Tầm soát và chẩn đoán sớm ung thư phổi bằng xét nghiệm trên mẫu máu có vai trò rất quan trọng, giúp điều trị kịp thời và kéo dài thời gian sống cho bệnh nhân. DNA tự do trong máu rất có tiềm năng trong chẩn đoán và theo dõi điều trị cho bệnh nhân ung thư phổi. Mục tiêu: Đánh giá khả năng chẩn đoán và theo dõi điều trị ung thư phổi không tế bào nhỏ của nồng độ cfDNA.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 GIÁ TRỊ CỦA NỒNG ĐỘ CFDNA TRONG CHẨN ĐOÁN VÀ THEO DÕI ĐIỀU TRỊ UNG THƯ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ Phan Thanh Thăng*, Hồ Trọng Toàn*, Trần Thanh Tùng*, Suzan MCB Thanh Thanh*, Phan Cơng Hồng*, Lê Thị Thu Sương*, Lê Thượng Vũ*, Nguyễn Thúy Hằng*, Trần Bích Thư**, Nguyễn Trường Sơn* TĨM TẮT Đặt vấn đề: Tầm sốt chẩn đoán sớm ung thư phổi xét nghiệm mẫu máu có vai trò quan trọng, giúp điều trị kịp thời kéo dài thời gian sống cho bệnh nhân DNA tự máu có tiềm chẩn đoán theo dõi điều trị cho bệnh nhân ung thư phổi Mục tiêu: Đánh giá khả chẩn đoán theo dõi điều trị ung thư phổi không tế bào nhỏ nồng độ cfDNA Đối tượng: 53 bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ giai đoạn IIIB-IV 11 người trưởng thành khỏe mạnh bệnh viện Chợ Rẫytừ tháng 6/2016 - 01/2017 Phương pháp: Phương pháp cắt ngang Nồng độ cfDNA định lượng kỹ thuật Real-Time PCR với gen chứng nội exon gen EGFR Kết quả: Tuổi trung bình bệnhnhân nghiên cứu 58 tuổi (28 - 89 tuổi), với tỉ lệ nam/ nữ khoảng 2,5/1 Trong 53 trường hợp, có 42 trường hợp carcinôm tuyến, 37 trường hợp thuộc giai đoạn IV Nồng độ cfDNA trung bình huyết tương bệnh nhân NSCLC cao gấp 18 lần so với người trưởng thành khỏe mạnh (447,5 so với 24,8 ng/ml) (p = 0,002).Nồng độ cfDNA bệnh nhân NSCLC khơng có khác biệt theo độ tuổi, giới tính, kích thước u hay loại mơ học, cao nhóm thuộc giai đoạn IV so với giai đoạn IIIB (573,0 so với 157,3 ng/ml) (p = 0,025) Giá trị đường cong ROC AUC cfDNA chẩn đoán phân biệt NSCLC với người trưởng thành khỏe mạnh 0,9 (95%CI: 0,82 - 0,98) Độ nhạy, độ đặc hiệu giá trị chẩn đốn dương tính cfDNA 83,0% (95%CI: 75,7 - 95,7), 100% (95%CI: 100 - 100), 100% (95%CI: 100 - 100) Nồng độ cfDNA có xu hướng giảm bệnh nhân đáp ứng tốt với điều trị Kết luận: Nồng độ cfDNA huyết tương bệnh nhân NSCLC cao hơnso với người trưởng thành khỏe mạnh Bên cạnh giá trị chẩn đoán cao, nồng độ cfDNA có ý nghĩa theo dõi điều trị bệnh NSCLC Từ khóa: Ung thư phổi khơng tế bào nhỏ, NSCLC, nồng độ cfDNA ABSTRACT DIAGNOSIS AND TREATMENT FOLLOW-UP VALUES OF CIRCULATING FREE DNA CONCENTRATION IN NON-SMALL CELL LUNG CANCER Phan Thanh Thang, Ho Trong Toan, Tran Thanh Tung, Suzan MCB Thanh Thanh, Phan Cong Hoang, Le Thi Thu Suong, Le Thuong Vu, Nguyen Thuy Hang, Tran Bich Thu, Nguyen Truong Son * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement Vol 21 - No - 2017: 90 - 97 Background: Screening and early detection of lung cancer by non-invasive biomarker play an important role in treatment and elongation of life for patients Circulating free DNA (cfDNA) is a potential biomarker in molecular diagnostics for lung cancer patients Objective: To assess the capability of cfDNA level in identifying NSCLC patients and monitor their * Bệnh viện Chợ Rẫy **ĐH Khoa học Tự nhiên TP HCM Tác giả liên lạc: ThS Phan Thanh Thăng ĐT: 0977148046 Email: thanhthangphan@gmail.com 90 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 Nghiên cứu Y học disease status Subjects: 53 NSCLC patients stage IIIB-IV and 11 healthy adults at Cho Ray hospital from June 2016 to January 2017 Methods: Cross-sectional study cfDNA concentration was quantificated by Real-Time PCR using exon of EGFR gene as reference gene Results: the median age of NSCLC patients is 58 years (range 28 to 89 years) Male/female patient ratio is about 2.5/1 Of 53 NSCLC cases, 42 cases are adenocarcinoma, and 37 cases are in stage IV Mean concentration value of cfDNA in NSCLC patients plasma was almost 18 times the value detected in plasma of healthy adults (447.7 vs 24.8 ng/ml) (p = 0.002) Age, sex, tumor size and histology type did not correlate with cfDNA concentration in either group (p > 0.05) The cfDNA concentration in stage IV patients was significantly higher compared to stage IIIB (573.0 vs 157.3 ng/ml) (p = 0.025) The area under the ROC curve of cfDNA in discriminating NSCLC with healthy adults was 0.9 (95%CI: 0.82 - 0.98) The sensitivity, specificity and positive predictive value of cfDNA were 83.0% (95%CI: 75.7 - 95.7), 100% (95%CI: 100 - 100), 100% (95%CI: 100 100), respectively cfDNA level showed the trend toward reduction in good response to treatment Conclusions: cfDNA concentration in NSCLC patients was significantly higher compared to healthy adults Beside the high diagnostic values, cfDNA level may serve as a potential indicator in treatment follow-up for NSCLC patients Keywords: Non-small cell lung cancer, NSCLC, cfDNA concentration điều trị, có mối liên hệ chặt chẽ với yếu tố ĐẶT VẤN ĐỀ lâm sàng giai đoạn bệnh, kích thước khối u Ung thư phổi loại ung thư thường gặp hay mức độ biệt hóa(8,15,16,17).Nồng độ cfDNA giới nhiều thập kỷ, có ý nghĩa tiên lượng bệnh ung thư nguyên nhân gây tử vong hàng đầu phổi(2,8,11,15) Tại Việt Nam, chưa có báo cáo loại ung thư Năm 2012, tồn giới có khoảng nồng độ cfDNA huyết tương người 1,8 triệu ca mắc khoảng 1,59 triệu ca tử trưởng thành khỏe mạnh bệnh nhân ung thư vong ung thư phổi(22) Tầm soát chẩn đốn phổi, vai trò chẩn đoán, sớm ung thư phổi xét nghiệm mẫu theo dõi điều trị tiên lượng bệnh máu có vai trò quan trọng, giúp điều trị kịp Mục tiêu nghiên cứu thời kéo dài thời gian sống cho bệnh nhân Đánh giá khả chẩn đoán theo dõi Một số dấu ấn ung thư máu sử đáp ứng điều trị NSCLC nồng độ cfDNA dụng rộng rãi giúp sàng lọc ung thư phổi Xác định nồng độ cfDNA huyết tương CEA (carcinoma embryonic antigen), CA 199 người trưởng thành khỏe mạnh Xác định nồng (carcinoma antigen) CYFRA 211(cytokeratin độ cfDNA huyết tương bệnh nhân 19)(1,3) Tuy nhiên dấu ấn có độ nhạy (3,14) NSCLCtại thời điểm chẩn đoán, sau 1, chu thấp đặc hiệu kỳ điều trị Xác định giá trị chẩn đoán theo Nhiều nghiên cứu giới cho thấy dõi điều trị NSCLCcủa nồng độ cfDNA nồng độ DNA tự máu (cfDNA circulating free DNA) có tiềm năngtrong chẩn đốn ung thư phổi(4,10,12,14,16,17,18,23) So với người khỏe mạnh bình thường người mắc bệnh phổi mạn tính, nồng độcfDNA bệnh nhân ung thư phổi cao nhiều lần(10,12,16,17,18,23) Nồng độ cfDNA thay đổi trình ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu gồm 53 bệnh nhânmới, chẩn đốn mắc ung thư phổi khơng tế bào nhỏ (NSCLC - non-small cell lung cancer) giai đoạn IIIB-IV, thực xét Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 91 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 nghiệm tìm đột biến gen EGFR mẫu máu, 11 người trưởng thành khỏe mạnh đến khám sức khỏe định kỳ bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 6/2016 - 01/2017 Tất bệnh nhân tư vấn thể đồng ý tham gia nghiên cứu Mẫu huyết tương người trưởng thành khỏe mạnh thu thập sau hoàn tất xét nghiệm theo dõi sức khỏe định kỳ Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu tiến hành theo phương pháp cắt ngang Tách chiết cfDNA Mẫu máu sau thu thập xử lý cách ly tâm 4oC/2000rpm 10 phút; sau 4oC/12000rpm 10 phút để thu khoảng 2ml huyết tương cfDNA mẫu huyết tương tách chiết kit QIAsymphony Circulating DNA (Qiagen-Đức) Quy trình kỹ thuật theo hướng dẫn nhà sản xuất, thực máy QIA symphony, ứng dụng công nghệ tách chiết hạt từ có độ tinh hiệu suất tách chiết cao(13) cfDNA lưu -80oC đến làm PCR Định lượng cfDNA tronghuyết tương Nghiên cứu sử dụng mẫu DNA chuẩn người (Qiagen-Đức) có nồng độ 104ng/ml để xây dựng đường chuẩn phản ứng PCR định lượng cfDNA Một loạt nồng độ mẫu chuẩn sử dụng gồm: ng/ml,101 ng/ml, 102 ng/ml, 103 ng/ml 104 ng/ml Gen chứng nội sử dụng nghiên cứu exon gen EGFR, kèm master mix kit EGFR Plasma (Qiagen-Đức) Chuẩn bị phản ứng PCR cách trộn 19,5μl mastermix với 0,5μl Taq Polymerase(1 IU/μl), thêm 5μl mẫu chuẩn hay mẫu thử Chạy phản ứng PCR máy RotorGeneQ 3000, theo chu trình luân nhiệt: 95oC/15 phút; 40 chu kỳ 95oC/30 giây 60oC/60 giây.Kết cfDNA phân tích phần mềm RotorGene Q 2.0 92 Phân tích thống kê Dữ liệu từ nghiên cứu xử lý phần mềm thống kê STATA 14.0 (Lakeway Drive, Texas, Mỹ) Thống kê xác định so sánh: nồng độ cfDNA trung bình bệnh nhân NSCLC người khỏe mạnh; bệnh nhân NSCLC sau điều trị so với trước điều trị Phép kiểm có ý nghĩa thống kê p 0,8 Thống kê nhằm xác định giá trị cut-off nồng độ cfDNA tương ứng với độ nhạy độ đặc hiệu cao KẾT QUẢ Từ tháng 6/2016 - 01/2017, với 53 bệnh nhân NSCLC 11 người trưởng thành khỏe mạnh chọn vào nghiên cứu, ghi nhận kết sau: Đặc điểm lâm sàng nồng độ cfDNA Đặc điểm lâm sàng nồng độ cfDNA bệnh nhân NSCLC người trưởng thành khỏe mạnh trình bày theo bảng bảng Nồng độ trung bình cfDNA bệnh nhân NSCLC cao có ý nghĩa thống kê so với người trưởng thành khỏe mạnh (Bảng 1) Nồng độ trung bình cfDNA bệnh nhân NSCLC cao có ý nghĩa thống kê nhóm thuộc giai đoạn IV so với giai đoạn IIIB (Bảng 2) Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA ghi nhậnlần lượt theo bảng hình 1, giá trị ngưỡng 44,7 ng/ml huyết tương, độ xác, độ nhạy, độ đặc hiệu giá trị chẩn đốn dương tính NSCLC nồng độ cfDNA cao Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 Nghiên cứu Y học Bảng 1: Nồng độ cfDNAtrung bình người khỏe mạnh bệnh nhân NSCLC Nhóm Số lượng Người trưởng thành khỏe mạnh NSCLC 11 53 Nồng độ cfDNA (ng/ml huyết tương) Trung bình±SD Trung vị 24,8±10,5 29,5 447,5±1050,1 167,7 P 0,002 Bảng 2: Nồng độ cfDNA bệnh nhân NSCLC theo đặc điểm lâm sàng Đặc điểm lâm sàng Số lượng Tính chung 53 29 24 38 15 16 37 42 11 Tuổi (trung bình: 58; từ 28 - 89) Giới tính Giai đoạn bệnh Loại mơ học ≤ 60 > 60 Nam Nữ IIIB IV Carcinôm tuyến Khác** *So sánh: nhóm có kích thước u >5 ≤ cm; Nồng độ cfDNA (ng/ml huyết tương) Trung bình ± SD Trung vị 447,5±1050,1 167,7 336,6 ± 751,4 93,9 581,5 ± 1330,9 204,9 438,9±1076,6 201,3 469,3±1015,8 97,2 157,3±137,3 112,2 573,0±1237,4 198,9 517,9±1170,7 142,1 119,2±94,0 90,9 P 0,214 0,462 0,025 0,865 **Gồm: carcinôm tế bào gai tế bào lớn Bảng 3: Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA Nồng độ cfDNA Cut-off AUC Độ nhạy, % Độ đặc hiệu, Giá trị chẩn đoán Giá trị chẩn đoán (ng/ml huyết tương) (ng/ml) (95%CI) (95%CI) % (95%CI) dương, % (95%CI) âm, % (95%CI) Người trưởng thành khỏe mạnh: 0,90 24,8 (20,1 - 35,8) 83,0 100 100 61,1 44,7 p = 0,000 (75,7-95,7) (100-100) 100-100) (38,1-84,1) NSCLC: (0,82-0,98) 447,5(144,7 - 2108,8) Nồng độ cfDNA trước sau điều trị Hình Diện tích đường ROC AUC nồng độ cfDNA chẩn đoán NSCLC Trong 53 trường hợp, theo dõi cfDNA tổng cộng 13 trường hợp, có trường hợp đủ lần (ghi nhận trường hợp có đáp ứng tốt) trường hợp theo dõi lần dấu điều trị tử vong Kết cfDNA trình bày sau: nồng độ trung bình cfDNA bệnh nhân đáp ứng tốt giảm dần qua chu kỳ điều trị Số bệnh nhân có nồng độ cfDNA > cut-off giảm dần qua chu kỳ điều trị (bảng 4) Ở bệnh nhân dấu điều trị tử vong, nồng độ trung bình cfDNA sau điều trịchu kỳ cao gấp gần lần so với lúc chẩn đoán Số bệnh nhân có nồng độ cfDNA > cut-off sau chu kỳ tương tự lúc chẩn đoán (bảng 5) Bảng 4: Nồng độ cfDNA ởbệnh nhân có đáp ứng tốt Bệnh nhân số #6 #12 Nồng độ cfDNA (ng/ml huyết tương) Lần Lần Lần (chẩn đoán ban đầu) (sau chu kỳ) (sau chu kỳ) 90,0 72,5 27,2 167,7 63,4 6,6 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Đột biến EGFR Điều trị L858R L858R, T790M Erlotinib Hóa trị 93 Nghiên cứu Y học Bệnh nhân số #14 #22 #25 #32 #35 #46 #47 Trung bình Số bệnh nhân có nồng độ cfDNA > cut-off (%) Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 Nồng độ cfDNA (ng/ml huyết tương) Lần Lần Lần (chẩn đoán ban đầu) (sau chu kỳ) (sau chu kỳ) 203,7 131,1 8,6 300,0 114,8 81,4 220,8 142,8 6,2 41,4 33,7 24,2 83,4 2,4 18,0 23,6 6,8 2,5 26,0 4,7 2,2 139,5 63,6 19,7 6/9 5/9 1/9 (66,7%) (55,5%) (11,1%) Đột biến EGFR Điều trị L858R L861Q Del Del, G719S Del Del, T790M Del, T790M - Gefitinib Afatinib Hóa trị + Xạ trị Afatinib + Hóa trị Xạ trị Osimertinib Afatinib - - - Bảng 5: Nồng độ cfDNA bệnh nhân dấu điều trị tử vong Nồng độ cfDNA (ng/ml huyết tương; n = 13) Đột biến EGFR Lần Lần Lần (chẩn đoán ban đầu) (sau chu kỳ) (sau chu kỳ) #13 206,1 358,8 L858R #15 267,9 594,3 L861Q #31 90,0 121,1 G719S, L858R #39 57,9 63,1 Del Trung bình 155,5 284,3 Số bệnh nhân có nồng độ 4/4 4/4 cfDNA > cut-off (%) (100%) (100%) Bệnh nhân số Điều trị Erlotinib Hóa trị Hóa trị - 42 trường hợp carcinôm tuyến, nhiều dạng mô học khác (11 trường hợp gồm carcinôm tế bào gai tế bào lớn) Hình 2.Sự thay đổi nồng độ cfDNA nhóm bệnh nhân NSCLC BÀN LUẬN Đặc điểm lâm sàng nồng độ cfDNA Tuổi trung bình bệnh nhânNSCLC nghiên cứu 58 tuổi (từ 28 - 89 tuổi) Trong 53 trường hợp, có 38 bệnh nhân nam 15 bệnh nhân nữ, tương ứng với tỉ lệ nam/nữkhoảng 2,5/1 Độ tuổi tỉ lệ nam/nữ nghiên cứu tương đương với nghiên cứu ngồi nước(1,3,10,12,17,19) Có 37 trường hợp NSCLC giai đoạn IV 16 trường hợp thuộc giai đoạn IIIB; 94 Nồng độ cfDNA người trưởng thành khỏe mạnh 24,8 ng/ml huyết tương (20,1 35,8 ng/ml), gần với giá trị trung vị 29,5 ng/ml Độ lệch chuẩn 10,5 ng/ml cho thấy trị số cfDNA người trưởng thành khỏe mạnh ổn định Nồng độ trung bình cfDNA bệnh nhân NSCLC 447,5 ng/ml huyết tương, cao gấp 18 lần so với người trưởng thành khỏe mạnh (p = 0,002) (bảng 1) Nồng độ cfDNA khác biệt bệnh nhân NSCLC độ lệch chuẩn cfDNA 1050,1 ng/ml, giá trị trung vị 167,7 ng/ml (bảng 1) Nồng độ cfDNA bệnh nhân NSCLC nghiên cứu gần giống với nghiên cứu Gabriella Sozzi sử dụng gen chứng nội Microsatellite (333 ng/ml huyết tương)(16), cao so với nghiên cứu sử dụng gen chứng nội hTERT hay β-actin(5,9,12,17, 18,23) (bảng 4) Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 Theo Gbriella Sozzi, nồng độ cfDNA bệnh nhân NSCLC khơng khác biệt theo độ tuổi, giới tính, loại mô học hay giai đoạn bệnh (giai đoạn IIII)(16,17) Tương tự Gbriella Sozzi, nghiên cứu cho thấy nồng độ cfDNA huyết tương bệnh nhân NSCLC không khác biệt theo độ tuổi (≤ 60 so với > 60 tuổi), giới tính, loại mơ học hay kích thước u (≤ cm so với > 5cm) (bảng 2) Tuy nhiên, nồng độ cfDNA cao có ý nghĩa thống kê nhóm thuộc giai đoạn IV (573,0 ng/ml) so với nhóm thuộc giai đoạn IIIB (157,3 ng/ml) (p = 0,025) Sự khác biệt tiêu chuẩn chọn mẫu củachúng tơi khác với Gbriella Sozzi Nghiên cứu Y học Nghiên cứu tổng hợp 2125 bệnh nhân Tao Jiang cho thấy độ đặc hiệu nồng độ cfDNA chẩn đoán ung thư phổi cao nhiềukhi sử dụng gen chứng nội β-actin sử dụng phương pháp PCR(7) Trong nghiên cứu ghi nhận giá trị cut-off 44,7 ng/ml huyết tương, độ xác cfDNA chẩn đoán phân biệt NSCLC với người trưởng thành khỏe mạnh đạt 90% (AUC = 0,90; 95%CI: 0,82 -0,98; p = 0,000)(bảng 3, hình 1) Kết cho thấy nồng độ cfDNA có ý nghĩa chẩn đoán phân biệt NSCLC với người trưởng thành khỏe mạnh.Độ nhạy độ đặc hiệu cfDNA chẩn đoán NSCLC 83,0% (95%CI: 75,7 - 95,7%) 100% (95%CI: 100 - 100%) Giá trị chẩn đoán dương tính NSCLC sử dụng cfDNA 100% (95%CI: 100 - 100%) (bảng 3) Độ xác, độ nhạy, độ đặc hiệu giá trị chẩn đốn dương tính nghiên cứu tương đương với kết nghiên cứu Gabriella Sozzi (gen hTERT)(17),A.Szpechcins (gen β-actin)(18), Newman A.M (81bp chromosome1)(10), cao so với nghiên cứu khác (bảng 6) Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA Nhiều nghiên cứu cho thấy nồng độ cfDNA có giá trị chẩn đốn phân biệt NSCLC với bệnh hơ hấp mạn tính người trưởng thành khỏe mạnh(5,7,9,10,12,16,17,18,20,21,23) Tuy nhiên, độ xác, độ nhạy độ đặc hiệu có khác biệt đáng kể phòng thí nghiệm, phục thuộc vào phương pháp phát hiện, gen chứng nội hay tình trạng bệnh lý Bảng 6: Giá trị chẩn đoán ung thư phổi cfDNA số nghiên cứu Tác giả Nghiên cứu (6) Gabriella Sozzi (13) Paci M (21) Vienna L (2) A.Szpechcinski (8) Herrera L.J (10) Kyon-Ah Yoon (10) Van der D.MA (11) Newman A.M (5) Gabriella Sozzi (18) Tao Jiang (23) Zhangjing Wei Gen chứng nội, kỹ thuật n EGFR exon 53 hTERT hTERT hTERT β-actin β-actin β-actin β-globin 81bp Chromosome Microsatellite PicoGreen Nồng độ cfDNA (ng/ml) Bệnh Chứng 100 151 76 50 25 102 46 447,5 (144,7 2108,8) 24,3 12,8 60 8,02 14,6 22,6 52 24,8 (20,1 35,8) 3,1 2,9 2,27 10,6 10,4 29 13 - 84 2125 50 333 5,03 Cut-off (ng/ml huyết tương) Độ nhạy Độ đặc AUC % hiệu % Giá trị Giá trị chẩn chẩn đoán đoán âm dương % % 44,7 0,90 83,0 100 100 61,1 15 3,25 2,8 14 32 0,94 0,79 0,82 0,90 0,63 0,86 0,66 78 63,5 80 90 - 95 78,5 61 80,5 - 94 84,7 84,9 - 81 53,4 86,8 - - - 0,95 85 96 - - 18 2,24 25 - 0,84 0,89 0,84 75 81 - 86 85 - - - Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 95 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 Khả theo dõi điều trị NSCLC nồng độ cfDNA Chúng nhận thấy bệnh nhân có đáp ứng tốt qua chu kỳ điều trị (bảng 4), nồng độcfDNA trung bình giảm dần qua chu kỳ, tất trường hợp có kết lần sau thấp lần trước Ngược lại, ởnhóm bệnh nhân dấu điều trị tử vong (bảng 5), nồng độc fDNA trung bình sau chu kỳ cao gấp gần lần so với lúc chẩn đoán Tất trường hợp có kết lần sau cao lần trước Sự thay đổi nồng độ cfDNA nhóm bệnh nhân (hình 2) nghiên cứu chúng tơi tương tự với nhiều nghiên cứu khác(8,9,15,16,17) Nghiên cứu Gabriella Sozzi (16,17) Vienna L(9) nồng độ cfDNA thời điểm trước sau phẫu thuật - 12 tháng bệnh nhân NSCLC cho thấy: cfDNA giảm xuống nhiều lần so với ban đầu nhóm đáp ứng tốt không tái phát; tăng lên gấp nhiều lần so với ban đầu nhóm tái phát bệnh Tương tự, nghiên cứu B.T.Li Rafael Sirera cho thấy khác biệt lớn nồng độ cfDNA bệnh nhân có đáp ứng so với bệnh nhân khơng đáp ứng hay có tiến triển bệnh q trình hóa trị điều trị thuốc nhắm đích(8,15).Một số nghiên cứu cho thấy cfDNA có giá trị tiên lượng cho bệnh nhân ung thư phổi (2,11,15,20) Như vậy, vài kết nghiên cứu bước đầu người Việt Nam, cho thấy giá trị nồng độ cfDNA chẩn đoán phân biệt NSCLC với người trưởng thành khỏe mạnh, theo dõi điều trị Cần mở rộng nghiên cứu thêm với cỡ mẫu lớn hơn, bệnh nhân NSCLC giai đoạn I - IIIA bệnh nhân mắc bệnh phổi lành tính viêm phổi hay thuyên tắc phổi để đánh giá sâu thêm vai trò cfDNA chẩn đốn điều trị bệnh Nồng độ cfDNA huyết tương bệnh nhân NSCLC cao có ý nghĩa thống kê so với người trưởng thành khỏe mạnh; cao bệnh nhân NSCLC giai đoạn IV so với giai đoạn IIIB; giảm xuống nhóm đáp ứng tốt với điều trị Bên cạnh giá trị chẩn đốn cao, nồng độ cfDNA có ý nghĩa theo dõi điều trị bệnh NSCLC TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 15 KẾT LUẬN Nghiên cứu 53 bệnh nhân NSCLCgiai đoạn IIIB-IVvà 11 người trưởng thành khỏe mạnh, đến kết luận sau: 96 16 17 Ahn JM, Cho JY (2013) Current serum lung cancer biomarkers J Mol Biomark Diagn; S4: 001 doi:10.4172/2155-9929.S4-001 Ai B et al (2016) Circulating cell-free DNA as a prognostic and predictive biomarker in non-small cell lung cancer Oncotarget, 7(28):44583-44595 Alissa K Greenberg, M Sung Lee (2007) Biomarkers for lung cancer: clinical uses Curr Opin Pulm Med, 13:249-255 Bremnes RM et al (2005) Circulating tumour derived DNA and RNA markers in blood: a tool for early detection, diagnostics, and follow-up? Lung Cancer, 49:1-12 Herrera LJ et al (2005) Quantitative analysis of circulating plasma DNA as a tumor marker in thoracic malignancies Clinical Chemistry, 51(1):113-118 Hoàng Anh Vũ, Cao Văn Động, Ngơ Thị Tuyết Hạnh, Đặng Hồng Minh, Phan Thị Xinh, Hứa Thị Ngọc Hà (2011) Đột biến gen EGFR KRAS bệnh nhân ung thư phổi khơng tế bào nhỏ Y học TP.Hồ Chí Minh, tập 15: tr.166-172 Jiang T et al (2016) The diagnostic value of circulating cell free DNA quantification in non-small cell lung cancer: A systematic review with meta-analysis Lung cancer, vol.100:63-70 Li BT et al (2015) A prospective study of total plasma cell-free DNA as a predictive biomarker for response to systemic therapy in patients with advanced non-small-cell lung cancers Annals of Oncology, 00:1-6.doi:10.1093/annonc/mdv498 Ludovini V et al (2008) Plasma DNA, microsatellite alterations, and p53 tumor mutations are associated with disease-free survival in radically resected non-small cell lung cancer patients Journal of Thoracic Oncology, 3(4):365-373 Newman AM et al (2014) An ultrasensitive method for quantitating circulating tumor DNA with broad patient coverage Nat Med, 20(5):548-554 Nygaard AD et al (2013) The prognostic value of cell-free DNA in advanced non-small cell lung cancer Journal of Cancer Therapy, 4:1-7 Paci M et al (2009) Circulating plasma DNA as diagnostic biomarker in non-small cell lung cancer.Lung cancer, 64(1):92-7 Qiagen (2015) QIAsymphony Circulating DNA Kit Handbook Qiagen GmbH, 40724 Hilden, Germany Salvi S et al (2016) Cell-free DNA as a diagnostic marker for cancer: current insights OncoTargets and Therapy, 9:6549-6559 Sirera R et al (2011) Circulating DNA is a useful prognostic factor in patients with advanced non-small cell lung cancer J Thorac Oncol, 6:286-290 Sozzi G et al (2001) Analysis of circulating tumor DNA in plasma at diagnosis and during follow-up of lung cancer patients Cancer Research, 61:4675-4678 Sozzi G et al (2003) Quantification of free circulating DNA as a diagnostic marker in lung cancer J Clin Oncol, 21:3902-3908 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Tập 21 * Số * 2017 18 19 20 21 Szpechcinski A et al (2015) Cell-free DNA levels in plasma of patients with non-small cell lung cancer and inflammatory lung disease British Journal of Cancer, 113:476-483 Trần Minh Thơng, Phạm Hùng Vân, Đồn Trọng Nghĩa, Nguyễn Thúy Hằng (2013) Khảo sát đặc điểm giải phẫu bệnh đột biến EGFR 116 trường hợp ung thư phổi không tế bào nhỏ Y học TP.HCM, tập 17, phụ số 3: tr.67-70 Van der Drift MA et al (2010) Circulating DNA is a noninvasive prognostic factor for survival in non-small cell lung cancer Lung Cancer, 68:283-287 Wei Z et al (2016) Circulating DNA addresses cancer monitoring in non small cell lung cancer patients for detection and capturing the dynamic changes of the disease SpringerPlus, 5:531 22 23 Nghiên cứu Y học WHO (2012) Globocan: Estimated cancer incidence, mortality and prevalence worldwide in 2012 Cancer fact sheets Yoon KA et al (2009) Comparison of circulating plasma DNA levels between lung cancer patients and healthy controls Journal of Molecular Diagnostics, 11(3):182-185 Ngày nhận báo: 15/02/2017 Ngày phản biện nhận xét báo: 28/02/2017 Ngày báo đăng: 05/04/2017 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 97 ... 0,865 **Gồm: carcinôm tế bào gai tế bào lớn Bảng 3: Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA Nồng độ cfDNA Cut-off AUC Độ nhạy, % Độ đặc hiệu, Giá trị chẩn đoán Giá trị chẩn đoán (ng/ml huyết tương)... Xác định giá trị chẩn đoán theo Nhiều nghiên cứu giới cho thấy dõi điều trị NSCLCcủa nồng độ cfDNA nồng độ DNA tự máu (cfDNA circulating free DNA) có tiềm năngtrong chẩn đốn ung thư phổi( 4,10,12,14,16,17,18,23)... Nồng độ trung bình cfDNA bệnh nhân NSCLC cao có ý nghĩa thống kê nhóm thuộc giai đoạn IV so với giai đoạn IIIB (Bảng 2) Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA Giá trị chẩn đoán NSCLC nồng độ cfDNA