Trong đề tài này nhằm nghiên cứu được một công thức thuốc chứa 250 mg clarithromycin có độ giải phóng hoạt chất nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN 250 MG Lê Minh Quân*, Trần Thị Phương Chi*, Nguyễn Thiện Hải* TĨM TẮT Mục tiêu: Nghiên cứu cơng thức thuốc chứa 250 mg clarithromycin có độ giải phóng hoạt chất nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30 Phương pháp: Khảo sát qui trình định lượng clarithromycin phương pháp chiết đo quang Xây dựng công thức, khảo sát ảnh hưởng số yếu tố dung môi xát hạt, kích cỡ hạt, độ cứng lên q trình điều chế viên nghiên cứu so sánh độ giải phóng hoạt chất với chế phẩm thu thập thị trường theo USP 30 Kết quả: Phương pháp chiết đo quang áp dụng để định lượng clarithromycin Độ giải phóng hoạt chất mẫu thu thập thị trường cho thấy có khác biệt Cơng thức nghiên cứu CT9 có độ giải phóng hoạt chất đạt tiêu chuẩn USP 30, tương đương mẫu B nhanh mẫu đối chiếu khác Kết luận: Kết từ thực nghiệm cho thấy điều chế viên nén clarithromycin 250 mg phóng thích hoạt chất nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30 Chiết đo quang phương pháp hiệu quả, đơn giản kinh tế, áp dụng định lượng clarithromycin Từ khóa: Clarithromycin, chiết đo quang ABSTRACT FORMULATION OF CLARITHROMYCINE 250 MG TABLETS Le Minh Quan, Tran Thi Phuong Chi, Nguyen Thien Hai * Y Hoc TP Ho Chi Minh* Vol 15 - Supplement of No - 2011: 372 - 377 Objectives: Formulation of tablets containing 250 mg clarithromycine which has fast release rate of active substances, fitted to the specification of USP 30 Methods: Formulation and investigation the effects of some parameters on preparation of tablets by wet granulation method Clarithromycine release in references and studied samples were tested according to USP 30 and clarithromycine was determined by extractive spectrophotometric method Results: Dissolution profile results of five reference preparations containing 250 mg clarithromycine collected on the Vietnam market shows a big difference CT9 formula show fast rate of active substance release, fitted to the specification of USP 30 Conclusion: The present results provided evidence that clarithromycin 250 mg tablets can be prepared in condition of Vietnam Extractive spectrophotometric method can be applied to determine clarithromycin This method is effective, simple and economical Keywords: clarithromycine, extractive spectrophotometric nước, làm chậm giải phóng hoạt chất ĐẶT VẤN ĐỀ (GPHC), làm giảm sinh khả dụng thuốc Đối Clarithromycin kháng sinh bán tổng với qui trình sản xuất viên nén clarithromycin, hợp họ macrolid sử dụng phổ biến việc khảo sát công thức lựa chọn thông số tác động diệt khuẩn phổ rộng hiệu công nghệ hợp lý đóng vai trò quan trọng Tuy nhiên clarithromycin khó tan *Bộ Mơn Cơng Nghiệp Dược, Khoa Dược - Đại Học Y Dược TPHCM Tác giả liên lạc: PGS TS Nguyễn Thiện Hải ĐT: 0905352679 Email: thienhai2002@yahoo.com 372 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 cải thiện khả GPHC viên chất lượng thuốc thành phẩm Bên cạnh đó, clarithromycin hấp thu quang phổ UV yếu nên việc định lượng hoạt chất gặp nhiều khó khăn Các nghiên cứu gần cho thấy clarithromycin có khả tạo phức với số chất màu, điển hình xanh bromothymol Phức hợp tạo thành tan chloroform hấp thu tốt quang phổ UV-Vis Do vậy, chiết đo quang có triển vọng phương pháp đơn giản, nhanh xác định lượng clarithromycin(2,4) Nghiên cứu nhằm mục đích xác định cơng thức qui trình điều chế viên nén chứa clarithromycin 250 mg GPHC tốt để áp dụng vào điều trị, đồng thời tìm phương pháp định lượng tin cậy, xác, đơn giản tốn ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng, nguyên vật liệu trang thiết bị mẫu viên nén bao phim chứa clarythromycin 250 mg thu thập thị trường Clarithromycin (USP 29), tá dược, hóa chất dung mơi cần thiết khác đạt tiêu chuẩn dược dụng, tiêu chuẩn nhà sản xuất(1,5) Máy dập viên xoay tròn (CJB–3B–27 - Ấn độ), máy đo độ GPHC (PHARMA TEST TYPE PTW S3C – Đức), máy quang phổ UV-Vis (SHIMADZU UV1601 PC – Nhật) Phương pháp nghiên cứu Khảo sát qui trình định lượng clarithromycin phương pháp chiết đo quang(4) Khảo sát thời gian tạo phức, số lần chiết, hiệu suất chiết, cực đại hấp thu, độ bền phức theo thời gian, độ tuyến tính, độ đúng, độ xác Khảo sát tính chất lý độ GPHC chế phẩm thu thập thị trường - Thu thập mẫu thuốc đối chiếu thị trường Mã hoá (A, B, C, D E) tiến hành khảo sát số tính chất lý: hình dạng, khối lượng, độ cứng Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học - Khảo sát độ giải phóng hoạt chất mẫu thu thập (theo tiêu chuẩn USP 30)(5) + Thiết bị: Cánh khuấy, tốc độ 50 vòng / phút + Môi trường: 900 ml đệm acetate pH 5, nhiệt độ 36,5 0C – 37,5 0C + Thời điểm lấy mẫu: 30 phút + Tiêu chuẩn qui định: Không 80% lượng hoạt chất giải phóng sau 30 phút Trong điều kiện nghiên cứu đánh giá độ GPHC theo thời gian, chọn thời điểm lấy mẫu sau 5, 10, 20 30 phút Lượng mẫu lấy 10 ml, bù 10 ml dịch môi trường Các tiêu lý khả GPHC mẫu sở cho chế phẩm nghiên cứu Xây dựng công thức qui trình bào chế viên nghiên cứu - Phương pháp điều chế: Xát hạt ướt - Lựa chọn thành phần tá dược, xây dựng công thức viên phù hợp với phương pháp bào chế tiêu chuẩn độ GPHC theo USP 30 kết hợp so sánh với viên đối chiếu - Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố công nghệ dung môi dùng để xát hạt, kích cỡ hạt, độ cứng lên q trình điều chế viên nghiên cứu - Xây dựng tiêu chuẩn điều chế lô thử nghiệm đánh giá theo tiêu chuẩn xây dựng Xử lý kết Các thực nghiệm tiến hành lần Kết trình bày giá trị TB ± RSD KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Khảo sát qui trình định lượng clarithromycin phương pháp chiết đo quang Qui trình tóm lược sau: Dung dịch clarithromycin (chiết từ viên(a) hay từ môi trường thử nghiệm GPHC) pha loãng tới nồng độ thích hợp mơi trường đệm acetate pH Lấy 10 ml dung dịch thêm ml dung dịch xanh bromothymol (0,1%) để hình thành phức 373 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 hợp có màu vàng khoảng 15 phút, chiết lần 10 ml chloroform (lắc phút), tách lấy lớp chloroform đem đo quang bước sóng 414 nm Phức tồn vòng giờ(4) (a) Dịch chiết từ viên: Nghiền mịn 20 viên, cân lượng bột viên tương ứng với 50 mg clarithromycin, cho vào bình định mức 100 ml, phân tán lượng methanol Siêu âm 20 phút, để nguội nhiệt phòng, bổ sung methanol vừa đủ 100 ml, lắc đều, lọc qua lọc 0,45 µm, bỏ 20 ml dịch đầu Hút xác ml dung dịch này, pha lỗng đến vừa đủ 200 ml dung dịch đệm acetat pH Kết thẩm định phương pháp định lượng Độ tuyến tính: Có tương quan tuyến tính nồng độ độ hấp thu dung dịch chứa clarythromycin khoảng nồng độ - 20 mcg/ml Phương trình hồi qui tuyến tính: yˆ = 0,0318 x – 0,0267 (R = 0.9993) Độ xác: Kết khảo sát mẫu thử có nồng độ 10 µg/ml (tiến hành độc lập với nhau) cho thấy RSD = 1,63% < 2% Độ đúng: Tỷ lệ hồi phục trung bình 101,42% nằm khoảng qui định 100 ± % Định lượng clarythromycin chiết đo quang đạt yêu cầu độ tuyến tính, độ xác độ đúng, áp dụng qui trình định lượng clarithromycin nguyên liệu, chế phẩm môi trường thử nghiệm độ GPHC Khảo sát tính chất lý độ GPHC chế phẩm thu thập thị trường Kết từ bảng cho thấy năm loại viên mẫu có độ GPHC 80% sau 30 phút, nhiên lượng hoạt chất phóng thích theo thời điểm khác Viên B phóng thích gần hồn tồn - 10 phút đầu 374 Bảng Hình dạng, tính chất lý độ GPHC năm mẫu thuốc đối chiếu Mẫu Hình dạng Viên A Viên B Caplet Caplet Khối lượng 435,6 452,3 (mg) Độ cứng (N) 146 96 % GPHC phút 26,3±0,8 79,6±0,9 10 phút 50,1±0,4 86,7±0,6 20 phút 83,8±0,5 89,4±0,6 30 phút 86,5±0,7 90,0±0,7 Viên C Viên D Viên E Hình trụ dẹt, hai Caplet Caplet mặt lồi 376,4 374,6 522,5 127 138 152 46,3±0,3 78,9±1,1 88,8±0,7 88,8±0,5 40,4±0,9 21,5±0,4 67,1±0,5 38,6±0,8 84,1±0,8 70.0±0,3 84,6±1,0 82,4±1,2 Xây dựng cơng thức qui trình bào chế viên nghiên cứu Ba tá dược rã crosspovidone, crosscarmellose disodium starch glycolate (DST) sử dụng để cải thiện thời gian rã nhằm nâng cao độ GPHC viên Các công thức khảo sát kết thời gian rã trình bày bảng Dập viên chày tròn, đường kính 10 mm, khối lượng viên 330 mg, độ cứng 50 – 70N, Cỡ lô 330 g (1000 viên) cho công thức Kết GPHC từ bảng cho thấy CT1, CT2, CT3 không đạt tiêu độ GPHC Ở CT4, CT5 CT6 có cải thiện nâng cao độ rã viên, GPHC CT4 cao hẳn so với CT5 CT6 thời điểm chứng tỏ tà dược rã crosspovidone có ưu lựa chọn cho CT nghiên cứu CT7 CT8 có cải thiện độ rã chưa đạt yêu cầu độ GPHC theo USP 30 có thay đổi tỉ lệ tá dược rã nội rã ngoại Điều quan trọng cơng thức có tượng dính chày rít dập viên thời gian dài Nếu đưa thêm vào tá dược trơn bóng talc, magne stearate hay aerosil nhằm mục đích chống dính, viên khó rã độ hoà tan giảm Khắc phục điều này, natri lauryl sulfat sử dụng (CT9 CT10) CT9 cho cốm chảy tốt, dễ dập viên, độ GPHC đạt yêu cầu USP30 Lượng hoạt chất phóng thích gần hồn tồn khoảng – 10 phút đầu, ưu viên mẫu A, C, D, E tương đương với viên mẫu B nên CT9 lựa chọn nghiên cứu tiếp Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Bảng Thiết kế thành phần công thức viên nghiên cứu Thành phần Clarithromycin (mg) Avicel 101 (mg) Lactose (mg) PVP K30 (mg) CT1 250 – 60,2 13,2 CT2 250 30,1 30,1 13,2 CT3 250 60,2 – 13,2 CT4 250 21,5 25,5 13,2 Crosspovidone (mg) CT5 250 21,5 25,5 13,2 CT6 250 21,5 25,5 13,2 13,2 Croscarmellose (mg) DST (mg) Natri laurylsufat (mg) Aerosil (mg) Magnesi stearate (mg) CT7 250 21,5 25,5 13,2 7,26* 5,94** CT8 250 19,8 25,5 13,2 8,91* 5,94** CT9 250 19,3 25,7 13,2 8,91 5,94 CT10 250 18,6 25,1 13,2 8,91 5,94 13,2 13,2 1,65 4,95 1,65 4,95 1,65 4,95 1,65 4,95 1,65 4,95 1,65 4,95 1,65 4,95 1,65 4,95 1,32 1,0 4,62 2,64 1,0 4,62 8,2 25,3 18,3 5,1 5,8 5,8 3,7 3,5 2,5 2,5 Nước cất vừa đủ Thời gian rã (phút) (*): Rã nội, (**): Rã ngoại Bảng Độ GPHC CT nghiên cứu 10 CT1 5,6 ± 2,3 14,6 ±1,1 % Hoạt chất phóng thích theo thời gian (n = 3) CT2 CT3 CT4 19,3 ± 1,5 38,2 ± 2,1 56,8 ± 1,5 22,5 ± 1,9 48,4 ± 0,4 60,5 ± 1,9 20 24,0 ±0,6 30,1 ± 1,4 51,3 ± 1,3 69,7 ± 0,9 66,7 ± 1,3 30 32,7 ±0,7 CT6 51,2 ± 0,7 55,6 ± 1,1 70,1 ± 1,0 70,4 ± 1,6 36,6 ± 0,8 CT7 59,8 ± 1,2 66,2 ± 1,0 71,7 ± 0,5 74,5 ± 0,7 51,6 ± 0,9 CT8 65,2 ± 0,4 72,7 ± 1,2 75,3 ± 1,8 75,4 ± 0,8 72,1 ± 0,8 CT9 67,5 ± 0.6 84,7 ± 0.7 86,3 ± 1,5 86,8 ± 0,5 66,8 ± 0,9 CT10 69,1 ± 1,1 83,7 ± 0,8 87,9 ± 0,3 88,3 ± 0,5 Thời điểm (phút) 10 20 30 CT5 45,4 ± 0,5 49,8 ± 0,7 Khảo sát ảnh hưởng thông số kỹ thuật lên qui trình điều chế viên Ảnh hưởng dung môi Bảng Ảnh hưởng dung môi lên thơng số qui trình điều chế viên theo CT9 Tỉ lệ dung môi (Cồn: nước) 1: 1:1 0:1 Độ ẩm cốm (%) theo thời gian sấy (giờ) 5,82 2,60 7,85 2,34 1,81 3,57 1,32 1,40 1,76 3,5 Tốc độ chảy (g/s) 1,36 2,2 1,8 6,4 Cồn nước dùng để xát hạt cho CT9 Đồng khối lượng (n=20) 331, 07 ± 9,34 330,06 ± 5,94 333,86 ± 3,43 CV (%) 2,82 1,80 1,03 Độ rã (phút) 3-5 3-5 3-5 phân tán thấp Nước lựa chọn làm với tỷ lệ (1:0), (1:1) (0:1) Với cồn nước dung môi xát hạt theo tỷ lệ (0:1), khối bột xát hạt dễ dàng qua rây Sự ảnh hưởng cỡ hạt mm, hao hụt không đáng kể (bảng 4) Cốm tạo Với dung môi nước, tiến hành khảo sát thành có cảm quan đều, đẹp, độ chảy tốt (6,4 với cỡ rây xát hạt mm, sửa hạt mm, g/s), viên có độ đồng khối lượng với độ 0,8 mm 0,5 mm để chọn cỡ rây sửa hạt thích hợp cho qui trình điều chế Chuyên Đề Dược Khoa 375 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Bảng Ảnh hưởng cỡ hạt lên thông số kỹ thuật cốm viên Cỡ rây sửa hạt Tốc độ chảy Góc nghỉ (mm) (g/s) 0,5 0,8 1,0 Tỷ trọng biểu kiến (g/s) Hệ số nén (%) 0,5 0,45 0,45 23,33 15,15 14,9 280 290 330 6,3 6,2 5,8 Kết cho thấy thời gian sửa hạt qua rây 0,5 mm lâu Cốm tạo thành xát hạt qua rây mm sửa hạt qua rây 0,8 mm có độ chảy tốt (tốc độ chảy cao, góc nghỉ nhỏ hệ số nén nhỏ) nên viên tạo thành có khối lượng đồng đều, hệ số phân tán thấp (bảng 5), độ GPHC viên tương đối cao (Bảng 6) cỡ rây sửa hạt 0,8mm chọn Bảng Độ phóng thích hoạt chất ba mẫu viên tương ứng với ba cỡ rây sửa hạt Thời điểm (phút) 10 20 30 Hoạt chất phóng thích (%) 0,5 mm (n=3) 0,8 mm (n=3) mm (n=3) 63,8 ± 1,8 84,4 ± 1,3 84,7 ± 0.6 85,2 ± 0,7 69,0 ± 0.4 85,6 ± 0,6 87,1 ± 0,5 87,3 ± 1,1 58.9 ± 0,8 83,0 ± 1,4 83,5 ± 1.7 83,6 ± 0.9 Đồng khối lượng (n=20) CV (%) 333, 45 ± 5,90 1,77 332,40 ± 4,25 1,28 331,32 ± 6,80 2,05 Độ Rã (phút) 3-5 3-5 3-5 Sự ảnh hưởng độ cứng Với thông số chọn lựa, khảo sát công thức với thông số chọn lựa dập viên với độ cứng khác 50 – 70 N 80 – 100 N Kết cho thấy tăng độ cứng, độ mài mòn giảm xuống nhiều, viên khơng bị mẻ cạnh, thích hợp cho việc bao bảo vệ sau Độ cứng 80 – 100 N giúp viên đạt tiêu lý, vừa đạt yêu cầu độ GPHC Bảng Độ mài mòn độ giải phóng hoạt chất viên Các thơng số Kết Hiện tượng phút Độ giải 10 phút phóng hoạt chất (%) 20 phút 30 phút Độ mài mòn 50 – 70 N 0,61% Viên bị mòn nhiều 67,5 ± 0.6 84,7 ± 0.7 86.3 ± 1,5 86,8 ± 0,5 Độ cứng 80 – 100 N 0,041% Viên lành lặn, không mẻ cạnh 65,8 ± 1,2 83,9 ± 0,9 84,6 ± 1,6 86,5 ± 1,7 Điều chế viên với công thức thông số khảo sát Thực lô đối chứng cỡ lô 2000 viên Kết trình bày Bảng Bảng Kết kiểm nghiệm bán thành phẩm, thành phẩm lô khảo sát Chỉ tiêu kiểm nghiệm Bán thành phẩm Thành phẩm Độ ẩm (%) Tốc độ chảy (g/s) Góc nghỉ Tỷ trọng biểu kiến Hệ số nén (%) Đồng khối lượng Độ cứng (N) Mài mòn (%) Hàm lượng (%) Độ hòa tan (n = 3) (n = 3) (n = 3) (n = 3) (n = 3) (n = 20) (n = 20) ( n = 3) (n = 3) ( n = 6) Kết từ bảng cho thấy lô đạt yêu cầu đề ra, cho thấy qui trình có ổn định ứng dụng thực tiễn điều chế viên nén clarithromycine 250 mg 376 Lô 1,3 ± 0,2 6,2 ± 0,3 290 ± 2,6 0,45 ± 0,05 15,15 ± 0,5 332,4 ± 4,24 91,15 ± 7,13 0,041 ± 0,001 98,80 ± 0,4 86 ± 1,26 Kết Lô 1,32 ± 0,22 6,3 ± 0,3 290 ± 2,4 0,45 ± 0,05 15,25 ± 0,6 333,2 ± 4,20 92,25 ± 6,2 0,041 ± 0,002 99,20 ± 0,3 88 ± 1,20 Lô 1,33 ± 0,18 6,2 ± 0,3 290 ± 2,3 0,45 ± 0,05 15,10 ± 0,5 332,7 ± 4,27 94,05 ± 7,17 0,041 ± 0,001 98,9 ± 0,2 87 ± 1,22 KẾT LUẬN Viên nén clarithromycin điều chế theo phương pháp xát hạt ướt với thơng số ảnh hưởng đến q trình dập viên tiêu chuẩn kỹ thuật viên khảo sát cho thấy viên Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 nghiên cứu có khả phóng thích hoạt chất nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30 Phương pháp chiết đo quang cho thấy áp dụng để định lượng clarithromycin Đây phương pháp hiệu quả, đơn giản có tính kinh tế TÀI LIỆU THAM KHẢO Kibbe A.H (2000), Handbook of pharmaceutical excipients, pp 102 – 105, 160 – 165, 276 – 285, 478 – 489, 501 – 503, 555 Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa (2007), Giáo trình Bào Chế Sinh Dược Học, tập 2, Bộ môn Bào chế – Khoa Dược, Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học Đại học Y dược TP Hồ Chí Minh, Nhà xuất Y học, tr – 75, 145, 150 – 152, 168 – 182, 202 – 212 Phùng Chát (2008), Nghiên cứu bào chế viên giải phóng nhanh chứa Paracetamol Ibuprofen, Luận văn Thạc sĩ dược học, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Shah J., Jan M.R and Manzoor S (2008), “Extractive Spectrophotometric Methods for Determination of Clarithromycin in Pharmaceutical Formulations Using Bromothymol Blue and Cresol Red”, Journal of Chinese Chemical society, 55, 1107 – 1112 USP 30 (2007), CD Rom 377 ... giản, nhanh xác định lượng clarithromycin( 2,4) Nghiên cứu nhằm mục đích xác định cơng thức qui trình điều chế viên nén chứa clarithromycin 250 mg GPHC tốt để áp dụng vào điều trị, đồng thời tìm... Clarithromycin (mg) Avicel 101 (mg) Lactose (mg) PVP K30 (mg) CT1 250 – 60,2 13,2 CT2 250 30,1 30,1 13,2 CT3 250 60,2 – 13,2 CT4 250 21,5 25,5 13,2 Crosspovidone (mg) CT5 250 21,5 25,5 13,2 CT6 250 21,5... với viên mẫu B nên CT9 lựa chọn nghiên cứu tiếp Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Bảng Thiết kế thành phần công thức viên nghiên cứu Thành phần Clarithromycin