Đề tài này được tiến hành với mục tiêu nhằm xác định giá trị của xét nghiệm tìm kháng nguyên Hp trong phân (HpSA) trong chẩn đoán nhiễm helicobacter pylori (Hp) ở trẻ em nhiễm Hp có triệu chứng. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 Nghiên cứu Y học GIÁ TRỊ CỦA XÉT NGHIỆM KHÁNG NGUYÊN HP TRONG PHÂN TRONG CHẨN ĐỐN NHIỄM HELICOBACTER PYLORI CĨ TRIỆU CHỨNG Ở TRẺ EM Trần Thị Thanh Tâm*, Phạm Thị Ngọc Tuyết**, Nguyễn Thị Thu Hương**, Nguyễn Thúc Bội Ngọc**, Mai Văn Bơn* Tóm tắt Mục tiêu: Để xác định giá trị xét nghiệm tìm kháng nguyên Hp phân (HpSA) chẩn đoán nhiễm Helicobacter pylori (Hp) trẻ em nhiễm Hp có triệu chứng Phương pháp: Các bệnh nhi < 15 tuổi có triệu chứng tiêu hóa có định nội soi tiêu hóa nhập viện vào khoa tiêu hóa bệnh viện Nhi đồng Phân thu thập ngày trước tiến hành nội soi sinh thiết để xét nghiệm CLO test mô học Nhiễm Hp xác định mô học CLO test dương tính Sự diện Hp phân xác định phương pháp miễn dịch men (ELISA) sử dụng kit kháng thể đơn dòng Kết HpSA so sánh với kết mô học CLO test Kết quả: chín mươi bảy trẻ tham gia vào nghiên cứu với tuổi trung bình 8,5 ± 2,7 tuổi Mô học CLO test đồng 90 trẻ (92,7%) HpSA có độ nhạy, chuyên, giá trị dự đốn âm dương độ xác 95%, 98%, 96%, 97%, 96% Kết luận: HpSA, phương pháp miễn dịch men, có giá trị xác để xác định nhiễm Hp trẻ có triệu chứng tiêu hóa Abstract THE ACCURACY OF STOOL ANTIGEN TEST FOR DIAGNOSIS OF HELICOBACTER PYLORI INFECTION IN CHILDREN WITH SYMPTOMATIC DISEASE Tran Thi Thanh Tam, Pham Thi Ngoc Tuyet, Nguyen Thi Thu Huong, Nguyen Thuc Boi Ngoc, Mai Van Bon * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 12 – Supplement of No - 2008: 109 - 113 Objective: To evaluate the accuracy of HpSA for the detection of Hp infection in children with symtomatic disease Methods: Children younger than 15 years old with digestive symtoms and having the indication of upper endoscopic procedure admitted to Children Hospital N2 Stool samples were collected from each participant Endoscopy procedure gave three samples: one for CLO-test, other two for histologic examination The presence of Hp infection was determined by positive histologic findings and positive CLOtest The presence of Hp organisms in stool was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay using a commercially available monoclonal antibody kit Results of the stool antigen test were compared with histology findings and CLO-test results Results: Ninety seven children (mean age, 8.5 ± 2.7 years) participated in the study Histologic findings and RUT results were concordant in 90 children (92,7% of the children) Per study protocol, HpSA had a sensitivity, specificity, negative and positive predictive value, and accuracy rate of 95%, 98%, 96%, 97%, 96%, respectively * Bộ môn Nhi - Đại học Y Dược TP HCM ** Khoa tiêu hóa - BV Nhi Đồng TP.HCM Nhi Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 Nghiên cứu Y học Conclusion: HpSA, a ELISA test, had an accurate value for the detection of infection in children with digestive symtoms ĐẶT VẤN ĐỀ Phương pháp Nhiễm Hp nhiễm trùng mạn tính thường gặp người Người ta ước tính có khọảng 50% dân số giới nhiễm Hp, xuất độ nhiễm thay đổi theo tuổi, quốc gia, chủng tộc tình trạng kinh tế xã hội(1) Theo quốc gia, xuất độ thay đổi từ 20% đến > 80%, thấp nước Bắc Mỹ Tây Âu, cao nước Động Âu, Châu Á, nhiều nước phát triển Nhiễm Hp thường mắc phải nhiều thời kỳ trẻ em, có đến 70% trẻ em nước phát triển nhiễm Hp trước tuổi 15(8).Qua nghiên cứu Huang j-Q có mối liên quan nhễm Hp mạn tính lúc tuổi nhỏ với phát triển ung thư dày(7) Hạn chế quan trọng việc xử trí H pylori trẻ em thiếu xét nghiệm không xâm lấn xác để phát vi trùng trẻ em Test Urea thở dù mang nhiều hứa hẹn chưa nghiên cứu đầy đủ, khó áp dụng cho trẻ nhỏ chưa hợp tác, tỷ lệ dương tính giả cao trẻ nhỏ trẻ giữ thuốc miệng nơi có nhiều vi khuẩn sinh urease Thử nghiệm kháng nguyên Hp phân (HpSA) theo nghiên cứu có độ nhạy tốt (93%-100%) độ đặc hiệu hợp lý (70%-100%), giá trị tiên đoán âm tốt (100%) giá trị tiên đoán dương thấp (54%) (8,14,8) Trước có thêm xét nghiệm khơng xâm lấn tin cậy hơn, thử nghiệm Hp phân giúp ích nhiều phát Hp theo dõi điều trị nhiễm trùng Hp trẻ em.Các xét nghiệm xâm lấn: nội soi, sinh thiết (xét nghiệm mô học hay ni cấy) có giá trị vàng chẩn đóan Hp trẻ em Bảng 1: Độ nhạy đặc hiệu phương pháp phát Hp Phương pháp Độ nhạy (%) Độ đặc hiệu (%) Phương pháp xâm lấn Mô học mẫu sinh thiết Cấy mẫu sinh thiết Test urease nhanh 95-99 70-90 90-95 95-99 100 95-98 Nhi Khoa Độ nhạy (%) Độ đặc hiệu (%) 95 100 95 95-98 30-50 89-94 95 95-98 100 91-95 (Clotest) PCR mẫu sinh thiết Phương pháp không xâm lấn Huyết học Thử nghiệm urea thở Cấy phân HpSA Ở nước ta nay, xét nghiệm xâm lấn nội soi sinh thiết làm CLO test, mô học ni cấy nhiều hạn chế, nhiều sở y tế chưa thực rộng rãi trẻ em, xét nghiệm Urea thở thực vài sở y tế thành phố lớn Do đó, xét nghiệm khơng xâm lấn, có tính xác cao mối quan tâm lớn nhà nhi khoa lâm sàng Đề tài thực nhằm xác định giá trị xét nghiệm HpSA chẩn đoán nhiễm Hp trẻ em Từ đề xuất sử dụng HpSA thay cho xét nghiệm xâm lấn chẩn đoán nhiễm Hp trẻ em, sở y tế không thực nội soi tiêu hóa cho trẻ em Cụ thể mục tiêu nghiên cứu (1) xác định độ chuyên độ nhạy xét nghiệm HpSA (2) xác định giá trị tiên đoán dương âm xét nghiệm ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế nghiên cứu cắt ngang mơ tả phân tích Đối tương nghiên cứu Bệnh nhi nhập viện khoa tiêu hóa từ tháng 10-2005 đến tháng 10-2006 có triệu chứng tiêu hóa định nội soi tiêu hóa Các chì định nội soi bao gồm: - Đau bụng kéo dài > tháng - Hội chứng dày: đau bụng vùng thượng vị, đau bụng liên quan đến bữa ăn, trước sau ăn, ợ hơi, ợ chua - Ói tái diễn chưa rõ nguyên nhân - Ói máu nghi viêm loét dày – tá tràng Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 Tiêu chí loại Bệnh nhi có bệnh tim mạch, hơ hấp nặng, uống thuốc kháng sinh, kháng acid, ức chế bơm proton tuần trước nhập viện Cỡ mẫu Lấy theo công thức: Z12−α / P(1 − P ) n= , d2 P = 0,97 p=0,98 (độ nhạy độ chuyên dựa vào nghiên cứu trước đây) (1,1); n (nhóm nhiễm Hp) = 44, n (nhóm khơng nhiễm Hp) = 44; tổng=44+31=75 bệnh nhân Thu thập thông tin xử lý số liệu Bệnh nhi thăm khám lâm sàng, sau thực nội soi bệnh viện Nhi đồng II, đọc kết đại thể thử CLO-test, mẫu sinh thiết gửi đến khoa Giải phẫu bệnh lý bệnh viện Chợ Rẫy Nhóm nhiễm Hp xác định có kết mơ học Hp dương tính CLO test dương tính(15,16) Nhóm khơng nhiễm Hp mô học CLO test âm tính Trường hợp có hai xét nghiệm:mơ học CLO test dương tính loại bỏ khỏi phần phân tích kết - Trước nội soi tiêu hóa, bệnh nhân cho xét nghiệm HpSA: mẫu phân bệnh nhân chứa lọ kín chuyển đến phòng miễn dịch học Trung tâm Hòa Hảo sau bệnh nhân tiêu trễ sau Xét nghiệm phân tiến hành cách dùng kit định lượng để tìm kháng nguyên Hp với phương pháp ELISA (Genesis Diagnostics, UK) Kết dương tính âm tính hướng dẫn đọc nhà sản xuất Xử lý số liệu phân tích số liệu chương trình SPSS phiên 11.5 KẾT QUẢ Bảng 1: Đặc điểm mẫu nghiên cứu (N=90) Tần số Tỷ lệ % – tuổi tuổi – 10 tuổi 16 44 17,8 48,9 >10 tuổi 30 33,3 Đặc điểm Trung bình: 8,5 ± 2,7 Tuổi Nhi Khoa Nghiên cứu Y học Nam Nữ Giới 41 49 45,6 54,4 Viêm dày dạng nốt gặp 22 trẻ tất trẻ nhiễm Hp Loét tá tràng gặp 10 trẻ, tất trẻ nhiễm Hp Các dạng viêm khác phù nề, xuất tiết, chợt, xuất huyết dạng chấm gặp 42 trẻ, phân bố cho nhóm nhiễm Hp không nhiễm Hp (viêm dày nguyên nhân khác) theo tỉ lệ 12 /30 Có 97 bệnh nhân vào lô nghiên cứu Xét nghiệm mô học CLO test đồng với 90 trường hợp (92,7%) bệnh nhân (7,3%) có kết khơng đồng mô học CLO test nên loại khỏi phân tích tính tốn độ chun nhạy Trong 90 bệnh nhân có kết đồng mơ học CLO test có 42 bệnh nhân bị nhiễm Hp (46,7%) theo tiêu chuẩn xác định nghiên cứu tức có lúc mơ học dương tính CLO test dương tính Có 48 bệnh nhi (53,3%) không nhiễm Hp tức mô học CLO test âm tính Tỉ lệ nhiễm Hp theo phương pháp riêng biệt Mô học: 44/97 (45,3%) CLO test: 47/97 (48,5%) HpSA: 46/97 (47,4%) Bảng 2: So sánh HpSA tiêu chuản vàng (mô học + CLO test (n= 90) Mô học + CLO test Tổng cộng Nhiễm Hp Khơng nhiễm Hp Phân loại HpSA Dương tính AÂm tính Tổng cộng 40 47 41 49 42 48 90 Độ nhạy, độ chuyên, giá trị tiên đốn, độ xác chung HpSA chẩn đốn nhiễm Hp: Độ nhạy : 95% Độ chuyên : 98% Giá trị tiên đoán dương : 97% Giá trị tiên đốn âm : 96% Độ xác chung : 96% Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 BÀN LUẬN Đối với bệnh nhi, phương pháp xâm lấn nội soi có bất lợi nguy gây mê, sư lo âu sợ hãi trẻ cha mẹ Hơn nữa, số sở y tế trang bị máy nội soi tiêu hóa cho trẻ em Do đó, HpSA, phương pháp khơng xâm lấn để xác định có mặt Hp, từ giới thiệu, thu hút nhiều quan tâm bác sỹ chăm sóc trẻ em Tế bào thượng bì đổi 1-3 ngày lần Hp theo thải phân, phát kháng thể kháng Hp bên đưa vào Xét nghiệm miễn dịch men HpSA, không xâm lấn, không tốn nhiều thời gian thực (phân tích khoảng 90 phút) rẻ tiền phương pháp đo urea qua thở nội soi – CLO test Kỹ thuật phân tích xét nghiệm miễn dịch thực dễ dàng phòng xét nghiệm Các nghiên cứu người lớn sử dụng mô học tiêu chuẩn vàng để xác nhận nhiễm Hp chứng minh HpSA cơng cụ chẩn đốn Hp nhạy cảm(4,11,9) phương tiện tốt chứng minh đáp ứng điều trị Thật vậy, nghiên cứu cho kết độ nhạy cảm chuyên biệt xét nghiệm HpSA cao 95% 98% Giá trị tiên đoán dương âm cao (97% 96%) có giúp ích cho nhà lâm sàng việc xác định bác bỏ diện Hp bệnh nhi có triệu chứng tiêu hóa Nghiên cứu đồng với kết tác giả thực trẻ em Koletzko cs, năm 2003 từ nghiên cứu cơng bố độ nhạy, chun, giá trị tiên đốn dương âm 98%, 99%, 98%, and 99%(11) Nhưng theo tác giả Elitsur(1) HpSA có độ nhạy giá trị tiên đoán âm thấp 67% 86% độ chuyên giá trị tiên đoán dương cao tác giả khác Tương tự, Megraud cs(11) báo cáo giá trị độ nhạy thấp trẻ em làm cho nhà nhi khoa lâm sàng ngần ngại sử dụng HpSA để tầm soát Hp Tác giả Dondi(1) thực trẻ nhỏ tuổi, cho kết độ nhạy chuyên cao (93%, 99%) Để đánh giá Nhi Khoa Nghiên cứu Y học xác giá trị HpSA, Gisbert cs(5) tiến hành nghiên cứu gộp 22 nghiên cứu giá trị HpSA người lớn trẻ em Kết cho thấy độ nhạy chung 94%, độ chuyên 97% Đồng thời tác giả HpSA theo phương pháp ELISA với kháng thể đa dòng (polyclonal) cho kết âm tính giả nhiều test với kháng thể đơn dòng (monoclonal) Vì thế, nghiên cứu sử dụng kháng thể đa dòng cho độ nhạy thấp so với đơn dòng, Điều giải thích kết thấp tác giả Elitsur Ngồi ra, dự trữ vận chuyển mẫu phân khơng qui cách làm giảm độ nhạy xét nghiệm Mẫu phân giữ phòng xét nghiệm -200 C -700 C nhiều ngày trước phân tích Nếu nhiệt độ khơng đảm bảo bệnh nhân giữ phân nhiều nhà trước đưa đến phòng xét nghiệm làm giảm số mẫu phân thật dương tính Nghiên cứu chúng tơi có kết giống với nghiên cứu khác phương pháp xét nghiệm ELISA đơn dòng phân khơng dự trữ nhiều ngày, phân chuyển đến phòng thí nghiệm vòng tối đa giờ, sau phân tích phòng xét nghiệm mà khơng dự trữ đơng lạnh nước Châu Âu Tóm lại, HpSA có độ xác cao phát nhiễm Hp lâm sàng dựa vào giá trị tiên đốn dương âm cao HpSA thay xét nghiệm xâm lấn nội soi sinh thiết điều kiện nơi khơng sẵn có trang thiết bị để chẩn đốn nhiễm Hp trẻ có triệu chứng để xác định trùng sau điều trị, tránh cho bệnh nhân nội soi lập lại sau hoàn thành điều trị TÀI LIỆU THAM KHẢO Doni E, Boldorini R, Rapa A, Fonio P, et al High accuracy of noninvasive tests to diagnose Helicobacter pylori infection in very young children J Pediatr 2006;149:817-21) Dore MP, Negrini R, Tadeu V, Marras L et al Novel Monoclonal Antibody-Based Helicobacter pylori Stool Antigen Test Helicobacter 2004;9: 228-232 Elitsur Y, Lawrence Z, Hill I Stool Antigen Test for Diagnosis of Helicobacter pylori Infection in Children With Symptomatic Disease:A Prospective Study Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition.2004;39:64-67 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 10 11 12 13 14 15 16 Nghiên cứu Y học Gisbert JP, Pajares JM Diagnosis of Helicobacter pylori infection by stool antigen determination: a systematic review Am J Gastroenterol 2001;96:2829–38 Gisbert P, Morena F, Abraira V Accuracy of Monoclonal Stool Antigen Test for the Diagnosis of H pylori Infection: A Systematic Review and Meta-Analysis Am J Gastroenterol 2006;101:1921–1930 Go MF Review article: Natural history and epidemiology of Helicobacter pylori infection Aliment Pharmacol Ther 2002;16(Suppl 1):3-15 Huang J-Q, Sridhars CY, Hunt RH Meta-anlysis of the relationship between Helicobacter pylori seropositivity and gastric cancer Gastroenterology 1998;114:1169-79 Kabir S Review article: clinic-based testing for Helicobacter pylori infection by enzyme immunoassay of faeces, urine and saliva Koletzko S, Konstantopoulos N, Bosman D, et al Evaluation of a novel monoclonal enzyme immunoassay for detection of Helicobacter pylori antigen in stool from children Gut 2003;52:804–6 Logan RF, Walker MM, ABC of the upper gastrointestinal tract:epidemiology and diagnosis of Helicobacter pylori infection BMJ 2001;323:920-922 Megraud F, on behalf of the European Pediatric Task Force on Helicobacter pylori Comparison of noninvasive tests to detect Helicobacter pylori infection in children and adolescents: results of a multicenter European study J Pediatr 2005;146:198-203 Monteiro L, de Mascarel A, Sarrasqueta AM, et al Diagnosis of Helicobacter pylori Roggero P, Bonfiglio A, LUzzani S, et al Heliobacter pylori stool antigen test: a method to confirm eradication in children J Pediatr 2002;140:775-777 Sheu BS, Yang HB, Wang YL, et al Stool antigen assay to screen H pylori infection and to assess the success of 3-day and 7-day eradication therapy in the patients with partial gastrectomy Helicobacter 2002;7:199-204 Working Party of the European Helicobacter pylori Study Group Guidelines for clinical trials in Helicobacter pylori infection Gut 1997;41:S1–9 Working Party of the European Helicobacter pylori Study Group Technical annex: tests used to assess Helicobacter pylori infection Gut 1997;41:S10–18 Nhi Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 Nhi Khoa Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ Số * 2008 Nhi Khoa Nghiên cứu Y học ... (100%) giá trị tiên đoán dương thấp (54%) (8,14,8) Trước có thêm xét nghiệm không xâm lấn tin cậy hơn, thử nghiệm Hp phân giúp ích nhiều phát Hp theo dõi điều trị nhiễm trùng Hp trẻ em. Các xét nghiệm. .. vài sở y tế thành phố lớn Do đó, xét nghiệm khơng xâm lấn, có tính xác cao mối quan tâm lớn nhà nhi khoa lâm sàng Đề tài thực nhằm xác định giá trị xét nghiệm HpSA chẩn đoán nhiễm Hp trẻ em Từ... sử dụng HpSA thay cho xét nghiệm xâm lấn chẩn đoán nhiễm Hp trẻ em, sở y tế khơng thực nội soi tiêu hóa cho trẻ em Cụ thể mục tiêu nghiên cứu (1) xác định độ chuyên độ nhạy xét nghiệm HpSA (2)