Đang tải... (xem toàn văn)
Luận văn được thực hiện với các mục tiêu: Khảo sát điều kiện phản ứng, điều kiện tinh chế để thu được celecoxib với hiệu suất cao đạt tiêu chuẩn dược dụng; tổng hợp celecoxib ở quy mô 50g/mẻ trong phòng thí nghiệm.
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ YẾN NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH TỔNG HỢP LIÊN TỤC VÀ TINH CHẾ CELECOXIB LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC i ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ YẾN NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH TỔNG HỢP LIÊN TỤC VÀ TINH CHẾ CELECOXIB Chun nghành: Hóa hữu cơ Mã số: 60440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS. Ngơ Quốc Anh ii iii MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH x DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT xv ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 3 1.1 Tổng quan celecoxib 1.1.1 Cơng thức cấu tạo tính chất 1.1.2 Tác dụng dược lý chế tác dụng 1.1.2.1 Viêm chế chống viêm NSAIDs .4 1.1.2.2 Tác dụng 1.1.3 Tác dụng phụ 1.1.4 Chống định [3] .9 1.1.5 Chỉ định, liều dùng cách dùng [3] 10 1.1.6 Dạng thuốc biệt dược 10 1.2 Phương pháp tổng hợp 11 1.2.1 Tổng hợp celecoxib cách ngưng tụ diketon với hydrazin .11 1.2.2 Tổng hợp celecoxib cách ngưng tụ butynon với hydrazin .15 1.2.3 Tổng hợp celecoxib phản ứng đóng vòng 1,3 18 1.3 Phương pháp tinh chế .19 1.3.1 Kết tinh 19 1.3.2 Một số phương pháp kết tinh celecoxib 20 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG 23 VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 i 2.1 Nguyên liệu 23 2.2 Thiết bị thí nghiệm 24 2.3 Phương pháp nghiên cứu .26 2.3.1 Tổng hợp hóa học tinh chế 26 2.3.1.1 Tổng hợp hóa học 26 Bước 1: Tổng hợp liên tục 1-(4-methylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion từ 4methylacetophenon este axit trifluoroacetic theo mơ hình dòng chảy quy mơ phòng thí nghiệm 26 Bước 2: Tổng hợp celecoxib 27 2.3.1.2 Tinh chế 27 2.3.2 Kiểm tra độ tinh khiết khẳng định cấu trúc 27 2.3.2.1 Kiểm tra độ tinh khiết 27 2.3.2.1 Khẳng định cấu trúc 28 2.3.3 Kết .28 2.3.3.1 Kiểm nghiệm celecoxib 28 - Định tính 28 - Mất khối lượng làm khô .28 - Nhiệt độ nóng chảy 29 - Định lượng .29 2.3.3.2 Xác định độc tính cấp (LD50) 29 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ, THẢO LUẬN 31 3.1 Triển khai quy trình tổng hợp celecoxib quy mơ phòng thí nghiệm 31 Dựa vào điều kiện thí nghiệm cơng bố hóa chất cho phép, tiến hành tổng hợp celecoxib theo qui trình gồm hai giai đoạn để tổng hợp celecoxib Bước 1, diketon (6) tổng hợp phản ứng ngưng tụ Claisen keton este môi trường bazơ Bước 2, diketon (6) tạo thành dung dịch phản ứng với 4-SAPH (7) để tạo thành celecoxib 32 3.1.1 Tổng hợp liên tục 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion 32 ii 3.1.1.1 Thiết kế phản ứng tổng hợp liên tục 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan1,3-dion từ 4-metylacetophenon este axit trifluoroacetic theo mơ hình dòng chảy quy mơ phòng thí nghiệm 32 Tổng hợp 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (2) Xác định nồng độ tối ưu chất 4-metylacetophenon tham gia phản ứng theo mơ hình dòng chảy 35 Tổng hợp 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định nồng độ tối ưu este axit trifluoroacetic tham gia phản ứng theo mô hình dòng chảy 37 Tổng hợp 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định nhiệt độ tối ưu phản ứng ngưng tụ Claisen hệ phản ứng dòng chảy thực nghiệm .39 Tổng hợp 1-(4-methylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định tốc độ dòng phản ứng ngưng tụ Claisen hệ phản ứng dòng chảy thực nghiệm 41 3.1.1.2 Tổng hợp 1-(4-methylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định hiệu suất tối ưu phản ứng ngưng tụ Claisen hệ phản ứng dòng chảy thực nghiệm 43 3.1.2 Tổng hợp celecoxib 45 3.1.2.1 Khảo sát điều kiện dung môi phản ứng tổng hợp celecoxib .46 3.1.2.2 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ mol 4-SAPH/diketon đến tạo thành celecoxib sản phẩm phụ regioisomer 48 3.1.2.3 Khảo sát điều kiện nhiệt độ 49 3.2 Tinh chế celecoxib .50 3.2.1 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib loại dung môi 50 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib thô dung môi aceton .50 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib thô dung môi acetonitrile 51 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib thô dung môi MeOH .53 3.2.2 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib lại loại dung môi/nước .54 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib lại hệ aceton/nước 54 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib lại hệ acetonitril/nước: 55 Khảo sát, xây dựng phương pháp kết tinh celecoxib lại hệ MeOH/nước .56 3.3 Kiểm tra độ tinh khiết khẳng định cấu trúc 57 3.3.1 Kiểm tra độ tinh khiết 57 iii 3.3.2 Khẳng định cấu trúc 58 3.3.2.1 Phổ hồng ngoại (IR) 58 3.3.2.2 Phân tích phổ khối lượng (MS) .60 3.3.2.3 Phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) sản phẩm tổng hợp 61 3.4 Kết kiểm nghiệm .64 3.5 Kết thử độc tính cấp 65 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 67 Kết luận 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 A.Tiếng Việt 68 B Tiếng Anh .68 PHỤ LỤC 72 iv DANH MỤC BẢNG MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH x DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT xv ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 3 1.1 Tổng quan celecoxib 1.1.1 Công thức cấu tạo tính chất Hình 1.1: Cơng thức cấu tạo celecoxib 1.1.2 Tác dụng dược lý chế tác dụng 1.1.2.1 Viêm chế chống viêm NSAIDs .4 Hình 1.2: Cơ chế tác dụng cyclooxygenase [1] Hình 1.3: Một số thuốc chống viêm khơng steroid 1.1.2.2 Tác dụng Bảng 1.2: Tác dụng ức chế cyclooxygenase celecoxib, IC50(μM) [18] Bảng 1.3: Một số thông số dược động học celecoxib [7],[18] 1.1.3 Tác dụng phụ Bảng 1.4: Ảnh hưởng Celecoxib NSAID tim mạch [12] 1.1.4 Chống định [3] .9 1.1.5 Chỉ định, liều dùng cách dùng [3] 10 1.1.6 Dạng thuốc biệt dược 10 1.2 Phương pháp tổng hợp 11 1.2.1 Tổng hợp celecoxib cách ngưng tụ diketon với hydrazin .11 Hình 1.4: Sơ đồ tổng hợp celecoxib theo phương pháp .12 Hình 1.5: Tổng hợp liên tục celecoxib theo Zhi 15 1.2.2 Tổng hợp celecoxib cách ngưng tụ butynon với hydrazin .15 v Hình 1.6: Sơ đồ tổng hợp celecoxib theo WO 03/024400 .15 Hình 1.7: Sơ đồ tổng hợp 1,1,1-trifluoro-4-(methylphenyl)-3-butyn-2-on (9) 16 1.2.3 Tổng hợp celecoxib phản ứng đóng vòng 1,3 18 Hình 1.8: Sơ đồ tổng hợp celecoxib theo phương pháp Lynette [20] .18 1.3 Phương pháp tinh chế .19 1.3.1 Kết tinh 19 1.3.2 Một số phương pháp kết tinh celecoxib 20 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG 23 VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Nguyên liệu 23 Bảng 2.1: Danh sách ngun liệu, hóa chất, dung mơi sử dụng 23 2.2 Thiết bị thí nghiệm 24 2.3 Phương pháp nghiên cứu .26 2.3.1 Tổng hợp hóa học tinh chế 26 2.3.1.1 Tổng hợp hóa học 26 Bước 1: Tổng hợp liên tục 1-(4-methylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion từ 4methylacetophenon este axit trifluoroacetic theo mơ hình dòng chảy quy mơ phòng thí nghiệm 26 Hình 2.1: Sơ đồ tổng hợp chất (6) 26 Bước 2: Tổng hợp celecoxib 27 Hình 2.2: Sơ đồ tổng hợp celecoxib .27 2.3.1.2 Tinh chế 27 2.3.2 Kiểm tra độ tinh khiết khẳng định cấu trúc 27 2.3.2.1 Kiểm tra độ tinh khiết 27 2.3.2.1 Khẳng định cấu trúc 28 2.3.3 Kết .28 2.3.3.1 Kiểm nghiệm celecoxib 28 - Định tính 28 vi - Mất khối lượng làm khô .28 - Nhiệt độ nóng chảy 29 - Định lượng .29 2.3.3.2 Xác định độc tính cấp (LD50) 29 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ, THẢO LUẬN 31 3.1 Triển khai quy trình tổng hợp celecoxib quy mơ phòng thí nghiệm 31 Hình 3.1: Sơ đờ tổng hợp Celecoxib 32 Dựa vào điều kiện thí nghiệm cơng bố hóa chất cho phép, tiến hành tổng hợp celecoxib theo qui trình gồm hai giai đoạn để tổng hợp celecoxib Bước 1, diketon (6) tổng hợp phản ứng ngưng tụ Claisen keton este môi trường bazơ Bước 2, diketon (6) tạo thành dung dịch phản ứng với 4-SAPH (7) để tạo thành celecoxib 32 3.1.1 Tổng hợp liên tục 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion 32 3.1.1.1 Thiết kế phản ứng tổng hợp liên tục 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan1,3-dion từ 4-metylacetophenon este axit trifluoroacetic theo mơ hình dòng chảy quy mơ phòng thí nghiệm 32 Hình 3.2: Sơ đồ tổng hợp chất (6) 32 Hình 3.3: Phản ứng tổng hợp liên tục diketon từ 4-metylacetophenon este axit trifluoroacetic mơ hình phản ứng dòng chảy liên tục 33 Bảng 3.1: Hiệu suất tổng hợp phản ứng tổng hợp chất (6) 34 Tổng hợp 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (2) Xác định nồng độ tối ưu chất 4-metylacetophenon tham gia phản ứng theo mơ hình dòng chảy 35 Bảng 3.2: Hiệu suất tổng hợp phản ứng tổng hợp chất (6) thiết bị phản ứng dòng .36 Tổng hợp 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định nồng độ tối ưu este axit trifluoroacetic tham gia phản ứng theo mơ hình dòng chảy 37 Bảng 3.3: Hiệu suất tổng hợp phản ứng tổng hợp chất (6) thiết bị phản ứng dòng .38 Tổng hợp 1-(4-metylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định nhiệt độ tối ưu phản ứng ngưng tụ Claisen hệ phản ứng dòng chảy thực nghiệm .39 Bảng 3.4: Hiệu suất tổng hợp phản ứng tổng hợp chất (6) thiết bị phản ứng dòng .40 Tổng hợp 1-(4-methylphenyl)- 4,4,4-trifluorobutan-1,3-dion (6) Xác định tốc độ dòng phản ứng ngưng tụ Claisen hệ phản ứng dòng chảy thực nghiệm 41 vii Phụ lục 19: Phổ 13CNMR của chất (6) Phụ lục 20: Phổ 1HNMR của Celecoxib Phụ lục 21: Phổ 13CNMR của Celecoxib Phụ lục 22: Phổ 1HNMR của Celecoxib chuẩn Phụ lục 23: Phổ 13CNMR của Celecoxib chuẩn Phụ lục 24: Phiếu kiểm nghiệm KHOA DƯỢC LÝ VIỆN KIỂM NGHIỆM THUỐC TRUNG ƯƠNG KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP (Kết quả thử nghiệm chỉ có giá trị với mẫu đem thử) Tên mẫu: Celecoxib Nơi sản xuất: Viện Hóa học – Viện Hàn lâm KHCN Việt Nam Nơi gửi mẫu: Viện Hóa học – Viện Hàn lâm KHCN Việt Nam Lô SX: LTN01 Tài liệu thử: Phương pháp xac đinh đôc tinh cua thuôc – Nha xuât ban Y hoc 2014 ́ ̣ ̣ ́ ̉ ́ ̀ ́ ̉ ̣ OECD guidelines for testing of chemicals. Acute oral toxicity – Up and Down procedure OECD 425, 2001 OECD guidelines for testing of chemicals. Repeated dose 28 days Oral Toxicity study in Rodents OECD 407, 2008. Tình trạng mẫu thử khi nhận: Mẫu thử khi gửi được đóng trong túi PE kín, bên trong chứa bột màu trắng, mịn Trên nhãn ghi tên mẫu, lơ sản xuất, nơi sản xuất Nơi thực hiện: Khoa Dược lý – Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung Ương Kết quả thực nghiệm: I. ĐỘC TÍNH CẤP Thời gian thực hiện: Từ ngày 04/01/2015 đến ngày 14/03/2015 1.1. Động vật thí nghiệm: Lồi: chuột nhắt trắng giống Swiss do Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương cung cấp Cân nặng: 1820g Phụ lục 25: Kết quả thử độc tính cấp (LD Số lượng: 100 con Nguồn gốc cung cấp: Viện vệ sinh dịch tễ trung ương Điều kiện chăm sóc: ĐVTN được ni trong điều kiện chuồng thống mát, đảm bảo vệ sinh, chế độ ăn uống theo nhu cầu của chuột Cân nặng: Tất cả ĐVTN được để ổn định trước khi tiến hành thử nghiệm và theo dõi cân nặng khi tiến hành thử nghiệm 1.2. Mẫu thử: 1.2.1 Thử sơ bộ: Thăm dò mức liều khơng làm chết chuột thí nghiệm: Tiến hành trên 05 nhóm chuột. Dùng hỗn dịch có chứa 0, 5 g mẫu thử/ ml hồ tinh bột 3,0 %. (hỗn dịch A) Cho mỗi nhóm chuột gồm 5 con uống 0,5 ml; 0,6 ml; 0,7 ml; 0,8 ml và 0,9 ml hỗn dịch A tương đương với mức liều 12,5 g; 15,0 g; 17,5 g, 20,0 g và 22,5 g mẫu thử/kg chuột. Sau 24 giờ theo dõi, chuột uống hỗn dịch thử ở mức liều 12,5 g; 15,0 g; 17,5 g, 20,0 g mẫu thử/ kg chuột khơng bị chết, chuột uống mức liều 22,5 g/kg bị chết 01 con. Vậy liều khơng gây chết chuột phải khơng q 20,0g mẫu thử/ kg chuột Thăm dò mức liều làm chết 100% chuột thí nghiệm: Tiến hành trên 4 nhóm chuột. Dùng hỗn dịch có chứa 0,75 g mẫu thử/ ml hồ tinh bột 3,0 %. (hỗn dịch B) Cho mỗi nhóm chuột gồm 5 con uống 0,7 ml; 0,8 ml; 0,9 ml và 1,0 ml hỗn dịch B tương đương với mức liều 26,25 g/kg; 30,0 g/kg; 33,75 g/kg và 37,5 g mẫu thử/kg chuột. Sau 24 giờ theo dõi, chuột mức liều 26,5 g mẫu thử/ kg chuột gây chết 2/5 số chuột của nhóm, còn ở các mức liều 30,0 g/kg; 33,75 g/kg và 37,5 g mẫu thử/ kg chuột gây chết 100% số chuột thí nghiệm. Do đó liều gây chết 100% số chuột thí nghiệm phải khơng ít hơn 30,0 g mẫu thử/ kg chuột Như vậy, LD50 sẽ được xác định trong khoảng từ 20,0 g đến 30,0 g mẫu thử/kg chuột 1.2.2 Thử nghiệm chính thức: Các mức liều thử nghiệm: Mức liều 1: 20,0 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 2: 22,5 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 3: 25,0 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 4: 27,5 g mẫu thử/ kg chuột Mức liều 5: 30,0 g mẫu thử/ kg chuột Cách xử lý mẫu và chuẩn bị mẫu thử: Dùng hỗn dịch có chứa 0, 5 g mẫu thử/ ml hồ tinh bột 3,0 %. (hỗn dịch A) 1.3. Tiến hành: Chuột được nhịn ăn 15 giờ trước khi thí nghiệm, nước uống theo nhu cầu Kiểm tra cân nặng trước khi thử nghiệm. Chuột đạt các u cầu về cân nặng được đưa vào thử nghiệm Cách dùng: Đưa mẫu thử dưới dạng hỗn dịch theo đường uống. Lấy thể tích mẫu thử theo quy định đưa thẳng vào dạ dày chuột bằng kim cong đầu tù Dựa trên kết quả thăm dò trong thử nghiệm sơ bộ, tiến hành thử nghiệm chính thức trên 50 chuột, chia thành 5 nhóm thử theo mức liều đã dự tính. Các nhóm thử được uống hỗn dịch ở các mức liều và số lần đưa mẫu thử theo bảng 1.3.1: Bảng 1.3.1: Thể tích đưa mẫu thử và liều thử nghiệm trên chuột Liều dùng Liều dùng Số chuột (ml hd thử/ 20g chuột) (g mẫu thử/kg chuột) thí nghiệm Mức liều 1 0,8 ml hd thử 20,0 g mẫu thử/kg chuột 10 Mức liều 2 0,9 ml hd thử 22,5 g mẫu thử/kg chuột 10 Mức liều 3 1,0 ml hd thử 25,0 g mẫu thử/kg chuột 10 Mức liều 4 1,1 ml hd thử 27,5 g mẫu thử/kg chuột 10 Mức liều 5 1,2 ml hd thử 30,0 g mẫu thử/kg chuột 10 Nhóm chuột Lịch theo dõi: Theo dõi biểu hiện của chuột sau khi uống, trong 96 giờ và theo dõi hoạt động của ĐVTN trong thời gian 7 ngày sau khi uống 1.4. Theo dõi: 1.4.1 Tiêu thụ thức ăn và uống của chuột: Sau khi uống hỗn dịch thử ở mức liều 1, chuột khỏe mạnh, ăn uống, hoạt động bình thường. Ở mức liều 2, 3, 4 và 5, sau khi uống hỗn dịch thử, chuột có biểu hiện giảm hoạt động, giảm tiêu thụ thức ăn nước uống. Số chuột khơng chết ở các mức liều trên có biểu hiện giảm hoạt động trong thời gian theo dõi 1.4.2 Quan sát dấu hiệu ngộ độc: Sau khi uống hỗn dịch thử ở các mức liều 2, 3, 4 và 5, chuột có biểu hiện mệt mỏi, giảm hoạt động. Chuột chết trong khoảng thời gian 96 giờ sau khi uống hỗn dịch thử và tỷ lệ thuận với mức liều cho uống. Chuột ở mức liều 1 khơng nhận thấy có biểu hiện ngộ độc. 1.5. Kết quả: Theo dõi tỷ lệ chuột chết/ sống khi được uống hỗn dịch thử các mức liều thử nghiệm theo bảng 3.1 được thể hiện trên bảng1.5.1 và biểu đồ 1.5.2 1.5.1 Bảng số liệu: Mức liều Liều thử Số chuột chết/ Số chuột chết/ % Chết sống thực tế sống kỳ vọng (g mẫu thử/kg chuột) 20,0 0/10 0/29 22,5 1/9 1/19 5,0 25,0 4/6 5/10 33,3 27,5 6/4 11/4 73,3 30,0 10/0 21/0 100 1.5.2. Vẽ đồ thị theo các số liệu trên bảng 96 88 80 72 % chết 64 56 48 40 32 24 16 17.5 20 22.5 25 27.5 30 Mức liều (g mẫu thử/ kg chuột) 1.5.3. Tính LD50 theo Behrens ( 50 – a) x d LD50 = A + b – a Trong đó: A Liều gây chết a% ĐVTN a % ĐVTN chết sát dưới 50% sao cho a 50% d khoảng cách giữa các liều (g) Theo bảng trên, ta có: a = 33,3% b = 73,3% A = 25,0 g mẫu thử/ kg chuột d = 2,5 g m ẫu th ử/ kg chu ột ( 50 – 33,3) x 2,5 LD50 = 25,0 + = 26,04 g mẫu thử/kg chuột 73,3 – 33,3 1.5.4. Tính sai số chuẩn: ksd (EsLD50)2 = n Trong đó: k: hệ số Behrens = 0,66 n: Số chuột trong mỗi nhóm s: Phân phối chuẩn LD84 LD16 s = 2 Theo đồ thị, ta có: LD16 = 23,7 g mẫu thử/ kg chuột LD84 = 28,5 g mẫu thử/ kg chuột 28,5 – 23,7 s = = 2,4 g mẫu thử/ kg chuột 2 ksd 0,66 x 2,4 x 2,5 Sai số chuẩn: (EsLD50)2 = = n 10 SLD50 = 0,63 g mẫu thử/ kg chuột Vậy LD50 = (26,04 ± 0,63) g mẫu thử/ kg chuột 1.6. Kết luận: Mẫu thử Celecoxib gửi tới u cầu thử độc tính cấp trên chuột nhắt trắng có kết quả như sau: Sau khi uống hỗn dịch thử, chuột có các biểu hiện ngộ độc như sau: ở mức liều thấp (20,0 g mẫu thử/ kg chuột) khơng nhận thấy có biểu hiện ngộ độc, ở mức liều trong khoảng từ 22,5 g đến 30,0 g mẫu thử/ kg chuột, chuột có biểu hiện giảm hoạt động, mệt mỏi. Chuột bị chết trong khoảng thời gian 96 giờ theo dõi và tỷ lệ chết tùy theo mức liều uống Trong thử nghiệm này, chúng tơi đã tìm được liều khơng gây chết chuột là 20,0g mẫu thử/ kg chuột. Liều gây chết 100% số chuột thử nghiệm là 30,0g mẫu thử/ kg chuột. Dựa trên số liệu thực tế, chúng tơi đã tìm được liều LD50 là (26,04 ± 0,63) g mẫu thử/ kg chuột (hay 26040 ± 630 mg/kg). Theo phân loại độc tính của GHS (Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals, 2003), những chất có giá trị độc tính cấp LD50 > 5000 mg/kg chuột qua đườ uống, được coi là chất khơng độc. Như vậy, dựa trên kết quả thu được của thử nghiệm này có thể kết luận mẫu thử Celecoxib khơng độc ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ YẾN NGHIÊN CỨU QUI TRÌNH TỔNG HỢP LIÊN TỤC VÀ TINH CHẾ CELECOXIB Chun nghành: Hóa hữu cơ Mã số: 60440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC... cơng nghiệp, cho hiệu suất cao, giá thành hợp lý, có thể áp dụng trong nước, chúng tơi tiến hành đề tài Nghiên cứu qui trình tổng hợp liên tục và tinh chế celecoxib với các mục tiêu: 1. Khảo sát điều kiện phản ứng, điều kiện tinh chế để... Phương pháp tổng hợp 11 1.2.1 Tổng hợp celecoxib cách ngưng tụ diketon với hydrazin .11 Hình 1.4: Sơ đồ tổng hợp celecoxib theo phương pháp .12 Hình 1.5: Tổng hợp liên tục celecoxib