Cadmium cảm ứng in vitro quá trình Apoptosis ở nguyên bào sợi ở người

Kim loại nặng cadmium là một tác nhân gây ô nhiễm môi trường liên quan tới các ngành công nghiệp nặng. Cadmium có thể được hấp thụ vào cơ thể con người qua đường tiêu hóa, hô hấp. Sự tích tụ cadmium trong cơ thể có thể gây nguy hiểm cho con người. Trong nghiên cứu ngày, chúng tôi khảo sát các tác động của cadmium trên nguyên bào sợi người trong quá trình nuôi cấy in vitro. Kết quả cho thấy, mật độ của nguyên bào sợi bị giảm trong quá trình nuôi cấy tăng sinh khi được cảm ứng bởi cadmium ở các nồng độ khác nhau (1 µM, 10 µM, 100 µM), trong khi đó, mật độ của nhóm đối chưng lại tăng trong quá trình nuôi cấy. Ở nồng độ cảm ứng 10 µM cadmium, mật độ tế bào giảm dần sau 2 ngày, 4 ngày, 6 ngày và 8 ngày. Cadmium không chỉ làm giảm mật độ tế bào mà còn cảm ứng một số đặc điểm hình thái của quá trình apoptosis ở nguyên bào sợi người. Cadmium cảm ứng sự phân mảnh tế bào chất, hình thành các thể apoptotic ở nhóm tế bào cảm ứng cadmium. Quá trình cô đặc nhiễm sắc chất và phân mảnh nhân tế bào được quan sát thấy ở nhóm tế bào được cảm ứng cadmium sau 2 ngày, 4 ngày, 6 ngày, 8 ngày. Phương pháp RTPCR được sử dụng để đánh giá sự biểu hiện của một số gen liên quan tới quá trình apoptisis. Kết qua cho thấy, sự biểu hiện của gen kháng apoptosis bcl-2 giảm dần theo thời gian cảm ứng trong khi đó sự biểu hiện của gen tiền apoptosis bax lại tăng dần. Do đó, cadmium cảm ứng sự mất cân bằng điều hòa trong quá trình biểu hiện của 2 gen trên và dẫn tới cảm ứng apoptosis ở nguyên bào sợi người.

TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 292-298 CADMIUM CẢM ỨNG IN VITRO QUÁ TRÌNH APOPTOSIS Ở NGUYÊN BÀO SỢI Ở NGƯỜI Lê Thành Long1*, Nguyễn Thị Tường Vi2, Lê Phúc Chiến1, Đồn Chính Chung3, Đỗ Minh Sĩ3, Hồng Nghĩa Sơn1 (1) Viện Sinh học nhiệt đới, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, (*)lelong2510@gmail.com (2) Đại học Bách khoa, Hồ Chí Minh (3) Đại học Khoa học tự nhiên, Hồ Chí Minh TĨM TẮT: Kim loại nặng cadmium tác nhân gây ô nhiễm môi trường liên quan tới ngành cơng nghiệp nặng Cadmium hấp thụ vào thể người qua đường tiêu hóa, hơ hấp Sự tích tụ cadmium thể gây nguy hiểm cho người Trong nghiên cứu ngày, khảo sát tác động cadmium nguyên bào sợi người trình ni cấy in vitro Kết cho thấy, mật độ nguyên bào sợi bị giảm trình nuôi cấy tăng sinh cảm ứng cadmium nồng độ khác (1 µM, 10 µM, 100 µM), đó, mật độ nhóm đối chưng lại tăng q trình ni cấy Ở nồng độ cảm ứng 10 µM cadmium, mật độ tế bào giảm dần sau ngày, ngày, ngày ngày Cadmium không làm giảm mật độ tế bào mà cảm ứng số đặc điểm hình thái trình apoptosis nguyên bào sợi người Cadmium cảm ứng phân mảnh tế bào chất, hình thành thể apoptotic nhóm tế bào cảm ứng cadmium Q trình đặc nhiễm sắc chất phân mảnh nhân tế bào quan sát thấy nhóm tế bào cảm ứng cadmium sau ngày, ngày, ngày, ngày Phương pháp RTPCR sử dụng để đánh giá biểu số gen liên quan tới trình apoptisis Kết qua cho thấy, biểu gen kháng apoptosis bcl-2 giảm dần theo thời gian cảm ứng biểu gen tiền apoptosis bax lại tăng dần Do đó, cadmium cảm ứng cân điều hòa q trình biểu gen dẫn tới cảm ứng apoptosis nguyên bào sợi người Từ khóa: Apoptosis, gen bax, gen bcl-2, cadmium, hình thái apoptosis MỞ ĐẦU Cadmium kim loại nặng sử dụng nhiều ngành công nghiệp luyện kim Nó nhân tố gây nhiễm mơi trường Cadmium phân bố rộng mơi trường nước gây nhiều tác động xấu tới sinh vật nước, động vật thủy sinh [2] Một ảnh hưởng có hại kim loại cadmium tác động đến cân nước ion thể cá [6] Không thế, cadmium tác động tới người thơng qua thức ăn, nước uống, hơ hấp [5, 12] Nó gây số bệnh nguy hiểm cho người loãng xương hay rối loạn số enzyme thể [4] Cadmium có thời gian lưu lại lâu hấp thụ vào thể người Chỉ lượng nhỏ cadmium bị thải khỏi thể, hầu hết chúng tích tụ máu, thận, gan đó, thời gian để loại bỏ hồn tồn cadmium khỏi thể người từ 30-60 năm [5] Một số nghiên cứu ảnh hưởng cadmium người thực đánh giá tác động cadmium lên phát triển hình thái 292 việc sản xuất steroid tế bào hạt người [10], ảnh hưởng cadmium lên tăng sinh biệt hoá nguyên bào thần kinh [3], hay cadmium cảm ứng trình apoptosis tế bào gan người [8] Trong báo này, sử dụng ngun bào sợi từ người làm mơ hình để đánh giá ảnh hưởng in vitro cadmium lên biến đổi trình tăng sinh nguyên bào sợi Nguyên bào sợi người nằm lớp tế bào biểu mô, chịu tác động trực tiếp ảnh hưởng cadmium da người tiếp xúc với kim loại nặng PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguồn mẫu Nguyên bào sợi phân lập từ mô sẹo da người Nguyên bào sợi lần cấy chuyền thứ ba sử dụng để cảm ứng cadmium Nuôi cấy tế bào Môi trường sử dụng nuôi cấy nguyên bào sợi người DMEM (Gibco), bổ sung 10% FBS (Gibco), 1% Pen/Strep (Sigma) Tế bào nuôi nhiệt độ 37oC, 5% CO2 Le Thanh Long, Nguyen Thi Tuong Vi, Le Phuc Chien, Doan Chinh Chung, Do Minh Si, Hoang Nghia Son Cảm ứng cadmium Trong thí nghiệm này, khảo sát ảnh hưởng nồng độ thời gian xử lý cadmium lên mật độ nguyên bào sợi Để đánh giá ảnh hưởng nồng độ xử lý Cadmium lên mật độ, nguyên bào sợi cấy vào đĩa  = 35 mm với mật độ 50 × 103 tế bào/đĩa, nguyên bào sợi cảm ứng môi trường DMEM bổ sung 10% FBS, 1% Pen/Strep chứa Cadmium nồng độ µM, 10 µM, 100 µM Sau ngày ni cấy, mật độ nguyên bào sợi xác định buồng đếm tế bào Để đánh giá ảnh hưởng thời gian xử lý cadmium lên mật độ, nguyên bào sợi cấy vào đĩa  = 35 mm với mật độ 100x103 tế bào/đĩa, nguyên bào sợi cảm ứng môi trường DMEM bổ sung 10% FBS, 1% Pen/Strep chứa Cadmium nồng độ 10 µM Mật độ tế bào xác định sau ngày, ngày, ngày ngày Đánh giá phân mảnh tế bào chất Sự phân mảnh tế bào chất đánh giá kính hiển vi thơng qua việc xác định thể apoptotic nguyên bào sợi Đánh giá phân mảnh nhân Tế bào cố định dung dịch PBS (Phosphate Buffered Saline) chứa 4% paraformaldehyde (Nacalai) 30 phút Tế bào rửa dung dịch PBS lần (mỗi lần 10 phút) Tế bào xử lý với triton X100 (Sigma) 0,1% 4oC, qua đêm Tế bào rửa lại dung dịch PBS lần (mỗi lần 10 phút) Tế bào nhuộm với Acridine Orange (Sigma) 20 µg/ml 30 phút Sau nhuộm, tế bào rửa dung dịch PBS lần (mỗi lần 10 phút) Sự phân mảnh nhân xác định kính hiển vi huỳnh quang (Olympus) Đánh giá biểu gen bax, bcl-2 mức phiên mã RNA tổng tách chiết phương pháp sử dụng Trizol (Intront) Mẫu RNA tổng bảo quản nước DEPC (Naclai) 800C Phương pháp RT-PCR sử dụng để xác định biểu số gen liên quan đến trình apoptosis bax (mồi xi: 5’GGCCCACCAGCTCTGAGCAGA-3’, mồi ngược: 5’-GCCACGTGGGCGTCCCAAAGT- 3’), bcl-2 (mồi xuôi: 5’-GTGGAGGAGCTCTT CAGGGA-3’, mồi ngược: 5’-AGGCACCCAG GGTGATGCAA) Gen beta-actin sử dụng làm chứng nội (mồi xuôi: 5’GTGGGGCGCCCCAGGCAC CA-3’, mồi ngược: 5’-CTCCTTAATGTCACGCACGATT TC-3’) Chu kì phản ứng: 42oC 45 phút, 94oC phút, 40 chu kì: 94oC 45 giây, 56oC 45 giây, 72oC 45 giây, 72oC 10 phút Sản phẩm khuếch đại gen bax, bcl-2, beta-actin có kích thước 479bp, 304bp, 516bp Thống kê Số liệu thu từ lơ thí nghiệm phân tích “One way Anova” Giá trị P ≤ 0,05 đánh giá có ý nghĩa thống kê KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Cadmium làm giảm mật độ nguyên bào sợi điều kiện nuôi cấy in vitro Một số nghiên cứu trước cho thấy, kim loại cadmium có ảnh hưởng lớn đến tăng sinh chức tế bào Mật độ tế bào tuyến sinh dục đực chuột giảm chuột cảm ứng cadmium Quá trình giảm mật độ tế bào diễn theo trình apoptosis tế bào cảm ứng cadmium [1] Trong nghiên cứu người, cadmium làm giảm mạnh mật độ tế bào giao tử buồng trứng tinh hồn người thơng qua việc cảm ứng apoptosis tế bào [1] Các nghiên cứu cho thấy cadmium có tác động lớn đến mật độ tế bào Kết nghiên cứu cho thấy, tác động cadmium lên mật độ nguyên bào sợi người đánh giá theo nồng độ xử lý thời gian xử lý cadmium Trong thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng nồng độ cadmium lên mật độ nguyên bào sợi, sau ngày cảm ứng, mật độ tế bào cảm ứng nồng độ khác giảm mạnh (hình 1a) Mật độ tế bào lô cảm ứng cadmium nồng độ µM, 10 µM, 100 µM 26 × 103 tế bào/đĩa, 16 × 103 tế bào/đĩa, × 103 tế bào/đĩa Trong lơ đối chứng, mật độ tế bào tăng gấp đơi (110 × 103 tế bào/đĩa) so với mật độ cấy ban đầu (50 × 103 tế bào/đĩa) Kết khảo sát đưa 293 TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 292-298 dự đoán mật độ tế bào tiếp tục giảm ngày Tuy nhiên, sử dụng mật độ tế bào ban đầu 50 × 103 tế bào/đĩa, số lượng tế bào không đủ cho phân tích đánh giá hình thái tế bào chất, hình thái nhân đánh giá biểu gen Do đó, thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng thời gian xử lý cadmium lên mật độ tế bào, mật độ tế bào ban đầu tăng lên 100 × 103 tế bào/đĩa Một số nghiên cứu trước cho thấy, cadmium nồng độ 10 µM cảm ứng đặc nhiễm sắc chất tế bào thận người [9] hay hình thành thể apoptotic tinh nguyên bào chuột [1] Đây biểu trình apoptosis, nồng độ 10 µM cadmium sử dụng cho khảo sát ảnh hưởng thời gian sử lý cadmium lên mật độ tế bào Kết cho thấy, mật độ tế bào sau ngày cảm ứng (98 × 103 tế bào/đĩa) khơng có khác biệt so với mật độ cấy chuyền lúc đầu (100 × 103 tế bào/đĩa) Mật độ tế bào giảm mạnh sau ngày (40,2 × 103 tế bào/đĩa), ngày (14,8 × 103 tế bào/đĩa) ngày (2 × 103 tế bào/đĩa) cảm ứng (hình 1b) Các kết cho thấy, việc cảm ứng cadmium làm giảm mật độ nguyên bào sợi người trong điều kiện nuôi cấy in vitro Sự tăng sinh tế bào tỉ lệ nghịch với nồng độ thời gian xử lý cadmium Điều chứng tỏ rằng, cadmium không ảnh hưởng đến tăng sinh số lượng tế bào sinh dục (gồm tế bào sinh trứng tế bào sinh tinh) mà ảnh hưởng lớn đến phát triển số lượng nguyên bào sợi da người điều kiện in vitro Ở nồng độ khác mức độ ảnh hưởng khác Hình Mật độ nguyên bào sợi người cảm ứng Cadmium nồng độ khác sau ngày cảm ứng [a] cảm ứng Cadmium nồng độ 10 µM sau ngày, ngày, ngày, ngày [b] Cadmium cảm ứng biểu hình thái apoptosis nguyên bào sợi Quá trình phân mảnh, đứt gãy nhân tế bào chất, co đặc nhiễm sắc chất, hình thành thể apoptotic thay đổi hình thái tiến trình apoptosis [7] Trong cơng trình biểu số đặc điểm hình thái khảo sát nhóm tế bào cảm ứng cadmium nồng đồ 10 µM theo thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng thời gian xử lý cadmium lên mật độ tế bào Sự phân mảnh tế bào chất hình thành thể apoptotic Quá trình phân mảnh tế bào chất hình thành thể apoptotic đánh giá hình ảnh hiển vi Ở nhóm đối chứng, tế bào giữ đặc điểm hình thái nguyên bào sợi, tế 294 bào mọc phẳng thon dài, nhân kéo dài (hình 2a) Trong đó, tế bào nhóm cảm ứng cadmium xuất trình phân mảnh tế bào chất, hình thành thể apoptotic sau ngày (hình 2b), ngày (hình 2c), ngày (hình 2d), ngày (hình 2e) Mức độ phân mảnh hình thành thể apoptotic diễn mạnh theo thời gian cảm ứng xuất nhiều ngày khảo sát thứ Để xác định biến đổi nhân trình apoptosis, phương pháp nhuộm đơn với thuốc nhuộm Acridine Orange áp dụng việc đánh giá hình thái nhân [3] Kết nhuộm nhân cho thấy, nhóm tế bào đối chứng có hình thái nhân bình thường đều, màng nhân liên tục nhân khơng có đặc nhiễm sắc chất (hình 3a) Ở nhóm tế bào cảm ứng cadmium sau ngày, thấy xuất Le Thanh Long, Nguyen Thi Tuong Vi, Le Phuc Chien, Doan Chinh Chung, Do Minh Si, Hoang Nghia Son cô đặc nhiễm sắc chất, chưa thấy có xuất q trình phân mảnh nhân tế bào (hình 3b, 3g) Trong đó, nhóm tế bào cảm ứng cadmium sau ngày (hình 3c, 3h), ngày (hình 3d, 3i), ngày (hình 3e, 3j), q trình đặc nhiễm sắc chất phân mảnh nhân xuất nhóm tế bào Ở nhóm tế bào cảm ứng sau ngày, q trình đặc nhiễm sắc chất phân mảnh nhân diễn mạnh, phần nhân bị phân mảnh phân tán rộng tế bào chất Hình Sự phân mảnh tế bào chất hình thành thể apoptotic Tế bào nhóm đối chứng trì hình dạng đặc trưng nguyên bào sợi [a], nhóm tế bào cảm ứng cadmium xảy trình phân mảnh tế bào chất, hình thành thể apoptotic sau ngày [b], ngày [c], ngày [d], ngày [e] Sự cô đặc nhiễm sắc chất phân mảnh nhân Hình Kết nhuộm nhân tế bào Nhân nguyên vẹn nhóm tế bào đối chứng [a] Sự cô đặc xảy tế bào cảm ứng cadmium sau ngày [b], ngày [c], ngày [d], ngày [e] Nhóm ngày cảm ứng chưa thấy phân mảnh nhân [g], nhóm ngày [h], ngày [i], ngày [j] diễn trình phân mảnh nhân tế bào 295 TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 292-298 Sự biểu gen bax bcl-2 mức phiên mã Phương pháp RT-PCR áp dụng để đánh giá biểu số gen liên quan đến trình apoptosis gen bax bcl-2 [14] Họ protein Bcl-2 bao gồm protein BAX protein BCL-2 mã hóa gen họ bcl2 Sự cân protein tiền apoptosis protein kháng apoptosis xác định tế bào sống hay chết Các thành viên họ Bcl-2 có chức điểm kiểm soát định trạng thái tế bào [13] Kết phân tích biểu gen kháng apoptosis bcl-2 gen tiền apoptosis bax mức phiên mã cho thấy, sản phẩm phiên mã mRNA gen bcl-2 biểu giảm theo thời gian cảm ứng cadmium, đó, sản phẩm phiên mã mRNA gen bax tăng theo thời gian cảm ứng (hình 4) Ở nhóm đối chứng, biểu gen bcl-2 mạnh so với gen bax giúp tế bào khơng vào q trình apoptosis, đó, nhóm tế bào cảm ứng cadmium theo thời gian, cân trình biểu gen bcl-2 gen bax bị thay đổi dẫn tới cảm ứng tế bào vào trình apoptosis biểu số đặc điểm q trình apoptosis Do đó, cadmium ảnh hưởng tới cân trình biểu gen bcl-2 gen bax mức phiên mã Hình Kết phân tích RT-PCR Sự biểu gen Bcl-2 giảm dần theo thời gian cảm ứng cadmium, biểu gen bax tăng dần theo thời gian cảm ưng Gen beta-actin sử dụng làm chứng nội Kết phân tích RT-PCR phù hợp với kết đánh giá mức độ phân mảnh tế bào chất, cô đặc nhiễm sắc chất phân mảnh nhân Quá trình giảm biểu sản phẩm phiên mã gen kháng apoptosis bcl-2 tăng biểu gen tiền apoptosis bax diễn tương ứng với việc số đặc điểm biến đổi hình thái trình apoptosis phân mảnh tế bào chất, cô đặc nhiễm sắc chất phân mảnh nhân diễn ngày mạnh cấp nguồn nguyên bào sợi người để chúng tơi hồn thành cơng trình KẾT LUẬN Kim loại nặng Cadmium có khả cảm ứng q trình apoptosis nguyên bào sợi người điều kiện nuôi cấy in vitro Gill, T., Tewari, H., Pande, J., 1991 In vivo and in vitro effects of cadmium on selected enzymes in different organs of the fish Barbus conchonius Ham Comp Biochem Physiol., 100C: 501 Lời cảm ơn: Chúng chân thành cảm ơn Thạc sỹ Tô Minh Quân, Khoa Sinh học, Đại học Khoa học tự nhiên, Hồ Chí Minh cung Gulisano M., Pacini S., Punzi T., Morucci G., Quagliata S., Delfno G., 2009 Cadmium modulates proliferation and differentiation 296 TÀI LIỆU THAM KHẢO Gaëlle Angenard, Vincent Muczynski, Hervé Coffigny, Catherine Pairault, Clotilde Duquenne, René Frydman, René Habert, Virginie Rouiller-Fabre, and Gabriel Livera, 2010 Cadmium Increases Human Fetal Germ Cell Apoptosis Environmental Health Perspectives, 118: 134-136 Le Thanh Long, Nguyen Thi Tuong Vi, Le Phuc Chien, Doan Chinh Chung, Do Minh Si, Hoang Nghia Son of human neuroblasts J Neurosci Res., 87: 228-237 Hayes, Andrew Wallace, 2007 Principles and Methods of Toxicology Philadelphia: 858-861 CRC Press Henson M C., Chedrese P J., 2004 Endocrine disruption by cadmium, a common environmental toxicant with paradoxical effects on reproduction Exp Biol Med., 229: 383-392 Maywood Hwang P P., Lin S W., Lin H C., 1995 Different sensitivities to cadmium in tilapia larvae (Oreochromis mossambicus, Teleostei) Arch Environ Contam Toxicol., 29: 1-7 Kerr J F R., Wyllie A H., Currie A R., 1972 Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide - ranging implication in tissue kinetics Br J Cancer, 2: 239-57 Lasfer M., Vadrot N., Aoudjehane L., Conti F., Bringuier A F., Feldmann G., 2008 Cadmium induces mitochondria-dependent apoptosis of normal human hepatocytes Cell Biol Toxicol., 24: 55-62 Shultz Lawrence B., 2007 Cell Apoptosis: Regulation and Environmental Factors Nova Science Publisher Inc.: 151-152 10 Paksy K., Rajczy K., Forgacs Z., Lazar P., Bernard A., Gati I., 1997 Effect of cadmium on morphology and steroidogenesis of cultured human ovarian granulosa cells J Appl Toxicol., 17: 321327 11 Steve M Nguyen, Christopher J Lieven, Leonard A Levin, 2008 Simultaneous Labeling of Projecting Neurons and Apoptotic State J Neurosci Methods., 161: 281-284 12 Thompson J., Bannigan J., 2008 Cadmium: toxic effects on the reproductive system and the embryo Reprod Toxicol., 25: 304-315 13 Van Delft M F., Wei A H., Mason K D., Vandenberg C J., Chen L., Czabotar P E., Willis S N., Scott C L., Day C L., Cory S., Adams J M., Roberts A W., Huang D C., 2006 The BH3 mimetic ABT-737 targets selective Bcl-2 proteins and efficiently induces apoptosis via Bak/Bax if Mcl-1 is neutralized Cancer Cell, 10: 389-99 14 Yang H., Zhu Y T., Cheng R., Shao M Y., Fu Z S., Cheng L., Wang F M., Hu T., 2010 Lipopolysacchride-induced dental pulp cell apoptosis and the expression of Bax and Bcl-2 in vitro Brazilian Journal of Medical and Biological Research, 43: 1027-1033 CADMIUM IN VITRO INDUCES APOPTOSIS TO HUMAN FIBROBLAST Le Thanh Long1, Nguyen Thi Tuong Vi2, Le Phuc Chien1, Doan Chinh Chung3, Do Minh Si3, Hoang Nghia Son2 (1) Institute of Tropical Biology, VAST University of Technology, Ho Chi Minh city National University (3) University of Science, Ho Chi Minh city National University (2) SUMMARY The heavy metal cadmium is a common environmental pollutant associated with industrial processes Cadmium can be taken up into the human body by eating, drinking, breathe Cadmium accumulation can produce damage to humans For example, cadmium decreases cell density in some human organs such as ovaries, testis, or cadmium can induce disorders of enzyme function in the human body In this study, we examined effects of cadmium on human fibroblast during in vitro proliferation The result showed that cell densities were decreased by inducing with medium supplemented cadmium in various concentrations (1 µM, 297 TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 292-298 10 µM, 100 µM), whereas cell density increased in the control group Densities of fibroblast induced 10 µM cadmium were examined at days, days, days, days There was no change of cell density at 2-day induced (98  103/dish) compared to thecontrol group (100  103/dish) Cell densities were significantly decreased in 4-day, 6-day and 8-day cadmium induced cells Cadmium not only reduced cell density in vitro, it also induced apoptotic charactericstics of human fibroblast Firstly, cadmium induced cytoplasmic fragments and apoptotic formation of fibroblast whereas fibroblasts were long and flat with elongated nucleus morphology in the control group To detect morphologic changes in chromatin and nucleus, cadmium induced fibroblast were stained with acridine orange Chromatin condensation was observed in 2-day cadmium induced cells but no nucleus fragment In 4-day, 6-day, 8-day cadmium induced cells, there were not only chromatine condensation but also nucleus fragments Reversed transcription polymerase chain reaction was applied to access the transcript expression of bcl-2 (anti-apoptosis gene) and bax (pre-apoptosis gene) The transcript expression of bcl-2 was decreased during cadimium inducing while the transcript expression of bax was increased In the control group, bcl-2 transcript expression was higher than bax transcript but this balance in bcl-2 and bax expression was lost in cadmium induced fibroblast leading to apoptosis In conclusion, cadmium in vitro can induce apoptotic characteristics of human fibroblast Keywords: Apoptosis, apoptotic morphology, bax gene, bcl-2 gene, cadmium Ngày nhận bài: 21-6-2012 298 ... tế bào sinh trứng tế bào sinh tinh) mà ảnh hưởng lớn đến phát triển số lượng nguyên bào sợi da người điều kiện in vitro Ở nồng độ khác mức độ ảnh hưởng khác Hình Mật độ nguyên bào sợi người cảm. .. cảm ứng cadmium Quá trình giảm mật độ tế bào diễn theo trình apoptosis tế bào cảm ứng cadmium [1] Trong nghiên cứu người, cadmium làm giảm mạnh mật độ tế bào giao tử buồng trứng tinh hoàn người. .. sợi người cảm ứng Cadmium nồng độ khác sau ngày cảm ứng [a] cảm ứng Cadmium nồng độ 10 µM sau ngày, ngày, ngày, ngày [b] Cadmium cảm ứng biểu hình thái apoptosis nguyên bào sợi Quá trình phân mảnh,