Bài viết Phát hiện các týp nguy cơ cao của virút bướu nhú người (HPV) trong ung thư niêm mạc miệng trình bày về: Bệnh ung thư niêm mạc miệng, vai trò của HPV trong bệnh sinh ung thư niêm mạc miệng, thái độ về phòng ngừa và nhận biết ung thư... Mời các bạn cùng tham khảo đề tài nghiên cứu này.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học PHÁT HIỆN CÁC TÝP NGUY CƠ CAO CỦA VIRÚT BƯỚU NHÚ NGƯỜI (HPV) TRONG UNG THƯ NIÊM MẠC MIỆNG Trần Thị Kim Cúc* TÓM TẮT Ung thư niêm mạc miệng (UTNMM) xuất kết trình gồm nhiều giai đoạn, với nhiều yếu tố ảnh hưởng bệnh sinh, bao gồm yếu tố môi trường thói quen hút thuốc, uống rượu, nhai trầu, xạ Tuy nhiên, có tỉ lệ đối tượng khơng có thói quen mắc bệnh ung thư, cho thấy có yếu tố khác môi trường, hay yếu tố di truyền, yếu tố miễn dịch tế bào mô chủ liên quan bệnh sinh ung thư Vai trò HPV bệnh sinh UTNMM làm rõ nghiên cứu trực tiếp mẫu bướu hay invitro Mục tiêu: Nghiên cứu nhằm xác định tỉ lệ HPV UTNMM Đối tượng phương pháp: Các bệnh phẩm tươi sinh thiết từ 109 bệnh nhân UTNMM ly trích DNA, tiến hành phản ứng PCR tổ xác định HPV với hai cặp đoạn mồi thông dụng MY09/MY11 GP5+/GP6+ Phản ứng Realtime PCR xác định týp nguy cao (HPV-16, 18, 33, 45 58) Kết quả: Nhiễm HPV chiếm tỉ lệ 36,7% UTNMM, nhiễm HPV-16 chiếm tỉ lệ 17,5%, tỉ lệ HPV-18 47,5%, đồng nhiễm HPV-16 18 chiếm tỉ lệ 22,5%, đồng nhiễm HPV-45 58 7,5%, nhiễm HPV-33 chiếm tỉ lệ 5% Kết luận: Phân tích liên quan tình trạng nhiễm HPV với đặc điểm lâm sàng, giải phẫu bệnh thói quen nguy cho thấy nhiễm HPV gặp nhiều bệnh nhân UTNMM khơng có thói quen hút thuốc hay nhai trầu Từ khóa: Virút bướu nhú, ung thư niêm mạc miệng, nhiễm HPV ABSTRACT DETECTION OF HIGH RISK HUMAN PAPILLOMA VIRUS IN ORAL SQUAMOUS CELL CARCINOMA IN VIETNAMESE PATIENTS Tran Thi Kim Cuc* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 177 - 183 Background: Oral cancer has been causally associated with a history of heavy smoking and alcohol abuse However, non smokers and non drinking patients have oral cancer, suggest besides tobacco and alcohol, other environmental, immunologic and genetic factors are essential in the pathogenesis of oral cancer There is an increasing evidence for the role of high risk human papilloma virus (HPV) in the pathogenesis of oral squamous cell carcinoma (OSCC) Purpose: This study is to investigate the prevalence of HPV in the oral cancer patients Materials and methods: Biopsies of OSCC were obtained from 109 patients with clinical informations HPV DNA was identified in fresh-frozen samples by nested-PCR with MY09/MY11 and GP5+/GP6+ primer pairs and HPV genotype was determined by multiplex reatime PCR (HPV-16, 18, 33, 45, and 58) Association between the HPV status and risk factors for cancer as well as tumor-host characteristics were analysed Results: HPV was found in 36.7% of the tumors with HPV-16 accounting for 17.5%, HPV-18 for 47.5%, 22.5% co- infection with HPV-16 and 18; 7.5% for co-infection with HPV-45 and 58; 5% for HPV-33 *: Khoa RHM - Đại học Y Dược TP HCM Tác giả liên lạc: ThS Trần Thị Kim Cúc ĐT: 0908348850; Chuyên Đề Răng Hàm Mặt Email: kimcuc0804@yahoo.com 177 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Conclusions: HPV infection was significantly associated with non smoking or non betel-chewing oral cancer patients (p 45 HPV (+) 0,426 75 34 26 14 (34,7) (41,2) 14 (50,0) 95 33 (34,7) 0,269 Thói quen Hút thuốc nhai trầu Khơng thói quen Vị trí ung thư Mơi Niêm mạc má Lưỡi Sàn miệng Khẩu Nướu Độ mơ học ác tính Độ I 47 26 20 20 (0) (50,0) (42,5) (30,8) (40,0) (30,0) 49 18 (36,7) Độ II 47 16 (34,0) Độ III 13 (46,2) 04 32 36 37 55 54 02 13 12 13 19 21 (50,0) (40,6) (33,3) (35,1) (34,6) (38,9) 17 40 48 15 16 (50,0) (41,2) (37,5) (33,3) TNM T1 T2 T3 T4 N0 N+ Giai đoạn lâm sàng I II III IV 30 (32,6) 17 10 (58,8) nhất, có lẽ khác mặt di truyền nhóm dân số nghiên cứu Thứ hai, việc chọn lựa đoạn mồi sử dụng PCR ảnh hưởng đến phát HPV(2) 0,572 Nghiên cứu áp dụng kỹ thuật PCR phát tỉ lệ cao HPV, chiếm 36,7% UTNMM người Việt Nam Theo y văn, tỉ lệ thay đổi khoảng từ 25-75% hầu hết nghiên cứu HPV dựa phản ứng PCR 0,643 Trong phân tích meta(13), nghiên cứu từ năm 1982-1997, tỉ lệ nhiễm HPV tăng dần theo mức độ nặng bệnh: từ niêm mạc miệng bình thường (10%) đến bạch sản (22,2%), nghịch sản (26,2%), carcinơm dạng mụn cóc (29,5%) ung thư tế bào gai (46,5%) 0,039 92 Nghiên cứu Y học 0,731 Tuy nhiên, có số nghiên cứu ghi nhận tỉ lệ HPV thấp UTNMM Nghiên cứu(14) bệnh nhân UTNMM người Braxin, không phát HPV (0%), người Thái Lan, tỉ lệ nhiễm HPV thấp (1,54%)(16) Tỉ lệ týp nguy cao UTNMM 0,221 0,696 Nghiên cứu tìm thấy 17,5% UTNMM nhiễm HPV-16, 47,5% nhiễm HPV-18 tỉ lệ đồng nhiễm týp 22,5% Tỉ lệ nhiễm chủ yếu týp nguy cao 16 18 87,5% Tỉ lệ HPV UTNMM Trong nghiên cứu 91 bệnh nhân UTNMM Ấn độ(2), Balaram tìm thấy tỉ lệ phát HPV-16 18 42% 47% Aggelopouloa tìm thấy tỉ lệ nhiễm HPV-18 44% HPV-16 2% bệnh nhân có tổn thương tăng sản ung thư hốc miệng người Hy lạp(1) Có nhiều nghiên cứu HPV UTNMM hai thập niên qua Khả phát HPV phụ thuộc nhiều vào độ nhạy phương pháp phát Có nhiều loại xét nghiệm để phát HPV Xét nghiệm có độ nhạy thấp miễn dịch huỳnh quang, miễn dịch men lai chỗ Xét nghiệm có độ nhạy trung bình Southern Blot, dot blot PCR xét nghiệm có độ nhạy cao Và PCR phương pháp có độ nhạy cao xét nghiệm phát HPV, kết thay đổi(2,9) Sự khác yếu tố Thứ Nhiều nghiên cứu tìm thấy tỉ lệ cao HPV-16 UTNMM, giống UTCTC Trong phân tích meta gần Dayani (2010)(7), với nghiên cứu 5.681 bệnh nhân ung thư đầu cổ, tỉ lệ HPV chung 21,95%, tỉ lệ HPV ung thư hầu cao HPV16 chiếm đa số (86,7%), tỉ lệ HPV-16 thấp vị trí khác thuộc vùng đầu cổ Ngược lại, HPV-18 týp phổ biến thứ hai, lại gặp ung thư hầu (2,9%) so với tỉ lệ UTNMM (34,5%) Các týp nguy BÀN LUẬN Chuyên Đề Răng Hàm Mặt 181 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học cao khác phát UTCTC (HPV-31, 33, 45, 56, 58 59) gặp ung thư đầu cổ Trong nghiên cứu này, nhiễm HPV-33, 45, 58 chiếm tỉ lệ 12,5% Như vậy, nhiễm HPV-16 18 thay đổi tùy theo vùng giải phẫu học hay vùng địa lý(1,5,7) Nghiên cứu cho thấy khác tỉ lê týp so với nghiên cứu khác, với tỉ lệ đồng nhiễm týp nguy cao chiếm tỉ lệ lớn Phát HPV-16 18 chiếm tỉ lệ cao ung thư đầu cổ gợi ý chương trình vacxin phòng bệnh phát triển UTCTC nên xem xét đến phòng ngừa ung thư đầu cổ Liên quan tình trạng nhiễm HPV với lâm sàng giải phẫu bệnh UTNMM Nghiên cứu tìm thấy khác biệt có ý nghĩa nhóm bệnh nhân nhiễm HPV khơng có thói quen, so với người có thói quen hút thuốc hay nhai trầu (p< 0,05) Nghiên cứu Gillison Lindel cho thấy UTNMM nhiễm HPV gặp người hút thuốc hay uống rượu Tuy nhiên, Schwartz(15) tìm thấy người có thói quen hút thuốc có nhiễm HPV-16 gia tăng nguy UTNMM người có thói quen hút thuốc hay nhiễm HPV Tế bào bị nhiễm HPV nhạy cảm ảnh hưởng chất sinh ung khác thuốc lá, rượu tác nhân khác(11) (8) (12) Kết nghiên cứu cho thấy bệnh nhân nhiễm HPV 45 tuổi chiếm tỉ lệ cao (50%) so với nhóm bệnh nhân lớn tuổi (34,7%), khác biệt khơng có ý nghĩa Xu hướng bệnh nhân UTNMM nhiễm HPV thường trẻ bệnh nhân UTNMM không nhiễm HPV, nghiên cứu Gillison(8) Chaturvedi(5) ghi nhận bệnh nhân ung thư tế bào gai vùng đầu cổ liên quan HPV thường trẻ 3-5 tuổi so với nhóm bệnh nhân khơng nhiễm HPV 182 Trong nghiên cứu vào năm 2000 khơng tìm thấy liên quan tình trạng nhiễm HPV giới tính(8), hay tỉ lệ nhiễm cao nam giới(2,6) Nghiên cứu bệnh nhân UTNMM người Mexico cho thấy tỉ lệ nhiễm HPV cao nữ giới, giống UTCTC(10) Tuy nhiên, tổng kết nghiên cứu cho thấy khuynh hướng nhiễm HPV ung thư đầu cổ dường không liên quan đến giới tính(5) Nghiên cứu Ali 140 bệnh nhân Pakistan(2) khơng tìm thấy liên quan nhiễm HPV với giai đoạn lâm sàng, kích thước bướu, di hạch, độ mô học Một số nghiên cứu nhận thấy tình trạng nhiễm HPV thường liên quan với giai đoạn lâm sàng trễ, bướu có kích thước lớn T3 T4(5), độ ác tính mơ học cao(17).Tuy nhiên, đa số nghiên cứu khơng có tỉ lệ đủ bướu giai đoạn sớm, nên phân tích để phát mối liên quan giai đoạn lâm sàng hay TNM với tình trạng nhiễm HPV(2) Hiện diện HPV UTNMM nghiên cứu tìm liên quan theo vị trí Dùng kỹ thuật PCR, Miller phát tỉ lệ HPV cao amygdale (77%), NMM (59%), sàn miệng (44%), (42,8%), lưỡi (35%)(13) Trong nghiên cứu này, chúng tơi khơng tìm thấy mối liên quan có ý nghĩa tình trạng nhiễm HPV vị trí hốc miệng Điều niêm mạc vùng đầu cổ hốc miệng tiếp xúc chung với tác nhân sinh ung HPV KẾT LUẬN Nghiên cứu 109 trường hợp ung thư niêm mạc miệng tìm thấy tỉ lệ HPV 36,7% Tỉ lệ HPV xuất cao có ý nghĩa bệnh nhân khơng có thói quen nguy hút thuốc hay nhai trầu Hiện diện HPV-16 18 chiếm tỉ lệ 87,5% ung thư niêm mạc miệng Điều củng cố thêm chứng týp nguy cao, thường HPV-16 18, nhận diện ung thư cổ tử cung, đóng vai trò q trình sinh ung hốc miệng Chuyên Đề Răng Hàm Mặt Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 TÀI LIỆU THAM KHẢO Aggelopoulou E.F.I., Skalos D., Papadimitriou C (1999) “Human papilloma virus DNA detection in oral lesions in the Greek population” Anticancer Research 19 pp 1391-1396 Ali SMA (2008) “Human papillomavirus association and p53 mutation in oral cavity of Pakistani patients” Thesis for PhD Baez A., Almodovar J.L., Cantor A., Celest F., Cruz L.C., Vega W (2004) “High frequency of HPV 16- associated head and neck squamous cell carcinoma in the Puerto-Rico population” Head Neck 26 pp 778-784 Butt W.T., Butt M.U., Tariq S., Ahmad R., Ali T.S., Bukhari M.H., Naeem S., Munir M (2007) “Molecular pathogenesis, epidemiology, risk factors and prognosis of head and neck cancer in relation to humam papilloma virus infection” Annals 13(2) pp 169-173 Chaturvedi A.K., Engel E.A., Anderson W.F., Gillison M.L (2008) “ Incidence trends of HPV-related and unrelated oral squamous cell carcinoma in the United State” Journal of Clinical Oncology 26 (4) pp 617-619 Cruz I.B., Snijders P.J., Steeberger R.D (1996) “Agedependence of humam papilloma virus DNA presence in oral qumous cell carcinoma” Eur J Cancer B Oral Oncol 32B pp 55-62 Dayani F., Etzel C.J., Lui M., Ho C.H., Lippman S., Tsao.S (2010) “Meta-analysis of the impact of human papilloma virus on cancer risk and overall survival in head and neck squmous cell carcinoma” Head and Neck Oncology 2(15) pp 1-11 Gillison M.L., Koch W.M., Capone R.B (2000) “Evidence for a causal association between human papilloma virus and a subset of head and neck cancer” J Natl Cancer Inst 92(9) pp 709-720 Chuyên Đề Răng Hàm Mặt 10 11 12 13 14 15 16 17 Nghiên cứu Y học Ha P.K., Califano J.A (2004) “The role of human papilloma virus in oral carcinogenesis” Crit Rev Oral Biol Med 15(4) pp 188-196 Ibieta B.R., Lizano M., Frias-Mendivil M (2005) ”Human papilloma virus in squamous cell carcinoma in a Mexican population” Oral Surg Oral Med Oral Pathol 99 pp 311-315 Kim S.M., Shin K.H., Baek J.H., Cherrick H (1993) “HPV-16, tobaco-specific N-nitrosamine, and N-methyl-N’-nitor-Nnitrosoguanidine in oral carcinogenesis” Cancer Reasearch 53 pp 4811-4816 Lindel K., Beer K.T., Laissue J (2001) “Human paplloma virus positive squamous cell carcinoma of the oropharynx: a radiosensitive subgroup of head and neck cancer” Cancer 92 pp 805-813 Miller C.S., Johnstoon B.M (2001) “HPV as a risk factor for oral squamous cell carcinoma: a meta-analysis 1982-1997” Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endol 91(6) pp 622-635 Rivero E.R.C., Nunes E.D (2006) “Human papilloma virus in oral squamous cell carcinoma of a Brazilian population Amplication by PCR” Braz Oral Res 20(1) pp 21-24 Schwartz S.M., Daling J.R., Drody D.R (1998) “Oral cancer risk in relation to sexual history and evidence of human paplloma virus infection” J Natl Cancer Inst 90 pp 16261636 Siribang-on P., Buajeeb W., Sanguansm S., Poomsavat S., Weerapradist W (2008) “Detection of human papilloma carcinoma in oral squamous cell carcinoma, leukoplakia and lichen planus in Thai patients” Asian Pacific J Cancer Prev pp 771-775 Zhao D., Xu Q.G., Chen X.M., Fan M.W (2009) ”Human papillomavirus as a independent predictor in oral squamous cell carcinoma” International Journal of Oral Science 1(3) pp 119-125 183 ... trầu Hiện diện HPV-16 18 chiếm tỉ lệ 87,5% ung thư niêm mạc miệng Điều củng cố thêm chứng týp nguy cao, thư ng HPV-16 18, nhận diện ung thư cổ tử cung, đóng vai trò q trình sinh ung hốc miệng. .. HPV-16 chiếm phân Ung thư di từ nơi khác đến vùng miệng, nửa trường hợp HPV-18 týp gặp nhiều ung thư vùng lân cận da, hầu lan vào ung thư dạng tuyến cố tử cung (55%), (4) hốc miệng sau HPV-16... lệ týp nguy cao UTNMM Trong 109 bệnh nhân UTNMM, HPV phát 40 trường hợp, chiếm tỉ lệ 36,7% Về tỉ lệ týp HPV: 47,5% nhiễm týp1 8 (đơn kết hợp týp khác); 22,5% đồng nhiễm týp 16 18; 17,5% nhiễm týp