NGHIÊN cứu ẢNH HƯỞNG của TINH TRÙNG ít yếu dị DẠNG đến kết QUẢ THỤ TINH và HÌNH THÁI PHÔI NGÀY 2 TRONG kỹ THUẬT ICSI

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI *** NGUYỄN THỊ THỨ NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA TINH TRÙNG ÍT YẾU DỊ DẠNG ĐẾN KẾT QUẢ THỤ TINH VÀ HÌNH THÁI PHƠI NGÀY TRONG KỸ THUẬT ICSI LUẬN VĂN THẠC SỸ KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.BS NGUYỄN THANH TÙNG PGS.TS KHUẤT HỮU THANH Hà Nội – 2018 LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn này, nhận nhiều giúp đỡ thầy cơ, bạn bè, đồng nghiệp Với lòng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: Ban giám hiệu, Phòng sau đại học, Viện Cơng nghệ thực phẩm – Công nghệ sinh học, Trường đại học Bách khoa hà nội Đã tạo điều kiện thuận lợi cho q trình học tập nghiên cứu Tơi xin tỏ lòng kính trọng biết ơn tới: Tiến sỹ, Bác sỹ Nguyễn Thanh Tùng, Phó Giám Đốc Trung Tâm nghiên cứu mơ phơi, Học viện Qn y Phó giáo sư, Tiến sỹ Khuất Hữu Thanh, hai người thầy kính yêu dìu dắt, giúp đỡ, hướng dẫn tơi suốt trình học tập nghiên cứu Các Giáo sư, Phó giáo sư, Tiến sỹ hội đồng khoa học thông qua đề cương, hội đồng khoa học bảo vệ luận văn đóng góp nhiều ý kiến quý báu cho tơi q trình nghiên cứu, hồn chỉnh luận văn tốt nghiệp thạc sỹ y khoa Tập thể cán nhân viên Trung Tâm Hỗ Trợ sinh sản – Bệnh viện Bưu điện tạo điều kiện cho trình học tập nghiên cứu luận văn Cuối tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới cha mẹ, chồng con, anh chị em gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, chia sẻ với tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày 09 tháng 09 năm 2018 Nguyễn Thị Thứ LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Thị Thứ, học viên lớp Cao học khóa 16B - CNSH, Trường Đại học Bách khoa hà nội, chuyên ngành Công nghệ sinh học, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn TS.BS Nguyễn Thanh Tùng; PGS.TS Khuất Hữu Thanh Cơng trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp nhận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Người viết cam đoan Nguyễn Thị Thứ DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt CI ESHRE FSH: LH GnRH: hCG HTSS ICSI IVF KTBT NST OAT TDĐ TTTON VS WHO IU IUI PR NP PLC – zeta Tiếng anh Confidence Interval European Society of Human Reproduction and Embryology Gonadotropin Releasing Hormone Luteinizing Hormon Gonadotropin Releasing Hormon Gonadotropin Releasing Hormon Intra Cytoplasmic Sperm Injection In Vitro Fertilisation Oligo-Astheno-Tetratozoospermia World Health Organization International Unit Intrauterine rinemination Photpholipase C- zeta MỤC LỤC Tiếng việt Khoảng tin cậy Hiệp hội sinh sản phơi người Châu âu (Hormon kích thích nang nỗn Hormon hồng thể hóa Hormon giải phóng Hormon rau thai người Hỗ trợ sinh sản Tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn Thụ tinh ống nghiệm Kích thích buồng trứng Nhiễm sắc thể Tinh trùng – yếu – dị dạng Tinh dịch đồ Thụ tinh ống nghiệm Vô sinh Tổ chức y tế giới Đơn vị quốc tế Bơm tinh trùng vào buồng tử cung Di động tiến tới Di động không tiến tới DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Tinh trùng có vai trò quan trọng hình thành phát triển phơi Sự hình thành phát triển tinh trùng chịu ảnh hưởng nội tiết trục hạ đồi tuyến yên tinh hoàn tiết Ngoài ra, người ta xác định nhiều tác nhân môi trường sống, bệnh lý, chế độ làm việc, sinh hoạt, nghề nghiệp, hóa chất ảnh hưởng đến số lượng, chất lượng tinh trùng gây nên tượng tinh trùng ít, yếu dị dạng Kết dẫn đến vô sinh yếu tố nam giới, với tỷ lệ 40% [37] Hơn 30 năm qua, thụ tinh ống nghiệm (TTTON) gặt hái nhiều thành công điều trị vô sinh Nhiều cố gắng nhằm cải thiện tỷ lệ thụ tinh cho trường hợp tinh trùng yếu thử nghiệm Kỹ thuật tạo lỗ thủng màng suốt – PZD (Partial Zona Dissection) cho phép tinh trùng tiếp xúc trực tiếp với màng bào tương noãn Kỹ thuật tiêm tinh trùng vào khoang quanh nỗn - SUZI (Sub Zonal Insemination Nhìn chung với kỹ thuật PZD SUZI cho tỷ lệ thụ tinh thấp số phôi thu không cao nên hai kỹ thuật không xem phương pháp điều trị hiệu [13] Năm 1992, Palermo báo cáo trường hợp có thai sau tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI), kỹ thuật hỗ trợ sinh sản [44] Kỹ thuật ICSI giúp đạt tỷ lệ thụ tinh tỷ lệ thai cao mà không cần quan tâm đến yếu tố tinh trùng ICSI giúp bệnh nhân có bất thường số lượng chất lượng tinh trùng tinh dịch, hay chí tinh trùng chích suất từ mào tinh tinh hoàn làm bố Do đó, trở thành cách mạng cơng điều trị vơ sinh nam Cho đến có nhiều kỹ thuật đời bổ trợ cho ICSI nhằm cải thiện tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi chu kỳ hỗ trợ sinh sản [35] Tuy nhiên chất lượng tinh trùng cho tỷ lệ thành công TTTON thấp so với trường hợp tinh trùng bình thường Nhiều nghiên cứu tiến hành nhằm tìm mối liên quan chất lượng tinh trùng với kết thụ tinh, hình thái phơi tỷ lệ có thai, kết gây nhiều tranh cãi [50] Tại Việt Nam, chưa có nhiều nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng hình thái tinh trùng đến kết TTTON; việc lựa chọn phôi chuyển chủ yếu dựa đặc điểm hình thái phơi, mà chưa quan tâm nhiều đến yếu tố tinh trùng Chính thế, chúng tơi tiến hành nghiên cứu với đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng tinh trùng yếu dị dạng đến kết thụ tinh hình thái phôi ngày kỹ thuật ICSI.” Với nội dung nghiên cứu chính: Đánh giá đặc điểm tinh trùng nhóm OAT OAT nặng Đánh giá mối tương quan chất lượng tinh trùng với kết thụ tinh hình thái phơi ngày Đánh giá mối tương quan tinh trùng đến kết kết lâm sàng CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Một số khái niệm chung 1.1.1 Đại cương vô sinh 1.1.1.1 Một số khái niệm vô sinh Vơ sinh tình trạng cặp vợ chồng khơng có thai sau năm chung sống, sinh hoạt tình dục thường xun, khơng dùng biện pháp tránh thai Trong trường hợp nguyên nhân vô sinh rõ ràng việc tính thời gian khơng đặt Đối với cặp vợ chồng lớn tuổi có yếu tố nguy nên thăm dò sớm để can thiệp, điều trị, tiết kiệm thời gian người phụ nữ lớn tuổi khả sinh sản giảm [59] Vơ sinh nguyên phát (vô sinh I) trường hợp người phụ nữ chưa có thai lần nào, vơ sinh thứ phát (vơ sinh II) trước người phụ nữ có thai lần Vơ sinh nữ vơ sinh mà ngun nhân hồn tồn người vợ, vô sinh nam vô sinh mà nguyên nhân hồn tồn người chồng Vơ sinh khơng rõ nguyên nhân trường hợp cặp vợ chồng làm tất xét nghiệm thăm dò có khơng rõ ngun nhân vơ sinh 1.1.1.2 Tình hình vô sinh giới Việt Nam Tỷ lệ vô sinh giới thay đổi theo nước nghiên cứu khác nhau, nhìn chung tỷ lệ vơ sinh có xu hướng tăng lên năm gần Khu vực Trung Đông, Vahidi cộng (2009) nghiên cứu 10.783 phụ nữ lứa tuổi 19-49 tuổi Iran cho thấy tỷ lệ vô sinh nguyên phát 24,9% [56] Tại Châu Âu, theo Karl cộng thông báo tỷ lệ vô sinh nước phát triển hội nghị thường niên Hội nội tiết sinh sản người châu Âu (2008), với tỷ lệ vô sinh dao động từ 5% đến 25,7% tuỳ nước [26] Theo Wilkes cộng (2009), tỷ lệ vô sinh Anh 9%, tuổi trung bình người vợ 31 tuổi thời gian vơ sinh trung bình 18 tháng [57] Ở Châu Mỹ, theo báo cáo quan kiểm soát dịch bệnh Hoa Kỳ năm 2012, tỷ lệ vô sinh Mỹ tương đương 10%, có 39% vơ sinh nữ, 34% vô 10 sinh nam, 17% hai vợ chồng 10% không xác định nguyên nhân Trong vơ sinh nữ giảm dự trữ buồng trứng chiếm tỷ lệ cao với 31%, vòi tử cung 14%, rối loạn phóng nỗn 14% [9] Tại Việt Nam, theo Nguyễn Viết Tiến cộng (2010), khảo sát vùng sinh thái nước, với 14396 cặp vợ chồng độ tuổi sinh đẻ 15 - 49 tham gia, tỷ lệ vô sinh nước ta 7,7% Trong vơ sinh nguyên phát 3,9%, vô sinh thứ phát 3,8% Tỷ lệ vơ sinh cao Khánh Hòa với 13,9%, tỷ lệ vô sinh thấp Hải Phòng Quảng Ninh với tỷ lệ 3,8 - 3,9 % [36] Nguyên nhân vô sinh nam chủ yếu có vấn đề sản xuất tinh trùng Số lượng tinh trùng giảm chất lượng tinh trùng di động nhiều nguyên nhân khác tiền sử viêm nhiễm, quai bị hay bất thường nhiễm sắc thể, bất thường gen AZF nhiễm sắc thể Y… Vấn đề tinh trùng sản xuất tinh hoàn tắc nghẽn đường di chuyển đến quan xuất tinh Ngồi có ngun nhân khác rối loạn hormon, khó khăn giao hợp, rối loạn cương dương, rối loạn xuất tinh trở ngại cặp vợ chồng cố gắng thụ thai [29] Nguyên nhân vô sinh nữ phổ biến biết đến rối loạn phóng noãn với tỷ lệ 30% [26] Các viêm nhiễm đường sinh dục gây nên rối loạn chức vòi tử cung, viêm dính vòi tử cung, đặc biệt nhiễm lậu cầu khuẩn chlamydia nguyên nhân viêm nhiễm chủ yếu Các trường hợp dính buồng tử cung, tắc hay ứ dịch vòi tử cung thường gặp người vơ sinh thứ phát có tiền sử thai lưu nạo hút thai khơng an tồn Ngồi có ngun nhân khác lạc nội mạc tử cung, dị dạng hệ sinh dục-tiết niệu số nguyên nhân chưa xác định khác [13] 1.1.1.3 Ngun nhân vơ sinh nam Ngun nhân vơ sinh nam giảm sinh tinh mà nguyên nhân di truyền, biến chứng bệnh làm suy giảm chức sinh tinh tinh hoàn, biến chứng gây viêm tắc đường dẫn tinh [29]  Ngun nhân trước tinh hồn 61 nhóm TDĐ bình thường 41,0%, nhóm TDĐ OAT 40,6%, nhóm OAT nặng 40,2% [32] Tỷ lệ có thai bệnh nhân phụ thuộc vào nhiều yế tố như; chất lượng phơi chuyển, phụ thuộc nhiều vào hỗ trợ hoàng thể Vấn đề thời điểm bắt đầu hỗ trợ hoàng thể chưa trả lời rõ ràng thiếu chứng khoa học đủ mạnh Hầu hết nhà lâm sàng chọn bắt đầu hỗ trợ giai đoạn hoàng thể sau chọc hút trứng chuẩn bị niêm mạc tử cung để chuyển phôi trữ, kéo dài đến thai 10– 12 tuần, bệnh nhân có thai Cách làm dựa kinh nghiệm yên tâm bác sĩ làm cần thiết để tối đa hóa hội có thai cho bệnh nhân mà chưa có chứng thuyết phục mặt khoa học 62 KẾT LUẬN Từ số liệu nghiên cứu thu rút số kết luận sau: - Nhóm TDĐ OAT: Mật độ tinh trùng trung bình 7,33 ± 3,7 x 10 6/mm3, PR trung bình 6,24 ± 3,7 %, (NP+PR) trung bình 15,06 ± 7,5 %, tỷ lệ sống trung bình 28,92±10,7 %, hình dạng bình thường trung bình 1,31 ± 0,8 % - Nhóm TDĐ OAT nặng: Mật độ tinh dịch trung bình 0,95 ± 0,1 x 10 6/mm3 PR trung bình 0,92 ± 0,2 (NP+PR) trung bình 0,92 ± 0,2% Tỷ lệ sống trung bình 2,2 ± 1,5 Hình dạng bình thường trung bình 0,34 ± 0,1% - Tỷ lệ thụ tinh nhóm TDĐ OAT 67,44 ± 21,2% nhóm OAT nặng 58,79 ± 24,4% tương đương nhau, thấp so với nhóm TDĐ bình bình thường 77,54 ± 16,5% Tỷ lệ thụ tinh trung bình nhóm TDĐ nhóm OAT 67,44 ± 21,2%, nhóm OAT nặng 58,79 ± 24,4% Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p