Tác dụng kháng khuẩn của loxain trên invitro và điều trị bỏng trên mô hình bỏng ở chuột cống trắng

Chế phẩm Loxain được dùng đánh giá tác dụng kháng khuẩn trên Invitro và tác dụng điều trị bỏng trên mô hình gây bỏng nhiệt thực nghiệm.Tác dụng kháng khuẩn của Loxain được tiến hành trên Invitro, thử trên 4 chủng quốc tế là Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Staphylococcus aureus (ATCC 25913), Escherichia coli (ATCC 25922), Klebsiella pneumoniae (ATCCBAA - 1705).

TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC TÁC DỤNG KHÁNG KHUẨN CỦA LOXAIN TRÊN INVITRO VÀ ĐIỀU TRỊ BỎNG TRÊN MÔ HÌNH BỎNG Ở CHUỘT CỐNG TRẮNG Trần Thanh Tùng1, Phạm Thị Vân Anh1, Nguyễn Trọng Thông1, Đào Kim Long2 Bộ môn Dược lý – Trường Đại học Y Hà Nội Công ty Cổ phần Sản xuất Thương mại Nam Y Aurvini Chế phẩm Loxain dùng đánh giá tác dụng kháng khuẩn Invitro tác dụng điều trị bỏng mơ hình gây bỏng nhiệt thực nghiệm.Tác dụng kháng khuẩn Loxain tiến hành Invitro, thử chủng quốc tế Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Staphylococcus aureus (ATCC 25913), Escherichia coli (ATCC 25922), Klebsiella pneumoniae (ATCCBAA - 1705) Chuột cống trắng chủng Wistar hai giốngđược chia thành nhóm, nhóm khơng tác động gì, nhóm - gây bỏng nhiệt phía trước đùi với kích thước tương tự nhau, sau nhóm bơi dầu cọ lần/ngày, lô bôisulfadiazin - bạc lần/ngày, lô bôi tương ứng Loxain lần/ngày lần/ngày liên tục 21 ngày Sau giết chuột, lấy mẫu da vết bỏng để làm giải phẫu bệnh Kết nghiên cứu cho thấy: Loxain nồng độ từ 0,025 - 0,4g/ml không ức chế chủng vi khuẩn thử Trên mơ hình gây bỏng nhiệt thực nghiệm: Ở lô dùng Loxain thời gian liền khỏi vết thương bỏng diễn nhanh, hiệu điều trị vết thương bỏng Loxain bôi lần/ngày lần/ngày tương đương tương đương với lô dùng sulfadiazin - bạc 21 ngày điều trị liên tục Từ khóa: Loxain, tác dụng kháng khuẩn, chuột cống chủng Wistar, bỏng nhiệt da, liền sẹo I ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, có nhiều loại thuốc dùng để điều Bỏng chấn thương thường gặp, có nhiều trị chỗ vết thương bỏng sản xuất nguyên nhân gây nhiệt, hoá chất, nước nhập từ nước ngồi Ở phóng xạ , bỏng nhiệt hay gặp nước, số thuốc y học cổ truyền nhất, chiếm tới 84 - 94% tổng số nạn nhân nghiên cứu, kế thừa, dựa sở khoa học bỏng [1] Tuỳ mức độ bỏng mà bệnh nhân ứng dụng lâm sàng như: cao phải chịu ảnh hưởng với mức mỡ Maduxin từ sến, mật ong, Chitosan độ khác nhau, bệnh nhân bỏng thường phải [2 - 6] Bên cạnh thuốc y học cổ truyền, điều trị dài ngày, tốn Nếu điều trị không chất kháng khuẩn, kháng sinh tốt để lại di chứng lâu dài sử dụng phổ biến điều trị chỗ vết cho người bệnh làm ảnh hưởng đến thẩm thương bỏng nước ta giới mỹ, khả lao động, sinh hoạt, chí kem sulfadiazine - bạc 1% [7] gây tử vong cho người bệnh Các thuốc nước ngồi có tác dụng tương đối tốt chi phí cao khơng phù hợp với đại phận bệnh nhân nước ta nói Địa liên hệ: Trần Thanh Tùng, Bộ môn Dược lý, Trường Đại học Y Hà Nội chung bệnh nhân bỏng nói riêng Việc Email: tranthanhtung@hmu.edu.vn nghiên cứu tìm kiếm thuốc từ nguồn Ngày nhận: 02/3/2017 nguyên liệu nước, có trữ lượng dồi dào, Ngày chấp thuận: 25/4/2017 giá thành không cao, tác dụng điều trị chỗ TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC vết thương bỏng tốt đặt aeruginosa công tác điều trị bỏng aureus (ATCC 25913), Escherichia coli (ATCC Loxain có thành phần chủ yếu curcumin 25922), (ATCC 27853), Klebsiella Staphylococcus pneumoniae(ATCCBAA- β-caroten, hai hoạt chất có nhiều 1705) nhập, bảo quản nuôi cấy củ nghệ gấc, loại củ, nghiên cứu Khoa Vi sinh, Bệnh viện Hữu phổ biến nước ta β-caroten có tác dụng nghị Việt Đức tăng sức đề kháng thể, kích thích biệt hố tế bào biểu mô, sinh tiết nhầy [8] Curcumin chứng minh có tác dụng kháng khuẩn nhanh liền sẹo Theo nghiên cứu Mehrabani cộng curcumin dạng kem 2% có tác dụng làm giảm diện tích vết bỏng nhanh liền sẹo mơ hình gây bỏng nhiệt chuột cống chủng SpragueDawley [9] 1.3 Động vật nghiên cứu Chuột cống chủng Wistar hai giống, khoẻ mạnh, cân nặng 285 ± 30g Trung tâm động vật thí nghiệm Đan Phượng - Hà Tây cung cấp Động vật ni phòng thí nghiệm ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu điều kiện phòng thí nghiệm với đầy đủ thức ăn nước uống Bộ môn Dược lý - Trường Đại học Y Hà Nội Dựa sở đó, đề tài tiến hành nhằm nghiên cứu tính kháng khuẩn sản phẩm Loxain Invitro, đánh giá tác dụng điều trị bỏng chế phẩm Loxain mơ hình gây bỏng nhiệt thực nghiệm chuột cống trắng II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Đối tượng Phương pháp 2.1 Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn Loxain Invitro * Chuẩn bị thuốc thử: Pha loãng bậc dung dịch thử nghiệm vào ống tube (1, 2, 4, 8, 16, 32) dầu cọ Dung dịch gốc có độ đậm đặc cao nên nồng độ pha loãng từ 1/2 - 1/32 chọn để 1.1 Thuốc chất liệu nghiên cứu - Thuốc nghiên cứu: Loxain dạng dung dịch 500ml chất lỏng suốt, màu đỏ cam đồng Nồng độ 1,6g dược liệu/ml, Công ty Cổ phần sản xuất thương mại Nam Y Aurvini sản xuất, đạt tiêu chuẩn sở Loxain pha loãng dung môi dầu cọ - Thuốc dùng nghiên cứu: Sulfadiazinbạc (biệt dược Silvadene®) dạng kem bơi 1% sản phẩm Công ty cổ phần Dược Trung Ương Huế (Medipharco) 1.2 Chủng vi khuẩn mẫu quốc tế đánh giá hoạt tính kháng khuẩn * Chuẩn bị huyền dịch: Chủng vi khuẩn cần thử nuôi cấy thuần, qua đêm Lấy - khuẩn lạc hòa tan vào nước muối 0,9%, điều chỉnh để đạt huyền dịch có nồng độ 0,5 Mac Farland (tương đương 108 CFU/1ml) - Trong vòng 15 phút sau, pha lỗng huyền dịch canh thang Muller-Hinton vô trùng (đối với vi khuẩn dễ mọc) canh thang Muller - Hinton có 2,5-5 % máu cừu, để đạt nồng độ x 105 CFU/1ml Pha loãng huyền dịch với dung dịch chứa vi khuẩn để có Bốn chủng vi khuẩn quốc tế: Pseudomonas TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Loxain với nồng độ từ 0,025 - 0,4g dược liệu/ml Nhận định kết quả: tìm nồng độ ức chế tối thiểu - Ủ ống tube 37 C/18 - 24 Sau thời gian ủ ấm trên, lấy dịch tube cấy 2.2 Đánh giá tác dụng Loxain mơ hình gây bỏng thực nghiệm vào thạch máu Ủ đĩa thạch 370C/18-24 giờ, có khơng có CO2 tùy thuộc vào chủng vi khuẩn cần thử Kiểm tra đĩa thạch máu xem mọc vi khuẩn: đạt đĩa chứng, vi khuẩn mọc tốt tất đĩa vi khuẩn mọc nhất, xác định nồng độ ức chế tối thiểu Trong nghiên cứu với chủng vi khuẩn pha loãng nồng độ: 1/2, 1/4, 1/8, 1/16 Chuột chia thành lô, lô 13 con: - Lô (chứng sinh học): không gây tổn thương bỏng - Lô (mô hình): gây bỏng da Bơi dầu cọ lần/ngày - Lô (chứng dương): gây bỏng da Bôi sulfadiazin - bạc lần/ngày - Lô (Loxain liều thấp): gây bỏng da 1/32 so với dung dịch gốc Mỗi nồng độ Bôi Loxain lần/ngày - Lô (Loxain liều cao): gây bỏng da thử mẫu với chủng vi khuẩn Bôi Loxain lần/ngày Bôi thuốc dầu cọ N0 Gây bỏng N7 N14 Đo diện tích vết bỏng 2.3 Sơ đồ nghiên cứu quy trình gây N21 Đo diện tích vết bỏng, giải phẫu bệnh vết bỏng * Cách thức bôi thuốc bỏng nhiệt Dầu cọ, sulfadiazine - bạc Loxain Chuột lô gây tổn thương bỏng nhỏ 0,1 ml/1vết bỏng, sau xoa lần/1 da theo mơ hình gây bỏng nhiệt vết bỏng 15 giây, đảm bảo phủ kín vết dụng cụ kim loại theo mô tả Durmus AS cộng sự, Vũ Thị Ngọc Thanh [6; 10] * Cạo lông chuột gây bỏng bỏng Khoảng cách lần bôi cách 2.4 Chỉ số nghiên cứu Cạo lơng chuột vị trí ngang mào chậu với diện tích bên x 6cm.Vật gây bỏng kim loại (nặng 200g, đường kính 2,5 cm) * Tỷ lệ chết chuột sau gây bỏng Sau gây bỏng, chuột nuôi nhúng nước sôi 100 C chuồng riêng biệt cho ăn uống nước đạt nhiệt độ định, đặt vng góc lên vị trí hàng ngày chuồng Đồng cạo lôngchuột 35 giây không tác thời tiến hành quan sát, ghi lại ngày chết động thêm lực từ bên chuột lơ tương ứng (nếu có) TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC * Chỉ số hình thái đại thể Tình trạng tổn thương vết bỏng: sưng, nóng, đỏ, phù nề quan sát mắt thường ghi lại máy ảnh kỹ thuật số Vết bỏng khỏi lúc bề mặt khô, mép vết bỏng tiến gần nhau, quan sát thấy không tượng sưng tấy vết bỏng Đo diện tích vết bỏng Xử lý số liệu: Số liệu xử lý theo thuật toán thống kê Microsoft Office Excel 2007 Kiểm định khác biệt giá trị trung bình thuật tốn χ2, sử dụng t-test Student Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê, p < 0,05 III KẾT QUẢ ngày 7, 14, 21 sau gây bỏng Tính Đánh giá tác dụng Loxain phần trăm phục hồi tổn thương Cách đo: áp giấy lên vùng tổn In vitro thương, dùng bút lông ghi lại theo viền tổn Loxain với nồng độ từ 0,025 - 0,4g dược thương, sau scan lại hình ảnh đó, đo diện liệu/ml thử chủng vi khuẩn Quốc tích phần mềm ImageJ Basics ver 1.38 tế Tổ chức Y tế Thế giới công nhận K.pneumoniae cho kết vi khuẩn mọc phần mềm để đo diện tích cho nghiên cứu bình thường, khơng có khác biệt nhóm y sinh học chứng nhóm dùng thuốc thử Nên chúng P.aeruginosa, S.aureus, E.coli, chưa xác định nồng độ ức chế tối * Chỉ số hình thái vi thể thiểu Loxain Tại thời điểm 21 ngày, lúc vết bỏng bong hết vẩy hồi phục khỏi, chuột gây mê, lấy mô bệnh học ngẫu nhiên chuột lơ vị trí trung tâm tổn thương Đánh giá tăng sinh tế bào sợi, tăng sinh mạch máu, tăng sinh sợi collagen, tỷ lệ biểu mơ hóa vết thương Tác dụng Loxain mơ hình bỏng nhiệt thực nghiệm Tỷ lệ chết lô chuột Thời gian sau gây bỏng tỷ lệ chuột chết ghi lại theo bảng sau: Bảng Tỷ lệ chuột chết lô chuột sau gây bỏng Lơ Mơ hình Chứng dương Loxain liều thấp Loxain liều cao Tỷ lệ chuột chết 2/13 0/13 1/13 1/13 Theo dõi nghiên cứu cho thấy: chuột chết thời gian từ ngày đến ngày sau gây bỏng, ban đầu nhận thấy chuột giảm vận động, ăn dần bỏ ăn bỏ uống nước sau tử vong, tỷ lệ chết lô bôi dầu cọ cao (2/13), Loxain liều có tỷ lệ chết (1/13), lô bôi sulfadiazine - bạc thấp (0/13) 10 TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC 2.2 Diễn biến đại thể vết bỏng Ngay sau dùng nhiệt để gây bỏng: vết bỏng có màu trắng ngà, khơng phồng rộp, có ranh giới rõ với vùng da lành Khoảng - sau, rìa xung quanh vết bỏng nhìn rõ quầng sung huyết Ảnh minh hoạ: chuột số 13 sau gây bỏng Ảnh Da chuột sau gây bỏng Các vết bỏng bôi dầu cọ - Sau ngày, 100% vết bỏng có loét Vết bỏng tình trạng hoại tử, bề Ảnh Da chuột sau gây bỏng - Ngày thứ 14, vết bỏng bong vảy tiết nhanh, vết bỏng khơ, hình thành sẹo sớm, vùng tổn thương nhỏ mặt có nhiều ổ lt Các vết loét rộng dần, - Ngày thứ 21, hầu hết vết bỏng hồi chiếm khoảng 50 - 55% diện tích bề mặt vết phục, tạo thành sẹo nhỏ phẳng so với mặt da bỏng, chứa nhiều dịch tiết mầu đục Vùng xung quanh vết bỏng phù nề, có ranh giới với vùng da lành - Sau ngày, đa số vết loét chảy dịch, số vết lt khơ bắt đầu hình thành vảy tiết Vùng da xung quanh vết bỏng sung huyết - Sau 13 - 14 ngày, tất vết bỏng Mức độ thu hẹp diện tích bỏng Sau ngày dùng thuốc, diện tích bỏng khơng có khác biệt tất lô nghiên cứu Từ ngày thứ 14 sau dùng thuốc, diện tích vết bỏng bắt đầu thu hẹp rõ rệt Kết trình bày bảng Loxain liều có tác dụng làm thu hẹp hình thành vảy tiết 14/22 vết bỏng bắt diện tích bỏng nhanh lô chứng bôi dầu đầu bong vảy để lộ vùng tổn thương phía phục hồi, vết bỏng khô Vùng cọ vào ngày 14 21 sau dùng thuốc, da xung quanh tổn thương khơng sung huyết độ thu hẹp diện tích bỏng lô bôi Loxain so - Ngày thứ 21, tất vết bỏng bong vảy, 5/22 vết bỏng ướt, số lại hầu hết thời điểm (p > 0,05) khô, vùng da tổn thương thu hẹp thu hẹp diện tích vết bỏng tương đương * Các vết bỏng bôi sulfadiazin-bạc 1%, Loxain liều thấp Loxain liều cao thời điểm 14 21 ngày (p > TCNCYH 107 (2) - 2017 khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Mức với lô bôi sulfadiazine - bạc 1% tương đương Loxain liều thấp liều cao có tác dụng làm 0,05) bảng 11 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Bảng Phần trăm thu hẹp diện tích vết bỏng da chuột Thời điểm Thu hẹp diện tích vết bỏng (%) X ± SD N14 79,24 ± 8,95 N21 87,36 ± 2,83 (chứng dương) N14 87,12 ± 5,24 p3-2 < 0,05 N21 95,84 ± 1,79 p3-2 < 0,05 (loxain liều thấp) N14 88,90 ± 5,08 p4-2 < 0,05 p4-3 > 0,05 N21 94,20 ± 2,61 p4-2 < 0,05 p4-3 > 0,05 (loxain liều cao) N14 89,19 ± 5,45 p5-2 < 0,05 p5-3 > 0,05 p5-4 > 0,05 N21 94,33 ± 3,33 p5-2 < 0,05 p5-3 > 0,05 p5-4 > 0,05 Lô p (mơ hình) Giải phẫu bệnh vi thể da vết bỏng Cấu trúc vi thể da chuột vị trí tổn thương bỏng tiến hành thời điểm 21 ngày sau gây bỏng, lô lấy ngẫu nhiên chuột, kết tóm tắt sau Bảng Giải phẫu bệnh da chuột sau 21 ngày Lô Mã chuột Kết 1, 2, Da chuột bình thường Các lớp thượng bì, trung bì, hạ bì nguyên vẹn Dầu cọ 15, 21, 22 Thượng bì tổn thương nhiều, bắt đầu có tượng tăng sinh xơ tổ chức xung quanh Viêm xung huyết mức độ vừa lớp thượng bì Sulfdiazin - bạc 1% 25, 26, 33 Thượng bì tổn thương ít, có tượng tăng sinh xơ có tượng liền sẹo, tượng xung huyết vùng lớp thượng bì Loxain liều thấp 37, 44, 45 Thượng bì tổn thương ít, có tượng tăng sinh xơ mạnh liền sẹo, tượng xung huyết vùng lớp thượng bì Loxain liều cao 50, 53, 56 Thượng bì tổn thương ít, có tượng tăng sinh xơ mạnh có tượng liền sẹo, tượng xung huyết vùng lớp thượng bì Chứng sinh học 12 TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Ảnh Chuột số (chứng sinh học) (HE x 10) Da chuột bình thường Ảnh Chuột số 22 (bơi dầu cọ) (HE x 100) 1: Tổn thương dạng bọng nước 2: Biểu bì Tổn thương bỏng dạng bọng nước, tổ 1: Tuyến bã, tuyến tiết mồ hôi 2: Lớp biểu bì bị tổn thương chức bắt đầu tái tạo mới: tế 3: Chân bì tổ chức hạt mao mạch Ảnh Chuột số 25 (bôi sulfadiazine - bạc 1%) (HE x 100) 1: Xung huyết; 2: Chân bì Còn tổn thương nhẹ, tổ chức tái tạo bào lympho, tương bào xen lẫn tăng sinh Ảnh Chuột số 37 (bôi Loxain liều thấp) (HE x 400) 1: Xung huyết; 2: Bọng nước; 3: Biểu bì; 4: Tế bào viêm Tổn thương bỏng ít, bỏng nước nhỏ hình thành, tổ chức tái tạo mới: tăng sinh tổ chức hạt tân mạch Ảnh Chuột số 53 (bôi Loxain liều cao) (HE x 10) 1: Sẹo hình thành; 2: Vùng khơng có tuyến da; 3: Tuyến da; 4: Biểu bì Da chuột hình thành sẹo TCNCYH 107 (2) - 2017 13 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Có khác biệt rõ cấu trúc hình thái vi thể da vùng bỏng lô bôi dầu cọ lô bôi thuốc - Tại vết bỏng bôi dầu cọ: vùng vết bỏng biểu bì che phủ Chưa thấy có tượng tăng sinh tế bào lớp đáy chưa thấy có tượng tăng sinh xơ lớp thượng bì có tượng xâm nhập tế bào thực bào lympho bào - Tại vết bỏng bơi thuốc: vùng vết bỏng biểu bì che phủ rộng, tổn thương Có tượng tăng sinh tế bào lớp đáy tổ chức xơ lớp thượng bì Một số chuột có tượng hình thành sẹo rõ rệt (vùng da khơng có tổ chức tuyến da) Tuy nhiên, tượng sung huyết số vết bỏng IV BÀN LUẬN Loxain sản phẩm từ lâu dùng cho trường hợp bỏng napan giới tìm hiểu chứng minh tác dụng curcumin β - caroten Y học [8] chiến tranh vết thương nguyên nhân Dựa vào sở khoa học trên, khác zona, vết thương hở,… cho kết chọn Loxain làm nguyên liệu nghiên liền da nhanh, an toàn người cứu mơ hình gây bỏng nhiệt chuột cống bệnh đánh giá cao, mục đích nghiên chủng Wistar nhằm tìm loại thuốc điều trị nhằm chứng minh hiệu tính an tồn chỗ vết thương bỏng sản xuất từ nhằm phát triển Loxain trở thành thuốc chữa nguyên liệu có sẵn nước nhằm thay bỏng.Thành phần chủ yếu curcumin β- cho thuốc nhập ngoại đắt tiền caroten chiết xuất từ củ nghệ tinh dầu gấc - hai nguyên liệu phổ biến nước ta Đã có nghiên cứu khoa học chứng minh tác dụng curcumin β - caroten vết thương nói chung vết bỏng nói riêng, vai trò tăng cường khả miễn dịch[8] Curcumin thành phần chủ yếu củ nghệ, loại củ phổ biến nước ta Củ nghệ biết đến từ lâu loại củ có tác dụng nhanh liền sẹo, rút ngắn thời gian liền vết thương sử dụng rộng rãi β - caroten ba tiền chất vitamin A, có nhiều loại củ có màu như: gấc, cà rốt rau xanh Vitamin A có vai trò quan trọng thiếu cho hoạt động số quan thể: mắt, da tổ chức da, hệ thống miễn dịch Đã có nhiều nghiên cứu nước 14 Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn Loxain tiến hành Khoa Vi sinh – Bệnh viện Hữu nghị Việt Đức sở có đầy đủ trang thiết bị cần thiết như: chủng vi khuẩn mẫu quốc tế, dụng cụ nuôi cấy, cán tham gia nghiên cứu người có kinh nghiệm Sau ni cấy tìm nồng độ ức chế tối thiểu lên chủng vi khuẩn Loxain invitro lấy mẫu bệnh phẩm vết thương bỏng để nuôi cấy đánh giá tác dụng kháng khuẩn Loxain Với chủng vi khuẩn pha loãng nồng độ: 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 so với dung dịch gốc, với nồng độ hoà với Loxain tương ứng với nồng độ 0,025 0,4g dược liệu/ml Kết cho thấy tất nồng độ pha loãng chưa tìm nồng độ Loxain tối thiểu ức chế TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC chủng vi khuẩn Do không gian hay gây tử vong bỏng (giai tiến hành lấy mẫu bệnh phẩm vết thương đoạn nhiễm trùng, nhiễm độc từ ngày đến để nuôi cấy đánh giá tác dụng kháng ngày 20) khuẩn Kết cho thấy, lô bôi sulfadiazine -bạc Đối tượng nghiên cứu chuột cống dễ không bị tử vong sulfadiazine -bạc có tính dàng tạo tình trạng vết thương với tiêu kháng khuẩn làm giảm q trình nhiễm khuẩn chuẩn loại, kích thước, độ sâu vết thương vết bỏng Cả lô bôi tá dược Loxain cách phù hợp [10] Chuột cống lồi có có chuột bị tử vong, nhiên lô bôi Loxain sức chịu đựng cao, sức đề kháng tốt phù liều thấp liều cao có tỷ lệ chết cao so hợp việc gây mơ hình vết thương da với lơ chứng dương (Bảng 1) Loxain làm Bên cạnh đó, chuột cống trắng loài động vật giảm số chuột chết so với lơ mơ hình (bơi dầu phổ biến, phù hợp với điều kiện nhiều cọ) sản phẩm có tác dụng tạo phòng thí nghiệm, lựa hàng rào bảo vệ chống xâm nhập vi chọn chuột cống trắng để gây mơ hình bỏng khuẩn vào vết bỏng Loxain có tác dụng Bỏng nhiều nguyên nhân gây kháng khuẩn trực tiếp vết bỏng Mặc dù như: nhiệt, hoá chất, điện, xạ nhiệt Invitro, Loxain với nồng độ cao (0,4g Trong bỏng nhiệt nguyên nhân hay dược liệu/ml) không cho thấy khả kháng gặp 84 - 94% Đã có nhiều mơ hình gây khuẩn chủng vi khuẩn quốc tế thường bỏng nhiệt xây dựng thực gặp, điều vi khuẩn thực tế tác giả nước nước sử dụng vết bỏng mẫu vi khuẩn quốc tế có thỏ làm động vật thực nghiệm [6; 11] khác biệt chủng khả nhạy cảm Trong nghiên cứu này, gây bỏng thử nghiệm chuột với dụng cụ kim loại có nhiệt độ 100˚C, khoảng thời gian 35 giây để gây tổn thương bỏng phù hợp (tương ứng tổn thương bỏng độ III) Tổn thương bỏng gây nên phản ứng viêm chỗ, tiếp tình trạng nhiễm khuẩn vết với Loxain Để khẳng định liên quan tỷ lệ chết tính kháng khuẩn Loxain vết bỏng cần nghiên cứu với cỡ mẫu lớn hơn, đồng thời tiến hành lấy mẫu vi khuẩn trực tiếp vết thương bỏng giai đoạn khác nhau, sau nuôi cấy, định danh đánh giá khả kháng khuẩn Loxain chủng vi khuẩn bỏng làm ảnh hưởng đến tình trạng tồn Ở lơ chuột bơi dầu cọ, ngày đầu sau thân Chính vậy, sau bị bỏng, chuột bỏng tất vết bỏng có loét, vết trạng thái mệt, hoạt động, thường nằm yên loét rộng dần chảy nhiều dịch tiết có mùi Tình trạng ăn uống kém, cộng với khó chịu, ngày sau vết loét khô nước, protein qua vết bỏng làm chuột bị dần, thu hẹp diện tích tổn thương, nhiên suy kiệt, kèm theo nhiễm khuẩn đến kết thúc nghiên cứu lơ vết bỏng làm chuột bị tử vong [4] số vết bỏng chảy dịch tiết Tại chỗ vết Nghiên cứu cho thấy chuột chết bỏng bơi dầu cọ khơng có tác dụng khoảng từ ngày đến ngày sau gây kháng khuẩn, chống viêm làm bỏng Kết phù hợp với khoảng thời cho phản ứng viêm mạnh kéo dài TCNCYH 107 (2) - 2017 15 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC cộng với tình trạng nhiễm khuẩn làm vết - Loxain có tác dụng điều trị chỗ vết thương lâu liền Quá trình tái tạo hồi phục vết thương bỏng nhiệt thực nghiệm chuột thương đại thể vi thể tiến triển cống trắng thể ở: thời gian liền khỏi vết chậm, kết phù hợp với nghiên thương bỏng diễn nhanh, tăng tốc độ thu cứu nghiên cứu tiến hành hẹp vết thương bỏng Hiệu điều trị vết trước [6] thương bỏng Loxain bôi lần/ngày Ở lô bôi Loxain, thời gian liền vết thương lần/ngày tương đương bỏng tương tự lô bôi sulfadiazine - bạc, Lời cảm ơn sau ngày vết bỏng khô bắt đầu hình thành vảy tiết đến ngày thứ 21 đa số vết Nhóm nghiên cứu trân trọng cám ơn Cơng bỏng tạo sẹo Mức độ thu hẹp diện tích ty Cổ phần Sản xuất Thương mại Nam vết bỏng nhanh so với lơ mơ hình Y Aurvini tài trợ cho thực (p < 0,05) tương tự lô chứng dương đề tài (p > 0,05) Từ kết cho thấy Loxain TÀI LIỆU THAM KHẢO có tác dụng điều trị chỗ vết thương bỏng tương tự sulfadiazine - bạc Trên hình ảnh vi thể vết bỏng có tăng sinh xơ mạnh, Loxain có tác dụng kích thích tăng sinh xơ mơ tổn thương Phân tích kết cho thấy mức độ thu hẹp diện tích vết bỏng lơ bơi Loxain liều thấp liều cao khơng có khác biệt Từ kết nghiên cứu khác biệt tình trạng toàn thân, tác dụng liền vết thương bỏng liều Loxain thấp cao khơng có khác biệt rõ rệt, kiến nghị sử dụng Loxain liều thấp số lần bơi thuốc ngày lần dễ áp dụng thực tế Lê Thế Trung (1997) Những điều cần biết bỏng Nhà xuất Y học, Hà Nội Lê Thế Trung (1997) Bỏng - Những kiến thức chuyên ngành Nhà xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Gia Tiến, Phạm Gia Khánh, Phạm Đình Bảng(1997).Tác dụng điều trị chỗ vết bỏng nhiệt thuốc mỡ Maduxin Tạp chí Y học thực hành, 11 (342), 36 - 41 Lê Thế Trung, Trần Xuân Vận, Nguyễn Liêm, Nguyễn Đình Bảng, Đào Xuân Vinh (1991) Nghiên cứu thuốc Maduxin oil điều trị chỗ nhiễm khuẩn mủ xanh vết bỏng, Tạp chí Y học thực hành, 5, 23 - 26 V KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu tính kháng khuẩn tác dụng điều trị chỗ vết thương bỏng nhiệt Loxain chuột cống trắng, kết cho thấy: - Với nồng độ Loxain từ 0,025 - 0,4g/ Phạm Phan Địch, Nguyễn Văn Ngọc (1986) Ảnh hưởng mật ong đến tái tạo hồi phục vết bỏng da chuột cống trắng Tạp chí Y học Việt Nam (chuyên đề hình thái học), 2, 43 - 47 Vũ Thị Ngọc Thanh, Lê Văn Phủng, Lê chủng vi khuẩn là: P.aeruginosa, S.aureus, Huy Chính, Hồng Tích Huyền (2001) Nghiên cứu tính kháng khuẩn chitosan bỏng nhiệt thực nghiệm Tạp chí Dược E.coli K.pneumoniae Invitro học, 229, 19 ml chưa xác định nồng độ tối thiểu ức chế 16 TCNCYH 107 (2) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Phạm Toàn Thắng (1993) Thuốc Silvadence cream 1% (Silver sulfadiazin 1%), 10 Wanda A Dorsett-Martin, Annette B Thông tin bỏng, 3, 15 - 17 Wysocki (2008) Rat Models of Skin Wound Healing, Sourcebook of Models for Biomedical Bộ môn Dược lý (2011) Trường đại học Y Hà Nội, Dược lý học tập Nhà xuất Research, 6, 6631 - 6638 11 Durmus AS, Han MC, Yaman I giáo dục, Hà Nội, 203 - 213 (2009) Comperative evaluation of collagenase and silver sulfadiazine on burned wound heal- Mehrabani et al (2015) The Healing Effect of Curcumin on Burn Wounds in Rat, ing in rats, Firat Universitesi Saglik Bilimleri Veteriner Dergisi, 23, 135 - 139 World J Plast Surg, 4(1), 29 - 35 Summary STUDY ON ANTIBACTERIAL ACTIVITY IN VITRO AND HEALING EFFECT ON BURN WOUND IN RAT OF LOXAIN Loxain was used to investigate the antibacterial activity in In vitro and healing effect on heat burn wounds in rat Antibacterial activity of Loxain was evaluated in international bacteria strains Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae in In vitro In burn wound model in rat, Wistar rats were divided in to groups, group was served as control, similar burn ulcers were produced on anterior surface of thigh of 50 rats in groups to Then group served as control was treated with palm oil times per day, group served as positive control were treated with silver sulfadiazine ointment, group and were treated with Loxain ointment and times per day in 21 consecutive days The result showed that In vitro study, the concentration of Loxain from 0.025 g/ml to 0.4g/ml not have antibacterial activity against tested bacteria strains In vivo study, groups treated with Loxain oitment achieved reduced healing time, wound healing effect in groups treated with Loxain ointment and times per day were the same as in 21 consecutive days Keyword: Loxain, antibacterial activity, Wistar rat, heat burn wound, healing effect TCNCYH 107 (2) - 2017 17 ... giá tác dụng điều trị bỏng chế phẩm Loxain mô hình gây bỏng nhiệt thực nghiệm chuột cống trắng II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Đối tượng Phương pháp 2.1 Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn Loxain Invitro. .. chọn chuột cống trắng để gây mơ hình bỏng khuẩn vào vết bỏng Loxain có tác dụng Bỏng nhiều nguyên nhân gây kháng khuẩn trực tiếp vết bỏng Mặc dù như: nhiệt, hoá chất, điện, xạ nhiệt Invitro, Loxain. .. trị chỗ nhiễm khuẩn mủ xanh vết bỏng, Tạp chí Y học thực hành, 5, 23 - 26 V KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu tính kháng khuẩn tác dụng điều trị chỗ vết thương bỏng nhiệt Loxain chuột cống trắng, kết cho