Nghiên cứu điều chế viên nén clarithromycin 250 mg

Trong đề tài này nhằm nghiên cứu được một công thức thuốc chứa 250 mg clarithromycin có độ giải phóng hoạt chất nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.

NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN 250 MG

Lê Minh Quân*, Trần Thị Phương Chi*, Nguyễn Thiện Hải*

TÓM TẮT

Mục tiêu: Nghiên cứu được một công thức thuốc chứa 250 mg clarithromycin có độ giải phóng hoạt chất

nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30

Phương pháp: Khảo sát qui trình định lượng clarithromycin bằng phương pháp chiết đo quang Xây dựng

công thức, khảo sát sự ảnh hưởng của một số yếu tố như dung môi xát hạt, kích cỡ hạt, độ cứng lên quá trình điều chế viên nghiên cứu và so sánh độ giải phóng hoạt chất với các chế phẩm thu thập trên thị trường theo USP

30

Kết quả: Phương pháp chiết đo quang có thể áp dụng để định lượng clarithromycin Độ giải phóng hoạt

chất của các mẫu thu thập trên thị trường cho thấy có sự khác biệt Công thức nghiên cứu CT9 có độ giải phóng hoạt chất đạt tiêu chuẩn USP 30, tương đương mẫu B và nhanh hơn các mẫu đối chiếu khác

Kết luận: Kết quả từ thực nghiệm cho thấy có thể điều chế viên nén clarithromycin 250 mg phóng thích

hoạt chất nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30 Chiết đo quang là phương pháp hiệu quả, đơn giản và kinh tế, có thể áp dụng định lượng clarithromycin

Từ khóa: Clarithromycin, chiết đo quang

ABSTRACT

FORMULATION OF CLARITHROMYCINE 250 MG TABLETS

Le Minh Quan, Tran Thi Phuong Chi, Nguyen Thien Hai

* Y Hoc TP Ho Chi Minh* Vol 15 - Supplement of No 1 - 2011: 372 - 377

Objectives: Formulation of tablets containing 250 mg clarithromycine which has fast release rate of active

substances, fitted to the specification of USP 30.

Methods: Formulation and investigation the effects of some parameters on preparation of tablets by wet

granulation method Clarithromycine release in references and studied samples were tested according to USP 30 and clarithromycine was determined by extractive spectrophotometric method

Results: Dissolution profile results of five reference preparations containing 250 mg clarithromycine

collected on the Vietnam market shows a big difference CT9 formula show fast rate of active substance release, fitted to the specification of USP 30

Conclusion: The present results provided evidence that clarithromycin 250 mg tablets can be prepared in

condition of Vietnam Extractive spectrophotometric method can be applied to determine clarithromycin This

method is effective, simple and economical

Keywords: clarithromycine, extractive spectrophotometric

ĐẶT VẤN ĐỀ

Clarithromycin là một kháng sinh bán tổng

hợp họ macrolid được sử dụng phổ biến hiện

nay do tác động diệt khuẩn phổ rộng và hiệu

quả Tuy nhiên clarithromycin khó tan trong

nước, do vậy làm chậm sự giải phóng hoạt chất (GPHC), làm giảm sinh khả dụng của thuốc Đối với qui trình sản xuất viên nén clarithromycin, việc khảo sát công thức và lựa chọn các thông số công nghệ hợp lý đóng vai trò quan trọng trong

*Bộ Môn Công Nghiệp Dược, Khoa Dược - Đại Học Y Dược TPHCM

Tác giả liên lạc: PGS TS Nguyễn Thiện Hải ĐT: 0905352679 Email: thienhai2002@yahoo.com

cải thiện khả năng GPHC của viên cũng như

chất lượng của thuốc thành phẩm Bên cạnh đó,

clarithromycin hấp thu quang phổ UV rất yếu

nên việc định lượng hoạt chất này gặp nhiều

khó khăn Các nghiên cứu gần đây cho thấy

clarithromycin có khả năng tạo phức với một số

chất màu, điển hình là xanh bromothymol Phức

hợp tạo thành tan trong chloroform và hấp thu

tốt quang phổ UV-Vis Do vậy, chiết đo quang

có triển vọng là một phương pháp đơn giản,

nhanh và chính xác trong định lượng

clarithromycin(2,4)

Nghiên cứu này nhằm mục đích xác định

được công thức và qui trình điều chế viên nén

chứa clarithromycin 250 mg GPHC tốt để áp

dụng vào điều trị, đồng thời tìm ra một phương

pháp định lượng tin cậy, chính xác, đơn giản và

ít tốn kém

ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Đối tượng, nguyên vật liệu và trang thiết bị

5 mẫu viên nén bao phim chứa

clarythromycin 250 mg thu thập trên thị trường

Clarithromycin (USP 29), tá dược, hóa chất dung

môi cần thiết khác đạt tiêu chuẩn dược dụng,

tiêu chuẩn nhà sản xuất(1,5)

Máy dập viên xoay tròn (CJB–3B–27 - Ấn

độ), máy đo độ GPHC (PHARMA TEST TYPE

PTW S3C – Đức), máy quang phổ UV-Vis

(SHIMADZU UV1601 PC – Nhật)

Phương pháp nghiên cứu

Khảo sát qui trình định lượng clarithromycin

bằng phương pháp chiết đo quang (4)

Khảo sát thời gian tạo phức, số lần chiết,

hiệu suất chiết, cực đại hấp thu, độ bền phức

theo thời gian, độ tuyến tính, độ đúng, độ

chính xác

Khảo sát các tính chất cơ lý và độ GPHC của

5 chế phẩm thu thập trên thị trường

- Thu thập 5 mẫu thuốc đối chiếu trên thị

trường Mã hoá (A, B, C, D và E) và tiến hành

khảo sát một số tính chất cơ lý: hình dạng, khối

lượng, độ cứng

- Khảo sát độ giải phóng hoạt chất của mẫu thu thập (theo tiêu chuẩn USP 30)(5)

+ Thiết bị: Cánh khuấy, tốc độ 50 vòng / phút

+ Môi trường: 900 ml đệm acetate pH 5, nhiệt độ 36,5 0C – 37,5 0C

+ Thời điểm lấy mẫu: 30 phút

+ Tiêu chuẩn qui định: Không dưới 80% lượng hoạt chất giải phóng sau 30 phút

Trong điều kiện nghiên cứu đánh giá độ GPHC theo thời gian, chọn các thời điểm lấy mẫu sau 5, 10, 20 và 30 phút Lượng mẫu lấy

10 ml, bù ngay 10 ml dịch môi trường

Các chỉ tiêu cơ lý và khả năng GPHC của các mẫu là cơ sở cho chế phẩm nghiên cứu

Xây dựng công thức và qui trình bào chế viên nghiên cứu

- Phương pháp điều chế: Xát hạt ướt

- Lựa chọn thành phần tá dược, xây dựng công thức viên phù hợp với phương pháp bào chế và tiêu chuẩn về độ GPHC theo USP 30 kết hợp so sánh với viên đối chiếu

- Khảo sát sự ảnh hưởng của một số yếu tố công nghệ như dung môi dùng để xát hạt, kích

cỡ hạt, độ cứng lên quá trình điều chế viên nghiên cứu

- Xây dựng tiêu chuẩn và điều chế 3 lô thử nghiệm đánh giá theo tiêu chuẩn xây dựng

Xử lý kết quả

Các thực nghiệm được tiến hành ít nhất 3 lần Kết quả trình bày là giá trị TB ± RSD

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Khảo sát qui trình định lượng clarithromycin bằng phương pháp chiết đo quang

Qui trình được tóm lược như sau: Dung dịch clarithromycin (chiết từ viên(a) hay từ môi trường thử nghiệm GPHC) được pha loãng tới nồng độ thích hợp trong môi trường đệm acetate pH 4 Lấy 10 ml dung dịch này thêm 1 ml dung dịch xanh bromothymol (0,1%) để hình thành phức

hợp có màu vàng trong khoảng 15 phút, chiết

một lần bằng 10 ml chloroform (lắc trong 3

phút), tách lấy lớp chloroform rồi đem đo quang

ở bước sóng 414 nm Phức có thể tồn tại trong

vòng 6 giờ(4)

(a) Dịch chiết từ viên: Nghiền mịn 20 viên, cân

lượng bột viên tương ứng với 50 mg

clarithromycin, cho vào bình định mức 100 ml,

phân tán trong một lượng methanol Siêu âm 20

phút, để nguội ở nhiệt phòng, bổ sung methanol

vừa đủ 100 ml, lắc đều, lọc qua lọc 0,45 µm, bỏ

20 ml dịch đầu Hút chính xác 5 ml dung dịch

này, pha loãng đến vừa đủ 200 ml bằng dung

dịch đệm acetat pH 4

Kết quả thẩm định phương pháp định

lượng

Độ tuyến tính: Có sự tương quan tuyến tính

giữa nồng độ và độ hấp thu của dung dịch chứa

clarythromycin trong khoảng nồng độ 2 - 20

mcg/ml Phương trình hồi qui tuyến tính: yˆ =

0,0318 x – 0,0267 (R2 = 0.9993)

Độ chính xác: Kết quả khảo sát trên 6 mẫu

thử có nồng độ 10 µg/ml (tiến hành độc lập với

nhau) cho thấy RSD = 1,63% < 2%

Độ đúng: Tỷ lệ hồi phục trung bình là

101,42% nằm trong khoảng qui định 100 ± 2 %

Định lượng clarythromycin bằng chiết đo

quang đạt yêu cầu về độ tuyến tính, độ chính

xác và độ đúng, có thể áp dụng qui trình này

trong định lượng clarithromycin trong nguyên

liệu, chế phẩm và trong môi trường thử

nghiệm độ GPHC

Khảo sát các tính chất cơ lý và độ GPHC

của 5 chế phẩm thu thập trên thị trường

Kết quả từ bảng 1 cho thấy cả năm loại viên

mẫu đều có độ GPHC trên 80% sau 30 phút, tuy

nhiên lượng hoạt chất phóng thích theo từng

thời điểm là khác nhau Viên B phóng thích gần

như hoàn toàn ngay trong 5 - 10 phút đầu

Bảng 1 Hình dạng, tính chất cơ lý và độ GPHC của

năm mẫu thuốc đối chiếu

Hình dạng Caplet Caplet Hình trụ dẹt, hai

mặt lồi

Caplet Caplet Khối lượng

5 phút 26,3±0,8 79,6±0,9 46,3±0,3 40,4±0,9 21,5±0,4

10 phút 50,1±0,4 86,7±0,6 78,9±1,1 67,1±0,5 38,6±0,8

20 phút 83,8±0,5 89,4±0,6 88,8±0,7 84,1±0,8 70.0±0,3

30 phút 86,5±0,7 90,0±0,7 88,8±0,5 84,6±1,0 82,4±1,2

Xây dựng công thức và qui trình bào chế viên nghiên cứu

Ba tá dược rã crosspovidone, crosscarmellose

và disodium starch glycolate (DST) được sử dụng

để cải thiện thời gian rã nhằm nâng cao độ GPHC của viên Các công thức khảo sát và kết quả thời gian rã được trình bày trong bảng 2 Dập viên chày tròn, đường kính 10 mm, khối lượng viên 330 mg,

độ cứng 50 – 70N, Cỡ lô 330 g (1000 viên) cho mỗi công thức

Kết quả GPHC từ bảng 3 cho thấy CT1, CT2, CT3 không đạt chỉ tiêu về độ GPHC

Ở CT4, CT5 và CT6 có sự cải thiện và nâng cao độ rã viên, GPHC của CT4 cao hơn hẳn so với CT5 và CT6 ở từng thời điểm chứng tỏ tà dược rã crosspovidone có ưu thế hơn và được lựa chọn cho những CT nghiên cứu tiếp theo CT7 và CT8

có cải thiện về độ rã nhưng vẫn chưa đạt được yêu cầu về độ GPHC theo USP 30 mặc dù có thay đổi tỉ lệ tá dược rã nội và rã ngoại

Điều quan trọng là các công thức có hiện tượng dính chày và rít nếu dập viên trong thời gian dài Nếu đưa thêm vào các tá dược trơn bóng như talc, magne stearate hay aerosil nhằm mục đích chống dính, viên sẽ khó rã hơn và độ hoà tan sẽ giảm Khắc phục điều này, natri lauryl sulfat được sử dụng (CT9 và CT10)

CT9 cho cốm chảy tốt, dễ dập viên, độ GPHC đạt yêu cầu USP30 Lượng hoạt chất phóng thích gần như hoàn toàn trong khoảng 5 – 10 phút đầu, ưu thế hơn các viên mẫu A, C, D,

E và tương đương với viên mẫu B nên CT9 được

lựa chọn nghiên cứu tiếp

Bảng 2 Thiết kế thành phần công thức viên nghiên cứu

Nước cất vừa đủ

(*): Rã nội, (**): Rã ngoại

Bảng 3 Độ GPHC của các CT nghiên cứu

% Hoạt chất phóng thích theo thời gian (n = 3) Thời điểm (phút)

CT1 CT2 CT3 CT4 CT5

CT6 CT7 CT8 CT9 CT10

Khảo sát sự ảnh hưởng của các thông số kỹ thuật lên qui trình điều chế viên

Ảnh hưởng của dung môi

Bảng 4 Ảnh hưởng của dung môi lên các thông số của qui trình điều chế viên theo CT9

Tỉ lệ dung môi

Tốc độ chảy

Cồn và nước được dùng để xát hạt cho CT9

với các tỷ lệ (1:0), (1:1) và (0:1) Với cồn và nước

theo tỷ lệ (0:1), khối bột xát hạt dễ dàng qua rây

1 mm, hao hụt không đáng kể (bảng 4) Cốm tạo

thành có cảm quan đều, đẹp, độ chảy tốt (6,4

g/s), viên có độ đồng đều khối lượng với độ

phân tán thấp nhất Nước được lựa chọn làm dung môi xát hạt

Sự ảnh hưởng của cỡ hạt

Với dung môi là nước, tiến hành khảo sát với cỡ rây xát hạt là 1 mm, và sửa hạt là 1 mm, 0,8 mm và 0,5 mm để chọn cỡ rây sửa hạt thích hợp cho qui trình điều chế

Bảng 5 Ảnh hưởng của cỡ hạt lên các thông số kỹ thuật của cốm và viên

Đồng đều khối lượng

Cỡ rây sửa hạt

(mm)

Tốc độ chảy

(g/s)

Góc nghỉ Tỷ trọng biểu

kiến (g/s)

Hệ số nén

Độ Rã (phút)

Kết quả cho thấy thời gian sửa hạt qua rây

0,5 mm là lâu nhất Cốm tạo thành do xát hạt

qua rây 1 mm và sửa hạt qua rây 0,8 mm có độ

chảy tốt (tốc độ chảy cao, góc nghỉ nhỏ và hệ số

nén nhỏ) nên viên tạo thành có khối lượng đồng

đều, hệ số phân tán thấp (bảng 5), độ GPHC của

viên tương đối cao (Bảng 6) và cỡ rây sửa hạt

0,8mm được chọn

Bảng 6 Độ phóng thích hoạt chất của ba mẫu viên

tương ứng với ba cỡ rây sửa hạt

Hoạt chất phóng thích (%) Thời

điểm

5 63,8 ± 1,8 69,0 ± 0.4 58.9 ± 0,8

10 84,4 ± 1,3 85,6 ± 0,6 83,0 ± 1,4

20 84,7 ± 0.6 87,1 ± 0,5 83,5 ± 1.7

Sự ảnh hưởng của độ cứng

Với các thông số đã chọn lựa, khảo sát công thức với các thông số đã chọn lựa dập viên với 2

độ cứng khác nhau 50 – 70 N và 80 – 100 N

Kết quả cho thấy khi tăng độ cứng, độ mài mòn giảm xuống nhiều, viên không bị mẻ cạnh, thích hợp cho việc bao bảo vệ sau này Độ cứng

80 – 100 N giúp viên đạt các chỉ tiêu cơ lý, vừa đạt yêu cầu về độ GPHC

Bảng 7 Độ mài mòn và độ giải phóng hoạt chất của

viên

Độ cứng Các thông số

Độ mài mòn Hiện

tượng Viên bị mòn nhiều Viên lành lặn, không mẻ cạnh

5 phút 67,5 ± 0.6 65,8 ± 1,2

10 phút 84,7 ± 0.7 83,9 ± 0,9

20 phút 86.3 ± 1,5 84,6 ± 1,6

Độ giải phóng hoạt chất (%)

30 phút 86,8 ± 0,5 86,5 ± 1,7

Điều chế viên với công thức và các thông số đã khảo sát

Thực hiện trên 3 lô đối chứng cỡ lô 2000 viên Kết quả được trình bày trong Bảng 8

Bảng 8 Kết quả kiểm nghiệm bán thành phẩm, thành phẩm trên 3 lô khảo sát

Kết quả Chỉ tiêu kiểm nghiệm

Bán

thành

phẩm

Đồng đều khối lượng (n = 20) 332,4 ± 4,24 333,2 ± 4,20 332,7 ± 4,27

Thành

phẩm

Kết quả từ bảng 8 cho thấy cả 3 lô đều đạt

yêu cầu đề ra, cho thấy qui trình có sự ổn định

có thể ứng dụng trong thực tiễn điều chế viên

nén clarithromycine 250 mg

KẾT LUẬN

Viên nén clarithromycin được điều chế theo phương pháp xát hạt ướt với các thông số ảnh hưởng đến quá trình dập viên và tiêu chuẩn kỹ thuật của viên được khảo sát cho thấy viên

nghiên cứu có khả năng phóng thích hoạt chất

nhanh, đạt tiêu chuẩn USP 30 Phương pháp

chiết đo quang cho thấy có thể áp dụng để định

lượng clarithromycin Đây là phương pháp hiệu

quả, đơn giản và có tính kinh tế

TÀI LIỆU THAM KHẢO

1 Kibbe A.H (2000), Handbook of pharmaceutical excipients, pp

102 – 105, 160 – 165, 276 – 285, 478 – 489, 501 – 503, 555

2 Lê Quan Nghiệm và Huỳnh Văn Hóa (2007), Giáo trình Bào

Chế và Sinh Dược Học, tập 2, Bộ môn Bào chế – Khoa Dược,

Đại học Y dược TP Hồ Chí Minh, Nhà xuất bản Y học, tr 3 –

75, 145, 150 – 152, 168 – 182, 202 – 212

3 Phùng Chát (2008), Nghiên cứu bào chế viên giải phóng

nhanh chứa Paracetamol và Ibuprofen, Luận văn Thạc sĩ dược

học, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh

4 Shah J., Jan M.R and Manzoor S (2008), “Extractive Spectrophotometric Methods for Determination of Clarithromycin in Pharmaceutical Formulations Using

Bromothymol Blue and Cresol Red”, Journal of Chinese

Chemical society, 55, 1107 – 1112

5 USP 30 (2007), CD Rom