Đột biến gen Perforin và UNC13D ở bệnh nhân hội chứng thực bào máu người lớn liên quan với Epstein-barr virus

Hội chứng thực bào máu (HCTBM) ở người lớn liên quan đến Epstein-Barr virus (EBV) là một bệnh ít gặp, tử vong cao mặc dù được điều trị tích cực. Khảo sát đột biến gen chẳng những giúp chẩn đoán phân tử mà còn góp phần tiên lượng và hướng dẫn điều trị. Nghiên cứu này nhằmxác định tỉ lệ kèm mô tả đột biến gen Perforin và UNC13D ở bệnh nhân người lớn bị hội chứng thực bào máu (HCTBM) liên quan đến EBV.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học ĐỘT BIẾN GEN PERFORIN VÀ UNC13D Ở BỆNH NHÂN HỘI CHỨNG THỰC BÀO MÁU NGƯỜI LỚN LIÊN QUAN VỚI EPSTEIN-BARR VIRUS Lê Bửu Châu1 TÓM TẮT Đặt vấn đề: Hội chứng thực bào máu (HCTBM) người lớn liên quan đến Epstein-Barr virus (EBV) bệnh gặp, tử vong cao điều trị tích cực Khảo sát đột biến gen giúp chẩn đoán phân tử mà góp phần tiên lượng hướng dẫn điều trị Nghiên cứu nhằmxác định tỉ lệ kèm mô tả đột biến gen Perforin UNC13D bệnh nhân người lớn bị hội chứng thực bào máu (HCTBM) liên quan đến EBV Đối tượng phương pháp: Tại bệnh viện Bệnh Nhiệt đới từ tháng 03.2012-10.2013, có 27 bệnh nhân 15 tuổi chẩn đoán HCTBM liên quan đến EBV Đột biến gen Perforin (PRF1) UNC13D (exon 31) khảo sát phương pháp giải trình tự chuỗi DNA Kết phân tích phần mềm SeqScape vàđối chiếu với trình tự gen chuẩn ngân hàng gen giới Kết quả: Trong số 27 trường hợp đưa vào nghiên cứu, bao gồm 16 nam 11 nữ, tuổi trung vị 38 (thấp nhất: 19- cao nhất: 78) Tải lượng EBV (trung vị) 4,95 x 106 sao/ml (1,02x104- 4,89x107) Khảo sát gen PRF1: exon thấy trường hợp có thay đổi c.10C/T(p.Arg4Cys) (7,4%) Thay đổi chủ yếu exon thay đổi đa hình đơn nucleotide dạng c.900C>T (His300His) chiếm 77,8 %, dạng c.822C>T (Ala274Ala) (3,7%) hay phối hợp dạng thay đổi (3,7%) Không phát đột biến exon 31 gen UNC13D Các trường hợp đáp ứng với điều trị thay đổi có ý nghĩa so với trường hợp hồi phục tốt gen khảo sát Kết luận: Đột biến gen PRF1 UNC13D (exon 31) dường đóng vai trò nhỏ bệnh lý hội chứng thực bào máu người lớn liên quan đến EBV Từ khóa: Hội chứng thực bào máu (HCTBM), Epstein-Barr virus (EBV), PRF1, UNC13D, đột biến gen, người lớn ABSTRACT SCREENING THE PRF1 AND UNC13D GENEMUTATIONS IN ADULTS WITH EPSTEIN-BARR VIRUS-ASSOCIATED HEMOPHAGOCYTIC SYNDROME Le Buu Chau *Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No – 2016: 305 - 311 Background: Epstein-Barr virus-related haemophagocytic syndrome or hemophagocytic lymphohistiocytosis (EBV-HLH) in adultsis a rare disease that is often fatal despitetreatment Genetic analysisnot only helps molecular diagnosisbut also contributes to prognosis and treatment This study aimed to investigate the prevalence ofmutations in the PRF1 and UNC13D genes in these patients Methods: Twenty-seven patients over 15 years old, diagnosed with EBV-HLH in The Hospital for Tropical Diseases from May 2012 to October 2013 were recruited Nucleotide sequences of exon and of PRF1 gene and exon 31 of UNC13D gene were amplified by PCR assay followed by direct sequencing Results were analyzed by SeqScape software and compared with the correct gene sequence at GenBank Results: There were 27 patients in this study with a median age of 38 (min:16- max:78) and a male-to-female ratio of 1.45:1 The median EBV load (PCR) was 4.95x106 copies/ml (1.02x104- 4.89 x 107 copies/ml) Mutation * Bộ môn Nhiễm- Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS BS Lê Bửu Châu ĐT: 0918115600 Bệnh Nhiễm Email: buuchaule@yahoo com 305 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 analyses of PRF1 revealeda hetero single nucleotide substitution of 10C/T(p.Arg4Cys) in theexon of two cases accounting for 7.4% The essential change in exon of PRF1 gene was single nucleotide polymorphisms, including c.900C>T (His300His) accounted for 77.8% (21 cases), c.822C>T (Ala274Ala) accounted for 3.7% (1 case) and both of these changes accounted for 3.7% (1 case) No mutation of UNC13D (exon 31) gene was identified There was no significant change on the genes studied between cases of poor response to treatment and well-recovered cases Conclusion: PRF1 and UNC13D (exon 31) gene mutations seem to play a very small role in adults with Epstein-Barr virus-associated haemophagocytic syndrome Key words: Hemophagocyticsyndrome, Epstein-Barr virus, PRF1, UNC13D, gene mutation, adults khảo sát trước thực cho đối tượng ĐẶT VẤN ĐỀ trẻ em để có số liệu đầy đủ đột biến gen Hội chứng thực bào máu (HCTBM) hậu bệnh nhân HCTBM nước ta đáp ứng miễn dịch mạnh mẽ ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU khơng hiệu quả, từ gây tổn thương đa quan với tỷ lệ tử vong cao(7) Hội chứng Đối tượng nghiên cứu phân chia làm loại: HCTBM tiên phát Tiêu chuẩn chọn bệnh (hay gọi HCTBM bệnh lý gen) thứ Bệnh nhân từ 15 tuổi trở lên, điều trị nội trú phát sau nhiễm trùng, bệnh tự miễn bệnh lý bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Tp HCM từ tháng ác tính HCTBM tiên phát xảy lứa 03.2012 đến tháng 10.2013, đủ tiêu chuẩn chẩn tuổi(1) Khảo sát đột biến gen bệnh nhân đốn HCTBM, có xét nghiệm PCR (Polymerase HCTBM giúp chẩn đoán phân tử Chain Reaction) EBV ngưỡng phát mà góp phần tiên lượng hướng dẫn điều Tiêu chuẩn loại trừ trị Cả HCTBM tiên phát thứ phát thườngđược kích hoạt sau nhiễm trùng, Nhiễm HIV/AIDS thường gặp có tiên lượng xấu Có nhiễm trùng khác kèm theo nhiễm EBV nhiễm Epstein-Barr virus (EBV)(4,10).Cho tớinay,có xác định chẩn đoán bốn gen nằm nhiễm sắc thể thường Có chứng bệnh tự miễn bệnh lý ác xác địnhcó đột biếnliên quan đến HCTBM tính PRF1, UNC13D, STX11, STXBP2 locus Thân nhân hay bệnh nhân không đồng ý gen nằm nhánh dài nhiễm sắc thể số tham gia nghiên cứu 9(15) Trong số gen đề cập trên, đột biến Phương pháp nghiên cứu gen PRF1và UNC13D phổ biến khu vực Bắc Mỹ(8) Trong Nhật, đột biến gen Thiết kế nghiên cứu: Mô tả tiến cứu hàng loạt PRF1 chiếm 19%(17), Hàn Quốc đột biến gen ca với phương pháp chọn mẫu thuận tiện UNC13D chiếm 20%(18) Tại Việt Nam, nghiên Phương pháp tiến hành cứu tìm đột biến gen trước thực Biến số khảo sát: Tuổi, giới, tải lượng EBV, trẻ em Hai gen khảo sát nhiều đột biến gen Perforin exon 31 gen UNC13D, gen PRF1 gen UNC13D, gen kết điều trị sau tháng (sống, tử vong, UNC13D chủ yếu xảy đột biến exon 31(13,14) theo dõi) Chúng thực nghiên cứu với mục Chẩn đoán hội chứng thực bào máu tiêu xác định tỷ lệ mô tả đặc điểm đột theo Hội thực bào giới 2004 (5) : bệnh biến gen PRF1 UNC13D (exon 31) bệnh nhân có tiêu chuẩn sinh học phân tử nhân người lớn mắc hội chứng thực bào máu phải thỏa tiêu chuẩn liên quan đếnEBV Đồng thời tham khảo 306 Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 gồm lâm sàng cận lâm sàng Tuy nhiên điều kiện tại, có xét nghiệm chưa làm đo hoạt lực tế bào diệt tự nhiên CD25 hòa tan Vì bệnh nhân chọn trường hợp thỏa tiêu chuẩn lại Cụ thể sau: (1) Sốt, (2) lách to, (3) giảm dòng tế bào máu ngoại biên: Hemoglobin< 9g/dL, tiểu cầu < 100x10 /L, bạch cầu đa nhân trung tính < 10 /L, (4) tăng triglyceride máu và/hoặcgiảm fibrinogen máu: (triglyceride máu đói ≥ 3mmol/L (≥ 265 mg/dL), fibrinogen < 1,5g/L), (5) ferritin  500 ug/L,(6) có tượng thực bào tủy xương Các xét nghiệm sinh hóa, huyết học, chẩn đốn hình ảnh làm Khoa xét nghiệm bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Tủy đồ thực đọc kết bệnh viện Truyền máu Huyết học bác sĩ chuyên khoa huyết học.Chẩn đoán nhiễm EBV kết PCR EBV ngưỡng phát (> 100 sao/1 ml huyết tương) Riêng khảo sát đột biến gen PRF1 UNC13D thực Trung tâm Y Sinh học phân tử- Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Các bước thực khảo sát đột biến gen thực sau: Khảo sát đột biến gen Perforin (PRF1): Tách chiết genomic DNA: Dùng QIAamp DNA Kit (Qiagen, Mỹ) để tách chiết genomic DNA từ 200 µL máu ngoại biên theo hướng dẫn nhà sản xuất Thực PCR: Khuếch đại exon genPRF1 cặp mồi riêng biệt (mồi cho exon gồm 5’-aagggagcagtcatcctcca-3’ 5’tggaggactctgcctttcca-3’, mồi cho exon gồm 5’atgggggaaatactcccctg-3’và 5’gtgagaaccccttcagtcca-3’) Sản phẩm PCR phát điện di thạch agarose 1,5% có nhuộm ethidium bromide quan sát soi gel Pringraph (Atto, Nhật Bản) Sản phẩm PCR tinh QIAquick Gel Bệnh Nhiễm Nghiên cứu Y học Extraction kit (Qiagen, Mỹ) kiểm tra lại điện di thạch agarose 1,5% Thực giải trình tự chuỗi DNA: Sản phẩm PCR tinh thực phản ứng cycle sequencing với BigDye V3.1 từ Applied Biosystems, theo chiều xuôi ngược cho exon Sản phẩm sau kết tủa ethanol, hòa tan Hi-Di formamide, biến tính 950C phút trước làm lạnh đột ngột Trình tự DNA đọc máy ABI 3130 Genetic Analyzer, với POP-7 polymer capillary 50 cm (Applied Biosystems, Mỹ) Kết phân tích phần mềm SeqScape.Trình tự gen phân tích đối chiếu với trình tự gen chuẩn ngân hàng gen giới (GeneBank) với mã số NG_009615 Khảo sát đột biến gen UNC13D Thực PCR: khuếch đại exon 31 gen UNC13D(NG_007266) mồi xuôi 5’accaagtgggtgaacccatg-3’ mồi ngược 5’ctggctcccgtctccaggga-3’ Phát sản phẩm PCR giải trình tự DNA thực tương tự với gen PRF1 Điều trị hội chứng thực bào máu: điều trị nhiễm trùng kèm theo, điều trị nâng đỡ quan, diễn tiến không thuận lợi, điều trị theo phác đồ HLH-2004(5), bao gồm etoposide, dexamethasone cyclosporin A Xử lý thống kê Các số liệu thu thập xử lý phần mềm thống kê SPSS 12.0 KẾT QUẢ Từ tháng 3.2012 đến tháng 8.2013 có 30 trường hợp hội chứng thực bào máu liên quan đến EBV thu thập mẫu để làm xét nghiệm tìm đột biến gen PRF1 UNC13D (exon 31) Tuy nhiên số lượng bạch cầu thấp nên có 27 mẫu thực xét nghiệm Kết sau: 307 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Bảng 1: Đặc điểm mẫu nghiên cứu Đặc điểm Tuổi (nhỏ nhất-lớn nhất) Giới: nam/nữ Thời gian từ lúc bệnh đến nhập viện (nhỏ nhất-lớn nhất) Bảng 2: Kết giải trình tự gen PRF1 UNC13D Kết (n=27) Trung vị: 38 (19-78) 16/11 Trung vị 30 ngày (7-210 ngày) Sốt (100%) Trung vị: 4,95x10 (3,2x10 - 4,89x10 ) 20 (74,1%) Lý nhập viện Tải lượng EBV (bản sao/ml): (nhỏ nhất- lớn nhất) Điều trị theo phác đồ HLH-04 Kết điều trị sau tuần Sống Tử vong Mất theo dõi * Kết điều trị sau tháng Sống Tử vong Mất theo dõi* Thời gian tử vong từ lúc nhập viện, n=16 (nhỏ nhất- lớn nhất) 14 (51,9%) (33,3%) (25,9%) (14,8%) 16 (59,3%) (14,8%) Trung vị: 73 ngày (5-170 ngày) Thay đổi nucleotide Gen PRF1 exon c.10C>T: p.R4C wt exon c.900C>T (His300His) c.822C>T (Ala274Ala) c.900C>T c.822C>T wt Gen UNC13D exon 31 wt n=27 % 25 7,4 92,6 21 1 77,8 3,7 3,7 14,8 27 100 Ghi chú: c.10C>T(Arg4Cys) hay (p.R4C); c.900C > T: His300His; c.822C>T:Ala274Ala, wt: wild-type (bình thường) *: Bệnh nặng khơng đáp ứng với điều trị, xin về, sau khơng liên lạc Thay đổi c.10C>T Hình 1: Thay đổi c.10C>T(p.Arg4Cys) exon genPRF1 Bảng 3: Thay đổi nucleotide gen PRF1 bệnh nhân có bất thường exon bệnh phân hồi phục tốt Bệnh nhân BN 01 Tuổi/ giới Tải lượng EBV (bản sao/ml) 50/nam 8,47 x 10 22/nữ 41/nam 27/nữ 49/nam 3,04 x 10 2,67 x 10 4,89 x 10 3,20 x 10 BN 02 BN 03 BN 04 BN 05 Exon Exon c.10C>T: p.R4C c.900C>T c.10C>T: p.R4C wt wt wt wt c.900C>T c.900C>T c.900C>T BN: bệnh nhân, wt: wild-type (bình thường) BÀN LUẬN Hội chứng thực bào máu liên quan đến EBV nghiên cứu nhiều trẻ em Tại Nhật lứa tuổi thường gặp từ 1-2 tuổi(11) Ở người lớn, nghiên cứu bệnh lý chưa đề cập nhiều y văn Trong mẫu nghiên cứu này, tuổi mắc bệnh cao 79 tuổi, tất trường hợp nhập viện sốt kéo dài có tải lượng EBV cao (bảng 1) Tỷ lệ sống sau tuần 14/27 (51,9%), theo dõi sau 308 Điều trị Kết điều trị HLH-04 Đáp ứng ban đầu, tử vong sau tháng Không đáp ứng, xin sau 28 ngày, sau theo dõi Hồi phục tốt Hồi phục tốt Hồi phục tốt HLH-04 HLH-04 HLH-04 Điều trị hỗ trợ tháng, tỷ lệ sống giảm 14,8% (4 trường hợp), số lại tử vong 16 ca (59,3%) theo dõi (14,8%) Tỷ lệ thấp so với tỷ lệ sống nghiên cứu trẻ em Nhật với 78 trường hợp hội chứng thực bào máu liên quan đến EBV, theo dõi 43 tháng, tỷ lệ sống 75,6%(6) Đột biến gen perforin Đột biến gen liên quan đến HCTBM phát năm 1999, với gen PRF1(16), gây HCTBM di truyền loại Gen nằm nhánh dài nhiễm sắc thể số 10 (10q21-22)(16), Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 có exon, mã hóa cho 376 amino acid protein tạo perforin Đây thành phần tiết từ tế bào gây độc, với granzymes, làm khởi động cho q trình gây chết tế bào đích theo chương trình Ngồi ra, protein đóng vai trò quan trọng việc trì cân nội môi miễn dịch(16) Bằng kỹ thuật PCR, giải mã trình tự trực tiếp gen Nghiên cứu Y học PRF1, người ta phát 99% trường hợp có đột biến gen Đột biếngen PRF1 chiếm từ 13% đến 58% trường hợp HCTBM tiên phát, tùy vào nguồn gốc dân tộc Đột biến gen PRF1 chiếm khoảng 30% Thổ Nhĩ Kỳ, 40% Nhật gần 50% Bắc Mỹ(3) Bảng sau cho thấy tỷ lệ đột biến khác chủng tộc khác Bảng 4: Tỷ lệ đột biến gen theo chủng tộc bệnh nhân HCTBM Bắc Mỹ(8) Chủng tộc Gen Người da trắng Người gốc Tây Ban Nha Bồ Đào Nha Người Mỹ gốc Phi Người gốc Ả Rập Khác/ Không rõ PRF1 UNC13D STXBP2 STX11 RAB27A Tổng số BN 20 (27%) 41(71%) 44(98%) (36%) 22 (88%) 35 (47%) 10 (17%) (27%) (4%) 16 (22%) (2%) (2%) (18%) (4%) (2%) (7%) (9%) (0%) (3%) (3%) (9%) (4%) 74 58 45 22 25 Hiện 100 kiểu biến đổi gen PRF1 báo cáo Leiden Open variation Database, bao gồm 15 đột biến vô nghĩa, 70 đột biến sai nghĩa 16 thay đổi đa hình đơn nucleotide (Single Nucleotide Polymorphism: SNP) Kiểu đột biến gen PRF1 không giống quốc gia Những bệnh nhân người Mỹ gốc Phi có xu hướng mang kiểu đột biến gen PRF1 50delTA Tại Nhật Bản, kiểu đột biến gen PRF1 thường thấy 1090-1091delCT (chiếm 62,5%), kế 207delC (chiếm 37,5%)(17) Tại Hàn Quốc, nghiên cứu 40 trẻ em hội chứng thức bào máu phát bé gái tháng tuổi (2,5%) có mang đột biến gen PRF1 dạng c.10901091delCT(18), kiểu đột biến thường gặp Nhật Tỷ lệ phát đột biến cao trẻ sơ sinh, sau giảm dần theo tuổi người bệnh Trường hợp HCTBM lớn tuổi ghi nhận y văn, phát có đột biến gen PRF1 bệnh nhân 62 tuổi(12) Trên nghiên cứu tuổi lớn 78 tuổi (bảng 1), nhiên bệnh nhân không phát đột biến gen PRF1 mà có SNP c.900C>T bệnh nhân khác Tại Việt Nam, có nghiên cứu tìm đột biến gen PRF1 61 bệnh nhân nhi mắc HCTBM(9,13,14) Trong số có 2/61 trường hợp đột biến gen phát (3,27%), gồm 01 Bệnh Nhiễm trường hợp mang đột biến c.1168C>T di truyền từ cha, lúc mang đột biến c.1284G>A di truyền từ mẹ(13)và trường hợp mang đột biến c.1153C>T (R385W) codon 385 exon 3(14) Điều cho thấy đột biến gen PRF1 bệnh nhi thấp so với quốc gia khác giới (bảng 4) Trong nghiên cứu tác giả L.T.Mỹ cs (2009) có báo cáo biến thể exon c.10C>T (p.R4C)(9) tác giả cho kiểu đột biến gen PRF1 Trong 27 bệnh nhân nghiên cứu có trường hợp (7,4%) tương tự (bảng 2) Tuy nhiên thông tin quốc gia công nghệ sinh học (National center for Biotechnology information) coi kiểu SNP (rs12161733) với vai trò gây bệnh khơng rõ ràng Trong bệnh nhân chúng tơi có biến đổi exon c.10 C>T (p.R4C), trường hợp có đáp ứng ban đầu với phác đồ điều trị HLH-2004(5), nhiên bệnh nhân nhập viện nhiều lần sau địa phương không rõ nguyên nhân sau 150 ngày điều trị theo dõi Trường hợp không đáp ứng với điều trị ban đầu, thân nhân xin sau 28 ngày nằm viện, liên lạc sau (bảng 3) Khảo sát exon gen PRF1, phát 24/27 trường hợp SNP gồm c.900C>T (His300His) c.822C>T (Ala274Ala), vị trí c.900C>T chiếm tỷ lệ cao (bảng 2) Đây kiểu SNP ghi nhận bệnh nhân trẻ em (ở trẻ em thấy 309 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 có thêm vị trí c.630C>T (P210P))(14) Trong bệnh nhân hồi phục hồn tồn có SNP kiểu c.900C>T trường hợp nặng tử vong khác Kết cho thấy dường thay đổi SNP exon không ảnh hưởng đến tiên lượng bệnh (bảng 3) Như với 88 bệnh nhân HCTBM có khảo sát đột biến gen PRF1 Việt Nam, gồm 61 bệnh nhân nhi tác giả trước đây(9,13,14) 27 bệnh nhân người lớn nghiên cứu này, chúng tơi thấy có 2/88 (2,27%) trường hợp phát đột biến gen PRF1 kiểu đột biến khác với trường hợp nghiên cứu Nhật Bản Hàn Quốc(17,18) So sánh với bệnh nhân quốc gia khác (bảng 4), chúng tơi nhận thấy có lẽ đột biến gen PRF1 bệnh nhân Việt Nam thấp hẳn.Mặc dù tỷ lệ tử vong bệnh nhân người lớn có liên quan đến EBV vòng tháng cao, lên đến 59,3% (chưa kể trường hợp tử vong nhóm theo dõi) (bảng 1) Chính cần khảo sát đột biến gen khác, nhiều yếu tố miễn dịch hay độc tính virus để có phương thức điều trị hữu hiệu gen UNC13D 10 bệnh nhi HCTBM, kết có trường hợp đột biến c.3151G>A phát thuộc exon 31(14) Ngồi có nhiều thay đổi khác dạng SNP exon intron Vì điều kiện hạn chế, nghiên cứu khảo sát exon 31 gen UNC13D- exon mà nghiên cứu trước Việt Nam phát có đột biến Kết không thấy đột biến phát exon toàn 27 trường hợp Do cỡ mẫu nhỏ, khảo sát giới hạn exon nên không phản ánh hết thay đổi toàn gen bệnh nhân hội chứng thực bào máu Đột biến gen UND13C Đột biến gen UNC13D gây HCTBM di truyền loại (FHL-3) chiếm khoảng 10-32% trường hợp HCTBM di truyền(2) Gen UNC13D lớn, gồm 32 exons 31 introns, mã hóa cho 3273 amino acid, protein tạo Munc13–4 Đây protein có vai trò chủ yếu q trình tiết hạt gây ly giải tế bào Đột biến gen UNC13D gây cản trở trình hoạt động bình thường hạt này, kèm theo tượng thực bào tế bào máu Theo y văn, đột biến gen UNC13D thường gặp, đứng sau đột biến gen PRF1 bệnh nhân Bắc Mỹ (bảng 4) Một nghiên cứu quốc gia châu Á Hàn Quốc(18), khảo sát 40 bệnh nhân trẻ em HCTBM từ tháng đến 12 tuổi, kết có trường hợp (20%) có đột biến gen UND13C, 1/40(2,5%) có đột biến gen PRF1 khơng có trường hợp có đột biến gen SXT11 Tại Việt nam, có nghiên cứu khảo sát đột biến 310 KẾT LUẬN Đây nghiên cứu khảo sát đột biến gen PRF1 UNC13D Việt Nam đối tượng bệnh nhân người lớn mắc hội chứng thực bào máu liên quan đến EBV Số liệu nghiên cứu với số liệu nghiên cứu có trước trẻ em cho ta có nhìn đầy đủ tình trạng đột biến hai gen PRF1 UNC13D bệnh nhân hội chứng thực bào máu nước ta TÀI LIỆU THAM KHẢO Allen M, De Fusco C, Legrand F, Clementi R, Conter V, Danesino C, Janka G, Arico M (2001) Familial hemophagocytic lymphohistiocytosis: how late can the onset be? Haematologica, 86(5), 499-503 Feldmann J, Callebaut I, Raposo G, Certain S, Bacq D, Dumont C, et al (2003) Munc13-4 is essential for cytolytic granules fusion and is mutated in a form of familial hemophagocytic lymphohistiocytosis (FHL3) Cell, 115(4), 461-73 Gholam C, Grigoriadou S, Gilmour KC, Gaspar HB (2011) Familial haemophagocytic lymphohistiocytosis: advances in the genetic basis, diagnosis and management Clinical and experimental immunology, 163(3), 271-83 Henter JI, Ehrnst A, Andersson J, Elinder G (1993) Familial hemophagocytic lymphohistiocytosis and viral infections Acta Paediatr, 82(4), 369-72 Henter JI, Horne A, Arico M, et al (2007) HLH-2004: Diagnostic and therapeutic guidelines for hemophagocytic lymphohistiocytosis Pediatr Blood Cancer, 48(2), 124-131 Imashuku S, Teramura T, Tauchi H, Ishida Y, Otoh Y, Sawada M, Tanaka H, Watanabe A, Tabata Y, Morimoto A, Hibi S, Henter JI (2004) Longitudinal follow-up of patients with Epstein-Barr virus-associated hemophagocytic lymphohistiocytosis Haematologica, 89(2), 183-8 Janka GE (2007) Hemophagocytic syndromes Blood, 21(5), 245-253 Jordan MB, Allen CE, Weitzman S, Filipovich AH, McClain KL (2011) How We treat hemophagocytic Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 10 11 12 13 14 lymphohistocytosis blood, bloodjournal.hematologylibrary.org, 118(15), 4041-4052 Lam T My, Le B Lien, Hsieh WC, Imamura T, Tran N K Anh, Phan N L Anh, Nguyen T Hung, et al (2009) Comprehensive analyses and characterization of haemophagocytic lymphohistiocytosis in Vietnamese children British Journal of Haematology, 148301–310 Nadine GR, Naasha JT, Camille V, Kelly C, Roger M, Carolyn G (2007) Infections associated with haemophagocytic syndrome Lancet Infect Dis, 7814-822 Nadine RM, Abeer M, Jesse TJ, Helmut A (2010) Viral infections associated with haemophagocytic syndrome Rev Med Virol, 2093-105 Nagafuji K, Nonami A, Kumano T, Kikushige Y, Yoshimoto G, Takenaka K, et al (2007) Perforin gene mutations in adult-onset hemophagocytic lymphohistiocytosis Haematologica, 92(7), 978-81 Nguyễn Thị Phương Mai, Ngô Diễm Ngọc, Dương Bá Trực, Trần Thị Mạnh, Tạ Anh Tuấn, Nguyễn Thanh Liêm (2012) Phát đột biến gien PRF1 bệnh nhân mắc hội chứng thực bào tế bào máu (HLH): Báo cáo ca bệnh Tạp chí Y Học Việt Nam, tập 398(1), tr.80-84 Nguyễn Văn Tân Minh (2012) "Ứng dụng kỹ thuật giải trình tự chuỗi DNA tìm đột biến gien Perforin UNC13D hội chứng thực bào máu bệnh viện nhi", Luận văn thạc sĩ y học, Chuyên ngành Huyết học Truyền Máu, Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh Bệnh Nhiễm 15 16 17 18 Nghiên cứu Y học Rosado FG, Kim AS (2013) Hemophagocytic lymphohistiocytosis: an update on diagnosis and pathogenesis American journal of clinical pathology, 139(6), 713-27 Stepp SE, Dufourcq-Lagelouse R, Le Deist F, Bhawan S, Certain S, Mathew PA, Henter JI, Bennett M, Fischer A, de Saint Basile G, Kumar V (1999) Perforin gene defects in familial hemophagocytic lymphohistiocytosis Science, 286(5446), 1957-9 Ueda I, Morimoto A, Inaba T, Yagi T, Hibi S, Sugimoto T, et al (2003) Characteristic perforin gene mutations of haemophagocytic lymphohistiocytosis patients in Japan British Journal of Haematology, 121(3), 503-10 Yoon HS, Kim HJ, Yoo KH, Sung KW, Koo HH, Kang HJ, et al (2010) UNC13D is the predominant causative gene with recurrent splicing mutations in Korean patients with familial hemophagocytic lymphohistiocytosis Haematologica, 95(4), 622-6 Ngày nhận báo: 24/11/2015 Ngày phản biện nhận xét báo: 26/11/2015 Ngày báo đăng: 15/02/2016 311 ... tế bào Đột biến gen UNC13D gây cản trở trình hoạt động bình thường hạt này, kèm theo tượng thực bào tế bào máu Theo y văn, đột biến gen UNC13D thường gặp, đứng sau đột biến gen PRF1 bệnh nhân. .. thấp so với tỷ lệ sống nghiên cứu trẻ em Nhật với 78 trường hợp hội chứng thực bào máu liên quan đến EBV, theo dõi 43 tháng, tỷ lệ sống 75,6%(6) Đột biến gen perforin Đột biến gen liên quan đến... khảo sát đột biến 310 KẾT LUẬN Đây nghiên cứu khảo sát đột biến gen PRF1 UNC13D Việt Nam đối tượng bệnh nhân người lớn mắc hội chứng thực bào máu liên quan đến EBV Số liệu nghiên cứu với số liệu