Nhằm góp phần vào việc tìm kiếm nguồn nguyên liệu làm thuốc mới, nhóm nghiên cứu chúng tôi đã tổng hợp thành công các dẫn chất cis-N-heptyl phthalazinon và cis-N-benzyl phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc men phosphodiesterase IV và tác dụng kháng viêm mạnh hơn các dẫn chất trans và hỗn hợp racemic. Để tiếp tục công trình nghiên cứu, tiêu chuẩn hóa các hợp chất quang hoạt này với mong muốn đưa ra các dẫn chất quang hoạt mới có tác dụng sinh học.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học TIÊU CHUẨN HÓA CÁC DẪN CHẤT QUANG HOẠT CIS-N-HEPTYL-PHTHALAZINON VÀ CIS-N-BENZYL-PHTHALAZINON CÓ TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM Chương Ngọc Nãi*, Trần Thị Nguyên Đăng**, Đặng Văn Tịnh**, Nguyễn Đức Tuấn** TÓM TẮT Đặt vấn đề – Mục tiêu nghiên cứu: Nhằm góp phần vào việc tìm kiếm nguồn ngun liệu làm thuốc mới, nhóm nghiên cứu chúng tơi tổng hợp thành công dẫn chất cis-N-heptyl phthalazinon cis-N-benzyl phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc men phosphodiesterase IV tác dụng kháng viêm mạnh dẫn chất trans hỗn hợp racemic Để tiếp tục công trình nghiên cứu, chúng tơi tiến hành tiêu chuẩn hóa hợp chất quang hoạt với mong muốn đưa dẫn chất quang hoạt có tác dụng sinh học Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Các dẫn chất quang hoạt cis-N-heptyl-phthalazinon cis-Nbenzyl-phthalazinon tổng hợp Dự thảo tiêu chuẩn kỹ thuật cho hợp chất quang hoạt tổng hợp xây dựng tiêu: tính chất; định tính phương pháp xác định nhiệt độ nóng chảy, phổ hồng ngoại, góc quay cực riêng, sắc ký lỏng hiệu cao; giới hạn tạp đồng phân quang học; giới hạn tạp chất liên quan; giới hạn dung môi tồn dư; độ ẩm độ tinh khiết quang học Kết quả: Xây dựng dự thảo tiêu chuẩn kỹ thuật cho dẫn chất quang hoạt cis-N-heptylphthalazinon cis-N-benzyl-phthalazinon tổng hợp Kết luận: Dự thảo tiêu chuẩn kỹ thuật ứng dụng để xác định dẫn chất quang hoạt cisN-heptyl-phthalazinon cis-N-benzyl-phthalazinon tổng hợp nhằm giúp tối ưu hóa phương pháp tổng hợp, để chuẩn hóa thành nguyên liệu tinh khiết làm thuốc Từ khóa: Dẫn chất Cis-N-alkyl-phthalazinon; Tiêu chuẩn hóa; Độ tinh khiết quang học ABSTRACT STANDARDIZATION OF NEW CHIRAL CIS-N-HEPTYL-PHTHALAZINONE AND CIS-N-BENZYL-PHTHALAZINONE DERIVATIVES WITH ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY Chuong Ngoc Nai, Tran Thi Nguyen Dang, Dang Van Tinh, Nguyen Duc Tuan * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 13 - 19 Introduction – Aims: In order to search for new sources of bulk drugs, our study group was successfully synthesized new chiral cis-N-heptyl phthalazinone and cis-N-benzyl phthalazinone derivatives with selective phosphodiesterase IV inhibitory activity and stronger anti-inflammatory activity than that of trans derivatives and racemic mixture The aim of this study is to standardize these chiral compounds to give new chiral derivatives with biological activities Subjects and Methods: The subject of this study is new chiral cis-N-heptyl phthalazinone and cis-Nbenzyl phthalazinone derivatives The synthesized chiral compounds was standardized on the criteria such as appearance; identification by melting point, infrared absorption spectrophotometry, specific optical rotation and high performance liquid chromatography method; enantiomeric impurities; related substances; organic volatile impurities; moisture; enantiomeric purity *Viện Kiểm nghiệm thuốc TP Hồ Chí Minh **Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS Chương Ngọc Nãi ĐT: 0913 799 068, 0908 318 543 Email: diemnhim@yahoo.com Chuyên Đề Dược Khoa 13 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Results: The two draft specifications of the synthesized chiral cis-N-heptyl phthalazinone and cis-N-benzyl phthalazinone derivatives were established Conclusion: The draft specifications can be applied to control the synthesized chiral cis-N-heptylphthalazinone and cis-N-benzyl-phthalazinone derivatives to help optimize the synthesis, and standardize the new purity bulk drug Key words: Cis-N-alkyl phthalazinone; Standardization; Enantiomeric purity hành đề tài “Tiêu chuẩn hóa dẫn chất quang ĐẶT VẤN ĐỀ hoạt cis-N-heptyl phthalazinon cis-N-benzyl Nghiên cứu sản xuất thuốc phthalazinon có tác dụng kháng viêm” với mong nhiệm vụ vô quan trọng ngành muốn đưa dẫn chất quang hoạt có tác Dược Nhằm góp phần vào việc tìm kiếm nguồn dụng sinh học nguyên liệu làm thuốc mới, nhóm nghiên cứu ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU tổng hợp thành công dẫn chất cis-N-heptyl phthalazinon cis-N-benzyl Đối tượng nghiên cứu phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc men Các dẫn chất quang hoạt cis-N-heptylphosphodiesterase IV tác dụng kháng viêm phthalazinon cis-N-benzyl-phthalazinon mạnh dẫn chất trans hỗn hợp racemic(4,2) tổng hợp Cấu trúc phân tử chất Tuy nhiên, việc tiêu chuẩn hóa hợp chất trình bày hình hình quang hoạt chưa tiến hành Để tiếp tục cơng trình nghiên cứu, chúng tơi tiến H3C O H3C O 4a* 8a* H3C O 4a* 8a* O N C7H15 (−)N1: (+)-cis- N O N (+)N1: N H3C O C7H15 (−)-cis- Hình 1: Cis-2-(N-heptyl)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on H3C O H3C O N 4a* N (+)N2: (+)-cis- 8a* O H3C O H3C O N 4a* N 8a* O (−)N2: (−)-cis- Hình 2: Cis-2-(N-benzyl)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-4a,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-phthalazin-1-on 14 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Trang thiết bị, hóa chất, dung môi Trang thiết bị Bể siêu âm Power Sonic 410 (Hàn Quốc), cân phân tích Mettler Toledo AB265-S (Thụy Sĩ), cột sắc ký Gemini C18 (250 x 4,6 mm, μm) (Mỹ), cột sắc ký Lux Cellulose-1 (250 x 4,6 mm, μm) (Mỹ), máy chuẩn độ điện 751 GPD TitrinoMetrohm (Đức), máy đo suất quay cực Horiba SEPA-300 (Nhật Bản), máy đo điểm chảy Büchi B545 (Thụy Sĩ), máy đo phổ hồng ngoại FTIR Magna 760 Nicolet (Mỹ), máy sắc ký khí Agilent Technologies 6890N (Mỹ), máy sắc ký lỏng hiệu cao Shimadzu LC-20A (Nhật Bản) Các thiết bị phân tích hiệu chuẩn đạt quy định theo GLP ISO/IEC 17025 Hóa chất, dung môi Acetonitril, cloroform, dicloromethan, diethyl ether, ether dầu hỏa, ethanol, isopropanol, methanol, n-hexan đạt tiêu chuẩn dùng cho sắc ký lỏng (J.T.Baker, Mỹ) Ethyl acetat, diethylamin, dimethyl sulfoxyd, kali bromid, dung môi Karl Fischer, thuốc thử Karl Fischer Titrant 5, triethylamin đạt tiêu chuẩn dùng cho phân tích (Merck, Đức) Phương pháp nghiên cứu Việc tiêu chuẩn hóa dẫn chất quang hoạt cis-N-heptyl-phthalazinon cis-N-benzylphthalazinon tiến hành lô sản phẩm tổng hợp với tiêu tham khảo theo Dược điển Việt Nam IV (DĐVN IV)(1) Độ tinh khiết quang học xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao, sử dụng pha tĩnh bất đối Phương pháp thẩm định Viện Kiểm nghiệm thuốc thành phố Hồ Chí Minh, đạt yêu cầu theo ICH(3) Tính chất Dựa vào cảm quan, xác định hình dạng, màu, mùi chất Xác định độ tan theo DĐVN IV(1) Định tính Nhiệt độ nóng chảy: Tiến hành đo theo DĐVN IV(1) Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học Phổ hồng ngoại: Tiến hành đo phổ hồng ngoại kỹ thuật dập viên KBr theo DĐVN IV(1), xác định số sóng nhóm chức đặc trưng cơng thức cấu tạo chất thử Góc quay cực riêng: Pha dung dịch thử có nồng độ 0,4% cloroform Xác định góc quay cực riêng chất thử nhiệt độ 20 oC theo DĐVN IV(1) Sắc ký lỏng hiệu cao: Tiến hành sắc ký phần xác định độ tinh khiết quang học Trên sắc ký đồ, dựa vào diện tích thời gian lưu pic để xác định vị trí đồng phân (+) (−) Giới hạn tạp đồng phân quang học Tiến hành phần xác định độ tinh khiết quang học Giới hạn tạp chất liên quan Dùng sắc ký pha đảo để xác định tạp chất liên quan có mẫu thử Điều kiện sắc ký - Cột sắc ký Gemini C18 (250 x 4,6 mm, μm) - Nhiệt độ cột: 40 oC - Pha động theo chương trình dung môi: Thời gian (phút) 0-60 Acetonitril (%) 0-100 Nước (%) Tốc độ dòng 100-0 ml/ phút - Thể tích tiêm mẫu: μl - Đầu dò dãy diod quang Pha mẫu thử acetonitril nồng độ định lượng giới hạn phát (LOD) Tiến hành sắc ký mẫu trắng (acetonitril) mẫu thử So sánh sắc ký đồ mẫu trắng mẫu thử Tạp chất xác định pic xuất sắc ký đồ mẫu thử nồng độ định lượng có chiều cao pic lớn chiều cao pic sắc ký đồ mẫu thử LOD (loại trừ pic dung mơi pic chính) Giới hạn dung môi tồn dư Một số dung môi sử dụng trình tổng hợp dẫn chất cis-N-alkylphthalazinon dicloromethan, ethyl acetat, n- 15 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 hexan Các dung môi thử giới hạn theo DĐVN IV(1) Thực phương pháp sắc ký khí với điều kiện sắc ký sau: - Cột ZB-624 (30 m x 0,53 mm, μm) - Nhiệt độ cột: trì 30 oC 15 phút, sau gia tăng nhiệt độ với tốc độ 20 oC/phút đạt 240 oC, giữ 240 oC 10 phút KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Tính chất (−)N1 (+)N1: bột mịn màu trắng ngà, mùi hắc (−)N2: bột thô, màu vàng nhạt, mùi hắc (+)N2: bột thô, màu vàng nâu, mùi hắc - Tỉ lệ chia dòng 2:1, tốc độ dòng 20 cm/giây Các chất dễ tan dicloromethan cloroform, tan diethyl ether, tan isopropanol methanol, khó tan n-hexan ether dầu hỏa, không tan nước - Khí mang: nitơ dùng cho sắc ký khí Định tính - Đầu dò quang kế lửa Nhiệt độ nóng chảy Bảng Nhiệt độ nóng chảy chất - Nhiệt độ buồng tiêm: 180 oC - Nhiệt độ đầu dò: 300 oC - Thể tích tiêm mẫu: 1000 μl, hệ thống tiêm mẫu head-space tĩnh - Dung môi pha mẫu: dimethyl sulfoxyd Nước: Phương pháp chuẩn độ Karl Fischer Tiến hành theo DĐVN IV(1) Độ tinh khiết quang học Chất (−)N1 (+)N1 (−)N2 (+)N2 Trung Xử lý thống kê (n = 3) o bình ( C) 97,1 SD = 0,8; RSD = 0,77%; e = ± 1,9 (p = 0,95) 97,1 SD = 0,5; RSD = 0,49%; e = ± 1,2 (p = 0,95) 88,2 SD = 0,4; RSD = 0,40%; e = ± 0,9 (p = 0,95) 88,0 SD = 0,4; RSD = 0,46%; e = ± 1,0 (p = 0,95) Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao, sử dụng pha tĩnh bất điều kiện sắc ký sau Dựa vào kết thu sau xử lý thống kê bảng 1, mức chất lượng tiêu nhiệt độ nóng chảy đề nghị là: N1: 97,0 ± 2,0 oC; N2: 88,0 ± 1,0 oC - Pha động: n-hexan chứa triethylamin 0,2% : isopropanol chứa triethylamin 0,2% (90:10) Phổ hồng ngoại Bảng Số sóng hấp thu đặc trưng chất - Cột: Lux Cellulose-1 (250 x 4,6 mm, 5μm) - Nhiệt độ cột: 30 oC - Tốc độ dòng: 0,8 ml/phút - Bước sóng phát hiện: 317 nm - Thể tích tiêm mẫu: μl - Nồng độ chất thử: 100 μg/ml Số sóng hấp thu đặc trưng (cm-1) (+)N1 (+)N2 (−)N1 (−)N2 1644 1644 1668 1667 3446 3443 3502 3503 C=O −NH Từ kết thu bảng 2, yêu cầu định tính quang phổ hồng ngoại chất phải có số sóng hấp thu đặc trưng nhóm C = O −NH có phân tử - Dung mơi pha mẫu: n-hexan : isopropanol (90:10) Góc quay cực riêng [α ]D Sau tiến hành sắc ký mẫu thử, xác định lượng đối quang tinh khiết có sản phẩm theo phần trăm diện tích pic đo (độ tinh khiết quang học theo sắc ký) biểu diễn theo độ tinh khiết quang học đối quang (enantiomer excess - ee) Trung o bình ( ) (−)N1 - 381,73 (+)N1 +381,40 (−)N2 - 307,98 (+)N2 +303,23 16 Nhóm chức 20 Bảng Góc quay cực riêng chất Chất Xử lý thống kê (n = 5) SD = 0,32; RSD = 0,09%; e = ± 0,40 (p = 0,95) SD = 0,34; RSD = 0,09%; e = ± 0,42 (p = 0,95) SD = 0,41; RSD = 0,13%; e = ± 0,51 (p = 0,95) SD = 1,51; RSD = 0,50%; e = ± 1,88 (p = 0,95) Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Dựa vào kết thu sau xử lý thống kê bảng 3, mức chất lượng tiêu góc quay cực riêng đề nghị là: (−)N1: 381,73 ± 0,50o; (+)N1: + 381,40 ± 0,50o; (−)N2: 307,98 ± 1,00o; (+)N2: + 303,23 ± 2,00o chọn pic phụ sắc ký đồ mẫu thử có chiều cao lớn pic sắc ký đồ dung dịch mẫu thử LOD, lượng tạp xác định chất thử cụ thể trình bày bảng Sắc ký lỏng hiệu cao Tiến hành sắc ký chất thử cột bất đối, nhận thấy xuất pic đối quang, pic pic phụ sắc ký đồ Dựa vào góc quay cực riêng đo trên, xác định chất đối quang có thời gian lưu trình bày bảng Bảng Tỷ lệ tạp chất liên quan tính theo phần trăm diện tích pic chất Trung bình (phút) (−)N1 11,011 (+)N1 9,950 (−)N2 20,130 (+)N2 17,310 SD = 0,027; RSD = 0,24%; e = ± 0,066 (p = 0,95) SD = 0,037; RSD = 0,37%; e = ± 0,091 (p = 0,95) Giới hạn dung môi tồn dư Xử lý thống kê (n = 3) SD = 0,031; RSD = 0,15%; e = ± 0,076 (p = 0,95) SD = 0,012; RSD = 0,07%; e = ± 0,029 (p = 0,95) Dựa vào kết thu sau xử lý thống kê, mức chất lượng tiêu định tính dựa vào thời gian lưu đề nghị là: (−)N1: 11,011 ± 0,500 phút; (+)N1: 9,950 ± 0,500 phút; (−)N2: 20,130 ± 1,000 phút; (+)N2: 17,310 ± 0,800 phút Giới hạn tạp đồng phân quang học Bảng Tỷ lệ tạp đồng phân quang học tính theo phần trăm diện tích pic chất Trung bình (%) (−)N1 3,38 (+)N1 5,79 (−)N2 2,79 (+)N2 5,83 Chất Xử lý thống kê (n = 6) SD = 0,288; e = ± 0,30 (p = 0,95) SD = 0,248; e = ± 0,26 (p = 0,95) SD = 0,263; e = ± 0,27 (p = 0,95) SD = 0,147; e = ± 0,15 (p = 0,95) Dựa vào kết thu sau xử lý thống kê, mức chất lượng tiêu giới hạn tạp chất liên quan đề nghị không 1% Bảng Thời gian lưu chất Chất Chất Trung bình (%) 0,42 0,12 0,39 (−)N2 (+)N2 0,65 (−)N1 (+)N1 Xử lý thống kê (n = 6) SD = 0,15; RSD = 4,56%; e = ± 0,16 (p = 0,95) SD = 0,16; RSD = 2,79%; e = ± 0,17 (p = 0,95) SD = 0,04; RSD = 1,47%; e = ± 0,04 (p = 0,95) SD = 0,11; RSD = 1,93%; e = ± 0,12 (p = 0,95) Dựa vào kết thu sau xử lý thống kê bảng 5, mức chất lượng tiêu giới hạn tạp đồng phân quang học đề nghị không 7% Bảng Kết xác định dung môi tồn dư chất Chất (−)N1 (+)N1 (−)N2 (+)N2 Dicloromethan (μg/g) 34,5 15,2 < LOD 17,5 Ethyl acetat (μg/g) n-hexan (μg/g) < LOD Dựa vào kết thu bảng 7, mức chất lượng tiêu giới hạn dung môi tồn dư đề nghị theo quy định giới hạn dung môi tồn dư DĐVN IV sau: dicloromethan: khơng q 600 μg/g, ethyl acetat: khơng có, n-hexan: không 290 μg/g Nước Bảng Kết xác định hàm lượng nước chất Chất (−)N1 (+)N1 Trung bình (%) 0,33 0,57 0,53 0,61 Xử lý thống kê (n = 3) SD = 0,02; RSD = 4,58%; e = ± 0,04 (p = 0,95) SD = 0,03; RSD = 4,39%; e = ± 0,06 (p = 0,95) SD = 0,04; RSD = 6,80%; e = ± 0,09 (p = 0,95) SD = 0,03; RSD = 4,10%; e = ± 0,06 (p = 0,95) Giới hạn tạp chất liên quan (−)N2 (+)N2 Sắc ký đồ mẫu trắng có pic với thời gian lưu là: 36,1 ± 0,2 phút; 46,8 ± 0,2 phút; 56 ± 0,1 phút 56,5 ± 0,1 phút Sau loại bỏ pic trùng với pic dung mơi pic chính, Dựa vào kết thu sau xử lý thống kê bảng 8, mức chất lượng tiêu hàm lượng nước đề nghị không 1% Chuyên Đề Dược Khoa 17 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Độ tinh khiết quang học Bảng Kết xác định độ tinh khiết quang học chất Chất (−)N1 (+)N1 (−)N2 (+)N2 Trung bình theo sắc ký (%) Trung bình theo ee (%) 96,62 93,25% 94,22 88,43% 97,21 94,42% 94,17 88,34% Xử lý thống kê (n = 6) SD = 0,15; RSD = 0,16%; e = ± 0,16 (p = 0,95) SD = 0,16; RSD = 0,17%; e = ± 0,17 (p = 0,95) SD = 0,04; RSD = 0,04%; e = ± 0,04 (p = 0,95) SD = 0,11; RSD = 0,12%; e = ± 0,12 (p = 0,95) Dựa vào kết thu bảng 9, mức chất lượng tiêu độ tinh khiết quang học đối quang đề nghị 86% Bảng 10 Tóm tắt tiêu đề nghị dự thảo tiêu chuẩn kỹ thuật dẫn chất quang hoạt cis-N-alkyl-phthalazinon Chỉ tiêu N1 Tính chất N2 Định tính Nhiệt độ nóng chảy N1 N2 Phổ hồng ngoại N1 Góc quay cực riêng Thời gian lưu HPLC N2 Mức chất lượng đề nghị Bột mịn, màu trắng ngà, mùi Dễ tan dicloromethan cloroform; tan hắc diethyl ether; tan isopropanol methanol; khó tan n-hexan ether dầu Bột thô, hỏa; không tan nước màu vàng, mùi hắc 97,0 ± 2,0 oC o 88,0 ± 1,0 C Phải có số sóng hấp thu đặc trưng nhóm C = O −NH (−)N1 (+)N1 (−)N2 (+)N2 (−)N1 (+)N1 (−)N2 (+)N2 Giới hạn tạp đồng phân đối quang Giới hạn tạp chất liên quan Giới hạn dung môi tồn dư Độ ẩm Độ tinh khiết quang học KẾT LUẬN Sau tiến hành tiêu chuẩn hóa dẫn chất cis-N-heptyl-phthalazinon cis-N-benzylphthalazinon tổng hợp theo phương pháp nghiên cứu, xây dựng dự thảo tiêu chuẩn kỹ thuật cho dẫn chất để đánh giá nguồn nguyên liệu tổng hợp Từ đó, giúp tối ưu hóa phương pháp tổng hợp, chuẩn hóa sản phẩm thu thành nguyên liệu làm thuốc Kết khảo sát cho thấy hai đối quang cis-(+) tổng hợp có độ tinh khiết quang 18 - 381,73 ± 0,50o o + 381,40 ± 0,50 - 307,98 ± 1,00o o + 303,23 ± 2,00 11,011 ± 0,500 phút 9,950 ± 0,500 phút 20,130 ± 1,000 phút 17,310 ± 0,800 phút Không 7% Khơng q 1% Dicloromethan: khơng q 600 µg/g Ethyl acetat: khơng có n-hexan: khơng q 290 µg/g Khơng q 1% Khơng 86% học đối quang 90% tạp chất liên quan bốn đối quang nhiều (gần 1%) Vì cần tiếp tục nghiên cứu cải tiến quy trình tổng hợp để thu hai đối quang cis-(+) có độ tinh khiết quang học đối quang 90% bốn đối quang có tạp chất liên quan 0,15% TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, tr.PL-114-116, 119-129, 147-148, 150-151, 185-186, 205-213, tr.x liv Dang Van Tinh, Chung Keun Jin, Motoyuki Miyamoto, Yoshifumi Ikee, Takashi Masuda, Shigeki Sano, Motoo Shiro, and Yoshifumi Nagao (2006), Practical synthesis of new chiral Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 cis-phthalazinones with potential for high phosphodiesterase inhibitory activity, Heterocycles, 68, pp.2133-2144 ICH Harmonised Tripartite Guideline (2005), Validation of analytical procedures: text and methodology, pp.1-5 Van der May M, Boss H, Hatzelmann A, Van der Laan IJ., Sterk GJ., Thibaut U and Timmerman H (2002), Novel Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học selective PDE4 inhibitor In vivo antiinflammatory activity of a new series of N-substituted cis-tetra- and cishexahydrophthalazinones, Journal of Medical Chemistry, 45, pp.2520-2525 19 ... chất cis-N-heptyl phthalazinon cis-N-benzyl Đối tượng nghiên cứu phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc men Các dẫn chất quang hoạt cis-N-heptylphosphodiesterase IV tác dụng kháng viêm phthalazinon. .. Enantiomeric purity hành đề tài Tiêu chuẩn hóa dẫn chất quang ĐẶT VẤN ĐỀ hoạt cis-N-heptyl phthalazinon cis-N-benzyl Nghiên cứu sản xuất thuốc phthalazinon có tác dụng kháng viêm với mong nhiệm vụ vô... tiêu chuẩn hóa dẫn chất quang hoạt cis-N-heptyl- phthalazinon cis-N-benzylphthalazinon tiến hành lô sản phẩm tổng hợp với tiêu tham khảo theo Dược điển Việt Nam IV (DĐVN IV)(1) Độ tinh khiết quang