So sánh kết quả cấy máu và real-time PCR máu trên bệnh nhi nhiễm khuẩn huyết tại Bệnh viện Nhi Đồng 1

Nhiễm khuẩn huyết và sốc nhiễm khuẩn là những bệnh cảnh nặng nề, tỷ lệ tử vong cao ở hầu hết mọi lứa tuổi đặc biệt là ở trẻ em, và tỷ lệ này tiếp tục tăng lên khoảng 5 - 10% mỗi năm. Cấy máu được xem là tiêu chuẩn vàng để xác định tác nhân gây bệnh.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học SO SÁNH KẾT QUẢ CẤY MÁU VÀ REAL-TIME PCR MÁU TRÊN BỆNH NHI NHIỄM KHUẨN HUYẾT TẠI BỆNH VIỆN NHI ĐỒNG Bùi Thanh Liêm*, Phùng Nguyễn Thế Nguyên*, Trần Diệp Tuấn* TÓM TẮT Đặt vấn đề: Nhiễm khuẩn huyết sốc nhiễm khuẩn bệnh cảnh nặng nề, tỷ lệ tử vong cao hầu hết lứa tuổi đặc biệt trẻ em, tỷ lệ tiếp tục tăng lên khoảng - 10% năm Cấy máu xem tiêu chuẩn vàng để xác định tác nhân gây bệnh Tuy nhiên phương pháp cấy máu thường có độ nhạy thấp bệnh nhân trước sử dụng kháng sinh loại vi khuẩn phát triển chậm có tạp nhiễm Hiện nghiên cứu với PCR đa giá để xác định tác nhân gây bệnh cho kết hứa hẹn, tỷ lệ dương tính cao gấp khoảng lần so với kết cấy máu thơng thường Ngồi PCR kỹ thuật hữu ích bệnh nhân nhiễm khuẩn huyết mà kết cấy máu nhiều lần âm tính, bệnh nhân dùng kháng sinh trước Hiện nay, Việt Nam có nghiên cứu PCR máu bệnh nhân nhiễm khuẩn huyết Phương pháp nghiên cứu: Mơ tả hàng loạt ca có phân tích Chúng tơi mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng,điều trị so sánh kết cấy máu với PCR máu bệnh nhi chẩn đoán nhiễm khuẩn huyết nhập khoa Hồi Sức Tích Cực Chống Độc bệnh viện Nhi Đồng Kết quả: Trong thời gian từ ngày tháng 10 năm 2016 đến ngày 30 tháng năm 2017 chúng tơi có 53 trường hợp nhập khoa Hồi Sức Tích Cực Chống Độc bệnh viện Nhi Đồng thỏa tiêu chuẩn chẩn đoán nhiễm khuẩn huyết trẻ em năm 2005 Có 73,6% số trẻ mẫu nghiên cứu < tuổi 58,5% chẩn đoán sốc nhiễm khuẩn, 28,3% nhiễm khuẩn huyết nặng 13.2% nhiễm khuẩn huyết 100% điều trị kháng sinh trước nhập khoa hồi sức Có 22,6% trường hợp tử vong thời gian điều trị Tỷ lệ PCR máu cấy máu dương tính 43,4% 30,2% Trong số 23 trường hợp PCR dương tính có 15 (65,2%) trường hợp vi trùng Gram dương, MRSA chiếm 52,2% Con số tương ứng kết cấy máu 43,8% 18,7% Trung bình thời gian trả kết PCR 5,67 giờ, cấy máu 110,1 (p = 0,001) Kết luận: PCR cho kết dương tính cao hơn, thời gian cho kết nhanh hơn, nên dùng PCR biện pháp giúp xác định tác nhân gây nhiễm khuẩn huyết bên cạnh cấy máu Đặc biệt trẻ dùng kháng sinh trước Tỷ lệ NKH MRSA cao thường diễn tiến nặng xem xét điều trị tác nhân sớm lâm sàng nghi ngờ Từ khóa: cấy máu, PCR máu, nhiễm khuẩn huyết ABSTRACT COMPARISON OF BLOOD CULTURE AND MULTIPLEX REAL-TIME PCR FOR DIAGNOSIS OF PEDIATRIC SEPSIS IN CHILDREN’S HOSPITAL Bui Thanh Liem, Phùng Nguyen The Nguyen, Tran Diep Tuan * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 – No - 2019: 68 - 75 Objectives: Sepsis and septic shock are serious illnesses, with high mortality rate for almost all ages, especially in children, and this rate continues to increase by 5-10% per year Currently, studies with multiplex Real-time PCR to identify pathogens have shown promising results, with positive rates about two times higher than normal blood cultures In addition, PCR is a useful technique in patients with sepsis having multiple negative blood cultures, patients receiving previous antibiotics Currently, in Vietnam, there is little research on Real-time *Đại Học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS.BS Bùi Thanh Liêm ĐT: 0938 165 083 Email: liem.bui@ump.edu.vn PCR in patients with sepsis Method: Description of the series have analysis We describe the clinical and subclinical characteristics, treatment and comparison of blood cultures and PCR in patients with sepsis at PICU Results: There were 53 cases meeting the International pediatric sepsis consensus conference in 2005 standard, admitted to the PICU, Children's Hospital No 58.5% was diagnosed with septic shock, 28.3% severe Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 63 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 sepsis and 13.2% sepsis 100% was treated with antibiotics before admitting to the PICU The rates of microorganism detection by blood culture and PCR were 30.2% and 43.4%, respectively 15 (65.2%) cases with positive PCR had gram-positive bacteria, in which MRSA accounted for 52.2%, whereas blood culture results were 43.8% and 18.7%, respectively The Kappa homology index was 0.005 The mean time taken for PCR was 5.67 hours, blood culture was 110.1 hours (p = 0.001) Conclusion: Multiplex Real-time PCR gives more positive rates and faster results, so PCR should be used as a technique of identifying sepsis in addition to blood cultures, especially when the patient has been treated with antibiotics before The rate of sepsis due to MRSA was quite high and usually severe, therefore, consider treatment for this agent early on suspicion Keywords: blood culture, real-time PCR, sepsis viện, ngành y tế việc cải thiện phương pháp ĐẶT VẤN ĐỀ xác định tác nhân gây bệnh Nhiễm khuẩn huyết (NKH), sốc nhiễm khuẩn ĐỐITƯỢNG- PHƯƠNGPHÁPNGHIÊN CỨU bệnh cảnh nặng nề, tỷ lệ tử vong cao hầu hết lứa tuổi trẻ em tỷ lệ tiếp tục tăng Thiết kế nghiên cứu lên khoảng - 10% năm(14) Do chẩn đốn Nghiên cứu mơ tả hàng loạt trường hợp có phân điều trị sớm, thích hợp góp phần phòng ngừa tích biến chứng cải thiện tiên lượng tử vong, đặc biệt Đối tượng nghiên cứu bệnh nhân sốc nhiễm khuẩn Hầu hết Tất bệnh nhi điều trị khoa Hồi trường hợp điều trị hồi sức liệu pháp Sức Tích Cực Chống Độc bệnh viện Nhi Đồng từ (6) kháng sinh thích hợp Nhiều nghiên cứu lâm sàng 01/10/2016 đến 30/04/2017 với chẩn đoán nhiễm cho thấy việc điều trị kháng sinh chậm trễ khuẩn huyết khơng thích hợp làm tăng nguy tử vong lên gấp Tiêu chí chọn bệnh lần, bệnh nhân sốc nhiễm khuẩn chậm điều trị kháng sinh làm giảm 8% khả Những bệnh nhi điều trị khoa HSTCCĐ BV sống bệnh nhân(10) Do xác định Nhi Đồng thời gian nghiên cứu thỏa tiêu chuẩn chẩn đoán NKH hội nghị quốc tế NKH tác nhân gây bệnh cách xác nhanh trẻ em năm 2005(7) chóng khơng cải thiện tử vong mà góp phần vào việc giảm tỷ lệ kháng thuốc Tiêu chí loại trừ Hiện cấy máu xem tiêu chuẩn vàng Những bệnh nhi có thân nhân khơng đồng ý tham để xác định tác nhân gây bệnh Cấy máu thực gia nghiên cứu trước bắt đầu điều trị kháng sinh(6) Tuy nhiên Kỹ thuật chọn mẫu phương pháp cấy máu thường có độ nhạy thấp Lấy trọn tất trường hợp thỏa tiêu chí chọn bệnh nhân trước sử dụng kháng sinh vào loại loại vi khuẩn phát triển chậm có Phương pháp thu thập liệu tạp nhiễm Hiện nghiên cứu với PCR đa giá để xác định tác nhân gây bệnh cho kết hứa Tất bệnh nhân nghi ngờ NKH điều trị hẹn, tỷ lệ dương tính đạt cao gấp khoảng lần khoa HSTCCĐ BV Nhi Đồng hỏi bệnh so với kết cấy máu thơng thường(1,12,13) Ngồi sử, tiền căn, khám lâm sàng chi tiết làm PCR kỹ thuật hữu ích bệnh nhân xét nghiệm để chẩn đoán NKH, sốc nhiễm khuẩn nhiễm khuẩn huyết mà kết cấy máu nhiều lần âm (SNK) theo tiêu chuẩn Và số liệu thu thập tính, bệnh nhân dùng kháng sinh trước(23) theo bệnh án mẫu Mục tiêu nghiên cứu Bệnh nhân đủ tiêu chuẩn chẩn đoán NKH lấy máu để làm xét nghiệm vi sinh Quy trình xét So sánh kết cấy máu PCR máu nghiệm bao gồm: nhóm bệnh nhân nhiễm khuẩn huyết khoa Hồi Sức Tích Cực Chống Độc (HSTCCĐ) Bệnh viện Lấy ml máu phương pháp vô trùng Nhi Đồng Hi vọng với kết đạt cho vào chai cấy máu gửi đến phòng xét từ nghiên cứu chúng tơi góp phần vào thay nghiệm vi sinh BV Nhi Đồng 1, cấy máu thực đổi thực hành lâm sàng chẩn đoán điều trị theo qui trình cấy máu tự động Bactec cho bệnh nhân nhiễm khuẩn huyết Đồng thời lấy ml máu phương pháp vô sốc nhiễm khuẩn Góp phần thúc đẩy đầu tư bệnh khuẩn cho vô tuýp chống đông EDTA, không ủ 64 Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học gửi lúc với mẫu cấy máu phòng xét nghiệm Nam Khoa Tại phương pháp phát dấu ấn di truyền kỹ thuật realtime PCR thực hệ thống máy kit riêng phòng xét nghiệm Số liệu nhập xử lý phần mềm SPSS 20.0 Đánh giá tương đồng PCR máu cấy máu kiểm định Cohen’s Kappa SỐ CA (n ) TỶ LỆ (%) 15 31 31 13 10 53 35 16 13,2% 28,3% 58,5% 58,5 24,5 18,9 15,1 100 3,8 66,0 30,2 12 41 22,6 77,4 KẾT QUẢ Sau tháng thực nghiên cứu chứng tơi có 53 trẻ nhiễm khuẩn huyết thỏa tiêu chuẩn chọn mẫutrong thời gian nghiên cứu với đặc điểm kết sau Đặc điểm dịch tễ, lâm sàng, chẩn đoán điều trị Bảng Đặc điểm dịch tễ, lâm sàng, cận lâm sàng ĐẶC ĐIỂM Tuổi < tuổi - tuổi > tuổi Giới tính: Nam Nữ Vị trí nhiễm khuẩn Hơ hấp Tiêu hóa Da mơ mềm Thần kinh Các ổ nhiễm khác SỐ CA (n) TỶ LỆ (%) 19 20 14 30 23 35,9% 37,7% 26,5% 56,6% 43,4% 20 23 37,7% 43,4% 11,3% 5,7% 1,9% Trong nghiên cứu trẻ < tuổi chiếm 73,6%, < tuổi chiếm 35,9% trẻ trai chiếm tỷ lệ cao với tỷ số nam/nữ 1,3/1 Tất vị trí nhiễm khuẩn ngõ vào NKH ổ nhiễm khuẩn nguyên phát thường gặp đường tiêu hóa với 43,4%, tiếp đến hơ hấp (37,7%), da mô mềm (11,3%), thần kinh trung ương (5,7%) (Bảng 1) Bảng Đặc điểm chẩn đoán điều trị ĐẶC ĐIỂM Chẩn đoán Nhiễm khuẩn huyết Nhiễm khuẩn huyết nặng Sốc nhiễm khuẩn Có dùng vận mạch Dùng vận mạch Dùng vận mạch Dùng vận mạch Dùng kháng sinh tuyến trước Dùng kháng sinh Dùng kháng sinh Dùng ≥ kháng sinh Kết điều trị Tử vong Xuất viện Bảng cung cấp thơng tin đặc điểm chẩn đốn, điều trị kết điều trị nghiên cứu Chúng tơi có (13,2%) trường hợp NKH, 15 (28,3%) NKH nặng, 31 (58,5%) SNK (Bảng 3) Trong số nàycó 50 (94,3%) trường hợp có rối loạn chức từ quan trở lên Điều phù hợp mẫu nghiên cứu thực khoa Hồi sức, nơi tập trung hầu hết bệnh nhân nặng bệnh viện, bệnh nhân NKH đơn theo dõi điều trị khoa khơng có rối loạn chức quan có bệnh lý kèm.Chúng tơi có 12 (22,6%) trường hợp tử vong thời gian nằm khoa Hồi Sức Hình 1: Tỷ lệ loại kháng sinh dùng Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 65 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học 100% trường hợp dùng kháng sinh trước nhập khoa Hồi sức Tỷ lệ dùng kháng sinh phối hợp 96,2% Trong 66,0% dùng loại kháng sinh, 30.2% dùng từ loại kháng sinh trở lên Nghiên cứu cho thấy Vancomycine kháng sinh dùng nhiều nhất, có 40 (75,5%) trường hợp cho Vanomycine từ đầu Tiếp đến nhóm kháng sinh Carbapenem Meronem 30 (56,6%) trường hợp, Imipenem 19 (35,9%) Như tính riêng nhóm carbapenem có 49 (92,5%) trường hợp sử dụng Kháng sinh Amikacine thuộc nhóm aminoglycoside dùng cho 23 (43,4%) trường hợp Còn lại kháng sinh khác Clindamycin, Quinolone, Cephlosporine hệ thứ 3, Bactrim sử dụng với tỷ lệ thấp Như kháng sinh khởi đầu khoa Hồi sức bệnh viên Nhi Đồng có phổ tác dụng rộng, hầu hết ca phối hợp thuốc thuộc nhóm Carbapenem với thuốc thuộc nhóm Aminoglycoside Vancomycine (Hình 1) Đặc điểm kết cấy máu PCR máu Trong nghiên cứu tỷ lệ dương tính PCR máu 43,4% cao so với cấy máu 30,2% (Bảng 3), nhiên mức độ đồng thuận xét nghiệmrất thấp với số đồng thuận Kappa 0,005 Bảng Kết cấy máu PCR máu CẤY MÁU TỔNG (+) (-) PCR MÁU (+) (-) (30,4%) (30,0%) 16 (69,6%) 21 (70,0%) 23 (100%) 30 (100%) TỔNG 16 (30,2%) 37 (69,8%) 53 (100%) Kiểm định Cohen’s Kappa: số đồng thuận 0,005 Bảng So sánh thời gian cấy máu PCR máu Thời gian cấy máu Thời gian PCR máu TG ngắn TG dài TG trung bình 51 140 110,10 giờ 6,5 5,67 P value 0,001 Xét khía cạnh thời gian, thời gian (TG) cho kết ngắn nhất, dài trung bình phương pháp PCR máu nhanh so với cấy máu, tương ứng (5 giờ, 6,5 giờ, 5,67 giờ) so với (51 giờ, 140 110,1 giờ) (Bảng 4) Chúng ta dễ dàng nhận thấy khác biệt lớn, khác biệt nàycó ý nghĩa thống kê với mức ý nghĩa 0,001 Trong kết cấy máu tỷ lệ vi trùng Gram (+) chiếm 43,8%, Gram (-) chiếm 56,2%, đứng đầu tác nhân MRSA Staphylococcus coagulase (-) (Bảng 5) Một điểm đáng ý kết 66 xuất tác nhân mà bình thường gây NKH lâm sàng Alcaligenes faecalis, Cupriavidus pauculus, Ralstonia pickettii, Roseomonas gilardii, Sphingomonas paucimobilis, Vibrio vulnificus Bảng Tỷ lệ tác nhân gây bệnh kết cấy máu Tác nhân Vi trùng Gram dương MRSA Staphylococcus coagulase (-) Streptococcus pneumonia Vi trùng Gram âm Stenotrophomonas maltophilia Alcaligenes faecalis Cupriavidus pauculus Klebsiella pneumonia Ralstonia pickettii Roseomonas gilardii Sphingomonas paucimobilis Vibrio vulnificus Số ca (n=16) Tỷ lệ (%) 43,8 18,7 18,7 6,3 56,2 12,5 6,3 6,3 6,3 6,3 6,3 6,3 6,3 Bảng Tỷ lệ tác nhân gây bệnh kết PCR máu Tác nhân Vi trùng Gram dương MRSA Staphylococcus coagulase (-) Streptococus pneumonia Streptococcus agalactia Vi trùng Gram âm Acinetobacter baumannii Escherichia coli Klebsiella pneumonia esblPseudomonas aeruginosa Salmonella Số ca (n=23) 15 12 1 1 1 Tỷ lệ (%) 65,2 52,2 4,3 4,3 4,3 34,8 17,4 4,3 4,3 4,3 4,3 Ngược lại với phổ tác nhân phân lập từ kết cấy máu trên, tác nhân phân lập từ phương pháp PCR lại thấy có vượt trội nhóm vi trùng Gram (+) mà đặc biệt tụ cầu kháng methicillin Vi trùng Gram (+) chiếm 65,2%, MRSA 52,2%, vi trùng Gram (-) chiếm 34,8% Trong số trường hợp phân lập tác nhân Gram (-) PCR máu ghi nhận trường hợp Acinetobacter Baumannii trường hợp Pseudomonas aeruginosa (Bảng 6) BÀN LUẬN Đây nghiên cứu thực thời gian ngắn, nhiên đánh giá phần đặc điểm dịch tễ, lâm sàng, cận lâm sàng, điều trị đặc biệt so sánh phương Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 pháp xác định tác nhân gây nhiễm khuẩn huyết trẻ em cấy máu PCR máu Chúng nhận thấy đặc điểm dịch tễ, lâm sàng, cận lâm sàng điều trị mẫu nghiên cứu hầu hết tương đồng với nhữngnghiên cứu thực trước tác giả Việt Nam(2,3,8,9,11,15,16,17,22) Điều cho thấy đồng thuận, hướng dẫn chẩn đoán điều trị NKH, SNK trẻ em cập nhật nhiều năm qua NKH nói riêng bệnh lý nhiễm trùng trẻ em nói chung vấn đề sức khỏe bật khó kiểm sốt Bằng chứng cho thấy trẻ nhỏ nhóm tuổi nhạy cảm, dễ nhiễm khuẩn diễn tiến nặng, tỷ lệ tử vong có giảm khơng nhiều mức cao Đánh giá mục tiêu nghiên cứu so sánh phương pháp xác định tác nhân gây nhiễm khuẩn huyết cấy máu PCR máu Về mặt thời gian hẳn đồng ý PCR cho kết nhanh có ý nghĩa, điều khẳng định nhiều nghiên cứu tương tự(20,21,25) Tuy nhiên nghiên cứu thực thời gian ngắn (khoảng tháng) số lượng mẫu khơng nhiều (chỉ có 53 mẫu) nên khó khẳng định khác biệt tỷ lệ kết dương tính hai phương pháp có ý nghĩa thống kê hay khơng Khi thực phép kiểm Cohen’s Kappa để đánh giá tương đồng trong kết phương pháp giá trị đồng thuận 0,005, mức độ đồng thuận thấp với mức ý nghĩa 0,973 (Bảng 4) Tức phương pháp cho kết không tương đồng với Điều ngược lại với nghiên cứu Lehmann(12) Bảng So sánh kết cấy máu PCR máu với tác giả khác Tác giả Kết cấy máu Dương tính Âm tính Kết PCR Dương tính Âm tính Suberviola P.T.B.Thủy Chúng 27,73% 72,27% 3,33% 96,67% 30,2% 69,8% 43,38% 56,62% 43,33% 56,67% 43,4% 56,6% Bảng So sánh kết cấy máu PCR máu với Suberviola Cấy máu + Cấy máu – Cấy máu + Cấy máu – PCR + PCR PCR PCR + Suberviola 24,37% 52,1% 2,52% 21,01% Chúng 13,2% 39,6% 17,0% 30,2% Tác giả So sánh với kết nghiên cứu Suberviola(19) Phùng Thị Bích Thủy(18) thực Viện Nhi Trung Ương năm 2012, thấy có tương Nghiên cứu Y học đồng cao kết PCR với tác giả (Bảng 7) Điều khẳng định tổng quan Shy-Shin Chang(4), Paul Dark(5) Geoffrey Warhurst(24) Như vậy, nói phương pháp PCR cho dù thực phòng xét nghiệm cho kết tương đồng Còn kết cấy máu nghiên cứu Suberviola khác biệt không đáng kể, riêng nghiên cứu Phùng Thị Bích Thủy lại cho kết dương tính thấp Sự khác biệt lớn khó lý giải, phần mẫu nghiên cứu tác giả nhỏ, với khác biệt phòng xét nghiệm kỹ thuật cấy máu Nếu thấy khơng có khác biệt tỷ lệ dương tính kết cấy máu PCR máu với Suberviola phân tích nhóm lại thấy nghiên cứu Suberviola tỷ lệ phương pháp cho kết dương hay âm cao nghiên cứu ngược lại tỷ lệ hai phương pháp cho kết khác lại thấp Điều chứng tỏ tương đồng kết phương pháp nghiên cứu Suberviola cao nghiên cứu Tỷ lệ phương pháp cho kết tương đồng hai nghiên cứu 76,5% 52,8% (Bảng 8) Trong kết cấy máu tỷ lệ vi khuẩn Gram (+) chiếm 43,8%, Gram (-) chiếm 56,2%, đứng đầu tác nhân MRSA Staphylococcus coagulase (-) Điều phù hợp với nghiên cứu Phùng Nguyễn Thế Nguyên 65,8%(17), Bùi Quốc Thắng 70,2%(2), Lê Thị Thanh Thảo 68%(11) vi khuẩn Gram (-) chiếm đa số Sự xuất tác nhân gặpnhư Alcaligenes faecalis, Cupriavidus pauculus, Ralstonia pickettii, Roseomonas gilardii, Sphingomonas paucimobilis, Vibrio vulnificus điều đặc biệt Chúng tơi có ghi nhận báo cáo ca lâm sàng trường hợp nhiễm tác nhân giới xuất lúc tác nhân nghiên cứu chúng tơi chưa tìm thấy Đây khó khăn chúng tơi việc nhận xét so sánh với nghiên cứu khác Trong kết PCR máu tác nhân vi trùng Gram (+) chiếm 65,2%, riêng MRSA chiếm 52,2% MRSA trước xem tác nhân thường gặp nhiễm khuẩn bệnh viện, bệnh nhân đến từ cộng đồng trường hợp ghi nhận tác nhân Nhưng điều khơng Trong nhiều nghiên cứu gần MRSA lại tác nhân thường gặp ca viêm phổi hoại tử nhiễm khuẩn huyết từ cộng đồng Đó Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 67 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 điểm cần lưu ý, lý giải thích khoa Hồi sức bệnh viện Nhi Đồng tỷ lệ sử dụng kháng sinh Vancomycin đầu tay cho ca NKH nhiều Trong tác nhân vi trùng Gram âm mà PCR phân lập tác nhân trùng hợp với kết cấy máu Điều giải thích kỹ thuật realtime PCR thực phòng xét nghiệm Nam Khoa khơng có đoạn mồi đặc hiệu cho tác nhân này, bỏ sót số tác nhân Gram âm không thường gặp lâm sàng Ngược lại kỹ thuật PCR lại phát nhiều trường hợp tác nhân MRSA Acinetobacter Có thể lý giải điều tất bệnh nhân nhập Hồi sức dùng kháng sinh trước đó, kháng sinh có phổ tác dụng rộng, tỷ lệ dùng kháng sinh nhóm Carbapenem Vancomycin cao, điều làm cho khả phân lập Acinetobacter MRSA cấy máu thấp Trong đó, realtime PCR dùng kỹ thuật sinh học phân tử, khuếch đại phát vật chất di truyền tác nhân đoạn mội đặc hiệu, ngồi phòng xét nghiệm Nam Khoa có kit chuyên biệt giành cho tác nhân nhiễm khuẩn bệnh viện khả phát MRSA Acinetobacter PCR cao nhiều 10 11 12 13 14 KẾT LUẬN PCR cho kết dương tính cao hơn, thời gian cho kết nhanh hơn, nên dùng PCR biện pháp giúp xác định tác nhân gây nhiễm khuẩn huyết bên cạnh cấy máu Đặc biệt trẻ dùng kháng sinh trước Tỷ lệ NKH MRSA cao thường diễn tiến nặng xem xét điều trị tác nhân sớm lâm sàng nghi ngờ Mở rộng nghiên cứu PCR, làm thêm nhiều đoạn mồi đặc hiệu để mở rộng phổ tác nhân mà PCR có khả phân lập tìm kiếm gen sinh kháng thuốc 68 16 17 18 TÀI LIỆU THAM KHẢO 15 Bloos F, Hinder F, Becker K (2010) A multicenter trial to compare blood culture with polymerase chain reaction in severe human sepsis Intensive Care Med, 36(2):241-7 Bùi Quốc Thắng (2001) Đặc điểm nhiễm trùng huyết nhập khoa cấp cứu bệnh viện Nhi Đồng năm 1999 Y học TP Hồ Chí Minh, 19(5):129-133 Bùi Quốc Thắng (2005) Khảo sát rối loạn chức quan nhiễm trùng huyết trẻ em Y học Thành Phố Hồ Chí Minh, 9(1):109-113 Chang SS, Hsieh WH, Liu TS (2013) Multiplex PCR system for rapid detection of pathogens in patients with presumed sepsis - a systemic review and meta-analysis PLoS One, 8(5): e62323 19 20 Dark Paul, Blackwood Bronagh, Gates Simon (2015) Accuracy of LightCycler® SeptiFast for the detection and identification of pathogens in the blood of patients with suspected sepsis: a systematic review and meta-analysis Intensive Care Medicine, 41(1):21-33 Dellinger RP, Levy MM, Rhodes A (2013), Surviving sepsis campaign: international guidelines for management of severe sepsis and septic shock: 2012.Crit Care Med, 41(2):580-637 Goldstein B, Giroir B, Randolph A (2005) International pediatric sepsis consensus conference: definitions for sepsis and organ dysfunction in pediatrics Pediatr Crit Care Med, 6(1):2-8 Hà Mạnh Tuấn (1992) Góp phần nghiên cứu nhiễm trùng huyết bệnh viện Nhi Đồng Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Nội Trú Chuyên ngành Nhi, tr.39 Hoàng Trọng Kim, Trương Thị Hòa, Đỗ Văn Dũng (2005) Những yếu tố tiên lượng nặng nhiễm trùng huyết khoa hồi sức cấp cứu bệnh viện Nhi Đồng Y Học Thành Phố Hồ Chí Minh, 9(1):7-16 Kumar A, Ellis P, Arabi Y (2009) Initiation of inappropriate antimicrobial therapy results in a fivefold reduction of survival in human septic shock Chest, 136(5):1237-48 Lê Thị Thanh Thảo (2001) Một số đặc điểm dịch tễ học, lâm sàng vi trùng học nhiễm khuẩn huyết gram âm Y Học Thực Hành, 2: 611 Lehmann LE, Hunfeld KP, Steinbrucker M (2010), Improved detection of blood stream pathogens by real-time PCR in severe sepsis Intensive Care Med, 36(1):49-56 Levy MM, Fink MP, Marshall JC (2003) 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference Crit Care Med, 31(4):1250-6 Martin GS, Mannino DM, Eaton S (2003) The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000 N Engl J Med, 348(16):1546-54 Nguyễn Thanh Liêm, Lâm Thị Mỹ (2005) Đặc điểm dịch tể học, lâm sàng, huyết học, vi trùng học trẻ sơ sinh sanh nôn bị nhiễm trùng huyết BV Nhi Đồng từ tháng 1-1999 đến 1-2004 Y Học TP Hồ Chí Minh, 9:196 Phùng Nguyễn Thế Nguyên (2003) "Khảo sát nhiễm khuẩn huyết bệnh viện Nhi Đồng 2" Luận văn tốt nghiệp bác sĩ nội trú chuyên ngành nhi, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh, tr.50 Phùng Nguyễn Thế Nguyên (2006) Nhiễm khuẩn huyết gram âm bệnh viện Nhi Đồng Y Học Thành Phố Hồ Chí Minh, 10(1):116122 Phùng Thị Bích Thủy, Khúc Thị Rềnh Hoa, Phan Thu Chung, Tạ Anh Tuấn, Nguyễn Thanh Liêm (2012) Ứng dụng kỹ thuật Real Time PCR đa mồi chẩn đoán nguyên gây nhiễm trùng huyết trẻ em Bệnh viện Nhi Trung Ương Bệnh viện Nhi Trung Ương, http://benhviennhitrunguong.org.vn Suberviola B, Márquez-López A, Castellanos-Ortega A (2016) Microbiological diagnosis of sepsis: polymerase chain reaction system versus blood cultures American Journal of Critical Care, 25(1):68-75 Tafelski S, Nachtigall I, Adam T (2015) Randomized controlled clinical trial evaluating multiplex polymerase chain reaction for pathogen identification and therapy adaptation in critical care patients with pulmonary or abdominal sepsis J Int Med Res, 43(3):364-77 Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 21 Tsalik EL, Jones D, Nicholson B (2010 Multiplex PCR To Diagnose Bloodstream Infections in Patients Admitted from the Emergency Department with Sepsis J Clin Microbiol, 48(1):26-33 22 Võ Tăng Duyên, Bùi Quốc Thắng (2009) Các yếu tố dịch tễ học, lâm sàng cận lâm sàng liên quan đến tử vong nhiễm khuẩn huyết sơ sinh Y Học TP Hồ Chí Minh, 13:35-39 23 Von Lilienfeld-Toal M, Lehmann LE, Raadts AD (2009) Utility of a commercially available multiplex real-time PCR assay to detect bacterial and fungal pathogens in febrile neutropenia J Clin Microbiol, 47(8):2405-10 24 Warhurst G, Dunn G, Chadwick P (2015) Rapid detection of healthcare-associated bloodstream infection in critical care using Nghiên cứu Y học multipathogen real-time polymerase chain reaction technology: a diagnostic accuracy study and systematic review Health Technol Assess, 19(35):1-142 25 Warhurst G, Maddi S, Dunn G (2015) Diagnostic accuracy of SeptiFast multi-pathogen real-time PCR in the setting of suspected healthcare-associated bloodstream infection Intensive Care Med, 41(1):86-93 Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: Ngày báo đăng: Hội Nghị Nhi Khoa Mở Rộng BV Nhi Đồng 2019 13/06/2019 21/06/2019 10/08/2019 69 ... kết cấy máu PCR máu với Suberviola Cấy máu + Cấy máu – Cấy máu + Cấy máu – PCR + PCR PCR PCR + Suberviola 24,37% 52 ,1% 2,52% 21, 01% Chúng 13 ,2% 39,6% 17 ,0% 30,2% Tác giả So sánh với kết nghiên... Đánh giá tương đồng PCR máu cấy máu kiểm định Cohen’s Kappa SỐ CA (n ) TỶ LỆ (%) 15 31 31 13 10 53 35 16 13 ,2% 28,3% 58,5% 58,5 24,5 18 ,9 15 ,1 100 3,8 66,0 30,2 12 41 22,6 77,4 KẾT QUẢ Sau tháng... bệnh so với kết cấy máu thơng thường (1, 12 ,13 ) Ngồi sử, tiền căn, khám lâm sàng chi tiết làm PCR kỹ thuật hữu ích bệnh nhân xét nghiệm để chẩn đoán NKH, sốc nhi m khuẩn nhi m khuẩn huyết mà kết cấy