Cải tiến và thích nghi các kỹ thuật gây động dục và rụng trứng trên bò sữa Hà Lan nhằm giải quyế vấn đề chậm sinh và rút ngắn khoảng cạc giữa hai lần sinh con thông qua tỷ lệ bò động dục, phân bố và kết quả đậu thai sau thụ tinh lần thứ nhất.
29(3): 78-82 9-2007 Tạp chí Sinh học Cải tiến thích nghi kỹ thuật gây động dục rụng trứng bò sữa Hà Lan nhằm giải vấn đề chậm sinh rút ngắn khoảng cách hai lần sinh Lê Văn Ty Viện Công nghệ sinh học Nguyễn Việt Thắng Trờng trung cấp Nông Lâm Sơn La Hoàng Nghĩa Sơn Viện Sinh học nhiệt đới Nguyễn Mộng Hùng Trờng đaị học Khoa học tự nhiên, ĐHQG HN Các nghiên cứu buồng trứng động vật có vú năm gần chứng minh quy luật phát triển quần thể nang buồng trứng không tịnh tiến mà theo dạng sóng Bắt đầu từ số nang có kích thớc tới hạn, dới ảnh hởng gonadotropin nang tham gia vào trình phát triển, cạnh tranh dẫn đến phân hoá tốc độ lớn Chỉ có nang có tốc độ phát triển nhanh đến đợc giai đoạn độc tôn nang Các nang phát triển chậm trớc sau bị rơi vào trạng thái thoái hoá, chết tiêu biến vào lớp nội mạc buồng trứng Sóng nang hình thành nang độc tôn phát triển đến giai đoạn rụng trứng bị thoái hoá Trứng rụng tất sóng nang đợc chứng minh có khả thụ tinh, tạo phôi tơng tự so với trứng rụng cuối chu kỳ [3, 7] Về lý thuyết, điều mở rộng khả áp dụng kỹ thuật sinh sản: trạng thái sinh lý buồng trứng đợc xem lặp lại sau sóng nang không mét lÇn mét chu kú nh− quan niƯm tr−íc bò sữa, ngời ta quan sát thấy khoảng 70% sè c¸ thĨ cã chu kú sãng nang, 30% sè c¸ thĨ cã chu kú sãng nang [1, 2] Nh hội để áp dụng kỹ thuật sinh sản nh gây động dục rụng trứng, gây siêu noãn, lấy trứng chọc hút noãn (ovum-pckup) bò tăng lên đến lần 78 Trong thụ tinh nhân tạo bò, gây động dục rụng trứng đồng loạt có vai trò quan trọng Thay cho việc quan sát động dục hàng ngày, trải dài suốt năm tốn nhiều nhân công mà đạt đợc kết dao động, gây động dục đồng loạt tạo điều kiện cho tËp trung theo dâi ®éng vËt thêi gian ngắn, dẫn tinh thời điểm cần thiết, nâng cao hiệu thụ tinh mà chủ động cho bò chửa đẻ vào thời gian mong muốn Đối với bò sữa, thời điểm dẫn tinh trở lại đợc tính toán kinh tế 60 đến 120 ngày sau bò đẻ [1] Khoảng cách kéo dài kéo dài khoảng cách hai lứa đẻ gây thiệt hại kinh tế (sản lợng sữa, số bê sinh ra) lớn Đối với đàn bò cao sản thiệt hại rõ nét Nuôi bò sữa nớc ta trở thành nghề sản xuất hàng hoá Năng suất sữa, số bê sinh tiêu quan trọng định mức thu nhập đời sống ngời chăn nuôi Ngoài biến động lớn thời tiết, thức ăn theo mùa vụ chọn thời điểm sinh bê đàn bò nói chung đàn bò sữa nói riêng có ý nghĩa quan trọng Chủ động cho bò sinh vào lúc thời tiết thuận lợi, lúc dồi thức ăn, bò mẹ cho sữa nhiều hơn, bê có tỷ lệ đợc nuôi sống cao Giải vấn đề nêu mặt tăng thu nhập cho ngời chăn nuôi, mặt khác hạn chế đợc hội chứng bất dục mùa vụ, vấn đề vô sinh nh sử dụng hiệu thời gian có ích bò sữa Trong đa thử nghiệm số quy trình gây động dục rụng trứng áp dụng cụ thể đàn bò sữa Sơn La với hy vọng tìm một, hai quy trình tối u đáp ứng cho vùng chăn nuôi bò sữa nh mở rộng cho địa phơng khác I Phơng pháp nghiên cứu Động vật Đối tợng nghiên cứu đàn bò sữa hà lan, chăn nuôi hộ gia đình đội sản xuất Sông Lô - Bắc Quang, 3/2, 26/3, Bình Minh (Nông trờng Tô Hiệu, huyện Mai Sơn, tỉnh Sơn La) Đây đàn bò sữa nhập từ Ôx-trây-lia hai đợt 12/2002 06/2003 với tổng đàn vào thời điểm thí nghiệm 406 Số bò đợc chän tham gia vµo thÝ nghiƯm lµ 145 Toàn số bò thử nghiệm đợc nuôi gia đình hộ chăn nuôi Số bò hộ có từ đến 12 bò Bò đợc nuôi dỡng với chế độ dinh dỡng qui định cho bò sữa thống Nông trờng Chỉ bò trọng tốt (thang điểm > 5), không bệnh tật điều trị đợc định tham gia thÝ nghiƯm C¸c kÝch thÝch tè GnRH (Gonadotropin releasing hormone), PMSG (Folligon), HCG (Corulon), PG (Prosolvin), viªn cÊy tai SMB (Crestar) [Intervet, Hà Lan]; Estradiol [Hanvet-Việt Nam] Mô tả quy trình Bò đợc kiểm tra không bị bệnh sinh sản, vấn đề dinh dỡng, thể trạng tốt, khám qua trực tràng kiểm tra thÊy cã thĨ vµng ë mét hai bng trứng đợc định áp dụng thử nghiệm quy trình Qui trình I: GnRH - PG - PMSG Tiến hành tiêm mông ml chứa 10 àg GnRH vào ngày khám coi ngày thứ nhất, bảy ngày sau, tiêm mũi PG ml, lóc tiªm 500 iu PMSG Sau GnRH cã thĨ cã số bò động dục, số đợc khám để kiĨm tra tû lƯ rơng trøng Sau mòi tiªm PG PMSG theo dõi động dục dẫn tinh lần theo quy tắc AM/PM Quy trình II: GnRH - PG - E Tiến hành nh quy trình I, thay thĨ mòi tiªm PMSG b»ng mòi tiªm mg estradiol benzoate Quy tr×nh III: PG - PG - HCG TiÕn hành nh quy trình I, với mũi tiêm thứ GnRH đợc thay ml PG mũi tiêm PG thứ hai kết hợp với mũi tiêm HCG: 2.000 iu Qui trình IV: SMB-PG-PMSG Thời điểm viên cấy tai Synchno-mate B (SMB) đợc cấy vào gốc tai bò kết hợp với tiêm mg estradiol valerate đợc tính ngày thứ ngày sau, tiêm ml PG kết hợp với 500 iu PMSG, ngày thứ tháo bỏ viên cấy tai Theo dõi động dục dẫn tinh lần theo quy tắc AM/PM Qui trình V: PG+Gn RH PG+GnRH (Ovsynch) Các bò đợc tiêm ml PG có hoà sẵn với 10g GnRH, ngày tiêm đợc tính ngày thứ Sau ngày tiêm lặp lại ml PG 10 g GnRH Ghi nhận bò động dục sau mũi tiªm thø nhÊt, kiĨm tra tû lƯ rơng trøng b»ng khám qua trực tràng, theo dõi động dục dẫn tinh lần theo quy tắc AM/PM sau mũi tiêm thứ hai Thí nghiệm rút ngắn thời gian hai lứa đẻ 69 bò đẻ tháng trở lên vào thời điểm thí nghiệm đợc kiểm tra máy sinh dục cách khám qua trực tràng thấy tư cung phơc håi, kh«ng cã dÊu hiƯu bƯnh lý, buồng trứng phát triển bình thờng đợc định cho thử nghiệm rút ngắn thời gian hai lần đẻ Quy trình Ovsynch (quy trình V, phần trên) mở rộng áp dụng thử nghiệm rút ngắn thời gian hai lần đẻ II Kết thảo luận Thử nghiệm quy trình Tổng hợp kết khảo sát quy trình (bảng 1) cho thấy, tỷ lệ ®éng dơc, tû lƯ ®Ëu thai cao nhÊt (100%) vµ tËp trung nhÊt quan s¸t thÊy ¸p dơng víi viên cấy tai SMB kết hợp với 79 PG PMSG (quy trình IV) Đây quy trình kết hợp đợc tất lợi thế: liều estradiol ban đầu gây thoái hoá thể vàng hình thành; trì liên tục mức progesterone cao ức chế tiết LH, trì độc tôn nang, tiêm PMSG làm gia tăng phát triển nang Trên nh vậy, tiêm PG gây thoái hoá thể vàng với việc lấy viên cấy tai, làm giảm đột ngột mức progesterone máu gây động dục rụng trứng Động dục tập trung (trong vòng từ 48 đến 72 giờ), độ đồng pha động dục rụng trứng cao, biểu 100% số bò động dục có chửa Tuy nhiên, quy trình có giá thành cao nhất, xử lý phức tạp Quy trình gây động dục nh áp dụng bò cao sản kỷ lục cho việc cấy phôi tơi yêu cầu xác thời điểm động dục Bảng Tỷ lệ bò động dục, phân bố kết đậu thai sau thụ tinh lần thứ Chỉ số Quy trình Số lợng bò sử dụng Số động dục lần đầu Số động dục lần sau Số bò không động dục Phân bố Số bò động dục sau 24 Số bò ®éng dơc sau 48 giê Sè bß ®éng dơc sau 72 Số bò động dục sau 96 Số bò động dục sau 120 Có chửa sau dẫn tinh I II 24 (25) 18 (75) (25) (3,5) (17,9) (17,9) (10,7) (10,7) 12 (70,6) (16,7) (33,3) (12,5) (12,5) (50) Cải tiến quy trình Ovsynch (quy trình V) so với quy trình nguyên gốc [6] thay tiêm mũi GnRH thứ vào 48 sau PG, tiêm GnRH đồng thời với PG Động dục bò tập trung hơn, có khoảng 7% số bò động dục vòng từ 72 đến 96 sau tiêm Tuy nhiên, không dẫn tinh thời điểm cố định nh quy trình chuẩn, mà theo dõi động dục dẫn tinh theo quy tắc AM/PM đạt tỷ lệ thụ thai cao (100% so với số bò động dục, 70% so với số bò xử lý) Mặt khác, rõ trạng thái nang vào thời điểm xử lý, mũi tiêm kết hợp PG GnRH vừa kích thích tiết FSH, LH vừa làm thoái hoá thể vàng (giai đoạn sớm GnRH, giai đoạn muộn PG), tạo điều kiện động dục rụng trứng tập trung sau mũi tiêm thứ Quy trình kinh điển với hai mũi tiêm PG cách ngày có hạn chế có tỷ lệ bò không động dục cao không tập trung [4] Việc thay mũi PGF2 GnRH kích thích tiÕt FSH, LH, kÝch thÝch ph¸t triĨn nang trøng Do mũi PG thứ gây thoái hoá 80 Định l−ỵng (n; %) III IV 31 32 (26) 18 (59) 32 (100) 13 (41) I 28 13 (46) 17 (61) 11 (39) (19,3) 10 (32,3) 2(6,4) 13 (72,2) 19 (59,4) 13 (40,6) 0 32 (100) V 30 11 (36,7) 21 (70) (30) (13,3) 15 (50) (6,7) 21 (100) thể vàng vào lúc nang phát triển đến giai đoạn cận rụng trứng Chọn lựa PMSG (500 iu) võa kÝch thÝch lín nang võa g©y rơng trøng, estradiol (5 mg) kÝch thÝch lín nang hc HCG (2000 iu) kÝch thÝch rơng trøng, hoµn toµn phơ thc vµo ý nghĩa kinh tế quy trình Tuy nhiên công trình này, động dục tập trung quan sát thấy tiêm PG kết hợp với HCG (48 đến 72 giờ), nhiều bò động dục đợc tiêm PG kết hợp với estradiol (75%) Tiêm kết hợp với estradiol mặc tỷ lệ động dục cao nhng tỷ lệ đậu thai lại thấp (50%) tỷ lệ đậu thai bò tiêm PG kết hợp với PMSG tơng đơng với bò tiêm PG kết hợp với HCG (70,6% 72,2%) Có tỷ lệ động dục đạt tới 75% tỷ lệ đậu thai đạt 50% số bò xử lý chứng tỏ quy trình dùng kết hợp với estradiol gây động dục đồng thời với gây rụng trứng Vấn đề đặt phải điều chỉnh liều lợng estradiol để hạn chế hiệu ứng gây chết phôi tác động gây co bóp tử cung hooc-môn PMSG với liều lợng 500 iu/bò đủ để kích thích phát triển nang, không gây tăng sinh buồng trứng Hiệu ứng LH hợp chất kích thích rụng trứng Tuy nhiên thời gian bán phân rã PMSG kéo dài nên mặc dï cã tû lƯ ®éng dơc cao nh−ng ®éng dơc không tập trung mà kéo dài từ 24 đến 120 sau tiêm thuốc Mặt khác PMSG liều làm tăng tần số rụng trứng kép sinh đôi Quy trình tiêm kết hợp với HCG cho ®é tËp trung ®éng dơc cao vßng tõ 48 ®Õn 72 giê vµ cho tû lƯ ®Ëu thai cao (72,2%) Tuy nhiên tiêm hai liều PG cách ngày nên có tới 41% số bò không động dục, thay mũi tiêm đầu GnRH chắn nâng cao hiệu quy trình Kết thử nghiệm rút ngắn thời gian hai lứa đẻ Do cho tỷ lệ đậu thai cao động dục tập trung, Ovsynch (quy trình V) đợc mở rộng áp dụng 65 bò sữa HF Kết áp dụng quy trình rút ngắn thời gian từ lúc bò sinh đến lúc bò có chửa lại là: 91 28 ngày so với với toàn đàn (có theo dõi động dục tự nhiên dẫn lần cho lần động dục) là: 214 152 ngày (bảng 2) áp dụng quy trình V cho bò vào thời điểm tháng sau bò đẻ cho số bò đậu thai đạt 85,5% số bò có chửa sau tháng, đa đỉnh phân bố tỷ lệ đậu thai vòng 60 đến 120 ngày Trong không áp dụng biện pháp gây động dục đồng loạt, tỷ lệ chậm sinh cao: 56,8% số bò có chửa lại sau 150 ngày III Kết luận Tiêm kết hợp PGF2 GnRH cách ngày, theo dõi động dục để dẫn tinh quy trình tối u, cho tỷ ®éng dơc vµ rơng trøng ®ång pha vµ tû lƯ đậu thai cao áp dụng quy trình gây động dục rụng trứng đồng pha làm 85% số bò sữa có chửa lại vòng từ đến tháng sau bò đẻ Bảng Khoảng thời gian từ lúc bò đẻ đến lúc phối có chửa lại Các thông số Số bò (con) Khoảng từ lúc bò đẻ đến phối có chửa (ngày) Khoảng ngắn nhất, khoảng dài (ngày) Phân bố: < 60 ngày 61 - 90 ngµy 91 - 120 ngµy 121 - 150 ngày > 150 ngày Tài liệu tham khảo De Rensis F., Peters A R., 1999: Reprod Dom Anim., 34: 49-59 Gong J C et al., 1996: Biol Reprod., 55: 68-74 Kastelic J P., 1994: Vet Med., 47: 64-71 Lauderdale J W et al., 1974: J Anim Đàn thí nghiệm (quy trình V) Tổng đàn 69 389 91 ± 28 214 ± 152 35 - 180 ngµy 35 - 608 ngµy 10 (14,5%) 22 (31,9%) 27 (39,1%) (13,1%) (1,4%) 21 (5,4%) 56 (14,4%) 50 (12,9%) 41 (10,5%) 221 (56,8%) Sci., 38: 964-967 Pierson R A and Ginther O J., 1988: Anim Reprod Sci., 16: 81-95 Pursley J R et al., 1995: Theriogenology, 44: 915-923 Savio J D et al., 1988: J Reprod Fert, 88: 569-579 81 Modification and adaptation of the oestrus-ovulation synchronization technics in the Hostein-Friz cows for shortening anoestrus period and calving intervaL Le Van Ty, Nguyen Viet Thang, Hoang Nghia Son, Nguyen Mong Hung Summary Five modifications of the treatment with PGF2α and GnRH for oestrus synchronization in dairy cows have been tested and compared High percentage of cows became oestrus synchronized with ovulation and high concepted rate after IA was recorded in the cows, received injections of PGF2 (2 ml) mixed with GnRH (10µg) with interval days apart Application of this treatment for 65 post-partum dairy cows immediately a month after calving, reduced the interval between the parturition and the conception to 91 ± 28 days against 214 ± 152 days in the case of routine oestrus detection and IA So treatment with injections of PGF2α mixed with GnRH not only made oestrus detection more feasible but could be used for shortening the length between two parturition in cows Ngµy nhËn bµi: 1-2-2007 82 ... lợng bò sử dụng Số động dục lần đầu Số động dục lần sau Số bò không động dục Phân bố Số bò động dục sau 24 Số bò động dục sau 48 Số bò ®éng dơc sau 72 giê Sè bß ®éng dơc sau 96 Số bò động dục. .. bất dục mùa vụ, vấn đề vô sinh còng nh− sư dơng hiƯu qu¶ thêi gian cã ích bò sữa Trong đa thử nghi m số quy trình gây động dục rụng trứng áp dụng cụ thể đàn bò sữa Sơn La với hy vọng tìm một, hai. .. cách ngày, theo dõi động dục để dẫn tinh quy trình tối u, cho tỷ động dục rụng trứng đồng pha tỷ lệ đậu thai cao áp dụng quy trình gây động dục rụng trứng đồng pha làm 85% số bò sữa có chửa lại vòng