazol dạng viên nhằm kéo dài thời gian thuốc lưu dày để tăng hiệu điều trị Phương pháp nghiên cứu: Viên bào chế phương pháp xát hạt ướt, viên nhờ khí CO2 tạo từ NaHCO3 Các tá dược tạo khung bắt giữ khí nghiên cứu gồm gôm xanthan, HPMC K4M, HPMC K100M Thử nghiệm hòa tan thực mơi trường 500 ml HCl 0,1 N, thiết bị cánh khuấy, tốc độ 50 vòng/phút, nhiệt độ 37±0,5 0C Metronidazol dịch hòa tan định lượng phương pháp quang phổ tử ngoại Hiệu viên đánh giá thời gian HCl 0,1 N Hàm lượng metronidazol viên xác định phương pháp HPLC Kết quả: Đã thực bào chế 12 công thức với loại tỉ lệ polyme khác Gôm xanthan, HPMC K4M HPMC K100M dùng riêng phối hợp để làm chất tạo gel bắt giữ khí carbonic tạo chế cho viên Kết đánh giá độ hòa tan cho thấy HPMC cho viên có tiềm thời ngắn giải phóng hoạt chất nhanh viên dùng gôm xanthan, viên mơi trường thử hòa tan Qui trình định lượng metronidazol HPLC xây dựng thẩm định để định lượng metronidazol chế phẩm Kết luận: Đã nghiên cứu bào chế viên metronidazol Sản phẩm chứa HPMC K4M (15%) có tiềm thời 12 giây chứa HPMC K100M (10%) có tiềm thời 15 giây Sản phẩm công thức HCl 0,1N phóng thích 80% hoạt chất sau Từ khóa: Metronidazol, viên ABSTRACT PREPARATION OF GASTRORETENTIVE FLOATING TABLET CONTAINING METRONIDAZOLE 250 MG Nguyen Hoai Thanh Tam, Le Thi Thu Van, Le Hau * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No - 2014: 58 - 62 Objectives: Metronidazole is widely used for eradication Helicobacter pylori in duodenal and gastric ulcers This bacterium locates in mucous gastric Hence prolongation the gastric retention of dosage form may offer numerous advantages to improve bioavailability and therapeutic efficacy of the active ingredients Gastroretentive Floating Drug Delivery Systems (GRFDDS) can significantly prolong the gastric residence time of drugs for several hours The aim of this project is to formulate floating tablets with Metronidazole for Helicobacter pylori eradication Methods: Tablets were prepared by wet granulation process NaHCO3 was used as gas–generating excipient Xanthan gum, HPMC K4M and HPMC K100M were used to form matrix PVP in IPA (10%) was used as binder The blend was then compressed into tablets having average weight of 500 mg with 10 mm round * Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: DS Nguyễn Hồi Thanh Tâm - ĐT: 0917862349 - Email: thanhtam0317@gmail.com 58 Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học standard concave punches The punched tablets were of 40-60 N hardness Dissolution studies were performed in 500 ml of HCl 0,1N using the paddle method, at 50 rpm and 37 ºC The concentration of metronidazol was obtained by measuring its absorbance at 277 nm in a ultraviolet spectrophotometer HPLC was used to determine the amount of metronidazol in tablet Results: The development and validation of HPLC and ultraviolet spectrophotometer methods showed that they could be used to determine metronidazol Release rate of metronidazol in HPMC-based matrix was higher than that of xanthan gum-based matrix Lag time of HPMC-based tablet was shorter than that of xanthan gumbased tablet Combination of xanthan gum and HPMC did not improve drug release The evaluation of 13 formulations with above mentioned polymers showed that tablet containing either HPMC K4M at 15% or HPMC K100M at 10% could release over 80% of drug after hour and lag time was in seconds Conclusions: Gastroretentive floating drug delivery systems with metronidazol was successfully formulated It was found that with 10% of NaHCO3, the content of HPMC K4M and HPMC K100M should be 15% and 10% of tablet weight, respectively The release rate of resultant tablets was in range of 12 – 15 seconds Key words: Metronidazole, floating tablet ĐẶT VẤN ĐỀ Loét dày-tá tràng bệnh phổ biến giới, chiếm khoảng 10% dân số Trong Helicobacter pylori (HP) ghi nhận nguyên nhân dẫn tới loét dày-tá tràng (70% bệnh nhân loét dày, 90% bệnh nhân loét tá tràng có diện vi khuẩn niêm mạc dày), ung thư biểu mô tuyến lympho dày Do vậy, việc điều trị tiệt trừ HP giúp giải triệt để nhiều trường hợp loét dày-tá tràng, phòng ngừa tiên phát nguy loét ung thư dày Tuy nhiên, phác đồ điều trị HP với dạng thuốc qui ước hiệu không cao HP cư trú chủ yếu dày, viên nén qui ước thường nhanh chóng xuống ruột để hấp thu vào máu nên giảm hiệu tiệt trừ HP Sử dụng dạng bào chế lưu dày thời gian dài giúp giải vấn đề Mục tiêu đề tài nghiên cứu bào chế viên có thời gian lưu dài dày chứa metronidazol 250 mg, nhằm tăng hiệu điều trị metronidazol - kháng sinh thường dùng phác đồ diệt trừ HP VẬT LIỆU -PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Nguyên vật liệu Metronidazol, hydroxy Chuyên Đề Dược Học propyl cellulose (HPMC), gôm xanthan, natri hydrocarbonat, lactose, polyvinyl pyrolidon (PVP), isopropyl alcol (IPA); hóa chất khác đạt tiêu chuẩn dược dụng tiêu chuẩn phân tích Trang thiết bị Các thiết bị chủ yếu dùng nghiên cứu gồm máy dập viên xoay tròn (CJB – 3B – 27), máy thử độ hòa tan (Pharmatest type PTW S3C), máy đo độ cứng (Erweka TBH 30), máy quang phổ UV-Vis (Shimadzu UV1601PC), máy HPLC (Dionex), máy đo pH (Metrohm) Phương pháp nghiên cứu Phương pháp bào chế Viên nén bào chế phương pháp xát hạt ướt: metronidazol, lactose, natrihydro carbonat, polyme trộn 15 phút, hỗn hợp làm ẩm xát hạt với dung dịch PVP 10% IPA qua rây 1,2 mm, sấy 40oC giờ, sửa hạt qua rây 0,8 mm, thêm aerosil magie stearat, trộn 10 phút Hạt nén thành viên hai mặt khum, đường kính 10 mm Viên đánh giá tiềm thời (lag time- thời gian để viên lên hoàn toàn) thời gian (floating time- thời gian viên được) tiếp xúc với dung dịch HCl 0,1 N methyl 59 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Phương pháp thử độ hòa tan Viên thử 500 ml dung dịch HCl 0,1 N, với thiết bị kiểu cánh khuấy tốc độ 50 vòng/phút Nhiệt độ mơi trường trì 37 ± 0,5 oC Mẫu lấy cách thời gian Lượng metronidazol phóng thích xác định phương pháp quang phổ UV bước sóng hấp thu cực đại 277 nm khoảng nồng độ 1-25 µg/ml, với phương trình hồi qui yˆ = 0,0364x + 0,0028 Kết khảo sát mẫu giả định cho thấy tá dược có cơng thức không ảnh hưởng đến độ hấp thu metronidazol bước sóng 277 nm Độ phương pháp xác định với tỉ lệ phục hồi khoảng 80-110% Định lượng viên nén metronidazol phương pháp HPLC Phương pháp định lượng metronidazol viên Hàm lượng metronidazol viên xác định phương pháp HPLC với pha động gồm methanol:nước (20:80), cột C18 RP (Knauer 125-4), tốc độ dòng 1ml/phút, thể tích tiêm mẫu 20 μl, đầu dò UV, bước sóng phát 254 nm Với điều kiện sắc ký chọn, pic metronidazol có thời gian lưu khoảng 4,4 phút, hệ số bất đối 1,12 khơng trùng với pic có mẫu phân tích (hình 1, 2, 3) Tính tương thích hệ thống thể độ lệch chuẩn tương đối (RSD) thời gian lưu diện tich pic metronidazol 0,18% 1,25% (n=6) Tương quan diện tích pic nồng độ metronidazol khoảng nồng độ 10-500 µg/ml thể phương trình hồi qui yˆ =0,2362x - 0,0838 Độ lặp lại (n=6) thể KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Định lượng metronidazol dịch thử độ hòa tan phương pháp UV Kết thẩm định phương pháp quang phổ định lượng metronidazol dịch thử hòa tan cho thấy có tương quan tuyến tính rõ nồng độ metronidazol độ hấp thu 100 METRO #2 [modified by Administrator] mAU TRANG UV_VIS_2 WVL:254 nm 100 80 80 60 60 40 40 METRO #3 [modified by Administrator] mAU RSD 1,45% Tỉ lệ phục hồi (n=3) mức thêm chuẩn đạt khoảng 98,20 -101,82% chứng tỏ phương pháp đạt độ METRO UV_VIS_2 WVL:254 nm 100 METRO #5 [modified by Administrator] mAU M10 UV_VIS_2 WVL:254 nm 80 60 - METRO - 4.479 - METRO - 4.486 20 40 20 20 - 1.602 - 1.655 - 1.651 0 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 Hình Sắc kí đồ mẫu trắng 6.00 -15 0.00 - 5.338 -15 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 Hình Sắc kí đồ metronidazol chuẩn Nghiên cứu bào chế viên nén chứa metronidazol Các công thức viên với loại polymer khác trình bày bảng 6.00 -15 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 Hình Sắc kí đồ metronidazol mẫu thử Kết thử độ phóng thích hoạt chất (PTHC) cho thấy gôm xanthan với tỉ lệ 3% (CT1) chưa tạo viên phù hợp Ở tỉ lệ 5% (CT2) PTHC đạt gần 80% (bảng 2) Bảng 1: Các công thức viên nén metronidazol 250 mg Thành phần Metronidazol Gôm xanthan HPMC K4M 60 CT1 250 15 - CT2 250 25 - CT3 250 50 - CT4 250 100 - Lượng viên (mg) CT5 CT6 CT7 CT8 250 250 250 250 50 75 100 - CT9 250 - CT10 250 - CT11 250 50 50 CT12 250 25 - Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Thành phần HPMC K100M NaHCO3 Lactose PVP Aerosil Magie stearat Tổng CT1 50 176 1,5 2,5 500 CT2 50 166 1,5 2,5 500 CT3 50 141 1,5 2,5 500 CT4 50 91 1,5 2,5 500 Nghiên cứu Y học Lượng viên (mg) CT5 CT6 CT7 CT8 50 50 50 50 50 141 116 91 141 5 5 1,5 1,5 1,5 1,5 2,5 2,5 2,5 2,5 500 500 500 500 CT9 75 50 116 1,5 2,5 500 CT10 100 50 91 1,5 2,5 500 CT11 50 91 1,5 2,5 500 CT12 25 50 141 1,5 2,5 500 Kết thử độ phóng thích hoạt chất viên nén metronidazol 250 mg Bảng 2: Kết phóng thích hoạt chất sau sản phẩm nghiên cứu Thời gian (giờ) CT1 100,06 CT2 CT3 CT4 % metronidazol phóng thích CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 CT10 CT11 CT12 71,2 52,71 47,33 98,37 64,66 68,92 60,51 62,14 Viên chứa polyme HPMC phóng thích hoạt chất nhanh so với viên chứa gôm xanthan Do độ nhớt cao, viên chứa HPMC K100M PTHC chậm so với K4M Tốc độ PTHC viên chứa HPMC K100M tỉ lệ 15% 20% khác khơng đáng kể, tỷ lệ 15% HPMCK100M tạo 82,23 72,04 80,46 khung bền vững nên tăng thêm polyme không làm chậm tốc độ PTHC Các công thức phối hợp polyme (CT11, CT12) khơng cải thiện khả phóng thích hoạt chất, metronidazol phóng thích khoảng 60% sau Kết thử độ viên nén metronidazol 250 mg Bảng Kết thử độ viên nghiên cứu CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 Tiềm thời (giây), (n=6) 100 40 37 34 30 12 Thời gian (giờ) >8 >8 >8 >8 >8 >8 Kết thử độ cho thấy viên dùng CT8 15 >8 CT9 CT10 CT11 CT12 20 78 43 >8 >8 >8 >8 KẾT LUẬN HPMC nhanh so với viên dùng gôm Viên dày chứa metronidazol 250 xanthan HPMC tạo gel nhanh so với mg bào chế theo chế tạo khí CO2, gơm xanthan Tỉ lệ polyme HPMC cao viên polyme trương nở nhanh nước tạo nhanh Tuy nhiên với gơm xanthan khung bắt giữ khí gôm xanthan HPMC Đã khác biệt tiềm thời công thức không xác định công thức phù hợp yêu cầu: đáng kể Các viên phối hợp Xanthan HPMC viên giải phóng 80% hoạt có tiềm thời trung bình cộng viên chứa chất sau Trong đó, viên chứa HPMC K4M HPMC gơm xanthan với tỉ lệ 15% có tiềm thời 12 giây, Viên chứa HPMC bị bào mòn nhanh chóng phóng thích 80% metronidazol sau giờ; so với viên chứa gôm xanthan chứng tỏ viên chứa HPMC K100M với tỉ lệ 10% có tiềm khung gôm xanthan bền vững thời gian thời 15 giây, thời gian độ phóng thích hoạt viên dùng gơm xanthan trì chất tương đương viên chứa HPMC K4M lâu với tỉ lệ 15% Viên chứa gôm xanthan tỉ lệ 5%, dù phóng thích hoạt chất đạt khoảng 70% Chun Đề Dược Học 61 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 tạo khung gel có tính ngun vẹn trì lâu hơn, gơm xanthan tá dược phù hợp để nghiên cứu tiếp tục cho viên nén theo chế bắt giữ khí carbonic TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 Hetangi R, Vishnu P, Moin M (2010), “Floating drug delivery system: Innovative approach of gastroretentive”, Int J Pharm Sci Rev Res., (3), 183-190 Mayavanshi AV, Gajjar SS (2008), “Floating drug delivery systems to increase gastric retention of drugs: A Review”, Research J Pharm and Tech., 1(4), 345-348 Patil JM, Hirlekar RS, Gide PS, Kadam VJ, (2005), “Trends in floating drug delivery systems”, J Sci Ind Res., 65 (1), 11-21 Praveen N, Sheefali M, Deeppika S, (2010), “Floating system: A novel approach towards gastroretentive drug delivery system”, Int J Pharm Sci (3), 2-7 Shah SH, Patel JK, Patel NV, (2009), “Stomach Specific Floating Drug Delivery System: A Review”, Int J Pharm Res (3), 623-633 Shweta A, Javed A, Alka A, Roop KK, Sanjula B (2005), “Floating Drug Delivery Systems: A Review”, AAPS PharmSciTech, (3), 47 Ngày nhận báo: 12.12.2012 Ngày phản biện nhận xét báo: 23.12.2012 Ngày báo đăng: 10.03.2014 Chuyên Đề Dược Học ... trừ HP Sử dụng dạng bào chế lưu dày thời gian dài giúp giải vấn đề Mục tiêu đề tài nghiên cứu bào chế viên có thời gian lưu dài dày chứa metronidazol 250 mg, nhằm tăng hiệu điều trị metronidazol. .. kí đồ metronidazol chuẩn Nghiên cứu bào chế viên nén chứa metronidazol Các công thức viên với loại polymer khác trình bày bảng 6.00 -15 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 Hình Sắc kí đồ metronidazol. .. UV1601PC), máy HPLC (Dionex), máy đo pH (Metrohm) Phương pháp nghiên cứu Phương pháp bào chế Viên nén bào chế phương pháp xát hạt ướt: metronidazol, lactose, natrihydro carbonat, polyme trộn 15