Ba thí nghiệm được thực hiện để đánh giá ảnh hưởng của nhiệt độ (25, 30 và 34ºC) lên sự phát triển, tỷ lệ sống, sức sinh sản, tỷ lệ nở thành công, khả năng sinh sản và tuổi thọ của loài giáp xác chân chèo Pseudodiaptomus annandalei. Ở thí nghiệm 1, naupli mới nở F1 được nuôi trong các bình 5 lít nước (độ mặn 20 ppt), hàng ngày thu 300 ml xác định thành phần và kích thước các giai đoạn phát triển khác nhau.
Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2019 THÔNG BÁO KHOA HỌC ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ LÊN SỰ PHÁT TRIỂN VÀ SINH SẢN CỦA LOÀI COPEPODA Pseudodiaptomus annandalei EFFECTS OF TEMPERATURE ON GROWTH AND REPRODUCTION OF THE COPEPOD Pseudodiaptomus annandalei Đồn Xn Nam¹, Bùi Văn Cảnh¹, Phạm Quốc Hùng¹, Đinh Văn Khương¹ Ngày nhận bài: 20/6/2019; Ngày phản biện thông qua: 15/9/2019; Ngày duyệt đăng: 24/9/2019 TĨM TẮT Ba thí nghiệm thực để đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ (25, 30 34ºC) lên phát triển, tỷ lệ sống, sức sinh sản, tỷ lệ nở thành công, khả sinh sản tuổi thọ loài giáp xác chân chèo Pseudodiaptomus annandalei Ở thí nghiệm 1, naupli nở F1 ni bình lít nước (độ mặn 20 ppt), hàng ngày thu 300 ml xác định thành phần kích thước giai đoạn phát triển khác Ở thí nghiệm 2, 500 naupli nở F1 ni cốc nhựa lít (lặp lại lần) quần thể trưởng thành 100% Tỷ lệ sống, sức sinh sản tỷ lệ nở thành công, số naupli nở ra/copepoda xác định Thí nghiệm sử dụng đực, trưởng thành thí nghiệm 2, bố trí nhiệt độ với 50 đực 50 cho đơn vị thí nghiệm, số naupli sinh đánh giá 10 ngày số copepoda đực, chết xác định hàng ngày toàn copepoda chết hết để đánh giá tuổi thọ Kết cho thấy, yếu tố nhiệt độ nước ảnh hưởng đến tỷ lệ sống, phát triển, sinh sản tuổi thọ copepoda P.annandalei Nhiệt độ 30 ºC nhiệt độ thích hợp ni sinh sản lồi copepoda P annandalei Từ khóa: Nhiệt độ, Pseudodiaptomus annandalei, phát triển, sinh sản, tỷ lệ sống ABSTRACT Three experiments were conducted to determine the effects of temperatures (25, 30 and 34ºC) on growth, survival, fecundity, hatching success, reproductive ability, and life span of the copepod Pseudodiaptomus annandalei In the first experiment, newly hatched nauplii F1 were cultured in 5-L glass bottles (salinity of 20 g/L), daily sampled 300 ml to determine the size and composition of different development stages In the second experiment, 500 newly hatched nauplii F1 were cultured in 1-L plastic cups (4 cups per temperature treatment) until maturity The survival, fecundity, hatching success and nauplii/copepod were determined In the third experiment, 50 males and 50 females from the second experiment were cultured for each temperature treatment (5 experimental units of 10 males and 10 females each), nauplii production were observed for 10 days, death males and death females were also recorded daily until all copepods died to determine the life span Results indicate water temperature affects survival, growth, reproduction and life span of copepod P.annandalei Therefore, the temperature 30ºC is optimal temperature for culturing copepod Pseudodiaptomus annandalei Keywords: temperature, Pseudodiaptomus annandalei, growth, reproduction, survival I ĐẶTVẤN ĐỀ Loài giáp xác chân chèo (copepoda) Pseudodiaptomus annandalei cho thức ăn sống quan trọng nuôi trồng thủy sản (Doi et al., 1997, Liao et al., 2001, Lee et al., 2010, Rayner et al., 2015) Tuy nhiên, ¹ Viện Ni trồng Thủy sản, Trường Đại học Nha Trang nguồn copepoda chủ yếu thu từ tự nhiên biến động bị ảnh hưởng điều kiện tự nhiên liên quan đến yếu tố nhiệt độ độ mặn (Beyrend-Dur et al., 2011) Ở Việt Nam, nghiên cứu bước đầu đặc điểm sinh học làm sở cho ni sinh khối lồi thực năm gần (Nam X TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 91 Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Doan, 2018, Nam X Doan, 2019) Trong yếu tố môi trường, nhiệt độ yếu tố vô sinh quan trọng ảnh hưởng đến sinh trưởng sinh sản nhiều loài copepoda (Milione and Zeng, 2008, Santos et al., 1999, Rhyne et al., 2009, Devreker et al., 2009) Do vậy, thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng sinh sản loài copepoda P annandalei cần thiết Nghiên cứu nhằm nhiệt độ thích hợp cho sinh trưởng sinh sản lồi P annandalei, góp phần xây dựng quy trình ni sinh khối làm thức ăn sống giúp nâng cao tỷ lệ sống chất lượng giống sản xuất giống lồi cá biển có giá trị kinh tế II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Copepoda thí nghiệm Lồi copepoda P annandalei thu ngồi ao ni thủy sản diện tích 5.000 m², có độ sâu trung bình 1,2 m độ mặn nước 20 ppt trại thực nghiệm Cam Ranh, Viện Nuôi Trồng Thủy Sản, Trường Đại Học Nha Trang P annandalei phân lập cách sử dụng ống pipet hút cá thể kính hiển vi soi Quần thể copepoda P annandalei nuôi từ nhiệt độ nước ao thu mẫu nhiệt độ thí nghiệm 25, 30 34ºC ngày trước bố trí thí nghiệm Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng nhiệt độ lên phát triển quần thể P annandalei: Bố trí 1500 P annandalei mang trứng đưa vào ni bình thủy tinh (4 lít nước có độ mặn 20 ppt/bình) Sau 30 lọc thu bỏ mẹ vợt lọc có mắt lưới 200 µm lại nước có naupli nở Quần thể P annandalei nuôi tất đạt giai đoạn trưởng thành nhiệt độ 25, 30 34 ºC Thu mẫu hàng ngày từ ngày với thể tích 300 ml từ bình ni Số lượng copepoda mẫu xác định thành phần giai đoạn phát triển kích thước giai đoạn để đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ lên sinh trưởng copepoda P annandalei Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nhiệt độ lên tỷ lệ sống, sức sinh sản đánh giá tỷ lệ nở, số 92 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Số 3/2019 naupli nở ra/copepoda P annandalei: P annandalei mang trứng cho đẻ tương tự thí nghiệm để thu naupli Lọc thu naupli bố trí khoảng 500 naupli vào cốc nhựa tích nước Lít Thí nghiệm bao gồm ba nhiệt độ với độ lặp 4, tương ứng 12 cốc nhựa nuôi naupli Ở nhiệt độ 30 34ºC, cốc nuôi naupli đặt bể ổn nhiệt độ có thiết bị điều khiển nhiệt độ Trong nhiệt độ 25ºC, cốc ni đặt phòng kín điều hòa Copepoda nuôi cốc trưởng thành Copepoda trưởng thành sử dụng để bố trí xác định thông số như: tỷ lệ sống, sức sinh sản (xác định cho 40 nghiệm thức nhiệt độ), tỷ lệ nở (bố trí 12 vào vỉ có 12 giếng, lặp lần cho nhiệt độ), số naupli nở copepoda (10 mang trứng nuôi lọ thủy tinh 100 ml, lặp lần cho nghiệm thức nhiệt độ) Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nhiệt độ lên khả sinh naupli 10 ngày tuổi thọ P annandalei: Bố trí nhiệt độ với 50 đực 50 cho đơn vị thí nghiệm (nguồn P annandalei đực trưởng thành từ thí nghiệm 2) Mỗi đơn vị thí nghiệm gồm 10 10 đực nuôi cốc nhựa Lít nước Hàng ngày lọc thu naupli, loại bỏ copepoda chết 10 ngày thí nghiệm Sau 10 ngày thí nghiệm P annandalei đực lại đơn vị thí nghiệm tách nuôi riêng Số P annandalei đực, chết tiếp tục xác định hàng ngày toàn P.annandalei chết hết để đánh giá tuổi thọ Chế độ chăm sóc quản lý thí nghiệm Trong tất thí nghiệm: Thức ăn ni copepoda P annandalei tảo Isochrysis galbana với mật độ cho ăn 60.000-65.000 tế bào/ml ngày lần Copepoda nuôi nước có độ mặn 20 ppt lọc lõi lọc có kích thước 0,5 µm Chế độ chiếu sáng 12 sáng: 12 tối với ánh sáng tự nhiên Nhiệt độ thí nghiệm kiểm sốt theo dõi ngày lần Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Phương pháp thu phân tích mẫu Xác định phần trăm giai đoạn phát triển ngày thông qua số lượng cá thể giai đoạn phát triển mẫu Các giai đoạn phát triển naupli, copepodit, copepoda đực trưởng thành phân biệt thông qua đặc điểm thể hình thành phần phụ, thay đổi hình thái thể dựa theo mơ tả Golez, M.N ctv (2004) (Golez et al., 2004) Kích thước giai đoạn copepoda P annandalei đo kính hiển vi soi (Olympus SZ61) có gắn thước đo thị kính: Kích thước naupli tính từ phần đầu phần gai đi; giai đoạn copepodit trưởng thành tính từ đỉnh đầu đến hết phần đầu ngực (Prosome length) Sau kích thước quy đổi kích thước thực tế (với độ xác 10 µm) thơng qua tính tốn từ phép đo thước chuẩn (1 mm = N số vạch) kính soi vật kính Kích thước thực tế (µm) = số vạch * 1000/N Tỷ lệ sống đến giai đoạn trưởng thành xác định số P annandalei trưởng thành sống chia cho số naupli nuôi ban đầu Sức sinh sản/lần đẻ số trứng hai buồng trứng P annandalei Với 40 mang trứng nghiệm thức nhiệt độ cố định formol 5%, sau mổ rạch bọc trứng đếm số trứng kính hiển vi soi (Olympus SZ61) Tỷ lệ nở thành cơng sau 24 ấp nở tính cho số P annandalei mang trứng có naupli nở giếng tổng số P annandalei đưa vào ấp nở (12 con/vỉ có 12 giếng) đơn vị thí nghiệm Số naupli trung bình nở từ P annandalei tính tổng số naupli chia cho số P annandalei mang trứng đơn vị thí nghiệm Nauplii lọc cố định Lugol 4% trước đếm số lượng kính hiển vi soi Số naupli sinh P annandalei 10 ngày tổng số trung bình số naupli sinh ngày thí nghiệm Naupli lọc thu hàng ngày cố định Lugol 4% trước đếm số lượng kính hiển vi soi Số 3/2019 Tỷ lệ sống P annandalei đực xác định hàng ngày chết hoàn toàn để xác định tuổi thọ đực nhiệt độ thí nghiệm Phương pháp xử lý số liệu Số liệu kích thước giai đoạn phát triển P annandalei trình bày dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (Mean ± SD) Các số liệu tỷ lệ sống, sức sinh sản, tỷ lệ nở, số naupli nở số naupli sinh trình bày dạng giá trị trung bình ± sai số chuẩn (Mean ± SE) Tất số liệu xử lý phần mềm Microsoft excel 2010 phần mềm SPSS version 20 với phân tích phương sai yếu tố (One-way ANOVA), so sánh Ducan với mức ý nghĩa P