Đề tài này được tiến hành với mục tiêu nhằm xác định giá trị của xét nghiệm tìm kháng nguyên Hp trong phân (HpSA) trong chẩn đoán nhiễm helicobacter pylori (Hp) ở trẻ em nhiễm Hp có triệu chứng. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
Trang 1GIÁ TRỊ CỦA XÉT NGHIỆM KHÁNG NGUYÊN HP TRONG PHÂN TRONG CHẨN ĐOÁN NHIỄM HELICOBACTER PYLORI
CÓ TRIỆU CHỨNG Ở TRẺ EM
Trần Thị Thanh Tâm*, Phạm Thị Ngọc Tuyết**, Nguyễn Thị Thu Hương**,
Nguyễn Thúc Bội Ngọc**, Mai Văn Bôn*
Tóm tắt
Mục tiêu: Để xác định giá trị của xét nghiệm tìm kháng nguyên Hp trong phân (HpSA) trong chẩn
đoán nhiễm Helicobacter pylori (Hp) ở trẻ em nhiễm Hp có triệu chứng
Phương pháp: Các bệnh nhi < 15 tuổi có triệu chứng tiêu hóa và có chỉ định nội soi tiêu hóa trên được
nhập viện vào khoa tiêu hóa bệnh viện Nhi đồng 2 Phân được thu thập một ngày trước khi tiến hành nội soi sinh thiết để xét nghiệm CLO test và mô học Nhiễm Hp được xác định khi mô học và CLO test cùng dương tính Sự hiện diện của Hp trong phân được xác định bằng phương pháp miễn dịch men (ELISA) sử dụng kit kháng thể đơn dòng Kết quả HpSA được so sánh với kết quả mô học và CLO test
Kết quả: chín mươi bảy trẻ tham gia vào nghiên cứu với tuổi trung bình là 8,5 ± 2,7 tuổi Mô học và
CLO test đồng bộ trên 90 trẻ (92,7%) HpSA có độ nhạy, chuyên, giá trị dự đoán âm và dương và độ chính xác lần lượt là 95%, 98%, 96%, 97%, 96%
Kết luận: HpSA, một phương pháp miễn dịch men, có giá trị chính xác để xác định nhiễm Hp ở trẻ có
triệu chứng tiêu hóa
Abstract
THE ACCURACY OF STOOL ANTIGEN TEST FOR DIAGNOSIS OF HELICOBACTER PYLORI
INFECTION IN CHILDREN WITH SYMPTOMATIC DISEASE
Tran Thi Thanh Tam, Pham Thi Ngoc Tuyet, Nguyen Thi Thu Huong, Nguyen Thuc Boi Ngoc,
Mai Van Bon * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 12 – Supplement of No 1 - 2008: 109 - 113
Objective: To evaluate the accuracy of HpSA for the detection of Hp infection in children with
symtomatic disease
Methods: Children younger than 15 years old with digestive symtoms and having the indication of
upper endoscopic procedure admitted to Children Hospital N2 Stool samples were collected from each participant Endoscopy procedure gave three samples: one for CLO-test, other two for histologic examination The presence of Hp infection was determined by positive histologic findings and positive CLO-test The presence of Hp organisms in stool was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay using a commercially available monoclonal antibody kit Results of the stool antigen test were compared with histology findings and CLO-test results
Results: Ninety seven children (mean age, 8.5 ± 2.7 years) participated in the study Histologic
findings and RUT results were concordant in 90 children (92,7% of the children) Per study protocol, HpSA had a sensitivity, specificity, negative and positive predictive value, and accuracy rate of 95%, 98%, 96%, 97%, 96%, respectively
* Bộ môn Nhi - Đại học Y Dược TP HCM
** Khoa tiêu hóa - BV Nhi Đồng 1 TP.HCM
Trang 2
Conclusion: HpSA, a ELISA test, had an accurate value for the detection of infection in children with
digestive symtoms.
ĐẶT VẤN ĐỀ
Nhiễm Hp là một trong những nhiễm trùng
mạn tính thường gặp nhất ở con người Người ta
ước tính có khọảng 50% dân số thế giới nhiễm
Hp, nhưng xuất độ nhiễm thay đổi theo tuổi,
quốc gia, chủng tộc và tình trạng kinh tế xã hội(1)
Theo quốc gia, xuất độ thay đổi từ 20% đến >
80%, thấp nhất ở các nước Bắc Mỹ và Tây Âu,
cao nhất ở các nước Động Âu, Châu Á, và nhiều
nước đang phát triển
Nhiễm Hp thường mắc phải nhiều nhất
trong thời kỳ trẻ em, có đến 70% trẻ em ở các
nước đang phát triển nhiễm Hp trước tuổi
15(8).Qua nghiên cứu của Huang j-Q có mối liên
quan giữa nhễm Hp mạn tính lúc tuổi nhỏ với sự
phát triển ung thư dạ dày(7)
Hạn chế quan trọng trong việc xử trí H pylori
ở trẻ em là thiếu một xét nghiệm không xâm lấn
nhưng chính xác để phát hiện vi trùng ở trẻ em
Test Urea hơi thở dù mang nhiều hứa hẹn
nhưng chưa được nghiên cứu đầy đủ, khó áp
dụng cho trẻ nhỏ vì chưa hợp tác, và tỷ lệ dương
tính giả cao ở trẻ nhỏ do trẻ giữ thuốc trong
miệng nơi có nhiều vi khuẩn sinh urease Thử
nghiệm kháng nguyên Hp trong phân (HpSA)
theo các nghiên cứu có độ nhạy tốt (93%-100%)
và độ đặc hiệu hợp lý (70%-100%), giá trị tiên
đoán âm tốt (100%) nhưng giá trị tiên đoán
dương thấp (54%) (8,14,8) Trước khi có thêm các
xét nghiệm không xâm lấn tin cậy hơn, thử
nghiệm Hp trong phân giúp ích rất nhiều trong
phát hiện Hp và theo dõi điều trị các nhiễm
trùng Hp ở trẻ em.Các xét nghiệm xâm lấn: nội
soi, sinh thiết (xét nghiệm mô học hay nuôi cấy)
vẫn có giá trị vàng trong chẩn đóan Hp ở trẻ em
Bảng 1: Độ nhạy và đặc hiệu của các phương pháp
phát hiện Hp
Ph ươ ng pháp Độ nh ạ y (%) Độ đặ c hi ệ u
(%)
Ph ươ ng pháp xâm l ấ n
Ph ươ ng pháp Độ nh ạ y (%) Độ đặ c hi ệ u
(%)
(Clotest)
l ấ n
HpSA 89-94 91-95
Ở nước ta hiện nay, xét nghiệm xâm lấn như nội soi sinh thiết làm CLO test, mô học và nuôi cấy còn nhiều hạn chế, nhiều cơ sở y tế chưa thực hiện rộng rãi ở trẻ em, xét nghiệm Urea hơi thở chỉ thực hiện ở một vài cơ sở y tế tại thành phố lớn Do đó, một xét nghiệm không xâm lấn,
có tính chính xác cao là mối quan tâm lớn của các nhà nhi khoa lâm sàng
Đề tài này thực hiện nhằm xác định giá trị
xét nghiệm HpSA trong chẩn đoán nhiễm Hp ở
trẻ em Từ đó có thể đề xuất sử dụng HpSA thay thế cho xét nghiệm xâm lấn trong chẩn đoán
nhiễm Hp ở trẻ em, nhất là ở những cơ sở y tế
không thực hiện được nội soi tiêu hóa cho trẻ
em Cụ thể mục tiêu nghiên cứu là (1) xác định
độ chuyên và độ nhạy của xét nghiệm HpSA (2) xác định giá trị tiên đoán dương và âm của xét nghiệm
ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế nghiên cứu
cắt ngang mô tả và phân tích
Đối tương nghiên cứu
Bệnh nhi nhập viện khoa tiêu hóa từ tháng 10-2005 đến tháng 10-2006 có triệu chứng tiêu hóa được chỉ định nội soi tiêu hóa trên
Các chì định nội soi bao gồm:
- Đau bụng kéo dài > 1 tháng
- Hội chứng dạ dày: đau bụng vùng thượng
vị, đau bụng liên quan đến bữa ăn, trước hoặc sau ăn, ợ hơi, ợ chua
- Ói tái diễn chưa rõ nguyên nhân
- Ói máu nghi do viêm loét dạ dày – tá tràng
Trang 3Tiêu chí loại ra
Bệnh nhi có bệnh tim mạch, hô hấp nặng,
hoặc đã uống thuốc kháng sinh, kháng acid, ức
chế bơm proton 4 tuần trước khi nhập viện
Cỡ mẫu
Lấy theo công thức:
2
2
1
/ ( )
n
d
P = 0,97 và p=0,98 (độ nhạy và độ chuyên dựa
vào nghiên cứu trước đây) (1,1); n (nhóm nhiễm
Hp) = 44, n (nhóm không nhiễm Hp) = 44;
tổng=44+31=75 bệnh nhân
Thu thập thông tin và xử lý số liệu
Bệnh nhi được thăm khám lâm sàng, sau đó
được thực hiện nội soi tại bệnh viện Nhi đồng II,
đọc kết quả đại thể và thử CLO-test, 2 mẫu sinh
thiết được gửi đến khoa Giải phẫu bệnh lý bệnh
viện Chợ Rẫy Nhóm nhiễm Hp được xác định
khi có kết quả mô học Hp dương tính và CLO
test dương tính(15,16) Nhóm không nhiễm Hp khi
cả mô học và CLO test cùng âm tính Trường
hợp chỉ có một trong hai xét nghiệm:mô học
hoặc CLO test dương tính thì loại bỏ ra khỏi
phần phân tích kết quả
- Trước khi nội soi tiêu hóa, bệnh nhân được
cho xét nghiệm HpSA: mẫu phân của bệnh nhân
được chứa trong một lọ kín và chuyển đến
phòng miễn dịch học của Trung tâm Hòa Hảo
ngay sau khi bệnh nhân đi tiêu trễ nhất là 3 giờ
sau Xét nghiệm phân được tiến hành bằng cách
dùng kit định lượng để tìm kháng nguyên Hp
với phương pháp ELISA (Genesis Diagnostics,
UK) Kết quả dương tính âm tính được hướng
dẫn đọc bởi nhà sản xuất
Xử lý số liệu và phân tích số liệu bằng
chương trình SPSS phiên bản 11.5
KẾT QUẢ
Bảng 1: Đặc điểm của mẫu nghiên cứu (N=90)
Đặ c đ i ể m T n s ố T l %
Trung bình: 8,5 ± 2,7
Tu ổ i
N ữ
41
49
45,6 54,4
Viêm dạ dày dạng nốt gặp ở 22 trẻ trong đó
tất cả trẻ này đều nhiễm Hp Loét tá tràng gặp ở
10 trẻ, tất cả trẻ này đều nhiễm Hp Các dạng
viêm khác như phù nề, xuất tiết, chợt, xuất huyết dạng chấm gặp trên 42 trẻ, phân bố cho nhóm
nhiễm Hp và không nhiễm Hp (viêm dạ dày do
nguyên nhân khác) theo tỉ lệ 12 /30
Có 97 bệnh nhân vào lô nghiên cứu Xét nghiệm mô học và CLO test đồng bộ với nhau trên 90 trường hợp (92,7%) và 7 bệnh nhân (7,3%) có kết quả không đồng nhất giữa mô học
và CLO test nên chúng tôi loại ra khỏi phân tích tính toán độ chuyên hoặc nhạy
Trong 90 bệnh nhân có kết quả đồng bộ giữa
mô học và CLO test có 42 bệnh nhân bị nhiễm
Hp (46,7%) theo tiêu chuẩn xác định của nghiên
cứu này tức là có cùng lúc mô học dương tính và CLO test dương tính Có 48 bệnh nhi (53,3%)
không nhiễm Hp tức là mô học và CLO test cùng
âm tính
Tỉ lệ nhiễm Hp theo các phương pháp
riêng biệt
Mô học: 44/97 (45,3%) CLO test: 47/97 (48,5%) HpSA: 46/97 (47,4%)
Bảng 2: So sánh giữa HpSA và tiêu chuản vàng (mô
học + CLO test (n= 90)
Mô h ọ c + CLO test
nhi ễm Hp
T ng c ộ ng
AÂm tính
40
2
1
47
41
49
Độ nhạy, độ chuyên, giá trị tiên đoán, độ chính xác chung của HpSA trong chẩn đoán
nhiễm Hp:
Độ nhạy : 95%
Độ chuyên : 98%
Trang 4BÀN LUẬN
Đối với bệnh nhi, phương pháp xâm lấn như
nội soi có các bất lợi như nguy cơ gây mê, sư lo
âu và sợ hãi của trẻ và cha mẹ Hơn nữa, chỉ một
số ít cơ sở y tế mới trang bị máy nội soi tiêu hóa
cho trẻ em Do đó, HpSA, phương pháp không
xâm lấn để xác định sự có mặt của Hp, từ khi
được giới thiệu, đã thu hút nhiều sự quan tâm
của các bác sỹ chăm sóc trẻ em Tế bào thượng bì
đổi mới mỗi 1-3 ngày một lần và Hp theo đó
được thải ra trong phân, và được phát hiện bởi
kháng thể kháng Hp bên ngoài đưa vào Xét
nghiệm miễn dịch men HpSA, không xâm lấn,
không tốn nhiều thời gian thực hiện (phân tích
mất khoảng 90 phút) và rẻ tiền hơn phương
pháp đo urea qua hơi thở và nội soi – CLO test
Kỹ thuật phân tích của xét nghiệm miễn dịch có
thể thực hiện dễ dàng ở bất kỳ phòng xét
nghiệm nào
Các nghiên cứu ở người lớn sử dụng mô học
là tiêu chuẩn vàng để xác nhận nhiễm Hp đã
chứng minh được HpSA là công cụ chẩn đoán
Hp nhạy cảm(4,11,9) và là phương tiện tốt chứng
minh đáp ứng điều trị Thật vậy, nghiên cứu của
chúng tôi cho kết quả độ nhạy cảm và chuyên
biệt của xét nghiệm HpSA khá cao 95% và 98%
Giá trị tiên đoán dương và âm cũng cao (97% và
96%) có giúp ích cho các nhà lâm sàng trong việc
xác định hoặc bác bỏ sự hiện diện của Hp trên
các bệnh nhi có triệu chứng tiêu hóa Nghiên
cứu của chúng tôi cùng đồng bộ với kết quả của
các tác giả thực hiện ở trẻ em Koletzko và cs,
năm 2003 từ nghiên cứu của mình đã công bố độ
nhạy, chuyên, giá trị tiên đoán dương và âm lần
lượt là 98%, 99%, 98%, and 99%(11) Nhưng theo
tác giả Elitsur(1) HpSA có độ nhạy và giá trị tiên
đoán âm thấp lần lượt là 67% và 86% trong khi
độ chuyên và giá trị tiên đoán dương cao bằng
các tác giả khác Tương tự, Megraud và cs(11)
cũng báo cáo giá trị độ nhạy thấp ở trẻ em làm
cho các nhà nhi khoa lâm sàng ngần ngại trong
thực hiện ở trẻ nhỏ dưới 2 tuổi, vẫn cho kết quả
độ nhạy và chuyên cao (93%, 99%) Để đánh giá
chính xác giá trị của HpSA, Gisbert và cs(5) đã tiến hành nghiên cứu gộp 22 nghiên cứu về giá trị của HpSA cả người lớn trẻ em Kết quả cho thấy độ nhạy chung là 94%, độ chuyên là 97% Đồng thời tác giả cũng chỉ ra HpSA theo phương pháp ELISA với kháng thể đa dòng (polyclonal) cho kết quả âm tính giả nhiều hơn test với kháng thể đơn dòng (monoclonal) Vì thế, các nghiên cứu sử dụng kháng thể đa dòng cho độ nhạy thấp hơn so với đơn dòng, Điều này giải thích kết quả thấp của tác giả Elitsur Ngoài ra, dự trữ
và vận chuyển mẫu phân không đúng qui cách cũng làm giảm độ nhạy của xét nghiệm này Mẫu phân giữ trong phòng xét nghiệm ở -200 C - -700 Cnhiều ngày trước khi được phân tích Nếu nhiệt độ không đảm bảo hoặc bệnh nhân giữ phân nhiều giờ ở nhà trước khi đưa đến phòng xét nghiệm cũng làm giảm số mẫu phân thật sự dương tính Nghiên cứu chúng tôi có kết quả giống với các nghiên cứu khác là do phương pháp xét nghiệm là ELISA đơn dòng và phân không dự trữ nhiều ngày, phân chuyển đến phòng thí nghiệm trong vòng tối đa là 3 giờ, và sau đó được phân tích ngay tại phòng xét nghiệm mà không dự trữ đông lạnh như tại các nước Châu Âu
Tóm lại, HpSA có độ chính xác khá cao trong
phát hiện nhiễm Hp trên lâm sàng dựa vào giá
trị tiên đoán dương và âm cao HpSA có thể thay thế xét nghiệm xâm lấn như nội soi sinh thiết trong điều kiện những nơi không sẵn có trang
thiết bị để chẩn đoán nhiễm Hp ở trẻ có triệu
chứng và để xác định sự sạch trùng sau điều trị, tránh cho bệnh nhân một cuộc nội soi lập lại sau khi hoàn thành điều trị
TÀI LIỆU THAM KHẢO
of noninvasive tests to diagnose Helicobacter pylori
infection in very young children J Pediatr 2006;149:817-21)
Monoclonal Antibody-Based Helicobacter pylori Stool Antigen Test Helicobacter 2004;9: 228-232
Diagnosis of Helicobacter pylori Infection in Children With Symptomatic Disease:A Prospective Study Journal of
Trang 54. Gisbert JP, Pajares JM Diagnosis of Helicobacter pylori
infection by stool antigen determination: a systematic
review Am J Gastroenterol 2001;96:2829–38
5 Gisbert P, Morena F, Abraira V Accuracy of Monoclonal Stool
Antigen Test for the Diagnosis of H pylori Infection: A
Systematic Review and Meta-Analysis Am J Gastroenterol
2006;101:1921–1930
of Helicobacter pylori infection Aliment Pharmacol Ther
2002;16(Suppl 1):3-15
7 Huang J-Q, Sridhars CY, Hunt RH Meta-anlysis of the
relationship between Helicobacter pylori seropositivity and
gastric cancer Gastroenterology 1998;114:1169-79
8. Kabir S Review article: clinic-based testing for Helicobacter
pylori infection by enzyme immunoassay of faeces, urine and
saliva
9 Koletzko S, Konstantopoulos N, Bosman D, et al
Evaluation of a novel monoclonal enzyme immunoassay
for detection of Helicobacter pylori antigen in stool from
children Gut 2003;52:804–6
tract:epidemiology and diagnosis of Helicobacter pylori
infection BMJ 2001;323:920-922
Force on Helicobacter pylori Comparison of noninvasive
tests to detect Helicobacter pylori infection in children and
adolescents: results of a multicenter European study J
Diagnosis of Helicobacter pylori
13. Roggero P, Bonfiglio A, LUzzani S, et al Heliobacter pylori
stool antigen test: a method to confirm eradication in children J
Pediatr 2002;140:775-777
14 Sheu BS, Yang HB, Wang YL, et al Stool antigen assay to
screen H pylori infection and to assess the success of 3-day and
7-day eradication therapy in the patients with partial
gastrectomy Helicobacter 2002;7:199-204
15 Working Party of the European Helicobacter pylori Study
Group Guidelines for clinical trials in Helicobacter pylori
infection Gut 1997;41:S1–9
Group Technical annex: tests used to assess Helicobacter