Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu xác định tỷ lệ kiểu hình đề kháng của các trực khuẩn đường ruột tiết β-lactamase phổ rộng (ESBL) phân lập ở sinh viên và nhân viên y tế. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
TRỰC KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT TIẾT β -LACTAMASE PHỔ RỘNG (ESBL) PHÂN LẬP Ở SINH VIÊN VÀ NHÂN VIÊN Y TẾ Lê Kim Ngọc Giao1, Tống Phi Khanh1, Huỳnh Công Lý2, Ngơ T Quỳnh Hoa2∗ Võ T Chi Mai1,2 TĨM TẮT Mục tiêu: Xác định tỷ lệ kiểu hình đề kháng trực khuẩn ñường ruột tiết β-lactamase phổ rộng (ESBL) phân lập sinh viên nhân viên y tế Phương pháp: Nghiên cứu mô tả, tiền cứu, cắt ngang Sử dụng ChromIDESBL phân lập 162 mẫu phân từ sinh viên nhân viên y tế Xác ñịnh ESBL với phương pháp đĩa đơi gồm ceftazidime, cefepime, cefotaxime amoxicillin+ clavulanate Kết quả: Trong số 100 chủng tiết ESBL, vi khuẩn E coli chiếm tỉ lệ cao (82%) Tỉ lệ người khoẻ mạnh mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố cao khác ñối tượng số khảo sát (p < 0,05) 70,7% nhân viên y tế mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố, tỉ lệ 47,9% sinh viên Nguy mang trực khuẩn ñường ruột sinh ESBL NVYT cao gấp 2,6 lần sinh viên Ngồi ra, có 9/13 người nhà NVYT có vi khuẩn sinh ESBL đường tiêu hóa (69,2%) Kết luận: Vi khuẩn sinh ESBL ñang lan rộng cộng ñồng với tỉ lệ khác Cần ñề biện pháp cụ thể ñể ngăn chặn lây lan Từ khóa: β- lactamase phổ rộng, trực khuẩn đường ruột, sinh viên, nhân viên y tế, phương pháp ñĩa ñôi COLONIZATION OF ESBL-PRODUCING ENTEROBACTERIA IN STUDENTS AND HEALTH CARE PERSONS Le Kim Ngoc Giao*, Tong Phi Khanh*, Huynh Cong Ly**, Ngo Thi Quynh Hoa** Vo Thi Chi Mai*,** ABSTRACT Objective: To study prevalence of fecal carriage of the ESBL-producing enterobacteria in students and health care persons Methods: Descriptive, prospective, cross-sectional study was carried out with 162 stool specimens of 121 young students from Faculty of medical technologies and 41 health care persons ChromID-ESBL® agar was used for screening ESBLproducing enterobacteria which were then determined with double disk technique using ceftazidime, cefepime, cefotaxime and amoxicillin+clavulanate impregnated disks Results: One hundred isolates of ESBL-producing enterobacteria were detected, among them E coli were of highest prevalence (82%) Colonization of ESBL-producing bacteria in healthy carriers is of high rate and quite different between two studied objects (p < 0.05) The rate is of 70.7% health care persons and 47.9% of young students The risk in health care people is 2.6 compared to medical students Moreover, we found ESBL positive in 9/13 stool specimens (i.d 69.2%) of relatives of health care people Conclusions: ESBL-producing enterobacteria spread vigorously in community at different rates It is urged to put into practice various procedures for managing this condition Đại học Y Dược Tp HCM (University of Medicine and Pharmacy of Ho Chi Minh City) Khoa Vi sinh, bệnh viện Chợ Rẫy (Department of Microbiology, Cho Ray Hospital) * ñã (deceased) Người liên hệ: Võ Thị Chi Mai, : maivtc@ump.edu.vn, 84 903954320 Keywords: ESBL, enterobacteria, students, health care persons, double disk technique ĐẶT VẤN ĐỀ Đề kháng kháng sinh vấn ñề ñược quan tâm nghiên cứu sâu rộng giới Vi khuẩn tiết β-lactamase phổ rộng (ESBL) có khả bất hoạt hầu hết kháng sinh họ β-lactam ñang dùng phổ biến nay, đồng thời có tỉ lệ đề kháng chéo cao với họ kháng sinh khác nhóm β-lactam fluoroquinolone aminoglycoside Xuất ñầu tiên vào năm 1983, ñến vi khuẩn sinh ESBL ñã lan rộng khắp giới, chịu trách nhiệm cho nhiễm khuẩn bệnh viện ñang dần gây nên nhiễm khuẩn cộng đồng Tại Việt Nam nói chung thành phố Hồ Chí Minh nói riêng, nghiên cứu nhiễm khuẩn bệnh nhân cho thấy tỉ lệ vi khuẩn sinh ESBL dao ñộng từ 18,5% ñến 61,7%, ñó tỉ lệ Bệnh viện Chợ Rẫy 51,6% E coli 61,7% Klebsiella pneumoniae sinh ESBL [2], [8] Có nghiên cứu chủng vi khuẩn chiếm cư đường tiêu hóa Năm 2008, chúng tơi thực nghiên cứu bệnh nhân không mắc hội chứng nhiễm khuẩn tiêu hóa đến khám lý khác cho thấy tình trạng chiếm cư đường ruột vi khuẩn tiết ESBL 76,4%, chủ yếu E.coli (65,8%) Điều chứng tỏ vi khuẩn sinh ESBL ñang lan rộng cộng ñồng Cộng ñồng dân cư gồm nhiều ñối tượng khác tuổi tác, nghề nghiệp, mức sống, trình độ học vấn, nơi cư trú,… Liệu có khác biệt tỉ lệ mang vi khuẩn sinh ESBL ñối tượng khác nhau? Nhân viên y tế người tiếp xúc với bệnh nhân ngày, môi trường sử dụng kháng sinh thường xuyên Sinh viên ña số niên ñộ tuổi 18-25, lứa tuổi khoẻ mạnh đời người Chúng tơi tiến hành khảo sát hai ñối tượng ñặc biệt nhằm xác ñịnh tỉ lệ trực khuẩn ñường ruột tiết β-lactamase phổ rộng (ESBL) phân lập ñược họ, với mong muốn hiểu rõ tình hình mang vi khuẩn sinh ESBL cộng ñồng dân cư VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Nghiên cứu mô tả, tiền cứu, cắt ngang Thu thập bệnh phẩm: 121 mẫu phân lấy từ sinh viên khoẻ mạnh 41 mẫu phân lấy từ nhân viên y tế bệnh viện ñang cư trú ñịa bàn TpHCM từ tháng 12/ 2008 ñến tháng 11/ 2009 Mỗi mẫu phân lấy kết phân lập ñầu tiên Phương pháp: Mẫu phân cấy lên mơi trường ChromID-ESBL để sàng lọc ESBL mơi trường MC để kiểm chứng Vi khuẩn ni cấy, định danh thử nghiệm sinh hóa thường quy áp dụng mơn Vi sinh Xác định ESBL phương pháp đĩa ñôi với ñĩa kháng sinh (BioRad) ceftazidime, cefepime, cefotaxime ñặt xung quanh cách tâm ñĩa amoxicillin+clavulanate ≈ 22mm Kiểm tra chất lượng ñược thực với E coli ATCC 25922, K pneumoniae ATCC 700603 theo khuyến cáo CLSI 2009 Kết 1/ Trong thời gian năm, chúng tơi thu thập 121 mẫu từ sinh viên khoa Điều dưỡng-Kỹ thuật y học khoá 05, 06, 07, 08; 41 mẫu từ nhân viên y tế (NVYT) công tác Đại học Y Dược TpHCM, Bệnh viện Chợ Rẫy Bệnh viện Bình Chánh Bảng 1: Đặc điểm mẫu nghiên cứu Giới Tuổi Nơi cư ngụ Nghề nghiệp Tần số % Nam 63 38,9 Nữ 99 61,1 3- 20 tuổi 14 8,6 21- 30 tuổi 114 70,4 31-40 tuổi 26 16,1 41-50 tuổi 3,7 > 50 tuổi 1,2 Nội thành 89 54,9 Ngoại thành 73 45,1 Sinh viên 121 74,7 NVYT 41 25,3 162 100 Tổng cộng Độ tuổi trung bình 26,43 ± 6,9, cao 54 thấp 19 tuổi 2/ Tỉ lệ cấy dương tính 100%, chủ yếu vi khuẩn E coli, Klebsiella spp Citrobacter spp 87 mẫu có vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố, chiếm tỉ lệ 53,7%, 13 mẫu (14,9%) mang loại vi khuẩn sinh ESBL E.coli chiếm ña số (82%) số 100 vi khuẩn tiết ESBL phân lập ñược Bảng Kết phân lập vi khuẩn sinh ESBL Vi khuẩn có ESBL+ Tỷ lệ % E.coli 82 Klebsiella spp 14 Citrobacter spp Tổng cộng 100 3/ Mối tương quan người mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố với nghề nghiệp Bảng Esbl + Esbl - Sinh viên 58 (47,9%) 63 121 Nhân viên y tế 29 (70,7%) 12 41 87 (53,7%) 75 162 p= 0,01 ; OR= 2,6 (khoảng tin cậy 95%: 1,2 – 5,6) Có khác biệt tỉ lệ nhân viên y tế sinh viên mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố Nhân viên y tế có nguy mang vi khuẩn sinh ESBL gấp 2,6 lần so với sinh viên Ngoài ra, chúng tơi đồng thời thu thập 13 mẫu phân người nhà NVYT, tỉ lệ mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố 9/13= 69,2% 4/ Trong cơng trình này, chúng tơi khơng tìm thấy mối tương quan người mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố với yếu tố: tuổi, giới, nơi cư ngụ, tiền sử bệnh ñường tiêu hố việc sử dụng kháng sinh vòng tháng trước lấy mẫu BÀN LUẬN Tỉ lệ người khoẻ mạnh mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư ñường tiêu hố nghiên cứu 53,7%, tương đương nghiên cứu Thái Lan thực năm 2010 58,2% [6] cao nhiều so với nghiên cứu Tây Ban Nha (5,5%) [7] Rõ ràng lan rộng vi khuẩn ña kháng thuốc vấn ñề nghiêm trọng nước ñang phát triển Trong 100 chủng vi khuẩn sinh ESBL phân lập ñược, chiếm ña số E.coli với tỷ lệ 82% Kết thu ñược phù hợp với nghiên cứu khác ngồi nước Các tác giả nhận xét E coli loại vi khuẩn thường gặp nhóm vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố [3], [6], [7] Có khác biệt tỉ lệ mang vi khuẩn sinh ESBL ñối tượng nghiên cứu (p< 0,05) Tỉ lệ NVYT mang vi khuẩn sinh ESBL 70,7% tỉ lệ sinh viên mang vi khuẩn sinh ESBL 47,9% Nhân viên y tế có nguy mang vi khuẩn sinh ESBL cao gấp 2,6 lần so với sinh viên Có lẽ yếu tố: thường xuyên tiếp xúc với bệnh nhân, mơi trường có mức độ sử dụng kháng sinh cao, ñiều kiện vệ sinh chưa ñảm bảo tuyệt ñối ñã tạo nên khác biệt Ngoài ra, chúng tơi có tỉ lệ người nhà NVYT mang vi khuẩn sinh ESBL 69,2% Nghiên cứu Aranzazu Valverde thực Tây Ban Nha cho thấy tỉ lệ người nhà bệnh nhân mang vi khuẩn sinh ESBL cao tỉ lệ người khoẻ mạnh cộng ñồng (16,7% so với 3,7% (p= 0,004)) [7] Rõ ràng vi khuẩn sinh ESBL ñang lan tràn cộng ñồng, từ mơi trường bệnh viện lan sang NVYT, đến người nhà NVYT cộng đồng Tuy nhiên để có chứng xác nhất, cần có nghiên cứu gen, tìm hiểu giống chủng vi khuẩn phân lập ñược Người mang chủng ESBL chiếm cư đường tiêu hóa mang yếu tố nguy cho sức khỏe nhiễm khuẩn tiết niệu nhiễm khuẩn ổ bụng hầu hết E coli nội sinh [5] Ngoài ra, việc tăng tỉ lệ người mang ESBL chiếm cư đường tiêu hóa làm tăng nguy nhiễm cho người khác thông qua đường lây truyền từ người sang người thơng qua môi trường [4], làm tăng tỉ lệ gen kháng thuốc giúp cho vi khuẩn nhạy cảm dễ dàng tiếp nhận gen kháng thuốc [1] Điều ñáng lo ngại hơn, người khoẻ mạnh mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường tiêu hố người “tàng trữ” vi khuẩn khơng ai, kể thân họ biết họ ñang mang vi khuẩn đa kháng thuốc người Vì vậy, cần có biện pháp cấp bách cụ thể ñể hạn chế ñến mức thấp lây lan này, nhằm bảo vệ sức khoẻ cho cộng ñồng Trong nghiên cứu chúng tơi khơng tìm thấy mối tương quan người mang vi khuẩn sinh ESBL việc sử dụng kháng sinh vòng tháng trước lấy mẫu (p> 0,05) Nhiều nghiên cứu khác tìm thấy khác biệt Có lẽ, mẫu nghiên cứu chúng tơi khơng đủ lớn để tìm thấy khác biệt, quan trọng hơn, việc sử dụng kháng sinh nước ta vô dễ dàng tuỳ tiện, người bệnh đơi khơng biết khơng nhớ có sử dụng kháng sinh, điều ñã làm ảnh hưởng ñến kết nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO Canton, R., T.M Coque and F Baquero “Multi-resistant gram negative bacilli: from epidemics to endemics” 2003 Curr Opin Infect Dis 16: 315-325 Chu Thị Nga, Hoàng Đăng Mịch “Tỉ lệ sinh beta-lactamase phổ rộng ESBL chủng Klebsiella, E coli Enterobacter phân lập bệnh viện Việt Tiệp Hải Phòng từ 1-7-2005 đến 316-2006” Tạp chí y học Việt Nam 2007, 11 (1): 9-15 Kader AA, Kumar A, Kamath KA (2007), “Fecal carriage of extended- spectrum beta-lactamase producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae in patients and asymtomatic heathy individuals”, Infect Control Hosp Epidemiol, 28: 1114-1116 Levin, B R (2001) “Minimizing potential resistance: a polulation dynamics view” Clin Infect Dis 33(Suppl 3): 161-169 Livermore D and Paterson D (2005) “Pocket guide to extended-spectrum β-lactamase in resistance” Current medecine group Sasaki T, Hirai I, Niki M, Nakamura T et al (2010), “High prevalence of CTX-M betalactamase producing Enterobacteriaceae in stool speciments obtained from healthy individuals in Thailand”, J Antimicrob Chemother, 65: 666-668 Valverde A, Teresa M Coque, M Paz sanchez-Moreno, Azucena Rollan, Fernando Baquero and Rafael Canton (2004), “ Dramatic increase in prevalence of fecal carriage of extended-spectrum beta-lactamase producing Enterobacteriaceae during nonoutbreak situations in Spain”, Journal of clinical microb, 42(10): 4769-4775 Võ Thị Chi Mai Study for monitoring antimicrobial resistance trends, (SMART) bệnh viện Chợ Rẫy năm 2005 Báo cáo kết nghiên cứu bệnh viện Chợ Rẫy năm 2006 ... ESBL 70,7% tỉ lệ sinh viên mang vi khuẩn sinh ESBL 47,9% Nhân viên y tế có nguy mang vi khuẩn sinh ESBL cao gấp 2,6 lần so với sinh viên Có lẽ y u tố: thường xuyên tiếp xúc với bệnh nhân, mơi trường... - Sinh viên 58 (47,9%) 63 121 Nhân viên y tế 29 (70,7%) 12 41 87 (53,7%) 75 162 p= 0,01 ; OR= 2,6 (khoảng tin c y 95%: 1,2 – 5,6) Có khác biệt tỉ lệ nhân viên y tế sinh viên mang vi khuẩn sinh. .. hố Nhân viên y tế có nguy mang vi khuẩn sinh ESBL gấp 2,6 lần so với sinh viên Ngồi ra, chúng tơi đồng thời thu thập ñược 13 mẫu phân người nhà NVYT, tỉ lệ mang vi khuẩn sinh ESBL chiếm cư đường