Đề tài với nội dung nghiên cứu tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc, tinh dầu hương nhu trắng trên các vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm và khảo sát hiệu quả phối quả phối hợp của hai loại tinh dầu này nhằm tăng tác dụng, giảm độc tính, để từ đó là cơ sở ứng dụng vào bào chế các chế phẩm có tính kháng khuẩn cao trong điều trị nhiễm trùng trên những vết thương mất da.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU TRÀM TRÀ ÚC VÀ TINH DẦU HƯƠNG NHU TRẮNG TRÊN CÁC CHỦNG VI KHUẨN ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH PHÂN LẬP TỪ BỆNH PHẨM Huỳnh Thị Ngọc Lan*, Hồ Ánh Nguyệt*, Lâm Thị Ngọc Phương* TÓM TẮT Đặt vấn đề: tỷ lệ đề kháng kháng sinh cao chủng vi khuẩn, có vi khuẩn thường gây nhiễm trùng vết thương trở thành mối đe dọa nghiêm trọng việc điều trị nhiễm khuẩn Nghiên cứu tính kháng khuẩn tinh dầu tràm trà Úc, tinh dầu hương nhu trắng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm khảo sát hiệu phối phối hợp hai loại tinh dầu nhằm tăng tác dụng, giảm độc tính, để từ sở ứng dụng vào bào chế chế phẩm có tính kháng khuẩn cao điều trị nhiễm trùng vết thương da Đối tượng phương pháp nghiên cứu: - Vi khuẩn thử nghiệm: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Methicillin resistant Staphylococcus aureus(MRSA), Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae phân lập từ bệnh phẩm - Chất thử nghiệm: tinh dầu tràm trà Úc (T.T.O.), tinh dầu hương nhu trắng (O.G) Phương pháp: - Xác định MIC tinh dầu hương nhu trắng tinh dầu hương nhu trắng vi khuẩn thử nghiệm phương pháp pha loãng thạch - Xác định hiệu phối hợp tinh dầu thử nghiệm phương pháp bàn cờ Kết bàn luận: Tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu tinh dầu hương nhu trắng có tác động kháng khuẩn tốt chủng P aeruginosa, S aureus, K pneumoniae, E coli phân lập từ bệnh phẩm, tinh dầu tinh dầu hương nhu trắng cho tác động tốt (MIC P aeruginosa: 3,9 – 31,3 µl/ml; E coli: 0,98 µl/ml…) MIC tinh dầu tràm trà Úc P aeruginosa 7,8 – 125 µl/ml; E coli 1,95 µl/ml MIC tinh dầu vi khuẩn từ bệnh phẩm thấp MIC vi khuẩn chuẩn, cho thấy vi khuẩn đề kháng nhạy cảm với tinh dầu Phối hợp hai tinh dầu cho tác động cộng lực, cải thiện rõ rệt tính kháng khuẩn tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu dầu hương nhu trắng riêng lẻ (trên P aeruginosa, phối hợp làm giảm 32 lần MIC tinh dầu tràm trà Úc giảm lần MIC tinh dầu hương nhu trắng; E coli phối hợp làm giảm lần MIC tinh dầu tràm trà Úc lần MIC tinh dầu hương nhu trắng Trong tỉ lệ phối hợp bàn cờ tỉ lệ O.G: 1T.T.O cho tác động tốt P aeruginosa, tỉ lệ 1:2 cho kết cộng lực vi khuẩn S aureus, MRSA K pneumoniae Kết luận: Tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng có tác động mạnh chủng vi khuẩn đề kháng kháng sinh phân lập từ bệnh phẩm Điều mở khả sử dụng tinh dầu trị liệu số nhiễm khuẩn thơng thường Từ khóa: Tea tree oil, ocimum gratissimum oil ABSTRACT ANTIBACTERIAL EFFECT OF TEA TREE OIL AND OCIMUM GRATISSIMUM ESSENTIAL OIL ON BACTERIAL RESISTANT ANTIBIOTIC STRAINS FROM CLINICAL SPECIMENS Huynh Thi Ngoc Lan, Ho Anh Nguyet, Lam Thi Ngọc Phuong * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No - 2014: 209 - 215 Introduction: A high percentage of infections caused by resistant microorganisms often fail to respond to the standard treatment, resulting in prolonged illness and greater risk of death Research on antibacterial effect of tea * Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: TS Huỳnh Thị Ngọc Lan ĐT: 0907123548 Chuyên Đề Dược Học Email: tshuynhngoclan@yahoo.com 209 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 tree oil, Ocimum gratissimum essential oil and the combination of them against bacterial strains from clinical specimens is in order to enhance the effect, reduce toxicity and apply in therapy Materials and methods: Bacteria: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, K pneumoniae, MRSA Substances: tea tree oil (T.T.O.), Ocimum gratissimum essential oil (O.G.) Methods: Determine MIC of T.T.O and O.G by the agar dilution method - Identify rates of combinations between T.T.O and O.G by dilution chessboard method Results and discussion: - T.T.O and O.G have a strong antibacterial effect on P aeruginosa and E coli isolated from clinical specimens O.G (against P aeruginosa, MIC = 3.9 – 31.3 µl/ml; against E coli, MIC = 0.98 µl/ml) shows stronger effect than T.T.O (against P aeruginosa, MIC = 7.8 – 125 µl/ml; against E coli, MIC = 1.95 µl/ml) MIC of T.T.O and O.G against bacteria strains isolated from clinical specimens are lower than MIC of these essential oils against bacteria ATCC strains This result shows that the antibiotic-resistance bacteria strains are still sensitive with these essential oils - The combination of T.T.O and O.G against bacteria is synergistic, which enhance the antibacterial effect (against P aeruginosa, the combination reduces 32 times MIC of T.T.O and times MIC of O.G.; against E coli, the combination reduces times MIC of T.T.O and times MIC of O.G.) The best rate of the combination of T.T.O and O.G against P aeruginosa is O.G.: T.T.O and against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, K pneumoniae is O.G: T.T.O Conclusion: The study has identified the strong antibacterial effect of tea tree oil, Ocimum gratissimum essential oil on bacteria isolated from clinical specimens, found the combination rate of essential oils and applied in preparing products with effective bactericidal effect Key words: Tea tree oil, ocimum gratissimum oil ĐẶT VẤN ĐỀ Tỷ lệ đề kháng kháng sinh cao chủng vi khuẩn thường gây khó khăn trị liệu dẫn đến việc kéo dài thời gian điều trị dẫn đến tử vong Theo chương trình giám sát quốc gia tính kháng thuốc số vi khuẩn gây bệnh thường gặp, năm 1999, tỉ lệ kháng thuốc loại kháng sinh Ampicilin, Amoxicilin từ 10-30%, năm 2001 tỉ lệ 5070% lên tới 90%(3,4) Theo báo cáo hoạt động theo dõi đề kháng kháng sinh vi khuẩn gây bệnh thường gặp Việt Nam năm 2005 khoảng 22.647 chủng vi khuẩn xác định độ nhạy cảm với kháng sinh bệnh viện đại diện cho miền Bắc, Trung, Nam, kết cho thấy vi khuẩn thường gặp là: E coli (13,3%), trực khuẩn mủ xanh (13,3%), Staphylococcus (9,3%), Acinetobacter (9,9%) Klebsiella (15,1%) Cả loại vi khuẩn đề kháng với nhiều kháng sinh điều trị Các tinh dầu hương nhu, tràm trà Úc chứng minh có tính kháng khuẩn tốt 210 vi khuẩn S aureus, P aerusinosa chuẩn(1,2) Việc tiếp tục nghiên cứu tính kháng khuẩn tinh dầu vi khuẩn đề kháng kháng sinh mở khả ứng dụng cao tinh dầu lâm sàng việc kiểm sốt nhiễm khuẩn cách nhanh chóng hiệu cần thiết yếu tố định điều trị vết thương nhiễm trùng VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Vật liệu thử nghiệm Tinh dầu: tinh dầu hương nhu trắng Công ty TNHH tinh dầu Y Lang cung cấp, tinh dầu tràm trà Úc Công Ty Cổ phần Dược Phẩm 3/2 cung cấp Vi khuẩn thử nghiệm - Các chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm Khoa Vi sinh, bệnh viện Thống Nhất gồm có: 11 chủng Staphylococcus aureus, 12 chủng Klebsiella pneumoniae, 14 chủng Pseudomonas aerusinosa, 10 chủng E coli, chủng MRSA Môi trường thử nghiệm Môi trường Manitol Salt Agar (MSA), môi Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 trường MacConkey (MC), môi trường thử nghiệm kháng sinh, môi trường phát Fluorescin Pseudomonas, môi trường dinh dưỡng Nutrient Broth (NB) Kháng sinh thử nghiệm Đĩa kháng sinh công ty TNHH Dịch Vụ & Thương mại Nam Khoa cung cấp Phương pháp Khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm phương pháp khuếch tán (phương pháp KirbyBauer) - Phương pháp: phân lập vi khuẩn MRSA S.aureus môi trường MSA, K pneumoniae môi trường MC, P aerusinosa môi trường Pseudomonas, ấp 24 37 oC, sau đó, lấy 3-5 khóm vi khuẩn cấy sang mơi trường lỏng NB, ấp 37 oC 5-6 Pha loãng huyền dịch vi khuẩn để đạt số lượng vi khuẩn vào khoảng 107 vk/ml Trải vi khuẩn, ấp khô mặt thạch 37 oC không 15 phút Đặt đĩa kháng sinh, ấp 37 oC 24 - Đọc kết quả: dùng thước có đo độ chia đến milimet đo đường kính vùng ức chế Tra bảng biện giải theo kháng sinh, vi khuẩn hoạt lực tương ứng để suy độ nhạy cảm Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) phương pháp pha lỗng mơi trường rắn - Hoạt hóa vi khuẩn thử nghiệm pha huyền dịch vi khuẩn để đạt số lượng vi Nghiên cứu Y học thạch là: 125 µl/ ml, 62,5 µl/ ml; 31,25 µl/ ml mơi trường Chấm 1µl huyền dịch vi khuẩn pha lỗng vào thạch có chứa chất kháng khuẩn trên, để nhiệt độ phòng Đọc kết sau 24 Xác định hiệu kháng khuẩn phối hợp tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng vi khuẩn thử nghiệm - Sử dụng phương pháp bàn cờ để xác định hiệu phối hợp tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng chủng vi khuẩn thử nghiệm Dựa vào kết kháng sinh đồ chọn chủng vi khuẩn S.aureus, MRSA, K pneumoniae, aeruginosa đề kháng kháng sinh để sử dụng cho thử nghiệm - Pha huyền dịch vi khuẩn để đạt số lượng vi khuẩn vào khoảng 107 CFU/ml - Phối hợp tinh dầu: hai tinh dầu nghiên cứu pha lỗng ống nghiệm chứa mơi trường thử nghiệm kháng sinh theo độ pha lỗng ½, tạo thành dãy nồng độ tinh dầu giảm dần Sau từ hai dãy nồng độ tiếp tục phối hợp nồng độ theo phương pháp bàn cờ cho phối hợp vào hộp petri Chấm 1µl huyền dịch vi khuẩn pha loãng vào thạch có chứa chất kháng khuẩn trên, để nhiệt độ phòng Đọc kết sau 24 Để xác định loại tương tác chất thử nghiệm, dựa vào hệ số FIC Tính tốn giá trị FIC (Fractional Inhibitory Concentration) khuẩn vào khoảng 107 CFU/ml - Chuẩn bị môi trường có chứa tinh dầu: FIC ≤ 0,5: hiệp lực bội tăng (synergism) dùng Tween 80 nồng độ 0,1% để nhũ hóa tinh FIC ≤1: cộng lực (additive) dầu, pha loãng tinh dầu ống nghiệm chứa < FIC ≤ 4: tác dụng riêng rẽ (indiferent) môi trường rắn nấu chảy, theo độ pha FIC > 4: đối kháng (antagonism) lỗng ½, tạo thành dãy nồng độ tinh dầu Chuyên Đề Dược Học 211 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 KẾT QUẢ Khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm Bảng 1: Kết khảo sát tỷ lệ đề kháng kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm Kháng sinh Oxacillin Amoxicillin/ clavulanic Ceftazidim Imipenem Ciprofloxacin Ofloxacin Azithromycin Erythromycin Gentamycin Amikacin Piperacillin + tazobactam Ticarcillin + clavulanic Tobramycin S aureus n=11 100 81,8 63,6 9,09 90,9 54,5 100 100 Tỷ lệ vi khuẩn đề kháng kháng sinh (%) E coli n =10 K pneumoniae n = 12 P aeruginosa n = 14 58,3 40 50 50 28,6 8,3 30 75 35,6 30 Nhận xét: chủng S.aureus đề kháng với nhiều kháng sinh điều trị thông thường như: oxacillin (100%), azithromycin (100%), erythromycin (100%), ciprofloxacin (90,91%) amoxicillin/ clavulanic (81,82%) Trong 11 chủng S aureus khảo sát, đa số nhạy cảm với imipenem Trên 10 chủng E coli phân lập từ mẫu bệnh phẩm cho thấy vi khuẩn đề kháng với kháng sinh Các chủng đề kháng đa kháng sinh dùng để điều trị ciprofloxacin, ofloxacin, amikaxin, amoxcillin/acid clavulanic, piperacillin/tazbactam, ceftazidim (tỉ lệ đề kháng 30 %), nhiên chủng nhạy cảm 100% với imipenem Trên 14 chủng P aeruginosa trích từ mẫu bệnh phẩm, có chủng đề kháng với đa số kháng sinh dùng để điều trị gentamycin, amikacin, tobramycin, ciprofloxacin, tcarcillin/acid clavulanic, ceftazidime (tỉ lệ đề kháng 30%) Tuy nhiên chủng nhạy cảm với Imipenem Piperatazobactam Các chủng K pneumoniae đề kháng với nhiều loại kháng sinh điều trị thông thường gentamycin (91,67%), amikacin (83,33%), ticarcillin/ clavulanic (83,33%) Trong 12 chủng K pneumoniae khảo sát, có 11 chủng nhạy cảm với imipenem 212 90 30 30 91,6 83,3 50 83,3 35,7 28,6 35,6 35,7 Tính kháng khuẩn tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng chủng vi khuẩn thử nghiệm Bảng 2: MIC tinh dầu tràm trà Úc hương nhu trắng chủng vi khuẩn thử nghiệm Vi khuẩn n S aureus MRSA E coli K pneumoniae P aeruginosa 11 10 12 14 MIC (µl/ml mơi trường) Tinh dầu Tinh dầu hương tràm trà Úc nhu trắng 3,9 0,98 3,9 0,98 1,95 0,98 3,9 0,98 7,8 - 125 3,9 – 31,3 Tinh dầu tràm trà Úc có tính kháng khuẩn tốt chủng S aureus K pneumoniae phân lập từ bệnh phẩm với MRSA (Bảng 2) MIC chủng 3,9 µl/ml môi trường Trong 14 chủng P aeruginosa thử nghiệm, MIC T.T.O nằm khoảng rộng 7,8 – 125 µl/ml mơi trường MIC 10 chủng E coli (100%) 1,95 µl/ml mơi trường Như so với chủng P.aeruginosa, nhạy cảm T.T.O chủng E coli, S aureus K pneumoniae thay đổi Tinh dầu hương nhu trắng có tính kháng khuẩn mạnh chủng S aureus K Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Xác định hiệu kháng khuẩn phối hợp tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng chủng vi khuẩn thử nghiệm pneumoniae phân lập từ bệnh phẩm với P aeruginosa MRSA MIC chủng S aureus K pneumoniae 0,98 µl/ml mơi trường, P aeruginosa thay đổi từ 31,3 – 3,9 Tiến hành xác định hiệu kháng khuẩn phối hợp tinh dầu hương nhu trắng tinh dầu tràm trà Úc phương pháp bàn cờ µl/ml mơi trường Như vậy, tính kháng khuẩn tinh dầu hương nhu trắng tốt tinh dầu tràm trà Úc MIC hương nhu trắng vi khuẩn S aureus, MRSA, K.pneumoniae thấp lần so với tinh dầu tràm trà Úc Nồng độ tinh dầu tràm trà Úc (µl / ml môi trường Xác định hiệu kháng khuẩn phối hợp tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng vi khuẩn S aureus, MRSA K pneumoniae Bảng 3: Hiệu phối hợp tinh dầu hương nhu trắng tràm trà Úc S aureus MRSA A1 62,5 A2 31,2 A3 15,6 A4 7,8 A5 3,9 A6 1,95 + B1 62,5 A1 B1 _ A2 B1 _ A3B1 _ A4 B1 _ A5 B1 _ A6 B1 _ B2 31,2 A1 B2 _ A2 B2 _ A3 B2 _ A4B2 _ A5 B2 _ A6 B2 _ A7 0,98 + A8 0,49 + A9 0,24 + A7 B1 _ A8 B1 _ A9 B1 _ A7B2 _ A8B2 _ A9B2 _ Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml mơi trường) B3 B4 B5 B6 B7 15,6 7,8 3,9 1,95 0,98 A1 B3 A1 B4 A1 B5 A1 B6 A1 B7 _ _ _ _ _ A2 B3 A2B4 A2 B5 A2 B6 A2 B7 _ _ _ _ _ A3 B3 A3B4 A3 B5 A3B6 A3B7 _ _ _ _ _ A4 B3 A4B4 A4 B5 A4 B6 A4 B7 _ _ _ _ _ A5 B3 A5B4 A5 B5 A5 B6 A5 B7 _ _ _ _ _ A6 B3 A6B4 A6 B5 A6 B6 A6B7 _ _ _ _ _ A7 B3 _ A8 B3 _ A9 B3 _ A7B4 _ A8B4 _ A9B4 _ A7 B5 _ A8 B5 _ A9 B5 _ A7 B6 _ A8 B6 _ A9 B6 _ A7 B7 _ A8 B7 _ A9 B7 _ B8 0,49 + A1 B8 _ A2 B8 _ A3 B8 _ A4 B8 _ A5 B8 _ A6B8 _ B9 0,24 + A1 B9 _ A2B9 _ A3B9 _ A4B9 _ A5B9 _ A6B9 _ A7 B8 _ A8 B8 + A29B8 + A7B9 + A8B9 + A9B9 + Ghi chú: (-): vi khuẩn bị ức chế, (+): vi khuẩn phát triển A: nồng độ tinh dầu tràm trà Úc, B: nồng độ tinh dầu hương nhu trắng AB: phối hợp hai tinh dầu nồng độ Nồng độ tinh dầu tràm trà Úc (µl / ml môi trường) Bảng : Hiệu phối hợp tinh dầu hương nhu trắng tràm trà Úc K pneumoniae A1 62,5 A2 31,2 A3 15,6 A4 7,8 A5 B1 62,5 A1 B1 _ A2 B1 _ A3B1 _ A4 B1 _ A5 B1 Chuyên Đề Dược Học B2 31,2 A1 B2 _ A2 B2 _ A3 B2 _ A4B2 _ A5 B2 Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml mơi trường) B3 B4 B5 B6 B7 15,6 7,8 3,9 1,95 0,98 A1 B3 A1 B4 A1 B5 A1 B6 A1 B7 _ _ _ _ _ A2 B3 A2B4 A2 B5 A2 B6 A2 B7 _ _ _ _ _ A3 B3 A3B4 A3 B5 A3B6 A3B7 _ _ _ _ _ A4 B3 A4B4 A4 B5 A4 B6 A4 B7 _ _ _ _ _ A5 B3 A5B4 A5 B5 A5 B6 A5 B7 B8 0,49 + A1 B8 _ A2 B8 _ A3 B8 _ A4 B8 _ A5 B8 B9 0,24 + A1 B9 _ A2B9 _ A3B9 _ A4B9 _ A5B9 213 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml mơi trường) B3 B4 B5 B6 B7 B8 15,6 7,8 3,9 1,95 0,98 0,49 + _ _ _ _ _ _ A6 B3 A6B4 A6 B5 A6 B6 A6B7 A6B8 _ _ _ _ _ _ 3,9 A6 1,95 + B1 62,5 _ A6 B1 _ B2 31,2 _ A6 B2 _ B9 0,24 + _ A6B9 _ A7 0,98 + A8 0,49 + A7 B1 _ A8 B1 _ A7B2 _ A8B2 _ A7 B3 _ A8 B3 _ A7B4 _ A8B4 _ A7 B5 _ A8 B5 _ A7 B6 _ A8 B6 _ A7 B7 _ A8 B7 _ A7 B8 _ A8 B8 + A7B9 + A8B9 + A9 0,24 + A9 B1 _ A9B2 _ A9 B3 _ A9B4 _ A9 B5 _ A9 B6 _ A9 B7 _ A9B8 + A9B9 + Ghi chú: (-): vi khuẩn bị ức chế, (+): vi khuẩn phát triển A: nồng độ tinh dầu tràm trà Úc, B: nồng độ tinh dầu hương nhu trắng Giá trị FIC ba vi khuẩn thử nghiệm 0,75 Vậy phối hợp tinh dầu hương nhu trắng tinh dầu tràm trà Úc tỉ lệ 1:2 cho kết tốt nhất, có tác động cộng lực S aureus, MRSA K pneumoniae AB: phối hợp hai tinh dầu nồng độ Kết cho thấy MIC phối hợp hai tinh dầu ba chủng vi khuẩn S aureus, MRSA K.pneumoniae 0,49 µl O.G /ml + 0,98 µl T.T.O /ml mơi trường (Bảng Bảng 4) MIC T.T.O ba vi khuẩn S aureus MRSA, K.pneumoniae 3,9 µl/ml MIC tinh dầu O.G ba vi khuẩn 0,98 µl/ml Xác định hiệu kháng khuẩn phối hợp tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng vi khuẩn P aeruginosa Nồng độ tinh dầu tràm trà Úc (µl / ml mơi trường) Bảng : Hiệu phối hợp T.T.O tinh dầu HNT chủng P aeruginosa A1 125 A2 62,5 A3 31,2 + A4 15,6 + A5 7,8 + A6 3,9 + B1 125 A1 B1 _ A2 B1 _ A3B1 _ A4 B1 _ A5 B1 _ A6 B1 _ B2 62,5 A1 B2 _ A2 B2 _ A3 B2 _ A4B2 _ A5 B2 _ A6 B2 _ A7 1,95 + A8 0,98 + A9 0,49 + A7 B1 _ A8 B1 + A9 B1 + A7B2 + A8B2 + A9B2 + Nồng độ tinh dầu hương nhu trắng (µl / ml mơi trường) B3 B4 B5 B6 B7 31,2 15,6 + 7,8 + 3,9 + 1,95 + A1 B3 A1 B4 A1 B5 A1 B6 A1 B7 _ _ _ _ _ A2 B3 A2B4 A2 B5 A2 B6 A2 B7 _ _ _ _ _ A3 B3 A3B4 A3 B5 A3B6 A3B7 _ _ _ _ _ A4 B3 A4B4 A4 B5 A4 B6 A4 B7 _ _ _ _ _ A5 B3 A5B4 A5 B5 A5 B6 A5 B7 _ _ _ _ _ A6 B3 A6B4 A6 B5 A6 B6 A6B7 _ _ + + + A7 B3 + A8 B3 + A9 B3 + Từ kết Bảng 5, MIC phối hợp hai tinh dầu 15,6 µl O.G /ml + 3,9 µl T.T.O /ml môi trường (tỉ lệ O.G: T.T.O 4:1), MIC T.T.O tinh dầu O.G P aeruginosa 125 µl/ml 31,3 µl/ml 214 A7B4 + A8B4 + A9B4 + A7 B5 + A8 B5 + A9 B5 + A7 B6 + A8 B6 + A9 B6 + A7 B7 + A8 B7 + A9 B7 + B8 0,98 A1 B8 _ A2 B8 _ A3 B8 _ A4 B8 _ A5 B8 _ A6B8 + B9 0,49 + A1 B9 _ A2B9 _ A3B9 _ A4B9 _ A5B9 _ A6B9 + A7 B8 + A8 B8 + A29B8 + A7B9 + A8B9 + A9B9 + môi trường Giá trị FIC phối hợp 0,53 Như hiệu phối hợp hai tinh dầu phối hợp cộng lực vi khuẩn P aeruginosa Tỷ lệ phối hợp O.G:và T.T.O tốt 4:1 So với tác động riêng lẻ, phối hợp hai tinh Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 dầu làm tăng hoạt tính kháng khuẩn cụ thể làm giảm 32 lần MIC T.T.O giảm lần MIC tinh dầu O.G KẾT LUẬN Các chủng vi khuẩn S aureus, K pneumoniae, P aeruginosa, E coli phân lập từ bệnh phẩm khoa Vi sinh thuộc bệnh viện Thống Nhất đề kháng với tỷ lệ cao nhiều kháng sinh điều trị thông thường amoxicillin/ clavulanic, azithromycin, erythromycin, ciprofloxacin tỷ lệ đề kháng lên tới 80% đến 100% Trong số 13 kháng sinh thử nghiệm, có kháng sinh imipenem cho khả nhậy cảm cao Đây điều đáng báo động việc sử dụng kháng sinh điều trị Tinh dầu tràm trà Úc hương nhu trắng có tính kháng khuẩn cao vi khuẩn đề kháng với kháng sinh Nồng độ MIC tinh dầu có giá trị tương đương MIC kháng sinh vi khuẩn nhậy cảm Việc phối hợp tinh dầu chủng vi khuẩn thử nghiệm có tính cộng lực làm gia tăng Chuyên Đề Dược Học Nghiên cứu Y học khả kháng khuẩn Điều mở khả sử dụng tinh dầu điều trị tổn thương da bỏng, tai nạn bệnh nhiễm khuẩn thông thường da khác để giảm nguy đề kháng kháng sinh TÀI LIỆU THAM KHẢO Carson CF, Riley TV (1998), “Antimicrobial activity of Tea Tree Oil” Rural Industries Research and Development Corporation, Australia, pp 14-29 Nakamura CV, Ueda-Nakamura T, Bando E (1999), “Antibacterial Activity of Ocimum gratissimum L Essential Oil”, Mem Inst Oswaldo Cruz, 94(5): 675-678 Siervert DM et al (2008), “Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus reported in the United States, 20022006”, Oxford Journal, 46(5): 668-674 Halcón L, Milkus K (2004), “Staphylococcus aureus and wounds: a review of tea tree oil as a promising antimicrobial”, Am J Infect Control 2:121-124 Chambers HF (2001), “The changing epidemiology of Staphylococcus aureus?”, Emerging Infectious Disease, 7(2):250 Ngày nhận báo: 14.12.2012 Ngày phản biện nhận xét báo: 20.3.2013 Ngày báo đăng: 10.03.2014 215 ... tốt tinh dầu tràm trà Úc MIC hương nhu trắng vi khuẩn S aureus, MRSA, K.pneumoniae thấp lần so với tinh dầu tràm trà Úc Nồng độ tinh dầu tràm trà Úc (µl / ml mơi trường Xác định hiệu kháng khuẩn. .. KẾT QUẢ Khảo sát độ nhạy cảm kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm Bảng 1: Kết khảo sát tỷ lệ đề kháng kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập từ bệnh phẩm Kháng sinh Oxacillin Amoxicillin/... MIC tinh dầu tràm trà Úc hương nhu trắng chủng vi khuẩn thử nghiệm Vi khuẩn n S aureus MRSA E coli K pneumoniae P aeruginosa 11 10 12 14 MIC (µl/ml mơi trường) Tinh dầu Tinh dầu hương tràm trà Úc