1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu đặc điểm sinh học và tính kháng kháng sinh của Neisseria meningitidis tại các ổ dịch lưu hành trong quân đội

87 50 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 87
Dung lượng 1,96 MB

Nội dung

Mục tiêu của luận văn nhằm xác định đặc điểm sinh học và cơ cấu nhóm huyết thanh của Neisseria meningitidis phân lập tại một số đơn vị tân binh trong quân đội; xác định tính nhạy cảm kháng sinh của các chủng Neisseria meningitidis phân lập từ người mang mầm bệnh không triệu chứng.

                                                           LỜI CẢM ƠN Tơi xin chân thành cảm  ơn Ban giám hiệu, Khoa Sinh Học­Trường   Đại Học Khoa Học Tự Nhiên­Đại Học Quốc Gia Hà Nội, đã hết lòng tạo   điều kiện để  chúng tơi có thể  học tập tốt và đạt được những thành quả  như ngày hơm nay Đặc biệt, với lòng biết  ơn sâu sắc, tơi xin gửi lơi cam  ̀ ̉ ơn tơi th ́ ầy   hướng dẫn TS.  Đoàn  Trọng Tuyên và GS.TS. Phạm Văn Ty đa tân tâm ̃ ̣   hương dân, giup đ ́ ̃ ́ ỡ, tao điêu kiên thuân l ̣ ̀ ̣ ̣ ợi đê tôi hoan thanh luân văn tôt ̉ ̀ ̀ ̣ ́  nghiêp ̣ Tôi cung xin g ̃ ửi lơi cam  ̀ ̉ ơn chân thanh nhât đên can bô nhân viên cua ̀ ́ ́ ́ ̣ ̉   khoa Vi sinh Vật viên Y h ̣ ọc Dự  phòng Quân đội va Lanh đao ch ̀ ̃ ̣ ỉ  huy viện  đa giup đ ̃ ́ ỡ va tao điêu kiên đê tôi thu th ̀ ̣ ̀ ̣ ̉ ập số liệu, thực hiện nghiên cứu và  hoan thanh lu ̀ ̀ ận văn tôt nghiêp ́ ̣ Xin gửi tới Ban lãnh đạo Bệnh viện Phổi Hà Nội lời cảm ơn sâu sắc   đã tạo điều kiện về thời gian để tơi có thể hồn thành khóa học này Một lần nữa, tơi xin gửi lời cảm  ơn tới các thầy cơ, bạn bè và tồn  bộ những người thân trong gia đình đã ln giúp đỡ nhiệt tình và động viên   tơi trong suốt q trình học tập Học Viên Vũ Thị Xn Thu                                                           MỤC LỤC                                                           MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT .1 NMC:   Não mô cầu VMN:  Viêm màng não PS:   Polysaccharide LOS:   Lipo – oligosaccharide LPS:   Lipopolysaccharide .1 MỞ ĐẦU Chương 1 TỔNG QUAN .3 1.1. Một số đặc điểm dịch tễ học bệnh viêm màng não do Neisseria meningitidis .3 1.1.1.Dịch tễ học của bệnh viêm màng não  1.1.2.Dịch tễ học người mang mầm bệnh không triệu chứng 1.2. Đặc điểm sinh học của N. meningitidis 1.2.1.Danh pháp và phân loại Não mô cầu [32] Hình 1.1: Hình ảnh nhuộm Gram N. meningitidis từ dịch não tủy[63] 1.2.2. Tính chất ni cấy .7 Hình 1.2:Khuẩn lạc N. meningitidis trên thạch chocolate. [63] .8 Hình 1.3: Khuẩn lạc N. meningitidis trên thạch máu. [63] 1.2.3. Sức đề kháng .9 Hình 1.4: Hình ảnh màng tế bào N. meningitidis cắt ngang.[18] 1.3. Các kỹ thuật chẩn đốn phòng thí nghiệm 11 Hình 1.5: Hình ảnh ni cấy N. meningitidis trên mơi trường thạch chocolate có kháng sinh 12 Hình1.6: Hình ảnh định danh N. meningitidis trên thanh định danh API NH .12 Hình 1.7 : Hình ảnh bộ sinh phẩm Pastorex phát hiện N. meningitidis .14     1.3.5. Kỹ thuật sinh học phân tử phát hiện vi khuẩn gây viêm màng não  14 1.4.  Đặc điểm gene đích phát hiện N. meningitidis 15 Hình 1.8: Đặc điểm gene mã hóa kháng ngun của N. meningitidis 16 1.5. Đặc điểm gene đích (gen đặc hiệu) xác định nhóm huyết thanh của N.  meningitidis 17 Hình 1.9 : Bản đồ gene capsule (CPS) của Nmen (14), ctrABCD operon mã hóa ATP­protein  (khung kẻ ơ). SynABC(màu ghi), D/E/F/G (chấm), sacABCD (sọc ngang), xcbABC (gạch  chéo), mã hóa  nhóm huyết thanh­specific enzymes cho tổng hợp capsule . oatC (nhóm huyết  thanh C) và oatWY (nhóm  huyết thanh  W135 và Y), kết hợp sao chép cùng với syn operons  và mã hóa O­acetyltransferases. lipA và lipB  mã hóa protein. ctrE and ctrF được biết như  LipA và LipB 20 1.6. Đáp ứng miễn dịch 20 Bảng 1.3 . Protein màng ngoài của N. meningitidis .21 1.7. Điều trị và dự phòng .22 Bảng 1.4. Đặc điểm lâm sàng, chẩn đoán, điều trị nhiễm N. meningitidis 22 Chương 2 25 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1. Đối tượng  25 2.2. Vật liệu nghiên cứu 25 2.2.1.Thiết bị 25 2.2.2. Sinh phẩm 25 2.3. Phương pháp nghiên cứu  .26 2.3.1. Phương pháp dịch tễ học mô tả cắt ngang .26 2.3.2. Phương pháp thực nghiệm trong phòng thí nghiệm: .26 Hình 2.1   : Thiết kế nghiên cứu đặc điểm sinh học của N. meningitidis 27 Bảng 2. 1. Các hóa chất gắn trong các giếng của thẻ định danh NH 27 Bảng 2.2:  Trình tự mồi khảo sát phát hiện gene đích của N. meningitidis và các nhóm   huyết thanh  (A; B; C) 32 Hình 2.2. Thanh E test 35 Hình 2.3. Kết quả thử nghiệm MIC bằng E test 35 Bảng 2.3:Tiêu chuẩn đánh giá MIC theo hướng dẫn của Viện lâm sàng và chuẩn thức  phòng thí nghiệm (CLSI) năm 2013[] 35 Chương 3 37 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 37 3.1. Đặc điểm sinh học và cơ cấu nhóm huyết thanh của Neisseria meningitidis phân  lập tại một số đơn vị tân binh trong quân đội 37 3.1.1. Đặc điểm sinh học của chủng Neisseria meningitidis phân lập tại các đơn vị  tân binh trong quân đội  .37 Bảng 3.1. Đặc điểm chuyển hóa axit amin của N.meningitidis 37 theo nguồn gốc chủng trên thẻ định danh NH 37 Bảng 3.2. Đặc điểm chuyển hóa đường của  N.meningitidis .38 theo nguồn gốc chủng trên thẻ định danh NH  38 theo nhóm huyết thanh B và C trên thẻ định danh NH 39 Bảng 3.4. Đặc điểm chuyển hóa đường của  N.meningitidis .39  theo nhóm huyết thanh B và C trên thẻ định danh NH .39 3.1.2. Cơ cấu nhiễm Neisseria meningitidis và các nhóm huyết thanh của các chủng  Neisseria meningitidis phân lập tại các đơn vị tân binh trong quân đội bằng phương  pháp PCR 40 Bảng 3.5: Tỷ lệ nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh 40 lưu hành tại 03 đơn vị giám sát 40 Bảng 3.6: Tần suất nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh .41 theo trung đoàn 41 Bảng 3.7: Tỷ lệ nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh theo địa phương nhập ngũ 43 Bảng 3.8. Kết quả kiểm tra chủng N. meningitidis trên thanh NH và 45 cơ cấu nhóm huyết thanh bằng kỹ thuật Multiplex­PCR 45 3.1.3. Khảo sát đặc điểm sinh học phân tử của các chủng N.meningitidis phân lập  được bằng các cặp mồi đặc hiệu lồi và nhóm N.meningitidis thơng qua phản ứng  PCR 47 Lựa chọn 32 trong tổng số 61 chủng đã phân lập được ở trên tiến hành khảo sát  đặc điểm sinh học phân tử bằng các cặp mồi đặc hiệu cho lồi và nhóm  N.meningitidis  47 Hình 3.1: Khảo sát gene CtrA trên 32 chủng N. Meningitidis 48 Hình 3.2: Khảo sát gene ctrA trên 32 chủng N. Meningitidis 49 Hình 3.3: Tiếp tục khảo sát sự xuất hiện của gen ctrA trên 32 chủng  50 N. meningitidis 50 Hình 3.4:  Kết quả khảo sát sự có mặt của gene Por A trên 32 chủng  51 N. meningitidis phân lập được 51 Hình 3.5: Khảo sát gene CrgA mã hóa LysR của N. meningitidis trên 32 52              Hình 3.6: Khảo sát gene SodC trên 32 chủng N. meningitidis  53 Khảo sát bằng các cặp mồi phát hiện nhóm N. Meningitidis .54 Khảo sát cự có mặt của gene siaDc phát hiện nhóm A của N. meningitidis [31] 54 Hình 3.7 : Khảo sát gene siaDc phát hiện N. meningitidis nhóm huyết thanh A,  55 Hình 3.8: Khảo sát gene siaDb phát hiện N. meningitidis nhóm B 56 Khảo sát cự có mặt của gene siaDc  phát hiện nhóm huyết thanh C của N. meningitidis [31] 56 Hình 3.9: Khảo sát gene siaDc phát hiện N. meningitidis nhóm C 57 3.2. Đánh giá sự nhậy cảm với kháng sinh của các chủng N. meningitidis nhóm huyết  thanh B và C 57 Bảng 3.9: Xác định MIC của chủng Neisseria meningitidis,  57 nhóm huyết thanh B (n=23) 57 Bảng 3.10: Kết quả thử nghiệm in vivo trên người nhiễm 59  N. meningitidis, nhóm huyết thanh B 59 Bảng 3.11 : Xác định MIC (in vitro) của chủng Neisseria meningitidis,  .59  nhóm huyết thanh C (n=4) 59 Bảng 3.12: Kết quả thử nghiệm in vivo trên người nhiễm 60  N. meningitidis, nhóm huyết thanh C 60 KẾT LUẬN 62 PHỤ LỤC 76 DANH MỤC BẢNG                                                           MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT .1 NMC:   Não mô cầu VMN:  Viêm màng não PS:   Polysaccharide LOS:   Lipo – oligosaccharide LPS:   Lipopolysaccharide .1 MỞ ĐẦU Chương 1 TỔNG QUAN .3 Hình 1.1: Hình ảnh nhuộm Gram N. meningitidis từ dịch não tủy[63] Hình 1.2:Khuẩn lạc N. meningitidis trên thạch chocolate. [63] .8 Hình 1.3: Khuẩn lạc N. meningitidis trên thạch máu. [63] Hình 1.4: Hình ảnh màng tế bào N. meningitidis cắt ngang.[18] Hình 1.5: Hình ảnh ni cấy N. meningitidis trên mơi trường thạch chocolate có kháng sinh 12 Hình1.6: Hình ảnh định danh N. meningitidis trên thanh định danh API NH .12 Hình 1.7 : Hình ảnh bộ sinh phẩm Pastorex phát hiện N. meningitidis .14 Hình 1.8: Đặc điểm gene mã hóa kháng ngun của N. meningitidis 16 Hình 1.9 : Bản đồ gene capsule (CPS) của Nmen (14), ctrABCD operon mã hóa ATP­protein  (khung kẻ ơ). SynABC(màu ghi), D/E/F/G (chấm), sacABCD (sọc ngang), xcbABC (gạch  chéo), mã hóa  nhóm huyết thanh­specific enzymes cho tổng hợp capsule . oatC (nhóm huyết  thanh C) và oatWY (nhóm  huyết thanh  W135 và Y), kết hợp sao chép cùng với syn operons  và mã hóa O­acetyltransferases. lipA và lipB  mã hóa protein. ctrE and ctrF được biết như  LipA và LipB 20 Bảng 1.3 . Protein màng ngoài của N. meningitidis .21 Bảng 1.4. Đặc điểm lâm sàng, chẩn đoán, điều trị nhiễm N. meningitidis 22 Chương 2 25 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 Hình 2.1   : Thiết kế nghiên cứu đặc điểm sinh học của N. meningitidis 27 Bảng 2. 1. Các hóa chất gắn trong các giếng của thẻ định danh NH 27 Bảng 2.2:  Trình tự mồi khảo sát phát hiện gene đích của N. meningitidis và các nhóm   huyết thanh  (A; B; C) 32 Hình 2.2. Thanh E test 35 Hình 2.3. Kết quả thử nghiệm MIC bằng E test 35 Bảng 2.3:Tiêu chuẩn đánh giá MIC theo hướng dẫn của Viện lâm sàng và chuẩn thức  phòng thí nghiệm (CLSI) năm 2013[] 35 Chương 3 37 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 37 Bảng 3.1. Đặc điểm chuyển hóa axit amin của N.meningitidis 37 theo nguồn gốc chủng trên thẻ định danh NH 37 Bảng 3.2. Đặc điểm chuyển hóa đường của  N.meningitidis .38 theo nguồn gốc chủng trên thẻ định danh NH  38 theo nhóm huyết thanh B và C trên thẻ định danh NH 39 Bảng 3.4. Đặc điểm chuyển hóa đường của  N.meningitidis .39  theo nhóm huyết thanh B và C trên thẻ định danh NH .39 Bảng 3.5: Tỷ lệ nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh 40 lưu hành tại 03 đơn vị giám sát 40 Bảng 3.6: Tần suất nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh .41 theo trung đồn 41 Bảng 3.7: Tỷ lệ nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh theo địa phương nhập ngũ 43 Bảng 3.8. Kết quả kiểm tra chủng N. meningitidis trên thanh NH và 45 cơ cấu nhóm huyết thanh bằng kỹ thuật Multiplex­PCR 45 Hình 3.1: Khảo sát gene CtrA trên 32 chủng N. Meningitidis 48 Hình 3.2: Khảo sát gene ctrA trên 32 chủng N. Meningitidis 49 Hình 3.3: Tiếp tục khảo sát sự xuất hiện của gen ctrA trên 32 chủng  50 N. meningitidis 50 Hình 3.4:  Kết quả khảo sát sự có mặt của gene Por A trên 32 chủng  51 N. meningitidis phân lập được 51 Hình 3.5: Khảo sát gene CrgA mã hóa LysR của N. meningitidis trên 32 52              Hình 3.6: Khảo sát gene SodC trên 32 chủng N. meningitidis  53 Khảo sát bằng các cặp mồi phát hiện nhóm N. Meningitidis .54 Khảo sát cự có mặt của gene siaDc phát hiện nhóm A của N. meningitidis [31] 54 Hình 3.7 : Khảo sát gene siaDc phát hiện N. meningitidis nhóm huyết thanh A,  55 Hình 3.8: Khảo sát gene siaDb phát hiện N. meningitidis nhóm B 56 Khảo sát cự có mặt của gene siaDc  phát hiện nhóm huyết thanh C của N. meningitidis [31] 56 Hình 3.9: Khảo sát gene siaDc phát hiện N. meningitidis nhóm C 57 Bảng 3.9: Xác định MIC của chủng Neisseria meningitidis,  57 nhóm huyết thanh B (n=23) 57 Bảng 3.10: Kết quả thử nghiệm in vivo trên người nhiễm 59  N. meningitidis, nhóm huyết thanh B 59 Bảng 3.11 : Xác định MIC (in vitro) của chủng Neisseria meningitidis,  .59  nhóm huyết thanh C (n=4) 59 Bảng 3.12: Kết quả thử nghiệm in vivo trên người nhiễm 60  N. meningitidis, nhóm huyết thanh C 60 KẾT LUẬN 62 PHỤ LỤC 76 DANH MỤC HÌNH                                                           MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT .1 NMC:   Não mô cầu VMN:  Viêm màng não PS:   Polysaccharide LOS:   Lipo – oligosaccharide LPS:   Lipopolysaccharide .1 MỞ ĐẦU Chương 1 TỔNG QUAN .3 Hình 1.1: Hình ảnh nhuộm Gram N. meningitidis từ dịch não tủy[63] Hình 1.2:Khuẩn lạc N. meningitidis trên thạch chocolate. [63] .8 Hình 1.3: Khuẩn lạc N. meningitidis trên thạch máu. [63] Hình 1.4: Hình ảnh màng tế bào N. meningitidis cắt ngang.[18] Hình 1.5: Hình ảnh ni cấy N. meningitidis trên mơi trường thạch chocolate có kháng sinh 12 Hình1.6: Hình ảnh định danh N. meningitidis trên thanh định danh API NH .12 Hình 1.7 : Hình ảnh bộ sinh phẩm Pastorex phát hiện N. meningitidis .14 Hình 1.8: Đặc điểm gene mã hóa kháng ngun của N. meningitidis 16 Hình 1.9 : Bản đồ gene capsule (CPS) của Nmen (14), ctrABCD operon mã hóa ATP­protein  (khung kẻ ơ). SynABC(màu ghi), D/E/F/G (chấm), sacABCD (sọc ngang), xcbABC (gạch  chéo), mã hóa  nhóm huyết thanh­specific enzymes cho tổng hợp capsule . oatC (nhóm huyết  thanh C) và oatWY (nhóm  huyết thanh  W135 và Y), kết hợp sao chép cùng với syn operons  và mã hóa O­acetyltransferases. lipA và lipB  mã hóa protein. ctrE and ctrF được biết như  LipA và LipB 20 Bảng 1.3 . Protein màng ngoài của N. meningitidis .21 Bảng 1.4. Đặc điểm lâm sàng, chẩn đoán, điều trị nhiễm N. meningitidis 22 Chương 2 25 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 Hình 2.1   : Thiết kế nghiên cứu đặc điểm sinh học của N. meningitidis 27 Bảng 2. 1. Các hóa chất gắn trong các giếng của thẻ định danh NH 27 Bảng 2.2:  Trình tự mồi khảo sát phát hiện gene đích của N. meningitidis và các nhóm   huyết thanh  (A; B; C) 32 Hình 2.2. Thanh E test 35 Hình 2.3. Kết quả thử nghiệm MIC bằng E test 35 Bảng 2.3:Tiêu chuẩn đánh giá MIC theo hướng dẫn của Viện lâm sàng và chuẩn thức  phòng thí nghiệm (CLSI) năm 2013[] 35 Chương 3 37 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 37 Bảng 3.1. Đặc điểm chuyển hóa axit amin của N.meningitidis 37 theo nguồn gốc chủng trên thẻ định danh NH 37 Bảng 3.2. Đặc điểm chuyển hóa đường của  N.meningitidis .38 theo nguồn gốc chủng trên thẻ định danh NH  38 theo nhóm huyết thanh B và C trên thẻ định danh NH 39 Bảng 3.4. Đặc điểm chuyển hóa đường của  N.meningitidis .39  theo nhóm huyết thanh B và C trên thẻ định danh NH .39 Bảng 3.5: Tỷ lệ nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh 40 lưu hành tại 03 đơn vị giám sát 40 Bảng 3.6: Tần suất nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh .41 theo trung đoàn 41 Bảng 3.7: Tỷ lệ nhiễm N. meningitidis và nhóm huyết thanh theo địa phương nhập ngũ 43 Bảng 3.8. Kết quả kiểm tra chủng N. meningitidis trên thanh NH và 45 cơ cấu nhóm huyết thanh bằng kỹ thuật Multiplex­PCR 45 Hình 3.1: Khảo sát gene CtrA trên 32 chủng N. Meningitidis 48 Hình 3.2: Khảo sát gene ctrA trên 32 chủng N. Meningitidis 49 Hình 3.3: Tiếp tục khảo sát sự xuất hiện của gen ctrA trên 32 chủng  50 N. meningitidis 50 Hình 3.4:  Kết quả khảo sát sự có mặt của gene Por A trên 32 chủng  51 N. meningitidis phân lập được 51 Hình 3.5: Khảo sát gene CrgA mã hóa LysR của N. meningitidis trên 32 52              Hình 3.6: Khảo sát gene SodC trên 32 chủng N. meningitidis  53 Khảo sát bằng các cặp mồi phát hiện nhóm N. Meningitidis .54 Khảo sát cự có mặt của gene siaDc phát hiện nhóm A của N. meningitidis [31] 54 Hình 3.7 : Khảo sát gene siaDc phát hiện N. meningitidis nhóm huyết thanh A,  55 Hình 3.8: Khảo sát gene siaDb phát hiện N. meningitidis nhóm B 56 Khảo sát cự có mặt của gene siaDc  phát hiện nhóm huyết thanh C của N. meningitidis [31] 56 Hình 3.9: Khảo sát gene siaDc phát hiện N. meningitidis nhóm C 57 Bảng 3.9: Xác định MIC của chủng Neisseria meningitidis,  57 nhóm huyết thanh B (n=23) 57 Bảng 3.10: Kết quả thử nghiệm in vivo trên người nhiễm 59  N. meningitidis, nhóm huyết thanh B 59 Bảng 3.11 : Xác định MIC (in vitro) của chủng Neisseria meningitidis,  .59  nhóm huyết thanh C (n=4) 59 Bảng 3.12: Kết quả thử nghiệm in vivo trên người nhiễm 60  N. meningitidis, nhóm huyết thanh C 60 KẾT LUẬN 62 PHỤ LỤC 76 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT NMC:  Não mô cầu VMN:  Viêm màng não PS:  Polysaccharide LOS:  Lipo – oligosaccharide LPS:  Lipopolysaccharide OMP:            OuRer membrase protein PCR: Polymerase chain reaction MIC Minimum inhibition concentration VSV:                Vi sinh vật MỞ ĐẦU Viêm màng não là một bệnh lý nhiễm trùng nghiêm trọng, tỷ  lệ  tử  vong cao nếu khơng được nghĩ đến, khơng chẩn đốn và điều trị  kịp thời   Sự hiểu biết về các tác nhân gây bệnh thường gặp, sẽ hỗ trợ cho cơng tác   điều trị và xây dựng các chương trình phòng chống bệnh tật tại từng Quốc   gia. Hầu hết những dữ liệu về dịch tễ của viêm màng não mủ ở người lớn   đều xuất phát từ những quốc gia đã phát triển, trong đó 4 tác nhân gây bệnh  thường   gặp     là:  Streptococcus   pneumoniae  (30%­60%),    Neisseria   meningitidis  (13­37%),  Listeria monocytogenes   Haemophilus influenzae.  Neisseria   meningitidis,  Haemophilus   influenzae  type   b   (Hib)   và  Streptococcus   pneumoniae    loại   vi   khuẩn   có   vỏ   (polysaccharide­ encapsuleated) là nguyên nhân quan trọng gây bệnh và tử vong trên thế giới  [23]   Hàng  năm  có  từ  400.000  –  500.000  người  chết  do  viêm  màng  não  (WHO, 2006).  Trong thời gian cuối thế kỷ 20 và đầu thế kỷ 21, đã có sự chuyển đổi  trong việc chẩn đốn các tác nhân sinh học, kết hợp kiểu hình và huyết  thanh học với việc xác định kiểu gene bằng các kỹ thuật sinh học phân tử  [39]. Phân tích tính đa dạng về tổ hợp trình tự nhiều vùng  gene (MLST) là  tiêu   chuẩn   vàng   cho   việc   xác   định     đặc   điểm     vi   khuẩn  N   meningitidis phục vụ  công tác giám sát dịch tễ  học. Sự  phát triển của các  kỹ thuật phân tử  cho phép phân tích vi khuẩn gây viêm màng não từ   mẫu   ni cấy phân lập và khơng phân lập để chẩn đốn xác định được ca bệnh  và nó trở thành cơng cụ hữu ích cho nâng cao chất lượng giám sát, phát hiện  và tiên lượng dịch, đây là chiến lược phòng ngừa chính ở các nước Châu âu  64 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1].Achtman M.  (1995),  "Epidemic  spread and antigenic  variability of  Neisseria  meningitidis", Trends in Microbiology. 3 (5), pp. 186­192 [2]. Bentley, S. D., G. S. Vernikos, L. A. Snyder, C. Churcher, C. Arrowsmith, T.  Chillingworth, A. Cronin, P. H. Davis, N. E. Holroyd, K. Jagels, M. Maddison, S.  Moule,   E   Rabbinowitsch,   S   Sharp,   L   Unwin,   S   Whitehead,   M   A   Quail,   M.  Achtman,   B   Barrell,   N   J   Saunders,   and   J   Parkhill   (2007),   “Meningococcal  genetic variation mechanisms viewed through comparative analysis of serogroup C  strain FAM18”, PLoS Genetics 3, pp. 23 [3]. Boisier, P., P. Nicolas, S. Djibo, M. K. Taha, I. Jeanne, H. B. Mainassara, B.  Tenebray, K. K. Kairo, D. Giorgini, and S. Chanteau (2007), “Meningococcal  meningitis:   unprecedented   incidence   of   serogroup   X­related   cases   in   2006   in  Niger”, Clinical Infectious Diseases 44, pp. 657­663 [4]. Borel, T., A. M. Rose, M. Guillerm, F. Sidikou, S. Gerstl, A. Djibo, N. Nathan,  S   Chanteau,   and   P   J   Guerin   (2006),   “High   sensitivity   and   specificity   of   the  Pastorex latex agglutination test for Neisseria meningitidis serogroup A during a  clinical trial in Niger”, Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and   Hygiene 100, pp. 964­969 [5]. Borrow, R., H. Claus, U. Chaudhry, M. Guiver, E. B. Kaczmarski, M. Frosch,  and A. J. Fox (1998),  “siaD PCR  ELISA  for confirmation and identification of  serogroup   Y   and   W135  meningococcal   infections”,  FEMS   Microbiology   Letters  159, pp. 209­214 [6]. Borrow, R., H. Claus, M. Guiver, L. Smart, D. M. Jones, E. B. Kaczmarski, M.  Frosch, and A. J. Fox (1997), “Non­culture diagnosis and serogroup determination  of meningococcal B and C infection by a sialyltransferase (siaD) PCR ELISA”,  Epidemiology and Infection 118, pp.111­117 65 [7]  Broome CV  (1986),“The carrier state:  Neisseria meningitidis”  , J Antimicrob   Chemother 18 (Suppl. A), pp. 25–34.  [8]. Bundle, D. R., H. J. Jennings, and C. P. Kenney (1974), “Studies on the group­ specific   polysaccharide   of   Neisseria   meningitidis   serogroup   X   and   an   improved  procedure for its isolation”, Journal of Biological Chemistry 249, pp. 4797­4801 [9]   Bustin,   S   A   (2004),  “The   PCR   Revolution   Basic   technologies   and  Applications”, Cambridge University Press [10]. Caugant DA,  Høiby EA,  Magnus P,  Scheel O,  Hoel T,  Bjune G,  Wedege E,  Eng J & Frøholm LO (1994), “Asymptomatic carriage of Neisseria meningitidis in a  randomly sampled population”. J Clin Microbiol 32, pp. 323–330.  [11]. Cartwright K  (1995),  “Meningococcal carriage and disease  Meningococcal  Disease” (CartwrightK, ed), pp. 115–146 [12]. Carvalho, M. G., M. L. Tondella, K. McCaustland, L. Weidlich, L. McGee, L.  W. Mayer, A. Steigerwalt, M. Whaley, R. R. Facklam, B. Fields, G. Carlone, E. W.  Ades, R. Dagan, and J. S. Sampson (2007), “Evaluation and improvement of real­ time PCR assays targeting lytA, ply, and psaA genes for detection of pneumococcal  DNA”. Journal of Clinical Microbiology 45, pp. 2460­2466.  [13].  Cedric Mims (1996),  “The Pathogenesis of the Acute Exanthemst”. Review  in Medical Virology. Vol 6,  pp. 1­8 [14]   Clare   L   Bennett,   Erwin   van   Rijn,   Steffen   Jung,   Kayo   Inaba,   Ralph   M.  Steinman, Martien L. Kapsenberg, and Björn E. Clausen (2005), “Inducible ablation  of mouse langerhans cells diminishes but fails to abrogate contact hypersensitivity”,  The Journal of Cell Biology, Vol 169, No 4,pp. 569­576 [15]. Claus, H., R. Borrow, M. Achtman, G. Morelli, C. Kantelberg, E. Longworth,  M. Frosch, and U. Vogel (2004), “Genetics of capsule O­acetylation in serogroup  C, W­135, and Y meningococci”, Molecular Microbiology 51, pp. 227­239 66 [16]. Claus, H., M. C. Maiden, R. Maag, M. Frosch, and U. Vogel (2002), “Many  carried meningococci lack the genes required for capsule synthesis and transport”,  Microbiology 148, pp. 1813­1819 [17]. Claus, H., U. Vogel, M. Muhlenhoff, R. Gerardy­Schahn, and M. Frosch (1997),  “Molecular   divergence   of   the   sia   locus   in   different   serogroups   of   Neisseria  meningitidisexpressing polysialic acid capsules”,  Molecular and General Genetics 257,  pp. 28­34 [18]. Corless, C. E., M. Guiver, R. Borrow, V. Edwards­Jones, A. J. Fox, and E. B.  Kaczmarski   (2001),   “Simultaneous   detection   of   Neisseria   meningitidis,  Haemophilus   influenzae,   and   Streptococcus   pneumoniae   in   suspected   cases   of  meningitis and septicemia using real­time PCR”, Journal of Clinical Microbiology  39, pp. 1553­1558 [19]. Csako, G. (2006) “Present and future of rapid and/or high­throughput methods  for nucleic acid testing”, Clinica Chimica Acta 363, pp. 6­31 [20]. Dolan­Livengood, J. M., Y. K. Miller, L. E. Martin, R. Urwin, and D. S.  Stephens (2003),  “Genetic basis for nongroupable Neisseria meningitidis”. Journal   of Infectious Diseases 187, pp. 1616­1628 [21]. Dolan Thomas, J., C.P. Hatcher, D.A. Satterfield, M.J. Theodore, M.C. Bach,  K.B. Linscott, X. Zhao, X. Wang, R. Mair, S. Schmink, K.E. Arnold, D.S. Stephens,  L.H. Harrison, R.A. Hollick, A.L. Andrade, J. Lamaro­Cardoso, A.P.S. de Lemos, J.  Gritzfeld, S. Gordon, A. Soysal, M. Bakir, D. Sharma, S. Jain, S.W. Satola, N.E.  Messonnier, and L.W. Mayer (2011),  “sodC­Based Real­Time PCR for Detection of  Neisseria meningitidis”, PLoS One 6, e19361 [22]   Edwards,   U.,   A   Muller,   S   Hammerschmidt,   R   Gerardy­Schahn,   and   M.  Frosch (1994), “Molecular analysis of the biosynthesis pathway of the alpha­2,8  polysialic   acid   capsule   by   Neisseria   meningitidis   serogroup   B”,  Molecular  Microbiology 14, pp.141­149 67 [23]. Falla, T. J., D. W. Crook, L. N. Brophy, D. Maskell, J. S. Kroll, and E. R.  Moxon (1994), “PCR for capsular typing of Haemophilus influenzae”  Journal of  Clinical Microbiology 32, pp. 2382­2386 [24]. Frosch, M., U. Edwards, K. Bousset, B. Krausse, and C. Weisgerber (1991),  “Evidence for a common molecular origin of the capsule gene loci in gram­negative  bacteria expressing group II capsular polysaccharides”, Molecular Microbiology 5,  pp. 1251­1263 [25]   Frosch,   M.,   and   A   Muller   (1993),   “Phospholipid   substitution   of   capsular  polysaccharides and mechanisms of capsule formation in Neisseria meningitidis”.  Molecular Microbiology 8, pp. 483­493 [26]. Gagneux, S. P., A. Hodgson, T. A. Smith, T. Wirth, I. Ehrhard, G. Morelli, B.  Genton, F. N. Binka, M. Achtman, and G. Pluschke (2002),  “Prospective study of a  serogroup   X   Neisseria   meningitidis   outbreak   in   northern   Ghana”,  Journal   of   Infectious Diseases 185, pp. 618­626 [27]. Ganguli, S., G. Zapata, T. Wallis, C. Reid, G. Boulnois, W. F. Vann, and I. S   Roberts (1994), “Molecular cloning and analysis of genes for sialic acid synthesis in  Neisseria   meningitidis   group   B   and   purification   of   the   meningococcal   CMP­ NeuNAc synthetase enzyme”, Journal of Bacteriology 176, pp. 4583­4589 [28]. Goldacre M J, Trevor Lambert, Julie Evans, Gill Turner.  “Preregistrantion  house officers’ views on whether their experience at medical school prepared them  well for their jobs: national questionnaise survey”  BMJ  Volume  326, pp. 1011­ 1012 [29]   Hammerschmidt,   S.,   C   Birkholz,   U   Zahringer,   B   D   Robertson,   J   van  Putten, O. Ebeling, and M. Frosch (1994), “Contribution of genes from the capsule  gene  complex 53(cps) to lipooligosaccharide biosynthesis and serum resistance in  Neisseria meningitidis”. Molecular Microbiology 11, pp. 885­896 68 [30]. Hammerschmidt, S., A. Muller, H. Sillmann, M. Muhlenhoff, R. Borrow, A. Fox,  J. van Putten, W. D. Zollinger, R. Gerardy­Schahn, and M. Frosch ( 1996),  “Capsule  phase variation in Neisseria meningitidis serogroup B by slipped­strand mispairing  in the polysialyltransferase gene (siaD): correlation with bacterial invasion and the  outbreak of meningococcal disease”, Molecular Microbiology 20, pp. 1211­1220 [31]. Hongfei Zhu, Quan Wang, Liuqing  Wen ,Jianguo Xu,Zhujun Shao, Min Chen,  Mingliang   Chen,  Peter   R   Reeves  ,Boyang   Cao,và  Lei   Wang  “Development   of   a   Multiplex PCR Assay for Detection and Genogrouping of Neisseria meningitidis” J Clin  Microbiol   2012   January;   50(1):   46–51.:   10.1128/JCM.00918­11PMCID:  PMC3256684” [31]. Janson, H., M. Ruan, and A. Forsgren (1993), “Limited diversity of the protein  D  gene  (hpd)   among   encapsulated   and   nonencapsulated   Haemophilus   influenzae  strains”, Infection and Immunity 61, pp. 4546­4552 [32]   Kroll,   J   S   (1992),   “The  genetics   of   encapsulation   in   Haemophilus  influenzae”. Journal of Infectious Diseases 165 Suppl 1, pp. 93­96 [33]   Kroll,   J   S.,   B   M   Loynds,   and   E   R   Moxon   (1991),   “The   Haemophilus  influenzae   capsulation  gene  cluster:   a   compound   transposon”,  Molecular  Microbiology 5, pp. 1549­1560 [34]. Kroll, J. S., and E. R. Moxon (1988),  “Capsulation and gene copy number at the  cap locus of Haemophilus influenzae type b”, Journal of Bacteriology 170, pp. 859­864 [35]   Kroll,   J   S.,   S   Zamze,   B   Loynds,   and   E   R   Moxon   (1989),   “Common  organization of chromosomal loci for production of different capsular polysaccharides  in Haemophilus influenzae”, Journal of Bacteriology 171, pp. 3343­3347 [36]. LaClaire, L. L., M. L. Tondella, D. S. Beall, C. A. Noble, P. L. Raghunathan,  N. E. Rosenstein, and T. Popovic (2003), “Identification of Haemophilus influenzae  serotypesby standard slide agglutination serotyping and PCR­based capsule typing”,  Journal of Clinical Microbiology 41, pp.393­396 69 [37]. Lee, L. G., C. R. Connell, and W. Bloch (1993),  “Allelic discrimination by  nicktranslation PCR with fluorogenic probes”,  Nucleic Acids Research  21, pp.  3761­3766 [38]   Liu,   T   Y.,   E   C   Gotschlich,   E   K   Jonssen,   and   J   R   Wysocki   (1971),  “Studies   on   the   meningococcal   polysaccharides   I   Composition   and   chemical  properties of the group A polysaccharide”, Journal of Biological Chemistry 246, pp.  2849­2858 [39]. Martin C.J. Maiden and Mathias Frosch (2001), “Molecular Techniques for  the   Investigation   of   Meningococcal   Disease   Epidemiology”,  Molecular  Biotechnology, Volume 18, pp. 119­134 [40]. Masson, L., and B. E. Holbein (1983), “Physiology of sialic acid capsular  polysaccharide   synthesis   in   serogroup   B   Neisseria   meningitidis”,  Journal   of  Bacteriology 154, pp. 728­736 [41N]. Marcelo Reyes, Juan Pablo Torres, Valeria Prado, Roberto Vidal. “Multiplex  PCR assay in spinal fluid to identify simultaneously bacterial pathogens associated to  acute bacterial meningitis in Chilean children”, Rev Méd Chile 2008; 136, pp. 338­ 346 [41]. Messmer, T. O., J. S. Sampson, A. Stinson, B. Wong, G. M. Carlone, and R.  R   Facklam   (2004),   “Comparison   of   four   polymerase   chain   reaction   assays   for  specificity   in   the   identification   of   Streptococcus   pneumoniae”,  Diagnostic  Microbiology and Infectious Disease 49, pp. 249­254 [42]. Moore, C. E., A. Sengduangphachanh, T. Thaojaikong, J. Sirisouk, D. Foster,  R. Phetsouvanh, L. McGee, D. W. Crook, P. N. Newton, and S. J. Peacock (2010),  “Enhanced determination of Streptococcus pneumoniae serotypes associated with  invasive disease in Laos by using a real­time polymerase chain reaction serotyping  assay   with   cerebrospinal   fluid”,  American   Journal   of   Tropical   Medicine   and   Hygiene 83, pp. 451­457 70  [43]. Mothershed, E. A., C. T. Sacchi, A. M. Whitney, G. A. Barnett, G. W. Ajello,  S   Schmink,   L   W   Mayer,   M   Phelan,   T   H   Taylor,   Jr.,   S   A   Bernhardt,   N.  E.  Rosenstein,   and   T   Popovic   (2004),     “Use   of   real­time   PCR   to   resolve   slide  agglutination   discrepancies   in   serogroup   identification   of   Neisseria   meningitidis”.  Journal of Clinical Microbiology 42, pp. 320­328 [43] Muhamed­kheir TaHa “Simultaneous approach for nonculture PCR base  indentification and serogroup prediction of N”. meningitidis  journal of clinical   microbiology.Feb, 2000, pp. 855­857  [44]. Mullis, K. B., and F. A. Faloona (1987), “Specific synthesis of DNA in vitro via a  polymerase­catalyzed chain reaction”, Methods In Enzymology 155, pp. 335­350 [45]. Murdoch, D. R., T. P. Anderson, K. A. Beynon, A. Chua, A. M. Fleming, R.  T. Laing, G. I. Town, G. D. Mills, S. T. Chambers, and L. C. Jennings (2003),  “Evaluation   of   a   PCR   assay   for   detection   of   Streptococcus   pneumoniae   in  respiratory   and   nonrespiratory   samples   from   adults   with   community­acquired  pneumonia”. Journal of Clinical Microbiology 41, pp. 63­66 [46]. Pai, R., R. E. Gertz, and B. Beall (2006), “Sequential multiplex PCR approach  for determining capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae isolates”, Journal   of Clinical Microbiology 44, pp. 124­131 [47]. Parkhill, J., M. Achtman, K. D. James, S. D. Bentley, C. Churcher, S. R. Klee,  G. Morelli, D. Basham, D. Brown, T. Chillingworth, R. M. Davies, P. Davis, K.  Devlin, T. Feltwell, N. Hamlin, S. Holroyd, K. Jagels, S. Leather, S. Moule, K.  Mungall, M. A. Quail,  M. A. Rajandream,  K. M. Rutherford, M. Simmonds, J.  Skelton, S.  Whitehead, B. G. Spratt, and B. G. Barrell (2000),  “Complete DNA sequence of a  serogroup A strain of Neisseria meningitidis Z2491”, Nature 404, pp. 502­506 [48].  Robert  K  Selander,  Dominique   A.  Caugant,  Howard Ochaman,  James  M.  Musser, Marion N. Gilmour, and Thomas Whittam (1986), “Methods of Multilocus  71 Enzyme   Electrophoresis   for   Bacterial   Population  Genetics   and   Systematics”,  Applied and Enviromental Microbiology, pp. 873­884 [49]. Resti, M., M. Moriondo, M. Cortimiglia, G. Indolfi, C. Canessa, L. Becciolini,  E   Bartolini,   F   M   de   Benedictis,   M   de   Martino,   and   C   Azzari   (2010),  “Communityacquired bacteremic pneumococcal pneumonia in children: diagnosis  and   serotyping   by   real­time   polymerase   chain   reaction   using   blood   samples”,  Clinical Infectious Diseases 51, pp. 1042­1049 [50]   Sadler,   F.,   A   Fox,   K   Neal,   M   Dawson,   K   Cartwright,   and   R   Borrow  ( 2003),  “Genetic analysis of capsular status of meningococcal carrier isolates”,  Epidemiology and Infection 130, pp. 59­70 [51]. Saiki, R. K., S. Scharf, F. Faloona, K. B. Mullis, G. T. Horn, H. A. Erlich, and  N. Arnheim (1985), “Enzymatic amplification of beta­globin genomic sequences  and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia”, Science 230, pp.  1350­1354 [52]. Satola, S. W., P. L. Schirmer, and M. M. Farley (2003), “Complete sequence of  the cap locus of Haemophilus influenzae serotype b and nonencapsulated b capsule­ negative variants”, Infection and Immunity 71, pp. 3639­3644 [53]. Satola, S. W., P. L. Schirmer, and M. M. Farley (2003), “Genetic analysis of  the capsule locus of Haemophilus influenzae serotype f”,  Infection and Immunity  71, pp. 7202­7207 [54]. Song, X. M., A. Forsgren, and H. Janson (1995), “The gene encoding protein  D (hpd) is highly conserved among Haemophilus influenzae type b and nontypeable  strains”.  63, pp. 696­699 [55]. Steven M. Pollard, Koichi Yoshikawa, Ian D. Clarke, Davide Danovi, Stefan  Strieker, Roslin Russell, Jane Bayani, Renee Head, Marco Lee, Mark Bernstein,  Jeremy A. Squire, Austin Smith, and Peter Dirks (2009), “Glioma Stem Cell Lines  Expanded in Adherent Culture Have Tumor­ Specific Phenotypes and Are Suiable  for Chemical and Genetic Screens”, Cell stem cell 4, pp. 568­580 72 [56]   Stratagene  (2006),  “Introduction   to   Quantitative   PCR:   Methods   and  Application Guide” [57]. Suzuki, N., M. Yuyama, S. Maeda, H. Ogawa, K. Mashiko, and Y. Kiyoura  (2006),   “Genotypic   identification   of   presumptive   Streptococcus   pneumoniae   by  PCR   using   four  genes   highly   specific   for   S   Pneumoniae”,  Journal   of   Medical   Microbiology 55, pp.   709­714 [58]. Swartley, J. S., J. H. Ahn, L. J. Liu, C. M. Kahler, and D. S. Stephens (1996),  “Expression of sialic acid and polysialic acid in serogroup B Neisseria meningitidis:  divergent transcription of biosynthesis and transport operons through a common  promoter region”, Journal of Bacteriology 178, pp. 4052­4059 [59]. Swartley, J. S., L. J. Liu, Y. K. Miller, L. E. Martin, S. Edupuganti, and D. S.  Stephens (1998), “Characterization of the gene cassette required for biosynthesis of  the   (alpha1­­>6)­linked   N­acetyl­D­mannosamine­1­phosphate   capsule   of  serogroup A Neisseria meningitidis”, Journal of Bacteriology 180, pp. 1533­1539.  55 [60]. Swartley, J. S.,  A  A. Marfin, S  Edupuganti, L  J. Liu,  P. Cieslak, B. A.  Perkins, J. D. Wenger, and D. S. Stephens (1997), “Capsule switching of Neisseria  meningitidis”,  Proceedings   of   the   National   Academy   of   Sciences   of   the   United   States of America 94, pp. 271­276 [61]. Swartley, J. S., and D. S. Stephens (1994), “Identification of a genetic locus  involved in the biosynthesis of N­acetyl­D­mannosamine, a precursor of the (alpha  2­­>8)­linked   polysialic   acid   capsule   of   serogroup   B   Neisseria   meningitidis”,  Journal of Bacteriology 176, pp. 1530­1534 [62].Taha,   M.­K   (2000),   “Simultaneous   approach   for   nonculture   PCR­based  identification   and   serogroup   prediction   of   Neisseria   meningitidis”,  Journal   of  Clinical Microbiology 38, pp. 855­857 [63]. Taha, M. K., J. M. Alonso, M. Cafferkey, D. A. Caugant, S. C. Clarke, M. A.  Diggle, A. Fox, M. Frosch, S. J. Gray, M. Guiver, S. Heuberger, J. Kalmusova, K.  73 Kesanopoulos, A. M. Klem, P. Kriz, J. Marsh, P. Mölling, K. Murphy, P. Olcén, O.  Sanou, G. Tzanakaki, and U. Vogel (2005), “Interlaboratory comparison of PCR­ based   identification   and   genogrouping   of   Neisseria   meningitidis”,  Journal   of   Clinical Microbiology 43, pp. 144­149 [64]. Tarrago, D., A. Fenoll, D. Sanchez­Tatay, L. A. Arroyo, C. Munoz­Almagro,  C   Esteva,   W   P   Hausdorff,   J   Casal,   and   I   Obando   (2008),   “Identification   of  pneumococcal  serotypes   from   culture­negative   clinical  specimens   by  novel  real­ time PCR”, Clinical Microbiology and Infection 14, pp. 828­834 [65]. Tettelin, H., N. J. Saunders, J. Heidelberg, A. C. Jeffries, K. E. Nelson, J. A.  Eisen, K. A. Ketchum, D. W. Hood, J. F. Peden, R. J. Dodson, W. C. Nelson, M. L.  Gwinn, R. DeBoy, J. D. Peterson, E. K. Hickey, D. H. Haft, S. L. Salzberg, O.  White, R. D. Fleischmann, B. A. Dougherty, T. Mason, A. Ciecko, D. S. Parksey,  E. Blair, H. Cittone, E. B. Clark, M. D. Cotton, T. R. Utterback, H. Khouri, H. Qin,  J. Vamathevan, J. Gill, V. Scarlato, V. Masignani, M. Pizza, G. Grandi, L. Sun, H.  O   Smith,   C   M   Fraser,   E   R   Moxon,   R   Rappuoli,   and   J   C   Venter   (2000),  “Complete genome sequence of Neisseria meningitidis serogroup B strain MC58”,  Science 287, pp. 1809­1815 [66]   Tzeng,   Y.­L.,   C   Noble,   and   D   S   Stephens   (2003),  “Genetic   basis   for  biosynthesis of the (alpha 1­­>4)­linked N­acetyl­D­glucosamine 1­phosphate capsule  of Neisseria meningitidis serogroup X”, Infection and Immunity 71, pp. 6712­6720 [67]. Tzeng, Y. L., A. K. Datta, C. A. Strole, M. A. Lobritz, R. W. Carlson, and D.  S. Stephens (2005), “Translocation and surface expression of lipidated serogroup B  capsular Polysaccharide in Neisseria meningitidis”, Infection and Immunity 73, pp.  1491­1505 [68]. Vogel, U., H. Claus, and M. Frosch (2000),  “Rapid serogroup switching in  Neisseria meningitidis”, New England Journal of Medicine 342, pp. 219­220 74 [69]. Waggoner­Fountain, L. A., J. O. Hendley, E. J. Cody, V. A. Perriello, and L.  G. Donowitz (1995),  “The emergence of Haemophilus influenzae types e and f as  significant pathogens”. 21, pp. 1322­1324.56 [70]. Wang, X., R. Mair, C. Hatcher, M. J. Theodore, K. Edmond, H. M. Wu, B. H.  Harcourt, G. Carvalho Mda, F. Pimenta, P. Nymadawa, D. Altantsetseg, M. Kirsch,  S. W. Satola, A. Cohn, N. E. Messonnier, and L. W. Mayer (2011),  “Detection of  bacterial pathogens in Mongolia meningitis surveillance with a new real­time PCR  assay   to   detect   Haemophilus   influenzae”,  International   Journal   of   Medical   Microbiology 301, pp. 303­309 [71]. Weber, M. V., H. Claus, M. C. Maiden, M. Frosch, and U. Vogel  (2006),  “Genetic  mechanisms   for   loss   of   encapsulation   in   polysialyltransferase­gene­ positive   meningococci   isolated   from   healthy   carriers”,  International   Journal   of   Medical Microbiology 296, pp. 475­484 [72]. Whatmore, A. M., A. Efstratiou, A. P. Pickerill, K. Broughton, G. Woodard,  D. Sturgeon, R. George, and C. G. Dowson (2000), “Genetic relationships between  clinical   isolates   of   Streptococcus   pneumoniae,   Streptococcus   oralis,   and  Streptococcus   mitis:   Characterization   of   “atypical”   pneumococci   and   organisms  allied   to   S   mitis   harboring   S   pneumoniae   virulence   factor­encoding  genes”,  Infection and Immu [73]Claus, H., M. C. Maiden, R. Maag, M. Frosch, and U. Vogel (2002), “Many carried  meningococci lack the  genes required for capsule synthesis and transport”,  Microbiology  148, pp. 1813­1819 75 PHỤ LỤC (Trình tự Nucleotide các vùng gene và kết quả so sánh trên ngân hàng gene ) [1]Query  541 TTGGAAGATTTAGTTGCAAATCCGCGACAAAATATTTTGCTGCGTCGCGGTGATGTGGTT   600 Sbjct    583 TTGGAAGATTTGGTGGCCAATCCGCGGCAAAATATTTTGTTGCGCCGTGGTGATGTGGTG   642 Query  601 ACCATGATTACCAATCCCTATACCTTTACGTCTATGGGTGCGGTGGGGAGAACACAAGAA   660 Sbjct    643 ACGATGATTACCAATCCCTACACTTTTACGTCTATGGGTGCGGTGGGGAGAACACAAGAA  702 Query  661 ATCGGTTTTTCAGCCAGAGGCTTATCGCTTTCTGAAGCCATTGGCCGTATGGGCGGTTTG   720 Sbjct    703 ATCGGTTTTTCAGCCAGAGGCTTATCGCTTTCTGAAGCCATTGGCCGTATGGGCGGTTTG   762 Query  721 CAAGATCGCCGTTCTGATGCGCGTGGTGTGTTTGTGTTCCGCTATACGCCATTGGTGGAA   780 Sbjct    763 CAAGATCGCCGTTCTGATGCGCGTGGTGTGTTTGTGTTCCGTTACACGCCTTTGGTGGAA   822 Query  781 TTGCCGGCAGAACGTCAGGATAAATGGATTGCTCAAGGTTATGGCAGTGAGGCAGAGATT  840 Sbjct    823 TTGCCGGCAGAACGTCAGGATAAATGGATTGCGCAAGGCTATGGCAGTGAGGCGGAGATT   882 [2]Query  421    CCGCTGACGGCAGCCGGTGAGCGTGTGTTGGATGCGGTGGCTGCGGTAGGTGGTTCAACG   480 Sbjct    463    CCGCTGACGGCAGCCGGTGAGCGTGTGTTGGATGCGGTGGCTGCGGTAGGTGGTTCAACG   522 Query  481    GCAAATGTGCAGGATACGAATGTGCAGCTGACACGTGGCAATGTAGTACGAACTGTTGCC   540 Sbjct    523    GCAAATGTGCAGGATACCAATGTGCAGCTAACACGTGGCAATGTGGTGCGCACGGTGGCT   582 Query  541    TTGGAAGATTTAGTTGCAAATCCGCGACAAAATATTTTGCTGCGTCGCGGTGATGTGGTT   600 Sbjct    583    TTGGAAGATTTGGTGGCCAATCCGCGGCAAAATATTTTGTTGCGCCGTGGTGATGTGGTG   642 76 [3]Query   766   GATGCGGTGGCTGCGGTAGGTGGTTCAACGGCAAATGTGCAGGATACGAATGTGCAGCTG   825 Sbjct     601    GATGCGGTGGCTGCGGTAGGTGGTTCAACGGCAAATGTGCAGGATACGAATGTGCAGCTG  660 Query   826    ACACGTGGCAATGTAGTACGAACTGTTGCCTTGGAAGATTTAGTTGCAAATCCGCGACAA   885 Sbjct     661   ACACGTGGCAATGTAGTACGAACTGTTGCCTTGGAAGATTTAGTTGCAAATCCGCGACAA   720 Query   886    AATATTTTGCTGCGTCGCGGTGATGTGGTTACCATGATTACCAATCCCTATACCTTTACG  945  Sbjct     721    AATATTTTGCTGCGTCGCGGTGATGTGGTTACCATGATTACCAATCCCTATACCTTTACG   780 Query   946    TCTATGGGTGCGGTGGGGAGAACACAAGAAATCGGTTTTTCAGCCAGAGGCTTATCGCTT   1005  Sbjct     781    TCTATGGGTGCGGTGGGGAGAACACAAGAAATCGGTTTTTCAGCCAGAGGCTTATCGCTT   840 Query   1006  TCTGAAGCCATTGGCCGTATGGGCGGTTTGCAAGATCGCCGTTCTGATGCGCGTGGTGTG   1065  Sbjct     841    TCTGAAGCCATTGGCCGTATGGGCGGTTTGCAAGATCGCCGTTCTGATGCGCGTGGTGTG   900 Query  1066   TTTGTGTTCCGCTATACGCCATTGGTGGAATTGCCGGCAGAACGTCAGGATAAATGGATT   1125  Sbjct    901     TTTGTGTTCCGCTATACGCCATTGGTGGAATTGCCGGCAGAACGTCAGGATAAATGGATT   960 Query  1126   GCTCAAGGTTATGGCAGTGAGGCAGAGATTCCAACGGTATATCGTGTGAATATGGCTGAT   1185  Sbjct    961     GCTCAAGGTTATGGCAGTGAGGCAGAGATTCCAACGGTATATCGTGTGAATATGGCTGAT   1020 [4]Query  661   AAAAATGGCGGTTTTGCCGGGAACTATGCCTTTAAATACGCGAAACACGCCAATGTGGGC   720 Sbjct    661    AAAAATGGCGGTTTTGCCGGGAACTATGCCTTTAAATACGCGAAACACGCCAATGTGGGC   720 Query  721    CGTGATGCTTTTGAGTTGTTCTTGCTCGGCAGCGGGAGTGATGAAGCCAAAGGTACCGAT   780 Sbjct    721    CGTGATGCTTTTGAGTTGTTCTTGCTCGGCAGCGGGAGTGATGAAGCCAAAGGTACCGAT   780 Query  781    CCCTTGAAAAACCATCAGGTACACCGCCTGACGGGCGGCTATGAGGAAGGCGGCTTGAAT   840 Sbjct    781    CCCTTGAAAAACCATCAGGTACACCGCCTGACGGGCGGCTATGAGGAAGGCGGCTTGAAT   840 Query  841    CTCGCCTTGGCGGCTCAGTTGGATTTGTCTGAAAATGGCGACAAAACCAAAAACAGTACG   900 [5]Query  497       CTGCTGGCGCCGCTGGCAACAAAATTCAACGAACGCTATCCGCATATCCGACTTTCGCTC   556  Sbjct    1930503CTGCTGGCGCCGCTGGCAACAAAATTCAACGAACGCTATCCGCATATCCGACTTTCGCTC   1930444 Query  557       616  GTTTCTTCCGAAGGCTATATCAATCTGATTGAACGCAAAGTCGATATTGCCTTACGGGCC   Sbjct    1930443GTTTCTTCCGAAGGCTATATCAATCTGATTGAACGCAAAGTCGATATTGCCTTACGGGCC   1930384 Query  617       676  GGAGAATTGGACGATTCCGGGCTGCGTGCACGCCATCTGTTTGACAGCCGCTTCCGCGTA   Sbjct   1930383 GGAGAATTGGACGATTCCGGGCTGCGTGCACGCCATCTGTTTGACAGCCGCTTCCGCGTA   1930324  Sbjct   1930323 ATCGCCAGTCCTGAATACCTGGCAAAACACGGCACGCCGCAATCTACAGAAGAGCTTGCC   1930264 [6]Query  1427411 TGCAAAACAACATGGTTACCCATGGCAAGATGATGCACACTTAGGTGATTTACCTGCATT  1427470 Sbjct    904201  TGCAAAACAACATGGTTACCCATGGCAAGATGATGCACACTTAGGTGATTTACCTGCATT   904142 Query  1427471 AACTGTATTGCATGATGGCACAGCAACAAATCCTGTTTTAGCACCACGTCTTAAACATTT  1427530 Sbjct    904141  AACTGTATTGCATGATGGCACAGCAACAAATCCTGTTTTAGCACCACGTCTTAAACATTT   904082 Query  1427531 AGATGATGTTCGCGGTCACTCTATTATGATCCACACGGGTGGTGATAATCACTCCGATCA  1427590 Sbjct    904081  AGATGATGTTCGCGGTCACTCTATTATGATCCACACGGGTGGTGATAATCACTCCGATCA   904022 [7]Query 76681 tttttttAGCATATTCAGGAAAGGGGACATGCAATATGTCAAAATGATCTATATATCCTT   76740 Sbjct 76681 TTTTTTTAGCATATTCAGGAAAGGGGACATGCAATATGTCAAAATGATCTATATATCCTT   76740 Query 76741 TAATATTAAGATTATTTCCAATCAAATAACGTTCTAATTTTGTTGGATGATATGAAAATG   76800 Sbjct 76741 TAATATTAAGATTATTTCCAATCAAATAACGTTCTAATTTTGTTGGATGATATGAAAATG   76800 77 Query 76801 ATTCTAATAAAGGAGCATATGTTCCAGTCCCTTCATCAATTAAATGAGTCGTAATATTCt   76860 Sbjct 76801 ATTCTAATAAAGGAGCATATGTTCCAGTCCCTTCATCAATTAAATGAGTCGTAATATTCT   76860 Query 76861  ttttttttGCAATACTAATCAGATAGGAGTAGTGGCCTGTAAAAGACAGCATATAGAGAT   76920 Sbjct  76861 TTTTTTTTGCAATACTAATCAGATAGGAGTAGTGGCCTGTAAAAGACAGCATATAGAGAT   76920 Query 76921 GAGCAGGCTGTATAATATTAAGGAtttttttGTAACTTCTATAAATATAAAGTAATTTTT   76980 Sbjct 76921 GAGCAGGCTGTATAATATTAAGGATTTTTTTGTAACTTCTATAAATATAAAGTAATTTTT   76980 Query  76981 TAGGAGTTATATTATTAGGGCTTCTAGGAAGCTCAAATAGATAAATAGATTCAAATAGAT   77040 Sbjct  TAGGAGTTATATTATTAGGGCTTCTAGGAAGCTCAAATAGATAAATAGATTCAAATAGAT   77040 Query  77041  TCTTGTTAGCTGATTGATGAACTAACTTAGGCATTTTTAAGTTTTTAGAAGTATATAAAA   77100 Sbjct  76981 TCTTGTTAGCTGATTGATGAACTAACTTAGGCATTTTTAAGTTTTTAGAAGTATATAAAA   77100 Query  77101 77041 TTACTAGTAAATTATTGGTTAATTTTTGTATTTTAATTAGGCTTTGGACTTGGTTAAGCT   77160 Sbjct  77101 TTACTAGTAAATTATTGGTTAATTTTTGTATTTTAATTAGGCTTTGGACTTGGTTAAGCT   77160 Sbjct  77161 GACCTAAATTAGATATGACAAATAAATTGTTACGTGGGGGGGTAAGATAAAATGGAGATG   77220 Query 7221 TTGTCAACCACATTGAATCTTGAAAAAACTTTTTAGGCTGAAAAAGAGCtttttttATTT   77280 Sbjct 77221 TTGTCAACCACATTGAATCTTGAAAAAACTTTTTAGGCTGAAAAAGAGCTTTTTTTATTT   77280 78 ...  N   meningitidis,  mắc bệnh trong cộng đồng. Với đề  tài nghiên cứu:  “ Nghiên cứu đặc điểm sinh học và tính kháng kháng sinh của Neisseria meningitidis tại các ổ dịch lưu hành trong quân đội.  Với mục tiêu:... 3.1. Đặc điểm sinh học và cơ cấu nhóm huyết thanh của Neisseria meningitidis phân  lập tại một số đơn vị tân binh trong quân đội 37 3.1.1. Đặc điểm sinh học của chủng Neisseria meningitidis phân lập tại các đơn vị  tân binh trong quân đội ... 1. Xác định  đặc điểm sinh học và  cấu  nhóm huyết thanh của Neisseria meningitidis phân lập tại một số đơn vị tân binh trong quân đội.     Xác   định   tính   nhạy   cảm   kháng   sinh       chủng  Neisseria

Ngày đăng: 16/01/2020, 09:19

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w