Đang tải... (xem toàn văn)
Hướng dẫn phân tích TBVTV Clo hữu cơ trong nước. Bao gồm từ quá trình chiết lỏng lỏng. Làm sạch bằng cột Silicagel và phân tích trên thiết bị sắc kí khí. Tài liệu được soạn thảo phù hợp tài liệu xin công nhận Vimcerts và Vilas.
ĐỊNH LƯỢNG DƯ LƯỢNG THUỐC BVTV GỐC CHLOR TRONG NƯỚC BẰNG SẮC KÝ KHÍ QUANTITATIVE DOSING OF PESTICIDES ORIGINAL CHLOR IN THE COUNTRY BY GAS NHỮNG THAY ĐỔI ĐÃ CÓ Ngày tháng Nội dung thay đổi Lần ban hành PHẠM VI ÁP DỤNG Phương pháp áp dụng để định lượng tổng hóa chất BVTV Clo hữu nước mặt Khoảng tuyến tính đường chuẩn từ 5µg/l đến 100 µg/l Giới hạn phát giới hạn định lượng bảng sau: Họ Chlor RT MDL LOQ Alpha-HCH 11,681 0,005 µg/L 0,010 µg/L Beta- HCH Chlor 12,397 0,005 µg/L 0,010 µg/L Gamma- HCH Chlor 12,515 0,005 µg/L 0,010 µg/L Delta- HCH Chlor 13,159 0,005 µg/L 0,020 µg/L Heptachlor Chlor 14,220 0,005 µg/L 0,010 µg/L Aldrin Chlor 15,004 0,005 µg/L 0,013 µg/L Trans- Hetapchlor Chlor 16,078 0,005 µg/L 0,010 µg/L Alpha- Endosulfan Chlor 16,768 0,005 µg/L 0,010 µg/L 4,4'- DDE Chlor 17,363 0,005 µg/L 0,010 µg/L 10 Dieldrin Chlor 17,487 0,005 µg/L 0,010 µg/L 11 Endrin Chlor 17,823 0,005 µg/L 0,016 µg/L 12 Beta- Endosulfan Chlor 18,056 0,005 µg/L 0,013 µg/L 13 4,4- DDD Chlor 18,409 0,005 µg/L 0,010 µg/L 14 Endrin-Aldehyte Chlor 18,501 0,005 µg/L 0,010 µg/L 15 Endosulfan- Sulfate Chlor 19,026 0,005 µg/L 0,010 µg/L 16 4,4'- DDT Chlor 19,217 0,005 µg/L 0,010 µg/L 17 Endrin-Keton Chlor 19,983 0,005 µg/L 0,016 µg/L 18 Methorxyclor Chlor 20,566 0,005 µg/L 0,013 µg/L STT Tên TÀI LIỆU VIỆN DẪN - US EPA Method 3510C: Separatory funnel liquid-liquid extraction - US EPA Method 3630C: Silica gel cleanup - US EPA Method EPA 8081B: Organochlorine pesticides by gas chromatography Nguyên tắc Thuốc trừ sâu Clo hữu chiết từ mẫu nước Acetone - Methylene chloride Dịch chiết cô quay để đuổi gần hết dung môi chiết Sau đó, cho 10ml Hexane lắc đều, cho qua cột Silica gel làm mẫu Mẫu sau làm sạch, thổi đến khơ, hòa tan mẫu mL octane, đánh siêu âm 30 phút Mẫu lọc qua màng lọc 0,45 m tiêm vào GC-ECD Lấy mẫu bảo quản mẫu - Mẫu lấy vào chai thủy tinh tối màu có lắp nót PTFE - Bảo quản mẫu nhiệt độ – 50C - Không lấy mẫu đầy chai - Mẫu endosufan giữ riêng biệt pH < Mẫu khác điều chỉnh tới pH = 5,0 đến pH = 7,5 Nếu pH ngồi khoảng này, chiết vòng 24 h TRỞ NGẠI VÀ BIỆN PHÁP KHẮC PHỤC Ngoài hợp chất chứa Chlor, có số hợp chất khác có độ nhạy với detector ECD Trong số có hợp chất oxygenat Những chất gây nhiễu loại bỏ kỹ thuật làm bổ trợ, sử dụng trình tách làm qua cột Silica gel Polyclorinate biphenyls (PCBs) – hợp chất hóa dẻo cơng nghiệp, chất lỏng thủy lực dầu biến qua sử dụng có chứa PCB nguồn tiềm tàng gây nhiễu phân tích thuốc trừ sâu Sự có mặt PCBs nhận biết số lượng lớn peak không phân giải phân giải phần mà xuất q trình sắc ký Với chất gây nhiễu manh, cần có q trình tách riêng trước phân tích Phtalat este – chất sử dụng rộng rãi chất hóa dẻo cơng nghiệp, ngun nhân gây nên phản ứng với detector ECD nguồn gây nhiễu Các phtalat tách khỏi thuốc trừ sâu thơng qua q trình tách làm qua cột Silicagel 5.THIẾT BỊ, DỤNG CỤ 5.1.Dụng cụ Cân phân tích có độ xác 0,1 mg Cân kỹ thuật có độ xác 0,01 g Phễu chiết 2L Màng lọc mẫu 0,45 µm Xylanh thủy tinh 10 mL Bình định mức: 100 mL; 10 mL Pipet tự động: 1mL; 200µL Cột silica gel (hạt lưới 100-200) 5.2.Thiết bị: Máy sắc ký khí đầu dò ECD (GC-µECD) Agilent 7890B Bộ quay chân khơng DLAB Re100 Pro 6.HĨA CHẤT - Chuẩn thuốc trừ sâu họ clo 2000 mg/L hãng LGC - Methylene chloride tinh khiết -Merk - Octane tinh khiết phân tích -Merk - NaCl tinh khiết phân tích - Merck - Axeton tinh khiết phân tích - Merck - Hexane tinh khiết phân tích - Merck Chuẩn gốc Chuẩn gốc thuốc trừ sâu clo hữu 20 mg/L: Lấy xác mL chuẩn thuốc trừ sâu họ chlor 2000 mg/L vào bình định mức 100 mL định mức octane Chuẩn thứ cấp - Chuẩn thứ cấp thuốc BVTV Clo hữu mg/L: Lấy xác 0,5 mL chuẩn gốc thuốc trừ sâu họ clo 20 mg/L vào bình định mức 10 mL định mức octane - Bảo quản Dung dịch chuẩn gốc thứ cấp: bảo quản 4oC, sử dụng 12 tháng, Dãy chuẩn làm việc: bảo quản 4oC, sử dụng tháng 7.QUY TRÌNH PHÂN TÍCH 7.1.Xử lý mẫu Bước 1: lấy 1L nước vào phễu chiết 2L, 50ml axetone 100 g NaCl lắc để hòa tan Bước 2: thêm 60 mL Methylen chloride, lắc phễu chiết mẫu vòng 30 phút Để yên cho hai pha tách lớp Chuyển pha hữu bình cô quay 250 mL phễu chứa 30g Na2SO4 khan Bước 3: Tiếp tục chiết mẫu thêm lần Tồn dịch chiết quay đến gần cạn, thêm 10mL dung dịch hexan chuẩn bị cho trình làm mẫu Quá trình làm mẫu: - Cột Silica gel: Cân 3g silica gel (100-200 mesh) hoạt hóa 1300C khoảng 16h khay thủy tinh nông, phủ lớp giấy bạc Lưu trữ silica gel khử hoạt tính lọ thủy tinh kín bên bình hút ẩm - Tiến hành cho 3g silica gel vào cột thủy tinh ID 10mm, có khóa Thực sau: đáy cột thủy tinh chèn lớp bơng thủy tinh, sau cho lượng cát thạch anh vừa đủ Cho silicagel vào Nhồi tiếp lớp thủy tinh mỏng lên bề mặt silicagel Tiếp tục cho 2-3g Na2SO4 khan lên bề mặt Rửa cột 10 mL dung dịch Hexan để loại bỏ cặn bẩn silicagel lớp cát, bông, Na2SO4 Không để cột khô từ cho dung môi vào Khi dung môi gần đến bề mặt Na2SO4 khóa van + Làm mẫu: Chuyển dịch chiết khoảng 5ml lên cột, rửa lại bình chứa bắng 1-2ml n Hexane Rửa giải cột 80ml Hexane Tốc độ qua cột khoảng 5ml/ phút Thu phần Tiếp tục rửa giải 50ml dung dịch Hexane thu Phần số Thực rửa giải lần 15ml CH2Cl2 Gom phần sau quay Mẫu mang thổi khơ sau thêm vào 1mL dung dịch Isooctane, mang đánh siêu âm vòng 15 phút Mẫu lọc qua màng lọc 0,45 µm tiêm vào GC/µECD Nếu mẫu vượt chuẩn tiến hành pha lỗng mẫu với hệ số pha lỗng thích hợp cho diện tích chất mẫu khơng vượt chuẩn, 7.2 Điều kiện phân tích + Chương trình nhiệt: 70oC (0,5 phút) 70C 70oC 8oC /phút 270oC (10 phút) + Điều kiện GC Column HP -5 (30m x 0,32mm x 0,25 µm) Injection Temp 250oC Injection mode Splitless Detector Temp 300oC Injection Volumn 1µl Make up : N2 7.3 Xây dựng đường chuẩn: Đường chuẩn biểu diễn mối quan hệ tỷ lệ diện tích peak chuẩn nồng độ chất chuẩn Thứ tự tiêm mẫu phân tích đồng thời nhiều mẫu thiết bị sử dụng tiêm mẫu tự động - Chuẩn làm việc thuốc trừ sâu họ chlor 0; 5,0; 10; 20; 40; 60; 100 µg/l: lấy 0; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 1,0 mL chuẩn gốc thuốc trừ sâu họ clo 1mg/L vào bình định mức 10 mL định mức Octane 7.4 Tính kết quả: Đường chuẩn y=bx+a y tỷ lệ diện tích chuẩn, x nồng độ chất phân tích Nồng độ theo đường chuẩn: Hàm lượng : Cmẫu = Cđường chuẩn (µg/L) µg/L C mẫu = C đường chuẩn V định mức / V mẫu Trong đó: Vđm: Thể tích định mức mẫu (mL), Cmau: Nồng độ mẫu theo đường chuẩn (mg/L) Vmau: Thể tích mẫu (mL) C: Hàm lượng chất phân tích mẫu µg/L 7.5 Báo cáo thử nghiệm: Nêu rõ phương pháp thử nghiệm dùng kết thu Mô tả chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn điều coi tùy ý cố ảnh hưởng đến kết quả, Cung cấp thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử KIỂM SỐT CHẤT LƯỢNG Thực kiểm sốt chất mẫu sau: a Mẫu trắng phòng thí nghiệm (LB: Laboratory Blank) Phân tích mẫu trắng lần thực phân tích Đánh giá kết dựa vào giới hạn ± MDL μg/L Nếu mẫu trắng giới hạn kiểm sốt, kiểm tra xem dụng cụ, hố chất có bị nhiễm bẩn khơng Nếu bị nhiễm bẩn Sử dụng hóa chất chất chuẩn thấy cần thiết b Mẫu kiểm soát chất chất lượng (QCS: Quality Control Sample) Mẫu kiểm soát: mẫu trắng thêm chuẩn Thêm mL dung dịch chuẩn 20 μg/L dãy chuẩn làm việc vào mẫu Mẫu lặp (LD: Laboratory Duplicate) Phân tích 01 mẫu lặp sau phân tích 20 mẫu mẻ mẫu Mẫu lặp phải lấy từ chai chứa mẫu Phân tích mẫu LD1 mẫu lặp LD2; Tính tốn khác mẫu lặp cơng thức RPD % ( LD1 LD ) [( LD1 LD ) / ] 100 Trong đó: RPD = phần trăm sai khác LD1 = mẫu lặp PTN, lặp lần thứ LD2 = mẫu lặp PTN, lặp lần thứ hai - Đánh giá khác mẫu lặp theo giới hạn RPD 20%, - Nếu % sai khác mẫu lặp giới hạn, khơng có u cầu thêm - Nếu % sai khác mẫu lặp nằm giới hạn RPD 20%, cán phân tích phải báo - Trong trường hợp % sai khác mẫu lặp giới hạn kết mẫu gần với giới hạn phát hiện, việc tính tốn khác tuyệt đối sau: ∆ = (LD1 – LD2) Trong : ∆ = Sự khác tuyệt đối LD1 = mẫu lặp PTN, lặp lần thứ LD2 = mẫu lặp PTN, lặp lần thứ hai + Đánh giá khác mẫu lặp theo giới hạn hạn 0± 0.003 μg/L Gamma-BHC + Nếu ∆ nằm ngồi giưói hạn ± MDLμg/L, kết báo cáo cán phân tích có trách nhiệm thơng báo với trưởng nhóm phân tích và ghi lại nhận xét “Biên thử nghiệm” c Mẫu thêm chuẩn (MS: Matrix Spike) - Phân tích 01 mẫu thêm chuẩn với nồng độ thêm 20μg/L Sau phân tích 20 mẫu mẻ mẫu - Chuẩn bị mẫu thêm chuẩn nồng độ thêm 20 μg/L : Thêm ml dung dịch 20μg/L vào mẫu Tính tốn độ thu hồi theo phương trình R (%) Cs C X 100 S Trong đó: R = Độ thu hồi Cs = Nồng độ mẫu thêm chuẩn C= Nồng độ mẫu S= Nồng độ đương lượng chất phân tích thêm vào mẫu Đánh giá độ thu hồi mẫu thêm chuẩn dựa vào giới hạn 60 – 115% (AOAC) ... chloride tinh khiết -Merk - Octane tinh khiết phân tích -Merk - NaCl tinh khiết phân tích - Merck - Axeton tinh khiết phân tích - Merck - Hexane tinh khiết phân tích - Merck Chuẩn gốc Chuẩn gốc thuốc... nhiễu phân tích thuốc trừ sâu Sự có mặt PCBs nhận biết số lượng lớn peak không phân giải phân giải phần mà xuất trình sắc ký Với chất gây nhiễu manh, cần có q trình tách riêng trước phân tích. .. việc vào mẫu Mẫu lặp (LD: Laboratory Duplicate) Phân tích 01 mẫu lặp sau phân tích 20 mẫu mẻ mẫu Mẫu lặp phải lấy từ chai chứa mẫu Phân tích mẫu LD1 mẫu lặp LD2; Tính tốn khác mẫu lặp