Nghiên cứu được tiến hành với mục tiêu nhằm thu thập mẫu các loài thuộc chi ancistrocladus để so sánh về hình thái thực vật với mô tả loài trong tài liệu và khảo sát về hóa học để xác định loài cho các mẫu nghiên cứu. Mời các bạn cùng tham khảo đề tài qua bài viết này.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 SO SÁNH ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN ALKALOID MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI ANCISTROCLADUS Ở MIỀN NAM VIỆT NAM Phạm Đơng Phương, Trần Hùng* TĨM TẮT Mục tiêu: Thu thập mẫu loài thuộc chi Ancistrocladus để so sánh hình thái thực vật với mơ tả lồi tài liệu khảo sát hóa học để xác định loài cho mẫu nghiên cứu Phương pháp: Khảo sát hình thái, sinh thái: Các mẫu vật nghiên cứu khảo sát thực địa so sánh, đối chiếu với mẫu chuẩn tiêu thực vật khơ lồi thuộc chi Ancistrocladus Viện Sinh học nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh, với khóa phân loại, tài liệu mơ tả thực vật giám định chuyên gia để xác định lồi Định tính alkaloid sắc ký lớp mỏng Sơ xác định hàm lượng alkaloid toàn phần phương pháp cân: Kết quả: Đã thu thập mẫu nghiên cứu xác định mẫu loài khác nhau, bao gồm A tectorius, A cochinchinensis Ancistrocladus sp Kết luận: A sp loài hòan tồn khác với thành phần lồi xác định chi Ancistrocladus Việt Nam lần loài báo cáo Từ khóa: Ancistrocladus, A tectorius, A cochinchinensis, A sp., alkaloid, thực vật ABSTRACT COMPARISON OF BOTANICAL CHARACTERISTICS AND ALKALOIDAL CONSTITUENTS OF ANCISTROCLADUS SPP GROWING IN SOUTH VIETNAM Pham Dong Phuong, Tran Hung * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 642 - 651 Objectives: Collection and botanical identification the samples of Ancistrocladus species Methods: The morphology and ecology of the Ancistrocladus samples were described on the field and at the laboratory The samples were compared with authentic samples of the botanical museum and confirmed by botanical expert (Dr Vo Van Chi) Alkaloidal constituents were identified by thin layer chromatography (TLC) The quantities of total alkaloids were estimated by gravimetry Results: samples of the genus Ancistrocladus belonging to the Ancistrocladaceae family were collected and were identified as Ancistrocladus tectorius, Ancistrocladus cochinchinensis and Ancistrocladus sp Conclusions: Ancistrocladus sp is different from Ancistrocladus species in Vietnam and it’s the first time this species was reported Keyword: Ancistrocladus, A tectorius, A cochinchinensis, Ancistrocladus sp., alkaloid, botany Nam Á) châu Phi (miền trung tây Phi)(5,7) ĐẶT VẤN ĐỀ Ở Việt nam, có lồi thuộc chi Ancistrocladus Họ Ancistrocladaceae có chi mơ tả thực vật chí Trung qn lợp Ancistrocladus với khoảng 32 loài, tập trung nhà (A tectorius (Lour.) Merr.); Trung quân nam rừng nhiệt đới, chủ yếu khu vực châu Á (Đông (A cochinchinensis Gangep.) Trung quân *Khoa Dược – Đại Học Y Dược TPHCM Tác giả liên lạc: TS Phạm Đông Phương 642 ĐT: 0918265213 Email: phuongpd56@yahoo.com.vn Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Wallich (A wallichi Planch.)(6) Lá lòai A cochinchinensis nghiên cứu với alcaloid chất thuộc nhóm naphthoquinon, tetralon báo cáo(1,2) Từ vỏ thân loài A tectorius, A cochinchinensis Ancistrocladus sp phân lập 14 alkaloid naphthoquinon, xác định cấu trúc alkaloid naphthoquinon(8,9) Một số chất phân lập từ loài chứng tỏ có hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư gan (Hep-G2), dòng tế bào ung thư gan (RD), ngồi có tác dụng kháng nấm gây bệnh da Candida albicans(10, 11) Các loài Châu Á chưa nghiên cứu mặt thực vật cách tồn diện Các mơ tả loài phần lớn nửa đầu kỷ 20 trở trước với mô tả ngắn sơ sài, thiếu thông tin sinh thái, thụ phấn, mùa hoa hay nảy mầm hạt Cá biệt có lồi mơ tả thiếu hoa, hay phận quan trọng phân loại học Do chưa có chắn việc phân định loài Đa số mô tả thực vật trước năm 1925 có mơ tả quan sinh dưỡng, khơng có quan sinh sản (4,7) Chính mà có thiếu thống số lượng danh mục loài Trong báo này, tác giả báo cáo kết việc xác định mẫu nghiên cứu, phát loài Ancistrocladus hệ thực vật Việt Nam ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Nguyên liệu: Cành mang lá, hoa, thân Trung quân lợp nhà (A tectorius (Lour.) Merr.) Trung quân nam (A cochinchinensis Gagn.) thu hái Vườn quốc gia Cát Tiên, Đồng Nai vào 6/2002 Cành mang lá, hoa, thân Ancistrocladus sp thu hái xã Suối Ngô, huyện Tân Châu, tỉnh Tây Ninh vào 7/2002 6/2004 Dung mơi, hóa chất: Các dung mơi, hóa chất nghiên cứu lọai đạt tiêu chuẩn TKPT Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học Các thuốc thử pha theo DĐVN III Sắc ký lớp mỏng sử dụng mỏng silica gel F254 dày 0,20 mm tráng sẵn đế nhôm (Merck) Phương pháp nghiên cứu Khảo sát thực vật Khảo sát hình thái, sinh thái: Các mẫu vật nghiên cứu khảo sát thực địa phòng thí nghiệm mắt thường, kính lúp, kính hiển vi để mơ tả đặc điểm thực vật Mẫu vật so sánh, đối chiếu với mẫu chuẩn tiêu khơ lồi thuộc chi Ancistrocladus Viện Sinh học nhiệt đới TP Hồ Chí Minh mẫu A wallichii Vườn Quốc gia Pù Mát (Nghệ An), với khóa phân loại, tài liệu mô tả thực vật giám định TS Võ Văn Chi để xác định loài Khảo sát đặc điểm giải phẫu: Vi phẫu lấy đoạn 1/3 từ cuống lá, vi phẫu thân lấy mẫu phần không già non Vi phẫu cắt tay với lưỡi dao lam hay microtome nhuộm kép (carmin, lục iod) Quan sát kính hiển vi quang học mắt với độ phóng đại 10 x 40, 10 x 10, mô tả chụp hình Khảo sát đặc điểm bột dược liệu: Mẫu nghiên cứu cắt nhỏ, sấy khô nhiệt độ 40-50oC, tán rây qua rây để thu bột mịn đồng Soi bột nước kính hiển vi, xác định thành phần bột dược liệu Định tính alkaloid sắc ký lớp mỏng: Lấy khoảng g bột vỏ thân khoảng g bột loài trên, chiết phương pháp dùng dung môi hữu môi trường kiềm Làm khan dịch chiết thực phân tích sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi n-hexan–CHCl3– diethylamin (7:3:1) Sau khai triển, soi UV bước sóng 254, 365 nm, phun TT Dragendorff chụp hình sắc ký đồ, so sánh vết alkaloid dựa giá trị Rf, màu sắc vết diện tích vết tương đương Sơ xác định hàm lượng alkaloid toàn phần: 10 g dược liệu khô, xay qua rây cỡ 1,5 mm, xác định độ giảm khối lượng sấy khô Bột làm ẩm với 10 ml NH4OH đậm đặc giờ, 643 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 để khô tự nhiên cho vào bình nón nút mài 250 ml Chiết kiệt alkaloid cách đun sôi hồi lưu khoảng 10 phút bếp cách thủy với 100 ml, 50 ml CHCl3 × lần, kiểm tra việc chiết kiệt thuốc thử Valse-Mayer Lọc gộp chung dịch chiết vào bình lắng gạn, lắc với HCl 1% 20 ml, 10 ml × lần, gộp chung dịch acid loại tạp ether dầu hoả 20 ml x lần Kiềm hoá dịch acid NH4OH đến pH 11, lắc với CHCl3 20 ml, 10 ml × lần (kiểm tra việc chiết kiệt thuốc thử Valse-Mayer) Gộp chung dịch CHCl3, làm khan Na2SO4 khan, gạn lấy dịch CHCl3, rửa Na2SO4 CHCl3 10 ml × lần gộp chung dịch CHCl3 Thu hồi dung môi CHCl3, sấy 105oC đến khối lượng không đổi, cân tính hàm lượng alkaloid tồn phần Mỗi thí nghiệm thực lần điều kiện KẾT QUẢ Đặc điểm hình thái vi phẫu loài nghiên cứu Loài Trung quân lợp nhà (cây thuyền, A tectorius (Lour.) Merr.): Mẫu nghiên cứu khảo sát thực địa lấy Vườn Quốc gia Cát Tiên – tỉnh Đồng nai Cây non hay tái sinh (cao khoảng 1-1,5m) thường mọc thẳng đứng, khơng phân nhánh, thân trơn có màu đỏ nâu phần có màu xanh Lá hình elip thn hình trứng ngược (thon dần phía cuống lá), đỉnh thon tròn tù gốc Lá mọc liên tục từ gốc lên đến thân Lá dài trơn mặt, không lông, chiều ngang trung bình khoảng 6-8 cm, dài khoảng 20-30 cm, mọc khu vực trống (cây tái sinh) dài tới 40 cm Cây trưởng thành hay lâu năm dây leo thân gỗ có màu xám đến xám nhạt, cành phân nhánh bên, có gai dạng móc câu Thân dài có đến 20 m hơn, mọc bò đất leo lên gỗ khác, đường kính gốc trung bình khoảng 4-6 cm, lên đến 8-10 cm Lớp vỏ thân có màu nâu, phần gỗ cắt ngang có màu nâu nhạt Cành có vết sẹo lồi hình n ngựa vết tích kèm rụng sớm 644 Lá mọc đối, thường mọc khít thành túm cuối cành nhỏ Lá có hình elip thn hình trứng ngược, đỉnh thon tròn tù gốc (giống hình nêm); dài khoảng 15-25 cm, rộng khoảng 5-7 cm có chỗ lõm xuống mặt, hình cầu nhỏ màu trắng Cuống ngắn rộng Cụm hoa hình chùy, hoa thưa, màu đỏ nhạt; đài không Quả màu nâu đến đỏ nâu, cánh (do đài đồng trưởng) Loài Trung quân nam (A cochinchinensis Gagnep.): Mẫu nghiên cứu khảo sát thực địa lấy Vườn Quốc gia Cát Tiên – tỉnh Đồng Nai Lá cành non bóng, trơn, dày chiều ngang phiến gần nửa đến 2/3 chiều dài, mọc cách thưa (khơng khít vào lồi A tectorius hay Ancistrocladus sp.) Lá thn hình trứng, to dần phía đỉnh, tròn tù gốc lá, đơi đỉnh lõm xuống Lá dài khoảng 10-20 cm, rộng khoảng 6-10 cm Trên thân non có tua mọc so le bên Cây trưởng thành hay lâu năm dây leo thân gỗ, phân nhánh có màu xám đến xám nhạt Thân dài khoảng 8-10 m hơn, leo lên gỗ khác, đường kính gốc trung bình khoảng 3-5 cm Lớp vỏ thân có màu nâu, phần gỗ cắt ngang có màu nâu nhạt phần vỏ Lá phần thân lớn hay cành già có cuống ngắn rộng, mọc cách, thành túm cuối phần thân phân nhánh cành nhỏ Lá lớn so với hai lồi lại, dài khoảng 20-30 cm, rộng khoảng 10-13 cm, có chấm hình cầu nhỏ màu nhạt mặt Cụm hoa phân nhánh, dạng chùy (paniculate), nụ hoa có màu đỏ đậm Chưa thu thập mẫu Loài Acistrocladus sp.: Mẫu nghiên cứu khảo sát thực địa lấy huyện Tân Châu, tỉnh Tây Ninh Cây non (cao khoảng 1-1,5 m) mọc thẳng đứng, khơng phân nhánh, tồn thân khơng có lơng Phần gốc thân có màu đỏ nâu, phần có màu xanh Lá mọc cách, mọc tập trung khoảng 1/2 phía Lá hình trứng ngược, Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 thon đầu, rộng khoảng 3-5 cm, dài khoảng 10-20 cm, mọc khu vực trống (cây tái sinh) dài tới 30 cm Cây trưởng thành hay lâu năm dài khoảng 6-8 m dây leo nhỏ thân gỗ, đường kính gốc 35 cm, phân nhánh Thân có vỏ ngồi dày sù sì, dễ bong tróc, màu nâu đỏ, phần gỗ cắt ngang có màu nâu Ngọn cành mọc bên thân biến thành gai hình móc câu Lá nhỏ loài trên, dài khoảng 15-20 cm, rộng khoảng 4-5 cm, mọc cách, khơng cuống gần khơng cuống, hình elip thon dần cuống Lá mọc tập trung tận hay cành nhỏ trơng giống hình hoa thị Phiến có chấm hình cầu nhỏ màu nhạt mặt Cụm hoa mọc cành, dạng xim chia ngả 3-4 lần, hoa dày có khoảng 50-70 hoa (đơi nhiều gấp đơi), hoa rụng sớm Cuống hoa Nghiên cứu Y học nhỏ, dài khoảng 3-4 mm Nụ hoa hình trứng, màu đỏ nhạt, dài 2-2,5 mm Hoa cánh, màu đỏ tươi đài khơng nhau, dài khoảng mm, nạc, rìa nhô lên Quả màu nâu nhạt, cánh không dài khoảng 1,5-3 cm (do đài đồng trưởng) Cả loài thu thập mẫu cành mang có hoa, (trừ lồi A cochinchinensis khơng có quả), lồi A tectorius định danh loài gắn biển tên Việt Nam tên khoa học Vườn Quốc gia Cát Tiên Cả lồi so sánh với khố phân loại chi Ancistrocladus, loài khảo sát trực tiếp định danh TS Võ Văn Chi Những điểm khác biệt lồi trình bày tóm tắt Bảng Bảng Tóm tắt điểm khác biệt lồi thuộc chi Ancistrocladus A tectorius A cochinchinensis - Dây leo thân gỗ to, có nhánh cong thành - Dây leo thân gỗ to, nhánh cong thành móc, có màu xám đến xám nhạt, móc, có màu xám đến xám nhạt Ancistrocladus sp - Dây leo nhỏ nhánh cong thành móc, vỏ ngồi dày sù sì, dễ bong tróc, màu nâu - Cây non hay tái sinh có mọc cách, - Cây non hay tái sinh có mọc cách, - Cây non hay tái sinh có mọc cách, mọc khít từ gốc lên ngọn, dài khoảng 20- mọc thưa từ gốc lên ngọn, dài khoảng 10- mọc dày từ 1/2 đến 1/3 thân phía 20 cm, rộng khoảng 6-10 cm, phiến Lá dài khoảng 20-40cm, rộng 40 cm, rộng khoảng 6-8 cm khoảng 4-6 cm dày, trơn nhẵn - Lá trưởng thành mọc cách, dài khoảng 15-25 cm, rộng khoảng 5-7 cm, phiến dày nhẵn, đầu thn nhọn, phía cuống có hình nêm Cuống ngắn, khó cháy - Lá trưởng thành mọc cách, đầu - Lá trưởng thành mọc cách, dai, tròn rộng, có đỉnh lõm xuống, không cuống gần không cuống, hình elip thon dần gốc Lá thn phía gốc Lá có kích thước lớn, dài khoảng 20-30 cm hơn, rộng nhỏ loài lại, dài khoảng 15khoảng 10-13 cm Cuống ngắn, 20 cm, rộng khoảng 4-5 cm, dễ cháy dễ cháy - Cụm hoa đứng, dạng chùy chia ngả, - Cụm hoa đứng, dạng chùy, chia ngả, - Cụm hoa đứng, dạng xim, phân nhánh nhiều (2 ngả, 3-4 lần), hoa nhiều, nụ hoa phân nhánh, hoa, cánh hoa màu đỏ nhạt phân nhánh ít, có nhiều hoa, cánh màu đỏ nhạt, cánh hoa màu đỏ sáng hoa màu đỏ đậm - Quả có cánh, khơng đều, màu đỏ nâu - Quả chưa thu thập - Quả có cánh, không đều, màu nâu nhạt - Mặt cắt ngang thân lớp vỏ thân (vùng - Mặt cắt ngang thân lớp vỏ thân (vùng - Mặt cắt ngang thân lớp vỏ thân lớp bần) màu nâu nhạt lớp bần) màu nâu nhạt (vùng lớp bần) màu đỏ nâu - Thân rễ rửa nước có nhiều - Thân rễ: khơng thu hái bọt - Thân rễ rửa nước có bọt Dưới hình ảnh hoa loài khảo sát Chuyên Đề Dược Khoa 645 Nghiên cứu Y học A tectorius Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 A cochinchinensis Ancistrocladus sp Hình Lá hoa lồi Ancistrocladus Hình Lá loài A cochinchinensis, Ancistrocladus sp A tectorius Đặc điểm vi phẫu Đặc điểm chung vi phẫu thân: Về hình thái bên ngồi khác thân gỗ A sp có màu đỏ so với loài A tectorius, A cochinchinensis cấu tạo giải phẫu chúng giống mơ bên Thân có tiết diện tròn, từ ngồi vào gồm có mơ sau: Lớp biểu bì gồm tế bào hình chữ nhật, vách cellulose Mơ mềm vỏ ngồi gồm tế bào hình đa giác vách cellulose, vùng chứa nhiều cụm tế bào tiết nhựa Lớp bần Mô mềm vỏ gồm tế bào hình bầu dục, vách cellulose, tế bào chứa hạt oxalatcalci hạt tinh bột; đám mơ cứng, vách dày hố gỗ phân bố khắp vùng Libe I gồm tế bào hình đa giác, vách cellulose, xếp lộn xộn Libe II gồm nhiều lớp tế bào hình chữ nhật, vách cellulose Gỗ II 646 gồm mạch gỗ tế bào mô mềm gỗ xếp thành vòng liên tục Gỗ I nằm phía vùng gỗ II Mơ mềm tuỷ hố mơ cứng Tuy nhiên vi phẫu thân có khác biệt nhỏ lồi A cochinchinensis có xuất bó libe-gỗ (bó vết lá) vùng mơ mềm vỏ lồi lại khơng có bó libe-gỗ Đặc điểm chung phần vi phẫu lá: Biểu bì trên, bên ngồi phủ lớp cutin dày rải rác có lơng tiết đầu tròn chân ngắn đa bào; mô mềm giậu chứa nhiều lục lạp; mô mềm khuyết, vùng có bó libe-gỗ phụ; biểu bì dưới, rải rác có lơng tiết đầu tròn chân ngắn đa bào, tế bào lỗ khí Tuy hình thái bên ngồi có khác cấu tạo giải phẫu loài giống bên cạnh có khác biệt nhỏ trình bày Bảng Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Khảo sát vi học loài nghiên cứu A:Cấu tạo mơ từ ngồi vào lồi A.tectorius Nghiên cứu Y học Vi phẫu thân: B: Cấu tạo mơ từ ngồi vào lồi A cochinchinensis Chú Thích 1: Biểu bì 2: Tế bào tiết tinh dầu 3: Mô mềm vỏ 4: Cụm mô cứng 5: Libe I 6: Libe II 7: Gỗ II 8: Gỗ I 9: Mô mềm tuỷ 10: Lớp bần hình thành 11: Bó libe gỗ đặc biệt lồi A cochinchinensis C:Cấu tạo mơ từ ngồi vào lồi Ancistrocladus sp Hình Cấu tạo giải phẫu thân loài chi Ancistrocladus Chuyên Đề Dược Khoa 647 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Hình Cấu tạo giải phẫu lồi chi Ancistrocladus A1, A2: Cấu tạo mơ gân phiến loài A tectorius Chú Thích 1: Biểu bì 6: Các bó libe gỗ B1, B2: Cấu tạo mô gân phiến lồi A cochinchinensis 2: Mơ mềm giậu 7: vòng mơ cứng 3: Libe 8: Mơ dày 4: Gỗ 9: Biểu bì C1, C2: Cấu tạo mơ gân phiến lồi Ancistrocladus sp 648 5: Mô mềm Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Bảng Một số điểm khác biệt vi phẫu loài A tectorius A cochinchinensis Ancistrocladus sp Gân lồi hai mặt Gân lõm mặt lồi mặt Gân lồi mặt lồi mặt dưới Biểu bì trên: có nhiều chỗ lõm sâu Biểu bì trên: có nhiều chỗ lõm sâu giống A tectorius Biểu bì trên: khơng có chỗ lõm Các bó libe-gỗ phụ tập trung thành cung gân Các bó libe-gỗ phụ tập trung bên gân Các bó libe-gỗ phụ tập trung bên gân Bó dẫn gồm: bó gỗ xếp vòng tròn nằm phía libe bao quanh phía ngồi Bó dẫn gồm: bó gỗ xếp Bó dẫn gồm: bó gỗ xếp vòng cung lồi lõm vòng tròn nằm phía libe khơng nằm phía libe bao quanh phía ngồi bao quanh phía ngồi Soi bột thân: Các thành phần bột thân ba lồi quan sát kính hiển vi khơng thấy có khác biệt nhiều Các cấu tử bao gồm mảnh mạch (mạch điểm, mạch vạch, mạch xoắn…), sợi, tế bào mô cứng, mảnh bần mảnh mô mềm, dịch nhựa Bột lá: Các thành phần bột ba loài quan sát kính hiển vi khơng thấy có khác biệt Các cấu tử bao gồm: mảnh biểu bì có lỗ khí kiểu hỗn bào, mảnh mạch xoắn, mảnh mạch vạch, sợi tế bào mô cứng, khối nhựa Qua khảo sát thực vật học, vi học mẫu Ancistrocladus sp phân biệt với loài A tectorius (Lour.) Merr A cochinchinensis Gagnep số điểm sau: - Lồi A tectorius (Lour.) Merr có cụm hoa hình chùy, phân nhánh, có hoa cánh hoa có màu đỏ nhạt; đỉnh thon hình trứng, phần gần cuống có hình nêm, khó cháy - Lồi A cochinchinensis Gagnep có cụm hoa hình chùy, phân nhánh, có hoa cánh hoa có màu đỏ đậm; Lá có kích thước lớn hẳn lồi lại, đỉnh tù, có đỉnh bị lõm dễ cháy - Lồi Ancistrocladus sp có cụm hoa hình xim, cánh hoa màu đỏ sáng; hình elip thuôn cuống lá, mọc thành túm tận xếp thành hình hoa thị, dễ cháy - Thân lồi Ancistrocladus sp xù xì, mặt cắt ngang thân có màu nâu đỏ, lồi lại thân trơn nhẵn mặt cắt ngang thân có màu nâu nhạt Chuyên Đề Dược Khoa Định tính alkaloid sắc ký lớp mỏng Các sắc ký đồ cho thấy thành phần alkaloid thân lồi có nhiều điểm tương đồng có khác biệt định Có alkaloid có lồi khơng có lồi ngược lại Thành phần alkaloid thân loài A tectorius loài A cochinchinensis gần so với loài Ancistrocladus sp Tỷ lệ alkaloid hỗn hợp so sánh diện tích mật độ vết sắc ký đồ loài khơng đồng nhất, lồi Ancistrocladus sp có vết có diện tích vết lớn hẳn vết tương ứng lồi lại Thành phần alkaloid loài nghiên cứu khác nhau, cụ thể sau: - Lồi A cochinchinensis có số lượng vết gần tương đương với số lượng vết alkaloid loài A tectorius vết phân cực có diện tích vết nhỏ vết tương ứng loài A tectorius - Lồi A tectorius có nhiều vết alkaloid nhất, vết phân cực có diện tích vết lớn vết tương ứng loài A cochinchinensis - Lồi Ancistrocladus sp có hàm lượng alkaloid thấp phát vết, có vết có hàm lượng lớn hẳn vết lại trùng với vết lồi A cochichinensis Với TT Dragendorff vết alkaloid Ancistrocladus sp cho màu hồng đến đỏ sậm có màu khơng bền vết alkaloid lồi lại có màu đỏ cam bền 649 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Như vậy, kết SKLM cho thấy thành phần alkaloid thân đặc biệt cho thấy có khác rõ lồi Sự khác biệt rõ thành phần alkaloid lồi Ancistrocladus sp với lồi lại Điều góp phần chứng tỏ mẫu nghiên cứu loài khác Qua định UV 254 nm UV 365 nm Dragendorff tính sơ nhóm hợp chất cho thấy Ancistrocladus sp có hàm lượng chất naphthoquinon nhiều so với loài A tectorius A cochinchinensis Điều phần giải thích vỏ gỗ thân lồi Ancistrocladus sp có màu đỏ đậm loài UV 254 nm UV 365 nm Dragendorff Hình SKĐ alcaloid thân loài Ancistrocladus TT TC TSP: Alcaloid thân A tectorius, A cochinchinensis A sp LT LC LSP: Alcaloid A tectorius, A cochinchinensis A sp Sơ định lượng alkaloid phương pháp cân: Kết định lượng phương pháp cân trình bày Bảng Bảng Kết định lượng alkaloid toàn phần thân loài Loài A A Ancistrocladus tectorius cochinchinensis sp Kết thân thân thân lần (%) 1,05 0,71 1,02 0,71 1,0 0, 040 lần (%) 1,05 0,68 1,01 0,70 1,0 0, 040 lần (%) 1,04 0,68 1,02 0,70 1,0 0, 039 TB (%) 1,02 0,70 1,0 0, 040 1,05 0,69 Kết sơ định lượng alkaloid thân loài nghiên cứu cho thấy: - Hàm lượng alkaloid toàn phần thân lồi vào khoảng 1% khơng có khác biệt đáng kể loài nghiên cứu - Hàm lượng alkaloid toàn phần loài A tectorius, A cochinchinensis gần (khoảng 0,7%) khoảng 70% so với hàm lượng alkaloid thân Riêng loài 650 Ancistrocladus sp hàm lượng alkaloid (0,04%), 4% so với hàm lượng alkaloid thân gần 1/18 so với hàm lượng alkaloid lồi lại Kết chứng minh khác biệt nguồn gốc thực vật Ancistrocladus sp so với loài BÀN LUẬN, KẾT LUẬN Qua khảo sát hình thái, sinh thái thực vật, vi học, đối chiếu với tài liệu với ý kiến chuyên gia thực vật (TS Võ Văn Chi) mẫu nghiên cứu kết hợp với kết định tính alkaloid sắc ký lớp mỏng sơ định lượng alkaloid tồn phần lồi A tectorius A cochinchinensis định danh Mẫu nghiên cứu thứ thu Tây Ninh có điểm khác biệt rõ so với loài và khác với lồi A wallichii Planch Có thể kết luận Ancistrocladus sp loài hoàn toàn khác với lồi hệ thực vật Đơng Dương mơ tả tài liệu có Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Như mẫu Ancistrocladus sp xác định khơng phải lồi A tectorius hay A cochinchinensis Lồi Ancistrocladus sp khơng phải lồi A wallichii Planch mơ tả tài liệu A wallichii mơ tả có mọc tập trung cuối nhánh; phiến thon hẹp, nhọn từ từ đỉnh gốc lá, hẹp lại thành cuống dài Lá không lông, gân phụ 15 cặp Cụm hoa đứng, khoảng 10 cm, phân nhánh 2-3 lần; hoa 3-4 mm, gần không cuống, cánh hoa màu trắng nhạt, đài khơng có sóng, màu xanh nhạt; 10 nhị Quả dài cm, có cánh gần [11, 12] Theo tài liệu, có Vườn quốc gia Pù Mát, huyện Con Cuông, tỉnh Nghệ An báo cáo có lồi A wallichii Planch Tuy nhiên, mẫu tiêu có cành mang (khơng có hoa quả, ) nên việc định lồi chưa chắn So sánh tiêu Ancistrocladus sp với mẫu vườn Quốc gia Pù Mát cho thấy rõ khác biệt Trong tồn q trình điều tra thu thập mẫu (từ 1999 đến 3-2009) chưa bắt gặp loài chi có cánh hoa màu trắng mơ tả lồi A wallichii Planch Qua điểm khác thực vật thành phần hoá học trên, nói mẫu Ancistrocladus sp loài khác với loài A tectorius (Lour.) Merr., A cochinchinensis A wallichii Planch điểm trên, mẫu Ancistrocladus sp phát thành phần hóa học, tác dụng sinh học thành phần loài chi Ancistrocladus cho hệ thực vật Việt Nam Như vậy, nói Việt Nam có loài thuộc chi Ancistrocladus Việc xác định loài mẫu Ancistrocladus sp tiến hành thời gian tới cách so sánh với mẫu vật gốc giải trình tự gen So sánh với đặc điểm thực vật Ancistrocladus sp với loài Ancistrocladus định danh gần hệ thực vật Malaysia cho thấy lồi Ancistrocladus sp có điểm tương đồng với lồi A benomensis Lồi Ancistrocladus sp có cụm hoa hình xim, phân nhánh nhiều (3-4 lần), hoa nhiều, cánh hoa màu đỏ sáng Lá hình elip thn phía cuống lá, mọc thành túm tận xếp thành hình hoa thị tương tự lồi A benomensis(3) Về thành phần hóa học, lồi Ancistrocladus sp có chứa alkaloid cochinchinolin-một chất lần công bố(9), đồng phân ancistrobenomin A- chất có cấu trúc 3-hydroxymethylen vốn gặp loài A benomensis Với đặc Chuyên Đề Dược Khoa TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 Anh Nguyen Hoang, Andrea Porzel, Helmut Ripperger, Gerhard Bringmann, Manuela Schaffer, Ralf God, Tran Van Sung and Gunter Adam (1997), Naphthylisoquinoline alkaloid from Ancistrocladus cochinchinensis, Phytochemistry, 45(6), 12871291 Anh Nguyen Hoang, Helmut Ripperger, Andrea Porzel, Tran Van Sung and Gunter Adam (1996), Tetralone from Ancistrocladus cochinchinensis, Phytochemistry, 44(3), 549 – 551 Bringmann G., M Dreyer, H Kopff, H Rischer, M Wohlfarth, H A Hadi, R Brun, H Meimberg, Gunther Heubl, (2005), “Ent-Dionchophylleine A and related dehydrogenated naphthylisoquinoline alkaloids, the first Asian Dionchophyllaceae-type alkaloids, from the ‘new’ plant species A benomensis”, J Nat Prod., 68, pp 686-690 Harald Meimberg et al (2010), “Evidence for species differentiation within the Ancistrocladus tectorius complex (Ancistrocladaceae) in Southeast Asia: a molecular approach”, Plant Syst Evol 284, pp.77–98 Kew Herbarium, Kew list: Ancistrocladaceae (http://www.plantsystematics.org/taxpage/0/0/79/genus/ Ancistrocladus.html Lecomte H., “Flore générale de L’Indo- Chine”, pp 19071912 Roy E Gereau, (1997), “Typification of names in Ancistrocladus Wallich (Ancistrocladaceae)”, Missouri Botanical Garden, NOVON 7, pp 242-245 Phạm Đông Phương, Trần Hùng, (2009), Nghiên cứu thành phần naphthoquinon loài trung quân (Ancistrocladus sp Ancistrocladaceae) phát Việt Nam, Dược học 4/2009, p.33-37 Phạm Đông Phương, Trần Hùng, (2009), Nghiên cứu thành phần alcaloid loài Trung quân (Ancistrocladus sp Ancistrocladaceae) phát Việt Nam, Dược học 5/2009, p.12-18 Phạm Đông Phương, Trần Hùng, (2009), Nghiên cứu tác dụng kháng nấm naphthoquinon loài Trung quân (Ancistrocladus sp Ancistrocladaceae) phát Việt Nam, Dược học 6/2009, p.12-18 Phạm Đông Phương, Trần Hùng, (2009), Nghiên cứu độc tính tế bào chất phân lập loài Ancistrocladus Việt Nam, Dược học 7/2009, p.12-18 Phạm Hoàng Hộ, (1999), Cây cỏ Việt Nam, 1, NXB Trẻ, tr 446 Võ Văn Chi, Trần Hợp, (2002), Cây cỏ có ích Việt Nam, tập 1, NXB Giáo dục, tr 297 651 ... wallichii Planch điểm trên, mẫu Ancistrocladus sp phát thành phần hóa học, tác dụng sinh học thành phần loài chi Ancistrocladus cho hệ thực vật Việt Nam Như vậy, nói Việt Nam có loài thuộc chi Ancistrocladus. .. định loài mẫu Ancistrocladus sp tiến hành thời gian tới cách so sánh với mẫu vật gốc giải trình tự gen So sánh với đặc điểm thực vật Ancistrocladus sp với loài Ancistrocladus định danh gần hệ thực. .. gặp loài chi có cánh hoa màu trắng mơ tả lồi A wallichii Planch Qua điểm khác thực vật thành phần hoá học trên, nói mẫu Ancistrocladus sp loài khác với loài A tectorius (Lour.) Merr., A cochinchinensis