TRANG THÔNG TIN VỀ LUẬN ÁN - Tên luận án tiến sĩ: Nghiên cứu đặc điểm di truyền tính kháng thuốc Vibrio cholerae phân lập tỉnh Trà Vinh - Chuyên ngành: Vi sinh vật học ; Mã số: 62 42 01 07 Họ tên nghiên cứu sinh: Nguyễn Thị Đấu Họ tên người hướng dẫn chính: PGS.TS Hồ Thị Việt Thu Cơ sở đào tạo: Trường Đại học Cần Thơ Tóm tắt nội dung luận án Vibrio cholerae loại vi khuẩn Gram âm có hình dấu phẩy với chủng không gây bệnh gây bệnh Chủng gây nên bệnh lây lan mạnh từ năm 1816 đến năm 1923 thuộc V cholerae O1 type sinh học cổ điển Những năm sau đó, chủng vi khuẩn khác thuộc type sinh học El Tor gây trận đại dịch kéo dài thập niên 1970S, chủng gây bệnh xác định vào năm 1992 thuộc type sinh học O139, chủng với chủng thuộc type sinh học O1 xem nguyên nhân vụ dịch xảy gần Hiện nay, có nhiều kháng sinh điều trị bệnh, hiệu kháng sinh có phần hạn chế tình hình đa kháng thuốc gia tăng quần thể vi khuẩn (CDC, 2005) Xuất phát từ vấn đề trên, đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm di truyền tính kháng thuốc Vibrio cholerae phân lập tỉnh Trà Vinh” thực với mục đích cung cấp thông tin cần thiết chiến lược sử dụng kháng sinh phù hợp nhằm làm giảm tỉ lệ tử vong, giảm tượng kháng thuốc giảm chi phí điều trị bệnh Nghiên cứu thực qua việc phân lập vi khuẩn Vibrio spp từ 160 mẫu nghêu, 150 mẫu nước (50 mẫu nước biển, 50 mẫu nước sông, 50 mẫu nước ao nuôi tôm), 100 mẫu huyết heo 40 mẫu phân bệnh nhân tiêu chảy thu thập bệnh viện đa khoa tỉnh Trà Vinh từ tháng năm 2012 đến tháng năm 2014 Kỹ thuật PCR test sinh hoá (theo tiêu chuẩn ISO/TS 21872-1:2007) sử dụng để định danh mức loài vi khuẩn Vibrios, phản ứng ngưng kết sử dụng để định type huyết Vibrio cholerae Kết nghiên cứu phân lập hai mươi lăm chủng vi khuẩn thuộc Vibrio spp bao gồm chủng Vibrio cholerae (24%) (3 chủng từ nghêu, chủng từ mẫu huyết heo chủng từ mẫu nước sông), chủng thuộc loài Vibrio paraheamolyticus (32%), chủng thuộc loài Vibrio vulnificus (16%), chủng thuộc loài Vibrio fluvialis (20%) chủng thuộc loài Vibrio alginolyticus (8%) Kết định type huyết học chủng Vibrio cholerae thuộc type sinh học O1, với 50% (3/6) dương tính với Inaba, 50% (3/6) dương tính Ogawa Không có chủng thuộc type sinh học O139 Kết so sánh tỉ lệ tương đồng trình tự nucleotide gene 16S rRNA chủng Vibrio cholerae phân lập với chủng MS6 (Thái Lan), O395 (Ấn Độ), M66-62 (Indonesia), LMA 3894-4 (Brazil) N16961 (Ấn Độ) Kết cho thấy chủng chủng 100% tương đồng với 56 chủng; 99% tương đồng với 32 chủng 99% tương đồng với 12 chủng gần Riêng chủng mang gene kháng kháng sinh nghiên cứu có trình tự nucleotide tương đồng 97% với 10 chủng; 96% với 01 chủng 94% với 02 chủng Tính kháng kháng sinh loại (streptomycin, norfloxacine, ampicillin, tetracycline, azithromycin, amoxillin/clavulanic acid, trimethotrime/sulfamethazol vancomycin) chủng Vibrio cholerae xác định phương pháp Kirby-Bauer (CLSI, 2010), kết cho thấy có 50% (3/6) chủng kháng streptomycin, 33% (2/6) chủng kháng tetracycline trimethoprimsulfamethoxazole Với kỹ thuật PCR cho thấy có chủng tổng số chủng kiểm tra chứa gene kháng kháng sinh tetA (gene mã hóa cho yếu tố kháng tetracycline), chưa phát gene kháng kháng sinh blaSHV, aac(3)-IV dhfrI mã hoá yếu tố cho nhóm kháng sinh β-lactam, aminoglycosid, trimethoprim So sánh Trình tự nucleotide gene tetA chủng T1 T3 so với chủng hoang dại (N16961) cho thấy có tượng thêm từ 1- nucleotide 10 vị trí codon gene tetA chủng T1 vị trí codon chủng T3 Kết thử nghiệm thỏ chứng minh số bám dính vi khuẩn V cholerae T1 T3 vào niêm mạc ruột thỏ không uống vaccine phòng bệnh tả thời điểm sau cho uống vi khuẩn 55.7±13.9 59.3±4.2 cao thỏ có uống vaccine phòng bệnh tả (12.4±0.6 7.41±1.9) Tại thời điểm 16 sau cho uống vi khuẩn, tượng vi khuẩn bám dính vào niêm mạc ruột tất thỏ thí nghiệm Thí nghiệm cho thấy chủng phân lập có tính kháng nguyên giống với kháng nguyên vi khuẩn sử dụng làm vaccine phòng bệnh tả (mORCVAX) sử dụng nước Từ khoá: Vibrio cholerae, gene, kháng, kháng sinh, phân lập Những kết luận án - Phân lập 25 chủng Vibrio spp bao gồm chủng thuộc loài V cholerae, chủng thuộc loài V paraheamolyticus, chủng thuộc loài V vultificus, chủng thuộc loài V fluvialis chủng thuộc loài V alginolyticus Tất chủng thuộc type sinh học O1, có 50% (3/6) dương tính với Inaba, 50% (3/6) dương tính với Ogawa Không có chủng thuộc type sinh học O139 - Các chủng Vibrio cholerae đề kháng với nhiều loại kháng sinh, có 50% (3/6) đề kháng với streptomycin, 33% (2/6) đề kháng với tetracycline trimethoprim2 sulfamethoxazole chủng (T1 T3) chủng có chứa gene kháng kháng sinh tetracycline (gene tetA) Chưa phát gene blaSHV, gene aac(3)-IV and gene dhfrI mã hóa cho yếu tố đề kháng β-lactam, aminoglycosid trimethoprim - Thí nghiệm cho thấy chủng (T1 T3) chủng có tính kháng nguyên giống với kháng nguyên vi khuẩn sử dụng làm vaccine phòng bệnh tả (mORCVAX) sử dụng nước Các ứng dụng/ khả ứng dụng thực tiễn, vấn đề cần tiếp tục nghiên cứu: Đề tài chứng minh có diện V cholerae mẫu nghêu, mẫu huyết heo mẫu nước sông tỉnh Trà Vình Điều cảnh báo nguy nhiễm V cholerae người Kết khảo sát tính kháng kháng sinh V cholerae nghiên cứu liệu cần thiết việc lựa chọn kháng sinh để điều trị bệnh Những kết nghiên cứu đóng góp cho việc cập nhật kiến thức dùng nghiên cứu giảng dạy trường Đại học Y Dược Đại học Nông nghiệp (Chăn nuôi Thuỷ sản) bệnh lây nhiễm từ thực phẩm Người hướng dẫn Nghiên cứu sinh PGS.TS HỒ THỊ VIỆT THU NGUYỄN THỊ ĐẤU Xác nhận Thủ trưởng đơn vị đào tạo sau đại học ... nghiên cứu: Đề tài chứng minh có di n V cholerae mẫu nghêu, mẫu huyết heo mẫu nước sông tỉnh Trà Vình Điều cảnh báo nguy nhiễm V cholerae người Kết khảo sát tính kháng kháng sinh V cholerae nghiên. .. (mORCVAX) sử dụng nước Từ khoá: Vibrio cholerae, gene, kháng, kháng sinh, phân lập Những kết luận án - Phân lập 25 chủng Vibrio spp bao gồm chủng thuộc loài V cholerae, chủng thuộc loài V paraheamolyticus,... (3/6) dương tính với Inaba, 50% (3/6) dương tính với Ogawa Không có chủng thuộc type sinh học O139 - Các chủng Vibrio cholerae đề kháng với nhiều loại kháng sinh, có 50% (3/6) đề kháng với streptomycin,