Bài viết trình bày phát hiện đại diện đầu tiên của chi Humphreya Stey. mới được phát hiện ở vườn quốc gia Cát Tiên (Đồng Nai – Lâm Đồng) – Loài nấm linh chi Endert: Humphreya Endertii. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu.
31(1): 39-45 3-2009 Tạp chí Sinh học Phát ĐạI DIệN ĐầU TIÊN CHI humphreya stey MớI đợc PHáT HIệN VƯờN QUốC GIA CáT TIÊN (ĐồNG NAI - LâM ĐồNG) loài NấM LINH CHI ENDERT: HUMPHREYA ENDERTII Lê Xuân Thám, Nguyễn Lê Quốc Hùng Trung tâm Hạt nhân Hồ Chí Minh Phạm Ngọc Dơng Vờn quốc gia Cát tiên J M Moncalvo Đại học Toronto, Ontario, Canada Hä nÊm Linh chi Ganodermataceae Donk ë ViÖt Nam hiÖn đợc ghi nhận 50 loài, đ mô tả khoảng 10 loài thuộc chi: Ganoderma Karst., Amauroderma Murr Haddowia Stey [6, 19] Trớc đây, đ có ghi nhận loài lạ có nhiều ®Ỉc ®iĨm cđa chi thø t−: Humphreya Stey (1972) song kiểu lới gián đoạn không thật điển hình; sau loài đợc xác định Ganoderma cupreolaccatum Cũng có mét sè loµi nÊm linh chi cã kiĨu bµo tư lới nhiều gián đọan, đợc định lọai xÕp vµo nhãm Humphreya, nh− G asperulatum, G neurosporum, G ochrolaccatum, G terengganuense…; nghÜa lµ cã nhãm trung gian víi chi Ganoderma Humphreya nhóm có nhiều vấn đề giới hạn (số lợng loài) mức bậc taxon Ryvarden & Johansen (1980) [11] đ giới hạn với loài theo khóa định loại sau: Bào tử dài tíi 25-30 µm ……………………………… H eminii Bào tử ngắn 25 àm 2 Bµo tư dµi 9-12 µm; loài tân nhiệt đới .2 H coffeatum 2’ Bµo tư dµi 14-19 µm …………………………………………………… 3 Tán nấm quế; loài châu ¸ …………………… H endertii 3’ Tán nấm nâu tối; loài châu Phi .4 H lloydii Trong đợt khảo s¸t thu thËp mÉu vËt nÊm ë V−ên quèc gia Cát Tiên, trải rộng từ vùng Bắc Cát Tiên - thuộc tỉnh Lâm Đồng xuống vùng Nam Cát tiên - tỉnh Đồng Nai hai mùa ma 2007-2008, J M Moncalvo đ giám định lại loài thc chi Humphreya Stey víi bé mÉu thĨ qu¶ cđa bào tử bề mặt có kiến trúc lới đặc trng Trung, Đài Loan Đại học Toronto, Ontario, Canada), đợc phân tích chi tiết hình thái giải phẫu mô tả đối chiếu với t liệu gốc [1, 11, 13, 22, 23] Chụp ảnh bào tử với vật kính dầu (ì100) kính hiển vi điện tử quét (SEM) Viện 69, Hà Nội I phơng pháp nghiên cứu Loµi nÊm linh chi endert - Humphreya endertii Stey MÉu thu vµo mïa m−a (7-9/2007 vµ 6/2008), gåm thể trởng thành (loạt mang ký hiệu CT 104-108, lu giữ Bảo tàng Nấm Cát Tiên, Bảo tàng Khoa học tự nhiên, Đài II Kết nghiên cứu Persoonia 7: 102, 1972 Đợc phát khu vực sâu tuyến thác Trời, Đạ Mí, Cát Tiên, mùa ma (739 8/2007, tìm thấy lại vào 8/6/2008) Thể mọc đơn lẻ, song tập trung thành cụm 4-5 tán to nhỏ quanh gốc gỗ Thể hình thái ngòai giống với chủng có màu sẫm thuộc loài chuẩn Ganoderma lucidum, đặc biệt giống với loài phức hợp ấy: G neo-japonicum, G formosanum (= G sinense?) G fornicatum, có hình thận tỏa tròn - hình quạt xòe rộng - hình thìa tròn, đờng kính biến động lớn 5,5-11,5 cm (lớn mẫu đợc mô tả vùng khác); phần lõm trung tâm nơi cuống xòe rộng loe, gồ lên kiểu đính lng (dorsal) Mặt tán láng bóng màu đỏ nâu - nâu bóng đen nh màu cà phê, thể không thật rõ vòng đồng tâm đờng hằn gồ ghề tỏa mép Lớp vỏ tán mỏng, bóng giòn, dễ dập vỡ ấn mạnh Mép tán dày kiểu xếp nếp (grooved), cúp lại vành sinh trởng chồng xếp tràn lên nhau, dày tới 3,6-7,7 mm Hình Bào tử đảm vỏ dày, có bề mặt lới gồ tầng cột dày (kiểu ganodermoid lới) 40 Mấu đính bào tử Hình Bào tử đảm có bề mặt lới gồ loài chuẩn Humphreya lloydii (ảnh SEM, Perreau, 1973) Tầng cột dày Mấu đính bào tử Hình Bào tử đảm Humphreya endertii với tầng cột chống dày mấu đính bào tử (ảnh hiển vi điện tử quét SEM) a Hình Thể cuống dài với lớp vỏ láng bóng loài Humphreya endertii 41 Tầng thịt nấm màu xám nâu nhẹ - vàng nhợt - vàng quế - ngà kem, dày vùng gần cuống - trung tâm, tới 5-8 mm, mỏng dần phía mép, xốp bông, dai, đàn hồi khô Tầng ống thẳng, màu nâu xám - nâu nhợt, dày 5,5-9,5 mm Bề mặt bào tầng có màu trắng phấn - trắng xám; lỗ ống tròn mịn, 3-4 ống/mm Hệ sợi kiểu dạng (trimitic) điển hình với sợi cứng sợi bện phân nhánh mạnh, thành dày B A Hình Thể tự nhiên A Mặt nâu đỏ láng bóng; B mặt dới trắng mốc Bào tử có dạng ganodermoid điển hình, có kích thớc 12,5-16,5 ì 9,5-11,5 àm Lỗ nảy mầm lớn, nằm đầu thuôn (thực chất vùng vỏ bào tử phồng dày nhất, tới 3,3 àm, phân hóa định vị nơi nảy mầm bào tử) Có giọt nội chất tròn giữa, màu vàng đậm Tuy nhiên vỏ bào tử phân hóa mạnh, dày, không thấy rõ (che lấp) mấu đính đáy bào tử dạng tròn bầu Vỏ bào tử dày, thấy rõ lát cắt vỏ - ảnh chụp hiển vi điển tử truyền qua - TEM (l−u ý Furtado, 1962, 1967 ph©n tÝch Ganoderma opacum G coffeatum - vào năm 1962 ông cha phân biệt tên loài đồng nghĩa) [2, 4] tầng cột chống rõ, cao tới 1,8-2,4 àm Kết cho thấy cấu trúc tơng tự H endertii (hình 4) Bề mặt phân hóa tạo thành kiến trúc dạng lới thô gồ ghề, ô lới ngoằn ngoèo, kiểu mê lộ (labirynthe), bờ lới thô gồ, uốn khúc Kiểu kiến trúc vỏ bào tử điển hình H lloydii [10] đồng với H endertii [13] H eminii [11], mô tả Corner (1983) cha chuẩn xác [1] Tuy nhiên, thấy H endertii cã bµo tư rÊt gièng víi bµo tư cđa lồi chuẩn H lloydii (Perreau, 1973) đồng loài [13], song bo tử nhỏ ë H coffeatum vµ lín 42 nhÊt lµ loµi thĨ nhỏ châu Phi: H eminii (vỏ bào tử loài dày nhiều có kiểu lới chồng phức tạp hơn, gờ lới dày) Thờng chụp kính hiển vi điện tử quét (SEM), xử lý làm mẫu, phần chóp nảy mầm bị bứt rời tạo thành dạng hốc lõm (tơng ứng với mô tả dạng trứng cụt - truncate) Cuống đính bên, thờng tròn mảnh dài (đôi dài, tới 13-19 (> 22) cm), hình trụ thuôn (đờng kính 0,5-1,1 cm), cong quẹo, đặc chắc, lớp vỏ cuống láng bóng màu cà phê ánh đỏ tím - đỏ nâu, dày rắn lớp vỏ tán Chất mô cuống đồng với mô thịt nấm tán Thờng đính bên, lm gồ ln, gần tâm tán xòe rộng thành hình quạt tròn Thờng gặp mọc đất quanh gốc gỗ, thực vơn lên từ rễ ngầm dới đất Chính Steyaert (1972) đ xác lập chi Humphreya bao gồm loài này, với mẫu vật thu đợc West Koetai, đảo Kalimantan, Inđô-nê-si-a sau Corner (1983) cho đ tìm thấy Ma-lai-si-a, cho phổ biến vùng Đông Nam gặp miền Nam Việt Nam Các tác giả cho loài Humphreya endertii gần với loài chuẩn Humphreya lloydii (Pat & Har.) Stey., đặc biệt cấu trúc bào tử, song khác biệt chủ yếu tán nấm lớp lông nhung màu sáng [1, 7] Điều gợi nhớ trờng hợp mô tả mẫu Humphreya coffeatum theo ảnh chụp Lodge (1998) thể dày có lớp lông nhung (velvety) giống với loài đồng nghĩa: H opacum Pat theo mô tả nguyên mẫu; song thực tế mô tả lại cho lớp lông nhung bề mặt tán láng nhẵn, mờ đục bị bụi bào tử phủ lên Chính vậy, Gottlieb & Wright (1999) cho chúng loài khác biệt [5] Chúng đề xuất chủng địa lý khác biệt bào tử nhỏ hơn, có bề mặt cấu trúc lới điển hình, kiểu ô lỗ tổ ong, thành ô lới gồ rõ, thô: Humphreya endertii Stey var dakluaense Thám & Dzuong, var nov Loài chuẩn (type species): Humphreya lloydii (Pat & Har.) Stey (Persoonia 7: 102, 1972) = Polyporus fasciculatus Lloyd = Amauroderma lloydii Pat & Har., Bull Soc Mycol Fr 28: 281, 1912 = Ganoderma lloydii (Pat & Har.) Trott., 1925, chi đợc Steyaert xác lập từ năm 1972 Vốn nguyên mẫu thu từ miền Tây châu Phi (mẫu thu Côn-gô Lloyd, 1912, lý thuyết ông ngời phát ông xác định Polyporus fasciculatus) Furtado nghiên cứu thẩm định (1967), vùng châu Mỹ Latinh đợc Ryvarden & Johansen (1980) mô tả miền Đông châu Phi Trong đó, loài tìm thấy vùng Nam Trung Hoa (1 loài: H coffeatum) Đông Nam (ít đ biết loài) giống với Ganoderma lucidum, G neo-japonicum, thờng láng bóng lớp lông nhung mặt tán; ngòai ra, cuống thờng thon mảnh, cong quẹo, có u cơc Mèi quan hƯ ph©n hãa víi chi Ganoderma chi Amauroderma a Tơng đồng hình thái thể Steyaert (1972) đ đề xuất lập chi Humphreya Stey víi loµi chn H lloydii (Pat & Har.) Stey (= Amauroderma lloydii Pat & Har., 1912 = Ganoderma lloydii (Pat & Har.) Trott., 1925) Ông đề nghị thêm loµi thø hai lµ H endertii Stey vµ loµi thø ba Zhao (1989) mô tả: H coffeatum, khác với Furtado (1967), Gotliebb cs., (1999) với mẫu thu Mỹ La tinh Ryvarden đ đa thêm loài thứ t−: Ganoderma eminii Henn (1893) vµo chi Humphreya: H eminii (Henn.) Ryv (1980), đợc ghi nhận có châu Phi [11] Nh vậy, có loài thờng đợc định danh vào chi Ganoderma chi Amauroderma, có nhiều đặc điểm thể phù hợp Kể loài thứ ba, đợc Steyaert đa vào chi Humphreya song thể giống với loài Ganoderma, sinh trởng hàng niên, phát sinh với cuống dài điển hình đính bên gồ đính lng, tiếp vào tán nấm hình thận xòe tròn Tòan láng bóng với sắc màu đỏ nâu vàng nâu; cấu trúc giải phẫu mô thịt, tầng ống hệ sợi giống ChÝnh Corner (1983) ® cho thÊy mèi quan hƯ gần gũi chi Humphreya với chi Amauroderma với chi Haddowia b Tơng đồng cấu trúc bào tử Đặc trng cấu trúc bào tử đợc đa số nhà nghiên cứu chấp nhận để tách biệt chi [11, 13] Tuy nhiên, việc phân tích đặc trng cấu trúc bào tử đ có bớc tiến sâu sắc gần [2, 9, 10, 16] Kiểu humphreyoid tách biệt rõ lắm, đặc trng ganodermoid với lớp vỏ kép phát triển tầng cột, tồn mấu đính tiểu bính đáy bào tử lỗ nảy mầm lớn đầu thuôn đối diện Tuy nhiên, kiểu trung gian lại phổ biến chi Ganoderma Đó kiểu lới gián đoạn Thực ra, kiểu cấu trúc lới điển hình thấy rõ H lloydii [10], rÊt gièng lµ ë H endertii vµ ë H eminii [11], H coffeatum lới gồ thô, không thật rõ [4, 23] Phân tích H endertii Steyaert (1972) [13] phù hợp với mẫu Cát Tiên, song ảnh chụp cho thấy bề mặt lới rõ Corner (1983) Moncalvo & Ryvarden (1997) [1, 7] có phân tích đề xuất phức hợp Humphreya, gồm loài chuyển tiếp đó, theo khóa định lọai đợc xây dựng cho phân lọai nhiều loµi thuéc nhãm trung gian nµy 43 Humphreya complex Bao gồm loài đợc ghi nhận chi Humphreya nh Ryvarden & Johansen (1980) [11] đ nêu Thực chất với kiểu bào tử ganodermoid đồng nh loài nêu trên, không thuyết phục nÕu chÊp nhËn chi Humphreya Stey ®éc lËp, đặc điểm khác thể mang nét chung loài thuộc chi Ganoderma Karst Vì theo kiểu bào tử có đến hàng chục loài phải xếp vào chi Humphreya Nghĩa ranh giới chi Ganoderma chi Humphreya không thật rõ tách biệt Có lẽ, hợp lý nên để chi Humphreya mức phân chi (subgenus) nhánh (section) chi Ganoderma Karst mà c Tơng đồng cấu trúc DNA - Quan hệ chủng lọai phát sinh Các phân tích DNA loài thuộc chi Humphreya (vì hiếm, có loài đợc xác lập thức) cha có công bố thức, đ phân tích loài trung gian [18] Kết cho thÊy cÊu tróc vïng ITS cđa chóng cã ®é tơng đồng cao nhóm loài Ganoderma, nằm xen nhóm loài gần gũi: Ganoderma lucidum, G tsugae, G tropicum, G amboinense, G oerstedii, G capense, G terengganuense… (lu ý loài Ganoderma sinh trởng hàng niên, có tán màu nâu đỏ láng bóng nh loài Humphreya vậy) Hiện nay, phối hợp với nhóm nghiên cứu quốc tế đại học Toronto, Canada (Moncalvo JM), Viện Bảo tàng tự nhiên Đài Trung, Đài Loan (Wu SH) đại học quốc gia Chung-Hsing, Đài Trung, tiến hành nuôi trồng phân tích đặc trng rDNA loài Humphreya đầu tiên: H Endertii kết cho phép thảo luận sâu mối quan hệ chủng lọai phát sinh mức bậc taxon đặc sắc Tài liệu tham kh¶o Corner E J H., 1983: Beihefte Zur Nov Hedw., 75: 1-182 Furtado, 1962: Donk Rickia, 1: 227-241 Furtado J S., 1965: Mycologia, 57: 588-611 Furtado J S., 1967: Persoonia, 4(4): 379-389 Gottlieb A M and Wright J E., 1999: Mycol Res., 103(10): 1289-1298 TrÞnh Tam KiƯt, 2001: Danh lơc Thùc vËt ViƯt nam Phần Nấm Nxb Nông nghiệp Moncalvo J M & L Ryvarden, 1997: Synopsis Fungorum, 11: 1-114 Moncalvo J M., 2005: Inter J Med Mus.,7(3): 53-54 Pegler D N & Young T W K., 1973: Kew Bull., 28: 351-364 10 Perreau J., 1972: Rev Mycol Tome., XXXVII: 241-252 11 Ryvarden L & Johansen I., 1980: Preliminary polypore flora of East Africa Fungiflora 12 Ryvarden L., 1991: Genera of polypore Nomenclature and taxonomy Synopsis Fungorum Fungiflora, Oslo, Norway 13 Steyaert R L., 1972: Persoonia, 7: 55-118 14 Teng S C., 1996: Chinese Fungi Science Press, Beijing Mycotaxon Ltd Ythaca, New York USA 15 Lê Xuân Thám cs.,1995: T¹p chÝ Sinh häc, 17(4): 10-13 16 Le Xuan Tham, 1998: Mycotaxon, 69: 1-12 17 Lê Xuân Thám, 1999: Tạp chí Sinh học, 21(1): 4-7 18 Lê Xuân Thám & J M Moncalvo, 1999: T¹p chÝ Sinh häc, 21(4): 1-9 19 Lê Xuân Thám, 2005: Nấm Linh chi Ganodermataceae - Ngn d−ỵc liƯu q ë ViƯt Nam Nxb Khoa häc vµ Kü thuËt, Hµ Néi 20 Wu X L et al., 1998: Mycosystema, 17: 122129 21 Wu X L and Dai Y C., 2004: Coloured Illustration of Ganodermataceae of China 22 Zhao J D., 1989: Bibliotheca Mycologica, 132: 1-176 23 Zhao J D & Zhang X.Q., 2000: Ganodermataceae Flora Fungorum Sinicorum, 18: 1-204 44 THE FIRST REPRESENTATIVE OF NEWLY-RECORDED GENUS OF THE GANODERMATACEAE IN Cat Tien national park, Dong Nai, Lam Dong province VIETNAM: HUMPHREYA ENDERTII Le xuan tham, nguyen le quoc hung, pham ngoc duong, J M Moncalvo Summary The first representative of the genus Humphreya Stey newly-found in National Park of Cat Tien, South Vietnam, were identified and described as following: Humphreya endertii Stey Pileus stipitate, single, woody, also coriaceous-woody, applanate to central-depressed, orbicular or kidney shape, 3.6-11.5 cm in diam.; concentrically zonate and sulcate to rugose or smooth, variously radially plicate or concentrically wrinkled; margin acute to obtuse, sometimes deflexed, regular to undulate as many glossy plicates growing over each others, so that thickened Pilear cover opaque, red brown, red coffeate or yellow brown The crust on the upper surface of pileus red brown - red coffeate, glossy-laccate at first, but later becoming dull by spore dusts covering on, thin, easily broken when craking or pressing with fingers The crust of the stipe thicker, more laccate, shiningly glossy red brown The stipes long to very long (7.5-17.5 cm), cylindric (0.7-1.4 cm in diam.) The context thick 0.3-0.8 cm, up to > 1.1 cm in base part, creamy fleshy, composed of trimitic hyphae The tube layer quite thick (0.5-0.9 cm), grey creamy or pale cinnamon Pores round or angular, small (4-5/mm) with the surface creamy or pale grey or dark grey when touched The spores typically ganodermoid, honey yellow, medium sized 12.5-16.5 ì 9.5-11.5 àm, truncate - ovate with an yellow round guttule in the center The spore surface coarse reticulate (labirynth architecture) with very thick column layer from inner wall (up to 2.5 µm) The hyaline apex (germpore - aperture) very thick, concave or convex, opposite to the hilum on the bottom (the attachments of spores to sterigmata) Humphreya endertii was recorded only from type locality (Indonesia), in Malaysia and now found in South Vietnam In general, macro and micro-morphological characteristics of four representatives designated to Humphreya are dissolved in many groups of Ganoderma species with intermediate or transient taxa, particularly their ganodermoid basidiospore type and thus they should not be isolated as a distinct genus, but ranked as a subgenus or section in the genus Ganoderma Karst The germs were isolated and purified on PGA media for molecular examinations to support our discussions and for fruitful cultivations on mixed substrates to supply of materia medica Ngµy nhËn bµi: 20-7-2008 45 ... xuất phức hợp Humphreya, gồm loài chuyển tiếp đó, theo khóa định lọai đợc xây dựng cho phân lọai nhiều loài thuộc nhóm trung gian 43 Humphreya complex Bao gồm loài đợc ghi nhận chi Humphreya nh... loài phải xếp vào chi Humphreya Nghĩa ranh giới chi Ganoderma chi Humphreya không thật rõ tách biệt Có lẽ, hợp lý nên để chi Humphreya mức phân chi (subgenus) nhánh (section) chi Ganoderma Karst... láng bóng nh loài Humphreya vậy) Hiện nay, phối hợp với nhóm nghiên cứu quốc tế đại học Toronto, Canada (Moncalvo JM), Viện Bảo tàng tự nhiên Đài Trung, Đài Loan (Wu SH) đại học quốc gia Chung-Hsing,